王磊

[摘? ? ? ? ? ?要]? 目的：觀察在非小細(xì)胞肺癌組織（NSCLC）及癌旁正常組織中兩種基因RUNX3和P53的表達(dá)情況，對(duì)兩者在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況進(jìn)行相關(guān)分析，研究它們與臨床病理分期的關(guān)系，探討這兩種基因與非小細(xì)胞肺癌之間發(fā)生、發(fā)展的關(guān)聯(lián)。方法：采用免疫組化法（SP法）檢測(cè)在40例非小細(xì)胞肺癌和10例肺癌旁正常組織中兩種基因RUNX3和P53的表達(dá)情況。結(jié)果：（1）在非小細(xì)胞肺癌組織中RUNX3基因的陽(yáng)性表達(dá)（37.5%，15/40）明顯低于在癌旁正常組織中的表達(dá)（80%，8/10）（P<0.05）;非小細(xì)胞肺癌組織中P53基因的陽(yáng)性表達(dá)（65%，26/40）明顯高于其在癌旁正常組織中的情況（20%，2/10）（P<0.05）。（2）在非小細(xì)胞肺癌中RUNX3和P53基因的表達(dá)均與患者的年齡、性別因素?zé)o關(guān)（P>0.05），均與肺癌組織的不同分期有關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：RUNX3基因表達(dá)下調(diào)與P53基因表達(dá)可能與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，RUNX3和P53基因有助于非小細(xì)胞肺癌的診斷和治療。

[關(guān)? ? 鍵? ?詞]? 非小細(xì)胞肺癌;RUNX3基因;P53基因;免疫組織化學(xué)

[中圖分類(lèi)號(hào)]? R4? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號(hào)]? 2096-0603（2021）38-0084-02

在呼吸系統(tǒng)疾病中，肺癌是一種常見(jiàn)的惡性腫瘤，臨床上可分為兩個(gè)大類(lèi)，即小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌，這當(dāng)中以非小細(xì)胞肺癌（Non-small-cell carcinoma，NSCLC）占比居多，主要包括腺癌、鱗癌、大細(xì)胞肺癌等。在現(xiàn)階段，大部分NSCLC患者的生存率并不高，主要是因?yàn)樵诿鞔_診斷時(shí)已為晚期或已出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。因此，如何能早期發(fā)現(xiàn)腫瘤并為腫瘤患者的治療提供新方向值得我們進(jìn)行深入研究。

檢測(cè)腫瘤基因是目前人們通過(guò)分子標(biāo)記物了解腫瘤的一種方式，主要是通過(guò)分析研究基因在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中的作用及其與腫瘤不同分期的關(guān)系等因素來(lái)完成，這也為今后開(kāi)展基因治療提供可能性。

P53基因最早是由英國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的，常被稱(chēng)為基因衛(wèi)士或基因監(jiān)護(hù)者。由于P53基因能夠激活修復(fù)或是停止損傷細(xì)胞生長(zhǎng)，近年來(lái)的相關(guān)研究較多。P53基因包括11個(gè)外顯子和10個(gè)內(nèi)含子，在17號(hào)染色體短臂上定位。目前有研究發(fā)現(xiàn)，P53基因與部分腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著一定的密切關(guān)系。

人類(lèi)runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3（human runt-related trans-cription factor 3，RUNX3） 位于染色體lp36，全長(zhǎng)為67kb，含有兩個(gè)啟動(dòng)和6個(gè)外顯子，屬于抑癌基因。有相關(guān)研究表明，RUNX3基因可能為通過(guò)影響轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（Transforming growth factor beta，TGF-β）信號(hào)通路的傳導(dǎo)，進(jìn)而在細(xì)胞周期調(diào)控、凋亡等方面發(fā)揮作用。

為幫助判斷在非小細(xì)胞肺癌中RUNX3和P53兩種基因的表達(dá)情況，分別選取非小細(xì)胞肺癌標(biāo)本組織和癌旁正常標(biāo)本組織利用SP法開(kāi)展相關(guān)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)而掌握它們?cè)诜伟┎∽冎械淖兓?/p>

一、所用材料與實(shí)驗(yàn)方法

（一）實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的來(lái)源

收集經(jīng)外科手術(shù)切除的非小細(xì)胞肺癌石蠟標(biāo)本，已經(jīng)過(guò)病理證實(shí)為原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌共40例，包括28例男性、12例女性，平均年齡約為55歲。所有患者術(shù)前都沒(méi)有接受過(guò)放射治療或者化學(xué)藥物治療等治療。

（二）試劑與方法

按照設(shè)計(jì)的技術(shù)路線(xiàn)，購(gòu)買(mǎi)RUNX3抗體、P53抗體及其他實(shí)驗(yàn)材料后，依照相關(guān)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行所有操作步驟，在每組試驗(yàn)中以磷酸鹽（PBS）緩沖液作為陰性對(duì)照代替一抗。

（三）結(jié)果判定

利用光學(xué)顯微鏡觀察切片情況，主要在細(xì)胞質(zhì)和（或）細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)RUNX3基因陽(yáng)性染色，主要在細(xì)胞核內(nèi)有P53基因陽(yáng)性染色，兩種基因的陽(yáng)性染色均為棕黃色或棕褐色顆粒狀或團(tuán)塊。

判斷標(biāo)準(zhǔn)：隨機(jī)選取5個(gè)視野，在高倍鏡下，在每個(gè)視野內(nèi)計(jì)算100個(gè)細(xì)胞，按照著色細(xì)胞數(shù)與計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)之比計(jì)算，取其平均值，確定為百分比<30%為陰性（-），百分比≥30%為陽(yáng)性（+）。

（四）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)在輸入電腦后，使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和數(shù)據(jù)處理，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

（一）RUNX3、P53兩種基因在非小細(xì)胞肺癌組織與癌旁正常組織中陽(yáng)性表達(dá)情況

經(jīng)過(guò)分析，RUNX3、P53兩種基因在對(duì)照組和非小細(xì)胞肺癌之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。RUNX3基因在非小細(xì)胞肺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)（37.5%，15/40）明顯低于癌旁組織（80%，8/10），P53基因在非小細(xì)胞肺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)（65%，26/40）明顯高于癌旁組織（20%，2/10）。

（二）RUNX3、P53兩種基因的表達(dá)與臨床病理分期的關(guān)系

非小細(xì)胞肺癌組織中RUNX3基因、P53兩種基因的表達(dá)與患者的年齡、性別差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），差異在腫瘤的不同分期存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），RU-NX3基因陽(yáng)性率隨腫瘤臨床分期的升高而降低，隨腫瘤臨床分期的升高P53基因陽(yáng)性表達(dá)增加。