趙玲麗， 周穎琳*， 張新祥*

(北京分子科學(xué)國家研究中心，生物有機(jī)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院，北京 100871)

1 前言

G -四聚體是由富鳥嘌呤(Guanine，G)的單鏈核酸通過Hoogsteen氫鍵折疊形成的特殊核酸高級(jí)結(jié)構(gòu)，因其結(jié)構(gòu)和功能的多樣性，G -四聚體被作為一個(gè)多功能的信號(hào)元件，廣泛應(yīng)用于小分子、蛋白質(zhì)，以及與疾病相關(guān)的特征核酸序列等與生命活動(dòng)密切相關(guān)的生物標(biāo)志物的分析檢測[1 - 3]。近年來G -三聚體作為G -四聚體的折疊中間體被確認(rèn)為一種新的核酸結(jié)構(gòu)[4]，它具有構(gòu)成新型核酸分子探針的良好應(yīng)用潛力[5，6]。

近30年來，電化學(xué)生物傳感器因其響應(yīng)速度快、易于小型化、成本低、選擇性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)受到越來越多的關(guān)注[7 - 9]。隨著即時(shí)檢測(Point-of-Care Testing，POCT)成為體外診斷的一大風(fēng)向標(biāo)[10，11]，基于G -四聚體或G -三聚體的電化學(xué)傳感器作為一種特殊的傳感器件，受到研究人員的關(guān)注并得到了長足發(fā)展，為POCT體外診斷提供了新途徑。本文主要針對G -四聚體和G -三聚體DNA在電化學(xué)傳感中的應(yīng)用進(jìn)行簡要評述，總結(jié)了此類電化學(xué)生物傳感器在金屬離子、有機(jī)小分子、核酸和蛋白大分子，以及酶活性等分析檢測方面的最新研究成果。

2 G -四聚體和G -三聚體

2.1 G -四聚體

近年來，人們發(fā)現(xiàn)Watson-Crick雙鏈結(jié)構(gòu)的許多變體在一些細(xì)胞生命過程中起著關(guān)鍵的作用，例如發(fā)夾結(jié)構(gòu)、十字形結(jié)構(gòu)、平行雙鏈結(jié)構(gòu)、DNA三聯(lián)體、G -四聚體和i-motif結(jié)構(gòu)等。這些結(jié)構(gòu)可以由分布在整個(gè)人類基因組中的核酸序列構(gòu)成，它們的位置不是隨機(jī)的，通常與人類疾病的發(fā)生息息相關(guān)[12]。這些特殊的核酸結(jié)構(gòu)通常是在堿基堆積和氫鍵相互作用的穩(wěn)定下，由一到四條鏈組成，并以各種非常規(guī)的配對方式存在。其中，G -四聚體吸引了研究人員的廣泛關(guān)注。人類端粒末端富含鳥嘌呤的序列和原癌基因啟動(dòng)子序列都可通過折疊形成G -四聚體的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)。G -四聚體的結(jié)構(gòu)由8個(gè)Hoogsteen氫鍵穩(wěn)定的G -四分體平面堆疊組成，O原子居中定位于環(huán)中，形成一個(gè)陰離子雙錐籠，可以與單價(jià)陽離子如Na+或K+配位[13 - 14]，見圖1。G -四聚體表現(xiàn)出豐富的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)多樣性[15]，它的結(jié)構(gòu)與鳥嘌呤區(qū)的數(shù)量和長度、loop區(qū)的長度和連接方式、鏈的取向，以及溶液中金屬離子的性質(zhì)都密切相關(guān)。G -四聚體拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的多樣性為小分子配體提供了變化多樣的結(jié)合位點(diǎn)，這是G -四聚體被廣泛應(yīng)用于電化學(xué)生物傳感器的重要基礎(chǔ)。

圖1 G -四分體和G -四聚體的化學(xué)結(jié)構(gòu)[16]Fig.1 Chemical structures of G -quartet and G -quadruplex[16]

2.2 G -三聚體

隨著研究的深入，G -四聚體結(jié)構(gòu)的重要性日益凸顯，這促使人們進(jìn)一步分析其折疊機(jī)制，并開始尋找新的涉及富鳥嘌呤序列多態(tài)性的結(jié)構(gòu)。2013年，一種新的G -三聚體核酸結(jié)構(gòu)，作為凝血酶適配體TBA(G -四聚體結(jié)構(gòu))的一個(gè)穩(wěn)定的折疊中間體被Limongelli等[4]首次確定。該團(tuán)隊(duì)利用核磁共振波譜、圓二色光譜、差示掃描量熱法等生物物理學(xué)研究手段，證實(shí)了該結(jié)構(gòu)的存在，并表征了其結(jié)構(gòu)和熱力學(xué)性質(zhì)。如圖2所示，該新結(jié)構(gòu)具有特殊的“G -三聚體”結(jié)構(gòu)，是由一系列Hoogsteen氫鍵穩(wěn)定的G∶G∶G三分體平面折疊構(gòu)成的。G -三聚體一經(jīng)發(fā)現(xiàn)就引起了人們極大的研究興趣，其具備構(gòu)成新型核酸分子探針的良好應(yīng)用潛力。目前G -三聚體在電化學(xué)生物傳感器中的應(yīng)用方興未艾。

圖2 G -三聚體結(jié)構(gòu)的示意圖[4]Fig.2 Structure of G -triplex[4]

3 基于G -四聚體或G -三聚體的電化學(xué)傳感器

G -四聚體和G -三聚體能被作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，這是由于G -四聚體和G -三聚體的折疊和去折疊對環(huán)境刺激有響應(yīng)。第一類刺激物是K+、Cs+、Pb2+等金屬離子，它們可以穩(wěn)定G -四聚體的結(jié)構(gòu)；第二類刺激物是小分子物質(zhì)，如ATP和可卡因等；第三類刺激物是生物大分子，如核酸分子和蛋白質(zhì)等。上述刺激物均可能是某些情況下人們感興趣的檢測目標(biāo)，且不同的目標(biāo)物會(huì)直接影響生物傳感器中的G -四聚體或G -三聚體對目標(biāo)物進(jìn)行響應(yīng)的機(jī)制。下面對基于G -四聚體或G -三聚體開發(fā)的電化學(xué)生物傳感器進(jìn)行介紹。

3.1 對金屬離子的檢測

多種一價(jià)和二價(jià)金屬離子對G -四聚體和G -三聚體結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定作用。特別是某些富含鳥嘌呤的寡核苷酸序列對特定的金屬離子具有很高的選擇性。這些發(fā)現(xiàn)被用于開發(fā)基于G -四聚體或G -三聚體的金屬離子電化學(xué)傳感平臺(tái)。Fu等[17]報(bào)道了一種基于DNA構(gòu)象變化的電化學(xué)生物傳感器，用于檢測超痕量的稀土Tb3+。該團(tuán)隊(duì)將一段標(biāo)記有巰基的富G序列固定在金電極表面，當(dāng)Tb3+存在時(shí)，富G序列從柔性的單鏈結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂缘腉 -四聚體結(jié)構(gòu)，G -四聚體的形成提高了Au電極表面的電荷密度，對帶負(fù)電荷的鐵氰化鉀造成排斥，從而導(dǎo)致電化學(xué)響應(yīng)信號(hào)的降低。該體系對Tb3+的檢測范圍為0.68～5.5 nmol/L，檢出限為61 pmol/L。Liu等[18]受到K+對G -四聚體構(gòu)象轉(zhuǎn)換的誘導(dǎo)作用啟發(fā)，建立了一個(gè)基于納米通道的電化學(xué)平臺(tái)，用于K+的快速檢測。當(dāng)目標(biāo)分子被引入納米通道時(shí)，固定在通道中的適配體折疊成G -四聚體結(jié)構(gòu)。這種構(gòu)象轉(zhuǎn)換導(dǎo)致納米通道中空間位阻的顯著增加，從而導(dǎo)致納米通道中的指示劑分子氫醌通量的降低。指示劑分子通量的變化可通過其在工作電極上的陽極電流進(jìn)行監(jiān)測，從而簡單快速地實(shí)現(xiàn)對K+檢測，檢測范圍為5～200 μmol/L，檢出限為0.4 μmol/L。Li等[19]基于穩(wěn)定的T-Hg2+-T相互作用，開發(fā)了一種簡單、靈敏、無標(biāo)記的檢測Hg2+的電化學(xué)傳感器。在目標(biāo)分子存在下，富G序列被特異性識(shí)別并折疊成平行型G -四聚體結(jié)構(gòu)，與氯化血紅素(Hemin)形成具有過氧化物酶活性的DNA酶，從而觸發(fā)H2O2介導(dǎo)的電化學(xué)氧化3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺。該體系對Hg2+的檢測范圍為100 pmol/L～100 nmol/L，檢出限為33 pmol/L。Liu等[20]利用DNA四面體探針上的特異性DNA酶，開發(fā)了一種新型的Pb2+的電化學(xué)生物傳感器(圖3)，在Pb2+的存在下，底物鏈被切割成兩部分，釋放出一段富G序列，隨后形成G -四聚體/Hemin復(fù)合物，在H2O2的輔助下產(chǎn)生可檢測的催化電流信號(hào)。三維DNA四面體調(diào)節(jié)了探針的密度和取向，改善了脫氧核酶反應(yīng)，促進(jìn)了電極表面界面受限空間內(nèi)復(fù)雜的DNA構(gòu)象變化，該生物傳感器的檢測范圍為0.01～1 000 nmol/L，檢出限為8 pmol/L。

圖3 基于G -四聚體的電化學(xué)生物傳感器檢測Pb2+的示意圖[20]Fig.3 Illustration of the Pb2+ electrochemical biosensor based on the G -quadruplex[20]

3.2 對有機(jī)小分子的檢測

針對與生命活動(dòng)密切相關(guān)的有機(jī)小分子等生物標(biāo)志物，發(fā)展快速、廉價(jià)、靈敏和高選擇性的檢測方法是生物化學(xué)分析的重要課題之一，而基于G -四聚體或G -三聚體的電化學(xué)傳感器為這一課題提供了新思路。

可卡因是一種從古柯植物的葉子中提取的生物堿，是一種與人類健康息息相關(guān)的小分子化合物。本課題組以可卡因?yàn)槟Ｐ?，發(fā)展了一系列基于G -四聚體或G -三聚體的電化學(xué)傳感器。在醫(yī)療中可卡因被用作局部麻醉藥或血管收縮劑，同時(shí)可作強(qiáng)效的天然中樞興奮劑，但也因其對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮作用而導(dǎo)致濫用，成為世界性的主要毒品之一。2013年，Zhang等[21]報(bào)道了一種無標(biāo)記、無固定化的均相電化學(xué)核酸適配體傳感器。所設(shè)計(jì)的單鏈功能核酸序列包含了可卡因核酸適配體序列和G -四聚體序列，經(jīng)過緩慢退火處理后，該功能核酸序列在溶液中形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)，其中雙鏈互補(bǔ)的莖的部分包含了一部分核酸適配體序列和一部分G -四聚體序列。這一優(yōu)勢構(gòu)象通過堿基互補(bǔ)阻礙了G -四聚體構(gòu)象的形成。而在可卡因存在的條件下，可卡因與核酸適配體的親和相互作用使得功能核酸的構(gòu)象發(fā)生變化，莖的結(jié)構(gòu)打開，釋放出G -四聚體結(jié)構(gòu)，與Hemin結(jié)合形成DNA酶，表現(xiàn)出過氧化物酶活性，催化氫醌和H2O2反應(yīng)，產(chǎn)生可觀測到的還原準(zhǔn)穩(wěn)態(tài)電流的變化。所使用的電化學(xué)裝置由一次性槍頭和可重復(fù)使用的碳纖維超微電極組成，可在微升水平的溶液中進(jìn)行檢測。該體系對可卡因的檢測范圍為1～500 μmol/L，最低檢出濃度為1 μmol/L。亞甲基藍(lán)(MB)是一種帶有芳香結(jié)構(gòu)的陽離子類吩噻嗪染料，本課題組首次發(fā)現(xiàn)其對G -四聚體DNA的親和力高于對ssDNA或dsDNA的親和力[22]，是鮮有的能特異性結(jié)合G -四聚體的電活性探針。2014年，Zhang等以G -四聚體/MB復(fù)合物為基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)了核酸適配體/G -四聚體雙功能核酸發(fā)夾結(jié)構(gòu)用于可卡因的電化學(xué)傳感器。在可卡因存在下，MB與被釋放的G -四聚體作用，具有相比于雙鏈DNA更強(qiáng)的結(jié)合力，從而引起MB的擴(kuò)散電流的明顯降低。該體系對可卡因的檢測范圍為5～1 000 μmol/L，最低檢出濃度為5 μmol/L。該方法證實(shí)了G -四聚體/MB復(fù)合物作為一種有潛力的電化學(xué)探針，可用于均相免標(biāo)記的電化學(xué)傳感器的構(gòu)建中。隨后，該探針被廣泛使用，發(fā)展為基于G -四聚體電化學(xué)均相分析的重要電化學(xué)指示劑用于miRNA的檢測[23]、DNA邏輯門的構(gòu)建[24]、甲基化轉(zhuǎn)移酶活性的檢測[25]等。2019年，為了探究G -四聚體與MB相互作用的關(guān)鍵部位，本課題組Zhao等[26]通過對前述G -四聚體核酸序列的截短，發(fā)現(xiàn)了一條與MB結(jié)合更加緊密的富G序列(G3)。與G -四聚體序列相比，該序列與MB結(jié)合后使得體系電流降低更為顯著。我們證實(shí)了該序列可形成穩(wěn)定的G -三聚體構(gòu)型。進(jìn)一步地，Zhao等以耦合了核酸適配體(作為目標(biāo)識(shí)別元件)與G3(作為信號(hào)報(bào)告元件)的雙功能核酸序列為基礎(chǔ)，構(gòu)建了可卡因的電化學(xué)傳感器(圖4)。與基于G -四聚體的傳感器相比，該傳感器不僅背景干擾更小，且信號(hào)響應(yīng)更強(qiáng)，對可卡因的檢測范圍為0.1～1 000 μmol/L，最低檢出濃度為0.1 μmol/L。

圖4 基于G -三聚體的電化學(xué)生物傳感器檢測可卡因的示意圖[26]Fig.4 Illustration of the cocaine electrochemical biosensor based on the G -triplex[26]

最近，Zhang等[27]利用G3/MB作為信號(hào)報(bào)告分子，結(jié)合微型一體化電極成功構(gòu)建了檢測三聚氰胺的均相、免標(biāo)記的電化學(xué)傳感平臺(tái)。基于胸腺嘧啶(T)與三聚氰胺可以通過氫鍵形成“T-三聚氰胺-T”三聯(lián)體結(jié)構(gòu)這一規(guī)律，該團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)了一種單鏈功能核酸傳感器，起初G3序列和富T序列均被掩蔽在功能核酸形成的發(fā)夾結(jié)構(gòu)中。當(dāng)三聚氰胺存在時(shí)，它與T的結(jié)合會(huì)導(dǎo)致功能核酸發(fā)生構(gòu)象變化，釋放出G3，G3與MB生成復(fù)合物輸出電信號(hào)。該方法對三聚氰胺的檢測范圍為100 μmol/L～2.5 mmol/L，檢出限為100 μmol/L。

3.3 對核酸分子的檢測

DNA和RNA在現(xiàn)代分子生物學(xué)中扮演著重要角色，因此核酸的檢測意義重大[28]。靈敏、高選擇性地檢測核酸分子，對于基因治療、突變分析和臨床診斷均具有關(guān)鍵的指導(dǎo)作用[29 - 31]。G -四聚體和G -三聚體介導(dǎo)的電化學(xué)傳感器具有穩(wěn)定簡便的優(yōu)點(diǎn)，為核酸的檢測領(lǐng)域提供了新的選擇。

本課題組Nie等[32]發(fā)展了靶標(biāo)促發(fā)的恒溫指數(shù)放大反應(yīng)(R-EXPAR)，結(jié)合微電極小型化電化學(xué)設(shè)備的檢測。R-EXPAR放大后的大量G -四聚體序列(約10-7～10-6mol/L)可以與Hemin結(jié)合形成DNA酶，通過DNA酶/氫醌/H2O2體系產(chǎn)生電化學(xué)信號(hào)。對信號(hào)報(bào)告基團(tuán)G -四聚體進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，經(jīng)R-EXPAR放大靈敏度可提高5個(gè)數(shù)量級(jí)。該策略被成功應(yīng)用于對靶標(biāo)DNA的靈敏檢測，檢測范圍為5 pmol/L～1 nmol/L，最低檢出濃度為1.7 pmol/L。這種無須標(biāo)記、固定化的小型電化學(xué)檢測具有操作簡單、成本低廉、高重復(fù)性和可靠性的優(yōu)勢。該策略不只局限于核酸生物標(biāo)志物的檢測，若利用核酸適配體識(shí)別相應(yīng)靶標(biāo)，信號(hào)轉(zhuǎn)換促發(fā)G -四聚體序列產(chǎn)生，亦可利用R-EXPAR急劇放大信號(hào)輸出，實(shí)現(xiàn)對不同靶標(biāo)小分子、大分子的靈敏檢測。理論上講R-EXPAR可以應(yīng)用到任何以釋放一條G -四聚體序列為信號(hào)報(bào)告基團(tuán)的POCT檢測中。本課題組Zhao等[33]以G3/MB為信號(hào)報(bào)告分子，構(gòu)建了一種新型均相的無標(biāo)記電化學(xué)傳感平臺(tái)，實(shí)現(xiàn)了對腫瘤標(biāo)志物MicroRNA的靈敏檢測。如圖5所示，在該傳感器中，首先通過一步核酸線性放大反應(yīng)識(shí)別MicroRNA，并將痕量的MicroRNA轉(zhuǎn)化為G3，進(jìn)而借助恒溫指數(shù)放大擴(kuò)增反應(yīng)在短時(shí)間內(nèi)迅速擴(kuò)增產(chǎn)生大量G3，其與MB形成G3/MB復(fù)合物作為報(bào)告分子輸出電化學(xué)信號(hào)。該體系對MicroRNA的檢測范圍為1 fmol/L～10 nmol/L，最低檢出濃度為0.45 fmol/L，并且可實(shí)現(xiàn)對MicroRNA單個(gè)堿基的區(qū)分。該工作成功地拓展了G -三聚體/MB作為一種高效、靈敏的核酸探針的應(yīng)用范圍，揭示了其作為一種生物傳感探針在未來具有取代G -四聚體的應(yīng)用潛力。此外這種便攜、低成本、高效的電化學(xué)方法可能成為DNA-配體相互作用研究的一種強(qiáng)大工具。

圖5 基于G -三聚體的電化學(xué)生物傳感器檢測MicroRNA的示意圖[33]Fig.5 Illustration of the MicroRNA electrochemical biosensor based on the G -triplex[33]

3.4 對蛋白質(zhì)和酶活性的檢測

蛋白質(zhì)在自然界中無處不在，是生命所必需的。在蛋白質(zhì)組學(xué)時(shí)代，人們期望發(fā)現(xiàn)大量與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的生物標(biāo)志物，而蛋白質(zhì)和酶的檢測方法是認(rèn)識(shí)、預(yù)防、診斷和治療許多疾病不可或缺的工具。

Liu等[34]報(bào)道了一種競爭免疫分析法，檢測微囊藻毒素-LR的無酶多重放大電化學(xué)傳感器。微囊藻毒素-LR是指亮氨酸(L)和精氨酸(R)在兩個(gè)可變位置。該團(tuán)隊(duì)將具有大比表面積的Au納米樹枝晶電沉積在ITO電極上，作為免疫傳感器的基底來捕獲抗原。隨后，合成了內(nèi)嵌有MB的單分散核殼結(jié)構(gòu)的SiO2復(fù)合物作為免疫傳感器的標(biāo)記物，負(fù)載二抗用于免疫反應(yīng)，同時(shí)修飾有DNA引物用于信號(hào)增強(qiáng)。當(dāng)目標(biāo)物存在時(shí)，兩條輔助DNA鏈引發(fā)原位雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，在SiO2復(fù)合物的表面形成雙螺旋DNA，加入Hemin后，在其兩側(cè)形成大量的DNA酶。最后，將MB插入到形成的雙螺旋DNA中，進(jìn)一步提高檢測信號(hào)。在MB的輔助下，所形成的DNA酶可以催化H2O2的還原，從而產(chǎn)生電流信號(hào)。該體系對微囊藻毒素-LR的檢測范圍為0.5 ng/L～25 μg/L，檢出限為0.3 ng/L。Xiang等[35]利用Cu2+和焦磷酸(PPI)的配位作用，以及G -四聚體/Hemin納米線對信號(hào)的放大作用，成功實(shí)現(xiàn)了對人體內(nèi)酸性磷酸酶(ACP)的檢測。Cu2+和PPI可以形成穩(wěn)定的PPI-Cu-PPI化合物。PPI作為ACP的水解底物，可被水解成不能與Cu2+配位的磷酸根離子，從而抑制PPI-Cu-PPI的形成，并釋放游離Cu2+激活電極上Cu2+-DNA酶的活性。進(jìn)一步地，底物鏈發(fā)生催化裂解，釋放出原本掩蔽在底物鏈中的富G序列，進(jìn)而與溶液中游離Hemin發(fā)生結(jié)合，在電極表面生成G -四聚體/Hemin納米線絡(luò)合物。這種表面受限的Hemin有望在不涉及任何標(biāo)記的情況下帶來大幅放大的電流信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)對ACP的靈敏檢測，檢測范圍為1～125 U/L，檢出限為0.45 U/L。該方法還被成功應(yīng)用于選擇性地檢測血清樣品中的低水平ACP。

在對蛋白質(zhì)和酶活性的檢測中，G -四聚體除了作為信號(hào)報(bào)告分子，還可作為目標(biāo)物的適配體參與識(shí)別過程，產(chǎn)生構(gòu)象變化。如圖6所示，Zhang等[36]基于此構(gòu)建了一種結(jié)合凝血酶-適配體復(fù)合物的光驅(qū)動(dòng)再生式電化學(xué)生物傳感器。光致變色的偶氮苯基團(tuán)能調(diào)控 G -四聚體結(jié)構(gòu)的折疊和去折疊。電極上修飾了二茂鐵(Fc)和偶氮苯標(biāo)記的凝血酶適配體，在檢測到凝血酶后，適配體序列識(shí)別目標(biāo)物發(fā)生構(gòu)象變化，折疊形成G -四聚體結(jié)構(gòu)，3′端修飾的Fc與電極表面的距離縮短，F(xiàn)c的電流信號(hào)增大。在紫外光照射下，插入適配體中的偶氮苯由反式結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變?yōu)轫樖浇Y(jié)構(gòu)，適配體結(jié)構(gòu)變得松散，遠(yuǎn)距離阻斷了Fc的電子傳遞，實(shí)現(xiàn)了適配體的再生。該體系對凝血酶的檢測范圍為5 pmol/L～5 μmol/L，檢出限為3 pmol/L。

圖6 基于G -四聚體的電化學(xué)方法檢測凝血酶的示意圖[36]Fig.6 Illustration of the thrombin electrochemical biosensor based on the G -quadruplex[36]

4 結(jié)論

本文主要綜述了功能核酸分子G -四聚體和G -三聚體與電化學(xué)檢測技術(shù)相結(jié)合構(gòu)建的電化學(xué)生物傳感器。在這些電化學(xué)生物傳感器中，G -四聚體和G -三聚體能夠?qū)⑸镒R(shí)別事件轉(zhuǎn)換成各種讀出信號(hào)，實(shí)現(xiàn)對與生命活動(dòng)相關(guān)的小分子、蛋白質(zhì)以及與疾病相關(guān)的特征核酸序列等生物標(biāo)志物的分析檢測。此類生物傳感器具有快速、靈敏、低成本和能夠便攜檢測生物或化學(xué)分子的優(yōu)勢，在檢測中表現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力，并為POCT體外診斷提供了新途徑。

同時(shí)，我們也必須認(rèn)識(shí)到這些基于G -四聚體和G -三聚體的電化學(xué)傳感器仍然存在一些局限性。首先，除了有限數(shù)量的金屬離子和蛋白質(zhì)外，并不是所有的金屬離子都能被檢測到。為了將基于G -四聚體和G -三聚體的技術(shù)推廣到更廣大的領(lǐng)域，必須使用其他綜合生化策略對其進(jìn)行優(yōu)化和改進(jìn)。其次，這些傳感策略的信噪比仍有很大的提高空間。最后，因G -三聚體較差的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，迄今為止已報(bào)道的基于G -三聚體的電化學(xué)傳感器還非常有限。本綜述介紹了部分基于G -四聚體和G -三聚體的電化學(xué)檢測平臺(tái)，但其應(yīng)用的范圍肯定遠(yuǎn)不止于此，本領(lǐng)域的研究仍然大有可為。