潘翔 韓思婕 陳可琢 李正磊 張丹丹 羅心遙 李慧君 夏和元 王天合 葉曉川

中圖分類號(hào) R285 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2021）20-2467-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.20.06

摘 要 目的：研究復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)淺Ⅱ度燒傷皮膚的修復(fù)及抗炎鎮(zhèn)痛作用。方法：將加熱后的砝碼緊貼豚鼠右側(cè)脫毛部位皮膚4 s，復(fù)制淺Ⅱ度燒傷模型。造模成功后，將豚鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、京萬(wàn)紅軟膏組（陽(yáng)性對(duì)照）和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一、配方二、配方三組（鱷魚油質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1.5%、3%、4.5%，下同），每組8只。除模型組外，其余各組豚鼠每天按0.7 g/只涂抹給藥2次，連續(xù)14 d。每天記錄豚鼠創(chuàng)面愈合情況，并計(jì)算創(chuàng)面愈合率;采用蘇木精-伊紅（HE）染色法觀察豚鼠創(chuàng)面組織病理學(xué)變化;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測(cè)定豚鼠血清中表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素1（IL-1）的水平。將80只昆明小鼠分為2組，每組再按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、京萬(wàn)紅軟膏組（陽(yáng)性對(duì)照）和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一組、配方三組，每組10只，分別采用二甲苯耳廓腫脹法和醋酸扭體法以考察復(fù)方鱷魚油燒傷膏的抗炎鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果：在燒傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)中，復(fù)方鱷魚油燒傷膏干預(yù)后，豚鼠的創(chuàng)面面積逐漸縮小，且第14天時(shí)其創(chuàng)面已極大幅度愈合，創(chuàng)面愈合率顯著升高（P<0.01）;血清中EGF、 SOD水平均顯著升高（P<0.01），VEGF、MDA、TNF-α、IL-1水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）;創(chuàng)面組織可見(jiàn)較厚的新生表皮層，真皮層中結(jié)締組織和新生血管均明顯增多。在抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)中，復(fù)方鱷魚油燒傷膏干預(yù)后，小鼠的耳腫脹度與扭體次數(shù)均顯著降低（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論：復(fù)方鱷魚油燒傷膏可修復(fù)豚鼠淺Ⅱ度燒傷皮膚，且對(duì)小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用良好;其作用機(jī)制可能與升高血清中EGF、 SOD水平，降低VEGF、MDA、TNF-α、IL-1水平有關(guān)。

關(guān)鍵詞 復(fù)方鱷魚油燒傷膏;淺Ⅱ度燒傷;創(chuàng)面愈合;抗炎;鎮(zhèn)痛

Study on Repair， Anti-inflammation and Analgesia Effects of Compound Crocodile Oil Burn Ointment on Superficial Second-Degree Burned Skin

PAN Xiang，HAN Sijie，CHEN Kezhuo，LI Zhenglei，ZHANG Dandan，LUO Xinyao，LI Huijun，XIA Heyuan，WANG Tianhe，YE Xiaochuan（College of Pharmacy/Key Laboratory of Chinese Medicine Resource and TCM Chemistry， Hubei University of TCM， Wuhan 430065， China）

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To study the repair， anti-inflammatory and analgesic effects of Compound crocodile oil burn ointment on superficial second-degree burned skin. METHODS： The heated weight was attached to the right depilated skin of guinea pigs for 4 s to induce the model of superficial second-degree burn. After modeling， guinea pigs were randomly divided into model group， Jingwanhong ointment group （positive control）， formula Ⅰ， Ⅱ and Ⅲ groups of Compound crocodile oil burn ointment （volume fraction 1.5%， 3%， 4.5%， hereinafter）， with 8 guinea pigs in each group. Except for model group， other groups were smeared with 0.7 g/guinea pigs twice a day for 14 consecutive days. The wound healing was recorded every day， the healing rate of wound was calculated. HE staining was used to observe the histopathological changes of the wound. The serum levels of EGF， VEGF， SOD， MDA， TNF-α and IL-1 were detected by ELISA. Eighty Kunming mice were divided into 2 groups， and then sub-grouped into model group， Jingwanhong ointment group （positive control）， formula Ⅰ and Ⅲ groups of Compound crocodile oil burn ointment， with 10 mice in each group. Then xylene auricle swelling method and acetic acid writhing method were used to investigate the anti-inflammatory and analgesic effects of Compound crocodile oil burn ointment. RESULTS： In the burn repair experiment， after intervention of Compound crocodile oil burn ointment， the wound area of guinea pigs gradually decreased， and on the 14th day， the wound had healed greatly， and the wound healing rate increased significantly （P<0.01）; serum levels of EGF and SOD were increased significantly （P<0.01）， while the levels of VEGF， MDA， TNF-α and IL-1 were decreased significantly （P<0.05 or P<0.01）. The thick new epidermal layer was found in wound tissue， and the connective tissue and neovascularization in the dermis increased significantly. In the anti-inflammatory and analgesic experiment， after intervention of Compound crocodile oil burn ointment， the degree of ear swelling and the times of? writhing decreased significantly （P<0.05 or P<0.01）. CONCLUSIONS： Compound crocodile oil burn ointment shows good skin repair， anti-inflammatory and analgesic efficacy; the mechanism may be associated with increasing the serum levels of EGF and SOD and reducing the levels of VEGF， MDA， TNF-α， IL-1.

KEYWORDS? ?Compound crocodile oil burn ointment; Superficial second-degree burned skin; Wound healing; Anti- inflammatory; Analgesia

燒燙傷是指由火焰、熱液、電等物理因素或強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)因素引起的組織損傷。目前統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，我國(guó)每年燒傷患者數(shù)約占總?cè)丝诘?%，大面積燒傷患者的致殘率達(dá)48%，不同地區(qū)的住院燒傷患者病死率可達(dá)0.34%～7.52%[1]。皮膚創(chuàng)傷引起的劇痛、皮膚壞死、感染、疤痕以及昂貴的修復(fù)治療費(fèi)用也給患者造成了嚴(yán)重的生理和心理負(fù)擔(dān)。

鱷魚是一種兩棲爬行動(dòng)物，研究者們發(fā)現(xiàn)鱷魚在搏斗中經(jīng)常會(huì)受傷甚至四肢斷裂，但傷口總能快速愈合，而且很少發(fā)生感染[2]。鱷魚油是從鱷魚體內(nèi)提取出來(lái)的油，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，世界上許多國(guó)家都有將鱷魚油廣泛用于治療創(chuàng)面和炎癥的記載[3]。現(xiàn)代藥理研究表明，鱷魚油可促進(jìn)大鼠皮膚燒傷創(chuàng)面的愈合，減少瘢痕形成，并具有良好的抗炎鎮(zhèn)痛效果[4]。隨著鱷魚養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，鱷魚油用于燒傷患者的治療已經(jīng)成為可能。

皮膚燒傷后，往往伴隨著出血、炎癥、疼痛、水腫、感染等癥狀，導(dǎo)致創(chuàng)面愈合緩慢;且即使愈合后，往往也伴隨著疤痕與色素沉積。中藥茯苓性平、味甘，可調(diào)和藥性，且具有美白祛斑的功效[5];白及可收斂止血、消腫生肌，具有促進(jìn)創(chuàng)面愈合的功效[6];白芷祛風(fēng)止痛，具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌和美白的功效[7];川芎行氣活血、祛風(fēng)止痛，具有抗炎鎮(zhèn)痛的作用[8]。基于此，本研究擬采用茯苓、白及、白芷、川芎與鱷魚油進(jìn)行配伍，制成復(fù)方鱷魚油燒傷膏，并探討其對(duì)淺Ⅱ度燒傷皮膚的修復(fù)及抗炎鎮(zhèn)痛作用，以期為該制劑的開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有：C21-RT2120型電磁爐（廣東美的生活電器制造有限公司）、HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州國(guó)華電器有限公司）、BSA423S型千分之一電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]、Spark 10M 型酶標(biāo)儀（瑞士 Tecan 公司）、IX-73P1F型顯微鏡（日本OLYMPUS公司）。

1.2 主要藥品與試劑

鱷魚油購(gòu)自孝感順利特種養(yǎng)殖有限公司;茯苓、白及、白芷、川芎藥材（批號(hào)分別為180901、181001、180812、180912）均購(gòu)自安徽精誠(chéng)本草中藥飲片有限公司，經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院葉曉川教授鑒定為真品;京萬(wàn)紅軟膏（批號(hào)212245，規(guī)格20 g/支）購(gòu)自天津達(dá)仁堂京萬(wàn)紅藥業(yè)有限公司;表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素1（IL-1）的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒（批號(hào)分別為20200724、20200724、20200724、20200724、20200710、20200812）均購(gòu)自上海撫生實(shí)業(yè)有限公司;其余試劑均為分析純，水為蒸餾水。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

本研究所用健康清潔級(jí)Hartley豚鼠共40只，雌雄各半，體質(zhì)量（300±50） g，購(gòu)自湖北逸摯誠(chéng)生物科技有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（鄂）2016-0020;所用健康SPF級(jí)昆明小鼠共80只，雌雄各半，體質(zhì)量（22±2） g，購(gòu)自湖北省疾病預(yù)防控制中心，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（鄂）2020-0018。所有動(dòng)物購(gòu)入后，飼養(yǎng)于湖北中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，飼養(yǎng)期間均自由攝食、飲水。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案得到湖北中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物管理委員會(huì)批準(zhǔn)。

2 方法

2.1 復(fù)方鱷魚油燒傷膏的制備

取茯苓、白及、白芷、川芎藥材適量，粉碎，過(guò)100目篩;分別取上述藥材粉末適量，置于燒杯中，加入凡士林，于70 ℃水浴加熱20 min，混勻;放冷至常溫后，加入相應(yīng)量的鱷魚油，混勻，即制得復(fù)方鱷魚油燒傷膏。筆者按上述方法分別制備了低、中、高3種不同比例的復(fù)方鱷魚油燒傷膏（鱷魚油質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1.5%、3%、4.5%），分別為配方一、配方二和配方三。

2.2 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)豚鼠淺Ⅱ度燒傷皮膚的修復(fù)作用考察

2.2.1 分組、造模與給藥 參考文獻(xiàn)[9-11]方法造模：實(shí)驗(yàn)前24 h，采用脫毛膏對(duì)40只豚鼠背部脊柱左右兩側(cè)的皮膚進(jìn)行脫毛，脫毛面積均為3 cm × 3 cm;脫毛后，采用乙醚對(duì)豚鼠進(jìn)行麻醉，將直徑為2 cm的砝碼置于100 ℃的恒溫?zé)崴屑訜?5 min后取出，迅速擦干砝碼上的水分，然后緊貼豚鼠右側(cè)脫毛部位皮膚4 s（經(jīng)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，燒燙的砝碼緊貼豚鼠背部皮膚4 s即可達(dá)到造模效果）;左側(cè)脫毛部位作為空白對(duì)照，不進(jìn)行造模和給藥。當(dāng)豚鼠右側(cè)脫毛部位皮膚發(fā)白，且次日可見(jiàn)燒傷區(qū)域皮膚硬化、結(jié)痂，則表明淺Ⅱ度燒傷模型復(fù)制成功。將造模成功后的40只豚鼠隨機(jī)分為模型組、京萬(wàn)紅軟膏組（陽(yáng)性對(duì)照）和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一、配方二、配方三組，每組8只。除模型組豚鼠不給藥外，其余各組豚鼠每天按0.7 g/只（劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置）涂抹給藥2次（早上10：00和下午4：00各給藥1次，下同），連續(xù)14 d。

2.2.2 豚鼠創(chuàng)面愈合情況觀察 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每天觀察并拍照記錄各組豚鼠創(chuàng)面愈合情況，包括顏色、軟硬情況;同時(shí)，采用透明膜標(biāo)記法[12]計(jì)算其創(chuàng)面愈合率[創(chuàng)面愈合率=（初始燒傷面積-未愈合創(chuàng)面面積）/初始燒傷面積×100%]。

2.2.3 取材及處理 末次給藥后次日，采用乙醚麻醉豚鼠，心臟取血，血樣于4 ℃條件下以3 500 r/min離心10 min，吸取上層血清，分裝后置于-80 ℃冰箱中保存，備用。取血后，將各組豚鼠處死，取其右側(cè)燒傷皮膚以及左側(cè)正常皮膚，以4%多聚甲醛溶液固定，備用。

2.2.4 豚鼠創(chuàng)面組織病理學(xué)形態(tài)觀察 取“2.2.3”項(xiàng)下各組豚鼠經(jīng)4%多聚甲醛溶液固定后的皮膚，常規(guī)制作蘇木精-伊紅（HE）染色切片，采用顯微鏡觀察并拍照記錄各組豚鼠創(chuàng)面組織中的炎癥細(xì)胞、新生血管等情況。

2.2.5 豚鼠血清相關(guān)指標(biāo)水平檢測(cè) 取“2.2.3”項(xiàng)下各組豚鼠的血清，根據(jù)ELISA試劑盒說(shuō)明書方法操作，測(cè)定血清中EGF、VEGF、SOD、MDA、TNF-α、IL-1的水平。

2.3 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用考察

2.3.1 抗炎作用 采用二甲苯耳廓腫脹法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將40只昆明小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、京萬(wàn)紅軟膏組（陽(yáng)性對(duì)照）和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一、配方三組（結(jié)合“2.2”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并為降低實(shí)驗(yàn)成本，不對(duì)復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方二進(jìn)行考察，下同），每組10只。模型組小鼠右耳涂抹生理鹽水，其余各組小鼠按9 mg/耳（劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置）涂抹相應(yīng)藥物，每天2次，連續(xù)7 d。末次給藥后30 min，在小鼠右耳正反兩側(cè)分別涂抹10 μL二甲苯致炎，左耳不涂抹藥物作為對(duì)照;30 min后處死小鼠，以直徑為6 mm的打孔器分別在小鼠兩耳同一部位打下圓形耳片，并稱定其質(zhì)量，計(jì)算腫脹度和腫脹抑制率[腫脹度=右耳耳片質(zhì)量-左耳耳片質(zhì)量，腫脹抑制率=（模型組小鼠腫脹度-給藥組小鼠腫脹度）/模型組小鼠腫脹度×100%]。

2.3.2 鎮(zhèn)痛作用 采用醋酸扭體法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將另外40只昆明小鼠進(jìn)行腹部脫毛，再按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、京萬(wàn)紅軟膏組（陽(yáng)性對(duì)照）和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一、配方三組，每組10只。模型組小鼠腹部涂抹生理鹽水，其余各組小鼠按0.15 g/只（劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置）涂抹相應(yīng)藥物，每天2次，連續(xù)7 d。末次給藥后1 h，各組小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液（0.2 mL/只）致痛，然后記錄15 min內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)均以x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

3 結(jié)果

3.1 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)豚鼠創(chuàng)面愈合情況的影響

給藥第1～7天，模型組豚鼠創(chuàng)面干燥、厚實(shí)，呈白色或黑褐色;京萬(wàn)紅軟膏組和復(fù)方鱷魚油燒傷膏各配方組豚鼠的創(chuàng)面均比較潮濕、柔軟，呈黃棕色或棕褐色;給藥第8～14天，除模型組外，其余各組豚鼠的創(chuàng)面面積均逐漸縮小，且在第14天時(shí)其創(chuàng)面已極大幅度愈合。結(jié)果見(jiàn)圖1。

另外，在給藥第14天時(shí)，復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一、配方三組中已各有3只豚鼠的創(chuàng)面完全愈合，皮膚表面光滑無(wú)疤，僅有少量紫紅色印記。

3.2 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)豚鼠創(chuàng)面愈合率的影響

與模型組比較，給藥第7 天時(shí)，京萬(wàn)紅軟膏組和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一組豚鼠的創(chuàng)面愈合率均顯著升高（P<0.05或 P<0.01）;給藥第9、12、14 天時(shí)，京萬(wàn)紅軟膏組和復(fù)方鱷魚油燒傷膏各配方組豚鼠的創(chuàng)面愈合率均顯著升高（P<0.01）。與京萬(wàn)紅軟膏組比較，給藥第12天時(shí)，復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方三組豚鼠的創(chuàng)面愈合率顯著升高（P<0.05）。結(jié)果見(jiàn)表1。

3.3 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)豚鼠創(chuàng)面病理學(xué)形態(tài)的影響

豚鼠正常皮膚表皮層結(jié)構(gòu)完整，鱗狀上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常、排列緊密，真皮層膠原纖維含量豐富、可見(jiàn)毛囊皮脂腺等附屬器官、未見(jiàn)明顯炎癥;模型組豚鼠表皮層明顯較薄，真皮層可見(jiàn)較多炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和大量出血、僅有少量結(jié)締組織與新生血管;各給藥組豚鼠的創(chuàng)面組織可見(jiàn)較厚的新生表皮層，真皮層中結(jié)締組織和新生血管均明顯增多。結(jié)果見(jiàn)圖2。

3.4 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)豚鼠血清相關(guān)指標(biāo)水平的影響

與模型組比較，京萬(wàn)紅軟膏組和復(fù)方鱷魚油燒傷膏各配方組豚鼠血清中EGF、 SOD水平均顯著升高（P<0.01），VEGF、MDA、TNF-α、IL-1 水平均顯著降低（P<0.05或P<0.01）;與京萬(wàn)紅軟膏組比較，復(fù)方鱷魚油燒傷膏各配方組豚鼠血清中SOD、TNF-α水平均顯著升高（P<0.05或P<0.01），配方二組豚鼠血清中MDA水平和配方一、三組豚鼠血清中IL-1水平均顯著降低（P<0.05或 P<0.01）。結(jié)果見(jiàn)表2。

3.5 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)小鼠的抗炎作用

與模型組比較，京萬(wàn)紅軟膏組和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一、配方三組小鼠的耳腫脹度均顯著降低（P<0.01），腫脹抑制率均高于60%。結(jié)果見(jiàn)表3。

3.6 復(fù)方鱷魚油燒傷膏對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用

與模型組比較，京萬(wàn)紅軟膏組和復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方一、三組小鼠的扭體次數(shù)均顯著降低（P<0.05或P<0.01）;與京萬(wàn)紅軟膏組比較，復(fù)方鱷魚油燒傷膏配方三組小鼠的扭體次數(shù)顯著降低（P<0.01）。結(jié)果見(jiàn)表4。

4 討論

燒傷一般是指熱力因素引起的組織損害，其創(chuàng)面的愈合過(guò)程可分為凝血和止血、炎癥發(fā)生、組織增殖及重塑、疤痕組織形成這4個(gè)階段：燒傷后，創(chuàng)面立刻發(fā)生凝血和止血來(lái)保護(hù)血管系統(tǒng);其后機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)以對(duì)抗外來(lái)抗原;然后當(dāng)機(jī)體的炎癥反應(yīng)基本穩(wěn)定后，開始新生肉芽組織、血管等;最后產(chǎn)生新的上皮和瘢痕組織[13]。京萬(wàn)紅軟膏是一種治療燒傷的中藥復(fù)方油膏制劑，在市面上的銷售量最多[14]，故本研究選擇京萬(wàn)紅軟膏作為陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。本研究結(jié)果顯示，復(fù)方鱷魚油燒傷膏干預(yù)第7～14天，豚鼠的創(chuàng)面面積逐漸縮小，且在第14天時(shí)，其創(chuàng)面已極大幅度愈合。進(jìn)一步通過(guò)HE染色可知，豚鼠創(chuàng)面組織可見(jiàn)較厚的新生表皮層，真皮層中結(jié)締組織和新生血管均明顯增多，表明其創(chuàng)面已逐漸愈合。

EGF是首個(gè)被分離出來(lái)的生長(zhǎng)因子，可通過(guò)刺激角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)表皮細(xì)胞再生，在皮膚創(chuàng)面愈合過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[15]。VEGF是一種促血管生成因子，在機(jī)體處于低氧或炎癥的環(huán)境中可大量產(chǎn)生，并能與血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體結(jié)合，通過(guò)VEGF/蛋白激酶B（Akt）等信號(hào)通路促進(jìn)血管新生，進(jìn)而促進(jìn)創(chuàng)面愈合[16]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)復(fù)方鱷魚油燒傷膏干預(yù)后，豚鼠血清中EGF水平顯著升高，VEGF水平顯著降低。這提示復(fù)方鱷魚油燒傷膏可通過(guò)升高血清中EGF水平來(lái)促進(jìn)創(chuàng)面愈合。孫琦等[17]在利用艾灸治療大鼠皮膚創(chuàng)傷的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，治療3 d后，大鼠創(chuàng)面上皮細(xì)胞中的VEGF水平相較于模型組顯著升高;治療7 d后，VEGF水平相較于模型組顯著降低。這與本研究結(jié)果類似。筆者推測(cè)這可能是由于創(chuàng)面已逐漸愈合，新生血管已生成，故而在創(chuàng)面愈合后期，機(jī)體內(nèi)的VEGF水平降低。

TNF-α是一種促炎性細(xì)胞因子，其水平與燒傷的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，血清中TNF-α水平越高，越容易誘發(fā)細(xì)胞死亡，進(jìn)而減緩創(chuàng)面愈合效率[18]。IL-1也是一種促炎性細(xì)胞因子，能誘導(dǎo)其他細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)產(chǎn)生，增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答，從而引起組織損傷[19]。上述2種細(xì)胞因子不僅可各自促進(jìn)炎癥反應(yīng)，還會(huì)相互刺激、相互誘導(dǎo)，激活細(xì)胞因子的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，進(jìn)而誘發(fā)炎癥介質(zhì)的釋放、增強(qiáng)局部炎癥反應(yīng)[20]。SOD是一種抗氧化物保護(hù)酶，能反映氧自由基的清除能力[21]。MDA是反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化程度和細(xì)胞損傷程度的重要參數(shù)[22]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)復(fù)方鱷魚油燒傷膏干預(yù)后，豚鼠血清中TNF-α、IL-1、MDA水平均顯著降低，SOD水平均顯著升高。這提示復(fù)方鱷魚油燒傷膏可通過(guò)抑制血清中TNF-α、IL-1、MDA水平，升高血清中SOD水平而促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

二甲苯誘導(dǎo)的耳腫脹模型是一種急性炎癥模型，可用于抗炎作用研究[23];醋酸誘導(dǎo)的扭體模型是一種疼痛模型，可用于鎮(zhèn)痛作用研究[24]。本研究采用這兩種方法進(jìn)一步評(píng)價(jià)復(fù)方鱷魚油燒傷膏的抗炎鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示，經(jīng)復(fù)方鱷魚油燒傷膏干預(yù)后，小鼠耳腫脹度、扭體次數(shù)均顯著降低。這提示復(fù)方鱷魚油燒傷膏的抗炎鎮(zhèn)痛作用良好。

綜上所述，復(fù)方鱷魚油燒傷膏可修復(fù)豚鼠淺Ⅱ度燒傷皮膚，且對(duì)小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用良好;其作用機(jī)制可能與升高血清中EGF、 SOD水平，降低VEGF、MDA、TNF-α、IL-1 水平有關(guān)。

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（收稿日期：2021-05-07 修回日期：2021-07-06）

（編輯：唐曉蓮）