徐海濤
摘要:兔輪狀病毒感染癥又名兔輪狀病毒病或兔輪狀病毒性腹瀉,是由兔輪狀病毒所引起的一種家兔,尤其是斷奶仔兔的急性、病毒性腸道傳染病,也是一種人獸共患病。在臨床上,以腹瀉和脫水為主要特征。本文分析了本病的發(fā)生原因以及應(yīng)對措施,希望能夠?yàn)閺V大養(yǎng)殖戶提供借鑒和參考。
關(guān)鍵詞:兔輪狀病毒感染癥;診斷;防治
養(yǎng)兔產(chǎn)業(yè)是我國重要的畜牧產(chǎn)業(yè)組成之一,家兔是毛皮動物生產(chǎn)的主要養(yǎng)殖對象,經(jīng)過多年的穩(wěn)定發(fā)展,規(guī)?;B(yǎng)殖場不斷出現(xiàn),年存欄量超過1,000只以上的母兔場已經(jīng)占據(jù)五分之一左右的市場份額,其中尤其是吉林、山東和重慶,規(guī)?;脠稣急瘸^60%,養(yǎng)兔產(chǎn)業(yè)已經(jīng)成為很多農(nóng)村地區(qū)的重要經(jīng)濟(jì)支柱性產(chǎn)業(yè)。但是家兔養(yǎng)殖受疾病的影響非常大,尤其是一些傳染類疾病,常常帶來巨大的危害,比如本文要研究的兔輪狀病毒,該病毒在全球主要養(yǎng)兔國家都有發(fā)現(xiàn)。我國也不例外,在近20年,我國學(xué)者通過流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),部分地區(qū)( 如河北、山東、云南和東北三省等)均存在兔輪狀病毒,給養(yǎng)兔業(yè)的發(fā)展造成了嚴(yán)重的威脅[1],并對畜牧業(yè)發(fā)展和人類健康都有較大危害。
1 病因
多種應(yīng)激因素,特別是寒冷、潮濕、不良的環(huán)境條件和喂不全價(jià)的飼料,以及其他疾病的襲擊,對兔輪狀病毒病的嚴(yán)重程度和病死率高低均有很大影響,促使該病的發(fā)生、發(fā)展。
2 流行病學(xué)
1)傳染源:帶毒者和發(fā)病者是主要傳染源??祻?fù)者從糞中排毒,可持續(xù)3周,在此期間,也成為傳染源[2]。
2)傳播途徑:兔輪狀病毒主要存在于腸道內(nèi),隨糞排到體外。污染飼料、飲水、墊草和土壤等,經(jīng)消化道傳染。
3)易感者:輪狀病毒不僅可以感染各種動物,而且還可感染6歲以下兒童。
4)發(fā)病年齡:主要侵害幼兔,尤其是30~60日齡的仔兔。成年兔常呈隱性感染而成為帶毒者,是傳染源[3]。
5)高發(fā)季:多見于晚秋、冬季和早春。
6)重要誘因:惡劣的天氣、飼養(yǎng)管理不良和衛(wèi)生條件差,以及長途運(yùn)輸?shù)葢?yīng)激因素,均為兔輪狀病毒病發(fā)生的重要誘因。
7)其他特點(diǎn):①一般以突然發(fā)生和迅速傳播的形式在兔群中出現(xiàn),通常呈散發(fā)性暴發(fā);②仔兔病死率約達(dá)40%,有的高達(dá)90%以上[4];③輪狀病毒病主要誘導(dǎo)細(xì)胞免疫,但免疫期不長,故康復(fù)者可以再感染;④兔群一旦發(fā)生輪狀病毒病,就會長期傳播,連年發(fā)生;⑤在許多情況下,病毒常與隱孢子蟲、球蟲、大腸桿菌和冠狀病毒等腸道致病因子混合感染,造成更大的損害。
3 主要癥狀和病理變化
1)主要癥狀:①潛伏期長短不一,一般為18~96h[5];②臨床類型:臨床上表現(xiàn)形式多樣,與年齡和品種都有一定關(guān)系,肉兔發(fā)病率低于長毛兔,幼齡兔高于成年兔。輕度癥狀表現(xiàn)為精神低沉、食欲下降,嚴(yán)重者則嘔吐、腹瀉、逐漸衰弱,糞便惡臭,極為稀薄,有白色、綠色、棕色等多種表現(xiàn),最后脫水死亡。發(fā)病后,約72h死亡[6]。成年病兔僅表現(xiàn)短暫的食欲不振和排軟便的過程。
2)病理變化:病死兔尸表脫水,病變主要集中在腸道。小腸膨脹、充血明顯,黏膜散布數(shù)量不等、大小不一的出血斑,絨毛萎縮;盲腸擴(kuò)張,內(nèi)含大量液狀內(nèi)容物;結(jié)腸淤血;腸系膜淋巴結(jié)腫大。其他臟器均無明顯病變。
4 診斷要點(diǎn)
4.1 類癥鑒別
引發(fā)兔群腹瀉的兔病種類繁多,其中包括不少傳染病、寄生蟲病、中毒病及營養(yǎng)代謝病等,因此,必須抓住各自的特征,尤其是病原,這是鑒別的主要依據(jù)。
4.2 定性診斷
根據(jù)主訴、現(xiàn)場調(diào)查、病兔臨床表現(xiàn)和病死兔剖檢病變,再通過類癥鑒別,可獲初診依據(jù),但要確診,必須進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)室診斷,即通過檢測腸道中的兔輪狀病毒或血清中的兔輪狀病毒抗體來做出結(jié)論。
1)采樣:正確取材無菌操作,一般在腹瀉開始4h內(nèi),采集小腸及其內(nèi)容物或糞便。
2)電鏡觀察:對于兔輪狀病毒的定性診斷具有重要意義。從病兔病料中發(fā)現(xiàn)特征性的病毒粒子,由11個(gè)雙股RNA片段組成,有雙層衣殼,像車輪,直徑70μm;也有直徑為55μm的缺損病毒,即可確診[7]。
3)病毒分離:兔輪狀病毒的分離培養(yǎng)比較困難,須經(jīng)特殊處理后才能適應(yīng)細(xì)胞,但早在1982年國外學(xué)者就已分離培養(yǎng)成功,國內(nèi)學(xué)者也在1993年獲得成功。
此法是將病兔糞樣經(jīng)低速離心和無菌處理后,加入胰蛋白酶處理,接種恒河猴胎腎傳代細(xì)胞系MA-104上,懸浮培養(yǎng),并繼代,收獲兔輪狀病毒,對毒株進(jìn)行檢查和鑒定。
此法的缺點(diǎn)是兔輪狀病毒的分離率比較低,一般不超過50%,存在假陰性間題。
4)血清學(xué)反應(yīng)可選用以下四種檢驗(yàn)方法:①酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn):此法不僅快速、敏感,而且實(shí)驗(yàn)條件簡單,適合大批標(biāo)本和微量標(biāo)本的檢測;美中不足的就是不夠穩(wěn)定,影響因素較多,需要進(jìn)一步做驗(yàn)證試驗(yàn),如ELISA阻斷試驗(yàn)和ELISA稀釋試驗(yàn)等;②核酸凝膠電泳:此法不僅可以鑒別人類和動物的兔輪狀病毒,而且還可以分析兔輪狀病毒的變異動態(tài)和發(fā)現(xiàn)新的病毒;③熒光細(xì)胞檢查法:用適量的磷酸緩沖液(PBS)稀釋病兔糞樣,涂抹于玻片上,37℃干燥20min,以冷丙酮固定10min,然后,用熒光素標(biāo)記的特異抗血清在室溫染色30min,鏡檢發(fā)現(xiàn)特異性熒光細(xì)胞;④乳膠凝聚試驗(yàn):此法不僅是一種特異、敏感、穩(wěn)定的方法,而且還具有快速、簡便等特點(diǎn)。
5)分子生物學(xué)診斷:逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)選取兔輪狀病毒基因上的兩段高度保守序列作為引物,在優(yōu)化RT-PCR條件的基礎(chǔ)上,建立RV-PCR方法。其敏感性要比ELISA高。
5 防治措施
5.1 應(yīng)急綜合性防控措施
1)針對傳染源:發(fā)現(xiàn)病兔立即隔離,并采取抗感染療法及支持療法。選用硫酸卡那霉素,肌內(nèi)注射安鈉咖、安乃近,靜脈注射25%葡萄糖等,還可給予能量合劑,補(bǔ)充VC。
病死兔必須及時(shí)深埋或焚燒,作無害化處理,以杜絕后患。
2)針對傳播途徑:關(guān)鍵措施是對兔舍、兔籠、用具及其環(huán)境進(jìn)行一次臨時(shí)性大消毒,以殺滅病原,切斷傳播途徑。
3)針對易感兔群:至今,對于本病尚無有效疫苗預(yù)防,因此,主要依靠加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,增強(qiáng)兔群抗病力。
5.2 防病要點(diǎn)
1)針對傳染源:首先,要堅(jiān)持自繁自養(yǎng),嚴(yán)禁從疫區(qū)引進(jìn)種兔,杜絕對外配種。其次,要嚴(yán)把引種關(guān),必須做好檢疫,嚴(yán)密隔離20~30d,在確認(rèn)健康后,方可入群飼養(yǎng)。
2)針對傳播途徑:兔場一定要嚴(yán)格執(zhí)行清潔衛(wèi)生、消毒制度,還要做好驅(qū)蟲、滅鼠工作,以消滅傳播者;并嚴(yán)禁兔毛商販進(jìn)兔舍購?fù)?、剪毛?/p>
3)針對易感兔群:一定要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,根據(jù)不同日齡、季節(jié)和氣候,確定合理的飼喂制度,以提高兔群對兔病的抵抗力。
5.3 診療注意事項(xiàng)
1)防病關(guān)鍵:加強(qiáng)幼兔的飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生消毒是防病的有效措施。
2)值得參考的防治方法:合理輸液,不僅可以糾正兔體水鹽代謝障礙和酸堿平衡,而且可以起到稀釋和排出毒素的作用,這對改善病兔的全身狀況,提高治愈率非常重要。常用藥物有:5%或10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化鈉注射液和生理鹽水等。
3)診斷的兩大技術(shù):兔輪狀病毒的實(shí)驗(yàn)室定性診斷,首推電鏡檢查,其次為免疫熒光抗體技術(shù)。
參考文獻(xiàn):
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