張沁怡，孫國(guó)祥

(1.沈陽(yáng)藥科大學(xué)無(wú)涯創(chuàng)新學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110016；2.沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110016)

溶出度是指在規(guī)定條件下，藥效活性物質(zhì)從普通固體制劑中溶出的速度和程度，對(duì)于緩、控釋制劑等則稱(chēng)為釋放度，作為控制固體制劑工藝一致性的體外評(píng)價(jià)方法，1970年《美國(guó)藥典》(18版)首次收載潑尼松片等品種的溶出度檢測(cè)，《中國(guó)藥典》(1977年版)開(kāi)始收載溶出度檢測(cè)項(xiàng)目[1]。2015 年國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》進(jìn)一步規(guī)范了溶出度測(cè)定方法。中藥固體劑型包括散劑、丸劑、膠囊劑和片劑等，近年來(lái)隨著新輔料和新技術(shù)等的應(yīng)用，出現(xiàn)新型固體制劑如緩(控)釋制劑、擇時(shí)和靶向釋藥系統(tǒng)等。藥品作為特殊商品，其質(zhì)量是確保用藥安全和有效的關(guān)鍵，而中藥制劑存在藥材來(lái)源分散，加工炮制方法和制劑生產(chǎn)工藝不統(tǒng)一等因素，造成其質(zhì)量和藥效的不確定性，因此，中藥一致性評(píng)價(jià)的溶出度問(wèn)題正成為確保藥品藥效均一穩(wěn)定的關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題。2016年3月5日國(guó)務(wù)院發(fā)布《國(guó)務(wù)院辦公廳關(guān)于開(kāi)展仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)的意見(jiàn)(國(guó)辦發(fā)〔2016〕8號(hào))》指出，開(kāi)展仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)工作，對(duì)提升我國(guó)制藥行業(yè)整體水平，保障藥品安全性和有效性，促進(jìn)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)升級(jí)和結(jié)構(gòu)調(diào)整，增強(qiáng)國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)能力，都具有十分重要的意義”。溶出度作為評(píng)價(jià)固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)顯得尤為重要，由于與化學(xué)藥的藥效成分明確不同，中藥制劑的藥效物質(zhì)復(fù)雜多樣，如何建立合適的溶出度研究方法成為當(dāng)前中藥固體制劑制備、質(zhì)量控制和一致性評(píng)價(jià)的熱點(diǎn)之一[2-4]。本文通過(guò)文獻(xiàn)查閱，對(duì)溶出度測(cè)定意義、溶出度測(cè)定裝置、檢測(cè)方法和數(shù)據(jù)處理分析方法進(jìn)行綜述，為中藥固體制劑的溶出度研究提供新參考和新思路。

1 溶出度研究的意義

1.1 溶出度是藥品質(zhì)量控制的重要指標(biāo) 固體制劑存在生物利用度低、差異性大等問(wèn)題，造成同一品種制劑生物不等效，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局記載的生物不等效藥品中，約80%存在溶出問(wèn)題[5]。為確保同一品種藥品間、批次間的質(zhì)量和療效一致，采用溶出度試驗(yàn)進(jìn)行藥品質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)成為研究的重要內(nèi)容[6-11]。閆慧等[7]采用高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜和紫外全指紋溶出度測(cè)定法對(duì)不同廠家復(fù)方甘草片的物質(zhì)組成并對(duì)溶出度進(jìn)行測(cè)定，以最后取樣點(diǎn)的溶出液紫外圖譜作為制劑全溶出標(biāo)準(zhǔn)圖譜，將不同時(shí)間點(diǎn)溶出樣品的紫外圖譜經(jīng)“復(fù)方甘草片主組分一致性數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)1.0”軟件，以210～400 nm的211個(gè)波長(zhǎng)下的紫外吸收光度點(diǎn)來(lái)計(jì)算溶出度和評(píng)價(jià)溶出曲線的一致性，發(fā)現(xiàn)各廠家制劑的28個(gè)HPLC主組分指紋的宏定量相似度很接近即藥效物質(zhì)總量都控制得很好，但其溶出行為存在顯著差異，可能與甘草浸膏粉質(zhì)量和生產(chǎn)工藝不同有直接關(guān)系。提示應(yīng)從原料和制備工藝入手開(kāi)展研究才能保證該制劑質(zhì)量的一致性，即在復(fù)方甘草片質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)中，工藝研究和溶出度控制更為重要。

1.2 溶出度是中藥劑型選擇、處方設(shè)計(jì)和制備工藝優(yōu)化的核心指標(biāo)

1.2.1 劑型選擇 中藥固體制劑的劑型包括散劑、顆粒劑、片劑和丸劑等，可滿足不同病癥緩急的用藥需要，如丸劑就有“水丸取其易化，蜜丸取其緩化，糊丸取其遲化，蠟丸取其難化”的傳統(tǒng)用藥選擇規(guī)范?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，不同劑型滿足疾病緩急用藥需要的根本與藥物溶出行為相關(guān)，溶出度測(cè)定可為劑型選擇提供依據(jù)。葉英響等[12]采用槳法，測(cè)定不同類(lèi)型六味地黃丸(分別為水泛丸、濃縮丸、蜜丸、水蜜丸、糊丸和蠟丸)的溶出度，發(fā)現(xiàn)不同類(lèi)型丸劑的溶出行為與丸劑傳統(tǒng)用藥選擇規(guī)范一致。劑型選擇基本代表藥物的作用吸收部位，要根據(jù)體內(nèi)吸收部位確定溶出介質(zhì)的種類(lèi)和pH，也是做好溶出方法開(kāi)發(fā)的前提。

1.2.2 處方設(shè)計(jì) 新輔料的開(kāi)發(fā)應(yīng)用促進(jìn)了中藥制劑現(xiàn)代化，輔料對(duì)制劑質(zhì)量如溶出行為影響顯著。以溶出度試驗(yàn)指導(dǎo)開(kāi)發(fā)新輔料、制劑輔料的選擇和處方設(shè)計(jì)，都可有效提升中藥固體制劑的質(zhì)量[13-14]。蔡延渠等[15]對(duì)桃膠進(jìn)行改良，制備喘平方緩釋片，采用小杯法，以麻黃堿、偽麻黃堿和東莨菪堿為測(cè)定指標(biāo)，對(duì)其釋藥曲線進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)各成分可實(shí)現(xiàn)同步釋放，改良桃膠緩釋性能更顯著，這與改良桃膠的含糖量增加，水溶性和吸水性提高，溶脹性能和形成水凝膠強(qiáng)度提高有關(guān)，可作為新型緩釋輔料應(yīng)用。

1.2.3 制備工藝 隨著“藥物一致性評(píng)價(jià)”研究的深入開(kāi)展，制備工藝對(duì)制劑溶出行為的影響日益受到關(guān)注，探討制劑技術(shù)和工藝對(duì)溶出度的影響，對(duì)合理選擇制備工藝和規(guī)范工藝參數(shù)具有指導(dǎo)意義[11，16-19]。張嬙等[11]采用槳法，在模擬消化道體液的4種介質(zhì)(分別為pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8緩沖液和純水)中，對(duì)不同廠家，不同批號(hào)復(fù)方丹參片的丹參酮ⅡA、丹酚酸B、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1等7種成分的溶出曲線進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)制劑的溶出行為存在較大差異，可能與輔料組成和制粒等工藝步驟控制不同有直接關(guān)系，提示中藥固體制劑的工藝條件選擇應(yīng)結(jié)合其溶出度測(cè)定數(shù)據(jù)來(lái)最終確定合理工藝參數(shù)。

1.3 溶出度可作為預(yù)測(cè)體內(nèi)生物利用度的重要指標(biāo) 生物利用度是指制劑中藥物吸收進(jìn)入體循環(huán)的速度和程度，與其藥效和安全性直接相關(guān)，需通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，存在耗時(shí)、成本高等問(wèn)題[20]。中藥固體制劑的藥效成分只有在胃內(nèi)充分溶出后，才能吸收進(jìn)入血液發(fā)揮藥效，通過(guò)制劑體外溶出與體內(nèi)吸收的相關(guān)性研究，可由簡(jiǎn)捷的溶出度測(cè)定來(lái)預(yù)測(cè)其生物利用度[21-23]。賴(lài)宏強(qiáng)等[24]對(duì)川芎組分片的體外溶出樣品和大鼠體內(nèi)血漿樣品進(jìn)行紫外掃描(波長(zhǎng)范圍為200～600 nm)，根據(jù)吸光度對(duì)波長(zhǎng)積分得到曲線下面積(吸波面積)，計(jì)算制劑的體外累積溶出度和體內(nèi)累積吸收百分率，兩組數(shù)據(jù)相關(guān)性良好，實(shí)現(xiàn)由體外溶出來(lái)預(yù)測(cè)體內(nèi)生物利用度。但該法要排除體內(nèi)內(nèi)源物質(zhì)所產(chǎn)生的紫外吸收才妥。

2 中藥溶出度測(cè)定裝置

《中國(guó)藥典》2015年版收載溶出度測(cè)定裝置有籃法、槳法、小杯法、槳碟法和轉(zhuǎn)筒法，2020年版新增流池法?；@法和槳法的裝置簡(jiǎn)單、耐用，易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測(cè)，應(yīng)用廣泛[9-10，12，25]；對(duì)于微粒給藥系統(tǒng)如納米粒、脂質(zhì)體等，需將制劑置于透析袋中進(jìn)行測(cè)定[26]；溶出介質(zhì)由水相和有機(jī)相組成，則稱(chēng)雙相法，用于水難溶性藥物的測(cè)定[5]。小杯法的介質(zhì)用量少，可用于劑量低的制劑[27-28]。槳碟法和轉(zhuǎn)筒法可用于透皮貼劑[29-30]；流池法可通過(guò)調(diào)節(jié)溶出介質(zhì)的流動(dòng)方式有效模擬體內(nèi)環(huán)境，有開(kāi)放式和循環(huán)式兩種[31]。溶出杯本身就是一個(gè)仿生試驗(yàn)裝置，900 mL溶出介質(zhì)的體積基本模仿人胃的體積，37 ℃也是人的正常體溫范圍內(nèi)，溶出儀的旋轉(zhuǎn)漿模仿人胃的蠕動(dòng)。

考慮到固體制劑進(jìn)入體內(nèi)胃腸道后的溶出和吸收過(guò)程具有連續(xù)、動(dòng)態(tài)、同步的特征，近年有學(xué)者提出設(shè)計(jì)藥物溶出/吸收仿生評(píng)價(jià)系統(tǒng)，模擬人體胃腸道變化條件下制劑的藥物溶出和跨膜吸收過(guò)程，實(shí)現(xiàn)對(duì)制劑中藥物連續(xù)、動(dòng)態(tài)釋放和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)性能的研究，與傳統(tǒng)溶出度測(cè)定裝置相比，更接近體內(nèi)實(shí)際環(huán)境[32-34]。

3 中藥溶出度測(cè)定方法

3.1 檢測(cè)指標(biāo)

3.1.1 單指標(biāo)成分 選擇制劑中單個(gè)或一類(lèi)成分(如總黃酮、總生物堿和總皂苷等)作為檢測(cè)指標(biāo)，適用于藥效成分明確或單一成分制備的中藥制劑[8，26，28]。劉芳芳等[25]以總黃酮苷為指標(biāo)制定了創(chuàng)新中藥奧蘭替胃康片的體外溶出度測(cè)定方法。復(fù)方制劑也可用主要藥效成分的單指標(biāo)作為測(cè)定溶出度的控制指標(biāo)。這種方法屬于抓主要矛盾的方法，但評(píng)價(jià)結(jié)果帶有一定的片面性。

3.1.2 多指標(biāo)成分 選擇制劑中多個(gè)或多類(lèi)成分作為檢測(cè)指標(biāo)，與單指標(biāo)相比，更能體現(xiàn)中藥多成分的特色，并且對(duì)不同指標(biāo)成分的溶出曲線進(jìn)行比較，可評(píng)價(jià)中藥制劑的多成分均衡釋藥性能，但多指標(biāo)成分測(cè)定存在指標(biāo)篩選、測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)如HPLC法需梯度洗脫、指標(biāo)成分的溶出特性不能完全代表中藥全成分等問(wèn)題[35-36]。段曉穎等[29]采用槳碟法，通過(guò)相似因子f2法對(duì)生物黏附制劑愈潰膜中丹皮酚、靛玉紅和龍腦3個(gè)指標(biāo)的溶出行為進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)制劑具有均衡釋藥特性。監(jiān)控中藥多指標(biāo)成分的溶出度采用HPLC指紋圖譜是很好方法，多指標(biāo)成分間或與相鄰峰首先要滿足分離度都大于2。顯然多指標(biāo)成分的溶出度需要建立各指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線法，閆慧[37]提出用一線多評(píng)法可節(jié)省對(duì)照品，其準(zhǔn)確性可控且好于一測(cè)多評(píng)法。

3.1.3 中藥物質(zhì)組 中藥物質(zhì)組是將基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)與中醫(yī)藥整體觀結(jié)合提出的新概念，采用中藥物質(zhì)組作為檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)制劑的溶出行為進(jìn)行評(píng)價(jià)，與單一或少數(shù)指標(biāo)成分相比，更能體現(xiàn)中藥多組成和整體性的特點(diǎn)，適用于多組分中藥固體制劑的溶出度研究[12,38-41]。凌昳等[41]采用紫外吸收光譜法對(duì)銀翹解毒丸的溶出樣品進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)Kalman濾波法處理，定量描述整體和不同程度切割后丸劑的物質(zhì)組溶出度，并以取樣間隔物質(zhì)組的歸一化溶出增量為指標(biāo)，對(duì)制劑的物質(zhì)組藥物溶出同步性進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)采用物質(zhì)組為指標(biāo)可定量描述銀翹解毒大蜜丸中藥物的溶出特性和同步性，物質(zhì)組的溶出速度和同步性與丸劑切割程度直接相關(guān)，過(guò)分切割影響制劑中物質(zhì)組的緩慢溶出特性和同步性。中藥物質(zhì)組的溶出度可采用HPLC指紋圖譜法來(lái)一次實(shí)現(xiàn)測(cè)定物質(zhì)組的整體和各單一組分的溶出度。中藥物質(zhì)組的各單一組分的溶出曲線可能存在差異，可選擇合適輔料和制劑工藝加以調(diào)控。

3.1.4 中藥全成分 基于中藥制劑成分的復(fù)雜多樣性，其質(zhì)量控制時(shí)應(yīng)體現(xiàn)“整體觀”思路，測(cè)定單一或數(shù)個(gè)指標(biāo)成分溶出行為不能充分體現(xiàn)制劑藥效成分整體的溶出特性[42-43]。近年來(lái)出現(xiàn)了采用HPLC指紋圖譜[44-46]、生物活性檢測(cè)[47-50]、紫外全指紋溶出度法[7,51-52]等方法，進(jìn)行中藥制劑全成分的溶出檢測(cè)。孫國(guó)祥課題組[7,51-52]開(kāi)發(fā)的HPLC指紋圖譜整體檢測(cè)溶出度法和紫外全指紋溶出度測(cè)定法，具有操作簡(jiǎn)便、快速、適用范圍廣等優(yōu)勢(shì)，測(cè)定的關(guān)鍵步驟是制劑全溶出液的制備，可采用制劑溶出度測(cè)定120 min時(shí)的溶出液作為全溶出溶液，考慮到有些制劑的中藥整體組分不一定完全溶出，以此溶出液指紋圖譜測(cè)定作為基準(zhǔn)只能得到相對(duì)溶出度數(shù)據(jù)。采用將10片固體制劑投入到900 mL的37 ℃溶出介質(zhì)中超聲20～30 min，然后取樣，稀釋10倍后，測(cè)定所得圖譜作為制劑全溶出液的標(biāo)準(zhǔn)圖譜，進(jìn)行溶出度測(cè)定和計(jì)算。溶出度檢查時(shí)，可測(cè)定相應(yīng)時(shí)間溶出液的指紋圖譜和全溶出液指紋圖譜的宏定量相似度作為制劑的溶出度的數(shù)據(jù)。缺少DAD檢測(cè)器時(shí)可采用一個(gè)能兼顧多個(gè)組分吸收的最大吸收波長(zhǎng)來(lái)同法測(cè)定。

3.2 檢測(cè)技術(shù)

3.2.1 氣相色譜法 氣相色譜法是利用氣體流動(dòng)相和色譜柱實(shí)現(xiàn)組分分離的分析方法，高效快捷，可用于易揮發(fā)性中藥成分的檢測(cè)[29,53-55]。王振等[55]將冰片包合于β-環(huán)糊精中制得復(fù)方丹參腸黏附微丸，采用籃法、氣相色譜法測(cè)定制劑在模擬胃、腸液中的龍腦溶出度，與復(fù)方丹參片相比，丸劑12 h累積釋放近70%，具有緩釋特性。

3.2.2 紫外分光光度法 紫外分光光度法是基于溶液中藥物成分對(duì)紫外線或可見(jiàn)光的吸收程度與其濃度之間定量關(guān)系的分析方法，具有操作簡(jiǎn)單、分析速度快等優(yōu)勢(shì)，可用于具有紫外吸收的單一成分或物質(zhì)組的檢測(cè)。王麗瓊等[56]以250 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，采用紫外法測(cè)定，經(jīng)加含量值校正的自身對(duì)照法計(jì)算溶出數(shù)據(jù)，與HPLC對(duì)照品法相比，兩者無(wú)顯著性差異。

針對(duì)中藥制劑成分復(fù)雜，溶出液紫外光譜多為混合光譜，專(zhuān)屬性較差，但可反映制劑整體成分的溶出行為，近年來(lái)，有學(xué)者提出了紫外指紋圖譜的新技術(shù)，用于制劑中整體成分或物質(zhì)組的溶出度測(cè)定[7，12，40，51-52]。葉英響等[12]以物質(zhì)組為檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)不同類(lèi)型六味地黃丸的溶出樣品進(jìn)行紫外掃描，以物質(zhì)組濃度標(biāo)準(zhǔn)譜為基準(zhǔn)，計(jì)算其釋放度，并繪制物質(zhì)組釋放度二維圖譜和物質(zhì)組釋放增量三維圖譜，實(shí)現(xiàn)對(duì)丸劑物質(zhì)組溶出行為的可視和定量描述，發(fā)現(xiàn)不同丸劑的溶出行為存在差異性和相似性。

3.2.3 高效液相色譜法 高效液相色譜法作為中藥制劑質(zhì)量檢測(cè)常用方法，專(zhuān)屬性強(qiáng)，靈敏度高，可用于單一成分[8，10，28]、多成分[57-60]和指紋圖譜全成分[44-46]的測(cè)定，其中指紋圖譜通過(guò)整體化學(xué)指紋的溶出動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)制劑質(zhì)量，體現(xiàn)了中藥整體性的特色[61]。楊巖濤等[45]采用HPLC指紋圖譜法測(cè)定補(bǔ)陽(yáng)還五單室滲透泵緩釋片的體外釋放度，將圖譜數(shù)據(jù)按出峰時(shí)間10 min 為間隔分段，按總量統(tǒng)計(jì)矩原理計(jì)算并評(píng)價(jià)成分間釋藥相似性，發(fā)現(xiàn)緩釋片可實(shí)現(xiàn)“整體受控、同步釋放”，同時(shí)探討超分子印跡模板在中藥不同成分整體同步釋放中的應(yīng)用。

3.2.4 生物效應(yīng)法 中藥制劑藥效通常是多組分協(xié)同作用的結(jié)果，反映其藥效作用的整體性，有學(xué)者提出采用生物效應(yīng)法代替單個(gè)(類(lèi))或幾個(gè)(類(lèi))指標(biāo)成分的檢測(cè)，從生物活性角度客觀評(píng)價(jià)制劑的溶出行為，生物效應(yīng)檢測(cè)方法的選擇需遵循“相關(guān)性、重復(fù)性、靈敏性和適用性”的原則，此方法與制劑藥效作用相一致，但存在操作煩瑣和適用性等問(wèn)題[47-50]。馬曉斐等[62]進(jìn)行復(fù)方丹參片溶出度研究時(shí)，經(jīng)實(shí)時(shí)細(xì)胞電子分析技術(shù)(RTCA) 實(shí)驗(yàn)和CCK-8 實(shí)驗(yàn)聯(lián)合篩選得到對(duì)制劑具有特定依賴(lài)性的H9C2 細(xì)胞作為檢測(cè)用細(xì)胞，并確定作用于細(xì)胞的合適藥效成分濃度范圍；將不同時(shí)間的溶出樣品作用于細(xì)胞，采用RTCA監(jiān)測(cè)細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化，轉(zhuǎn)換成電信號(hào)細(xì)胞指數(shù)(CI)，得到時(shí)間劑量依賴(lài)性細(xì)胞反應(yīng)曲線，通過(guò)CI值計(jì)算制劑的累積溶出率，進(jìn)行數(shù)學(xué)模型擬合，與紫外分光光度法進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)兩種方法具有一定的相關(guān)性，溶出數(shù)據(jù)符合Weibull 模型，RTCA法的模型擬合相關(guān)性?xún)?yōu)于紫外法。生物效應(yīng)法在各個(gè)方面應(yīng)用都只是一個(gè)美好的理想，真正用于生產(chǎn)檢驗(yàn)的難度是很大的。任何生物效應(yīng)法都只是中藥總效應(yīng)的一個(gè)側(cè)面，是一種單一活性方向的生物效應(yīng)。

3.2.5 其他技術(shù) 隨著檢測(cè)技術(shù)、新制劑的發(fā)展和制劑溶出規(guī)律及控制體系研究的需要，新技術(shù)不斷用于固體制劑溶出度的研究。梁蘭等[63]在黃柏煎煮提取過(guò)程，采用光譜成像技術(shù)測(cè)定在不同煎煮時(shí)間黃柏樣品的光譜圖像，根據(jù)熒光強(qiáng)度評(píng)價(jià)黃柏煎煮過(guò)程中活性成分的擴(kuò)散溶出行為，該技術(shù)可推廣應(yīng)用于緩、控釋制劑的釋藥行為、機(jī)理和控制體系的研究。近紅外透射光譜法[64]和拉曼光譜法[65]已用于化學(xué)藥制劑的溶出度研究。Ahme等[66]采用電位分析法監(jiān)測(cè)制劑中偽麻黃堿和布洛芬的溶出行為，此方法操作簡(jiǎn)便，但易受其他成分干擾，多用于成分簡(jiǎn)單的制劑測(cè)定，如測(cè)定成分復(fù)雜的中藥制劑，應(yīng)結(jié)合化學(xué)計(jì)算學(xué)方法以消除干擾。

紫外成像技術(shù)可采集制劑如片劑、凝膠劑等溶出過(guò)程的圖像，觀察制劑表層溶解和溶蝕情況，結(jié)合藥物溶出數(shù)據(jù)，探討制劑釋藥機(jī)制[67]。采用同步輻射顯微CT可連續(xù)觀察釋藥過(guò)程中固體制劑的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，探討制劑結(jié)構(gòu)因素對(duì)藥物釋放的影響和釋藥機(jī)制[68]。固體制劑的釋藥機(jī)制和溶出影響因素的研究，可指導(dǎo)新劑型的設(shè)計(jì)。

4 中藥溶出度數(shù)據(jù)處理分析方法

中藥固體制劑溶出度測(cè)定相關(guān)數(shù)據(jù)的處理分析，可用于評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量一致性、多成分釋藥均衡性和藥物釋藥機(jī)制的探討等。

4.1 差異因子(f1)和相似因子(f2)法 作為非模型依賴(lài)法，通過(guò)計(jì)算f1值和f2值，可評(píng)價(jià)不同藥物的溶出行為一致性，也可用于中藥制劑不同成分間溶出同步性的比較，評(píng)價(jià)制劑中多成分釋藥的均衡性[8-9，27]。

其中n為取樣時(shí)間點(diǎn)個(gè)數(shù)，Rt和Tt分別為參比和試驗(yàn)樣品在t時(shí)間的溶出數(shù)據(jù)。差異因子(f1)是計(jì)算兩條溶出曲線在每一時(shí)間點(diǎn)的差異，來(lái)衡量?jī)蓷l曲線相對(duì)偏差的參數(shù)。f1實(shí)際上是溶出曲線上每個(gè)點(diǎn)的溶出度的相對(duì)平均偏差，是一個(gè)誤差值。相似因子(f2)是衡量?jī)蓷l溶出曲線相似度的參數(shù)，通常f1值小于15或f2值大于50，則認(rèn)為兩條溶出曲線具有相似性。相似因子(f2)法對(duì)差異限度要求過(guò)高，監(jiān)控溶出曲線一致性差別的效果特別明顯，易顯示溶出曲線的差異性。相似因子(f2)法對(duì)于多組分的中藥有很多不適應(yīng)性，就是中藥用相似因子(f2)評(píng)價(jià)可能要求過(guò)高、過(guò)嚴(yán)格，按照中藥的特征性需要使用程度溶出度法。

4.2 溶出模型擬合法 采用不同數(shù)學(xué)模型(包括零級(jí)方程、一級(jí)方程、Weibull方程、Higuchi方程、Ritger-peppas方程等)對(duì)制劑溶出數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，通過(guò)擬合優(yōu)度參數(shù)比較確定最優(yōu)模型，根據(jù)最優(yōu)模型參數(shù)如Weibull方程中T50和Td(分別為制劑中藥物溶出50%和63.2%的時(shí)間)等對(duì)不同溶出曲線的相似性進(jìn)行比較，還可根據(jù)模型參數(shù)如Ritger-peppas模型中釋放參數(shù)n值大小推測(cè)制劑的藥物釋放機(jī)制[12，62，69-70]。

零級(jí)方程：Mt/M∞=kt

一級(jí)方程：ln(1-Mt/M∞)=-kt

Weibull方程：lnln[1/(1-Mt/M∞)]

=mln(t-τ)-lnt0

Higuchi方程：Mt/M∞=kt0.5

Ritger-peppas方程：Mt/M∞=ktn

其中Mt/M∞為制劑t時(shí)間的累積溶出百分率，k為常數(shù)，n為釋放參數(shù)。

4.3 Kalman濾波法 Kalman濾波法是基于經(jīng)典的最優(yōu)化遞推估算法[71]，當(dāng)中藥制劑中復(fù)雜藥效成分可視為同一物質(zhì)組，并且各組分可實(shí)現(xiàn)同步釋放時(shí)，與紫外分光光度法聯(lián)用，對(duì)制劑中物質(zhì)組進(jìn)行定量分析[12，40-41，69，72]。吳素香等[40]測(cè)定桂枝茯苓丸的溶出行為，分別采用HPLC法測(cè)定肉桂酸、芍藥苷、丹皮酚3種有效成分和Kalman濾波-UV法測(cè)定物質(zhì)組作為溶出檢測(cè)指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)丸劑有效成分與物質(zhì)組的溶出相關(guān)性良好，物質(zhì)組可代表制劑整體成分描述丸劑的釋藥特征。

4.4 中藥溶出度的定量指紋測(cè)定法 指紋圖譜用于中藥制劑溶出度研究時(shí)，通常采用指紋圖譜曲線下面積表示一定物質(zhì)量下的響應(yīng)總量，按譜量學(xué)方法對(duì)總成分進(jìn)行定量分析，計(jì)算制劑中每個(gè)指紋成分和整體成分的溶出度，常用指紋圖譜有HPLC指紋圖譜和UV全波長(zhǎng)指紋圖譜等[51-52，61，73]。孫林艷等[52]以小杯法，采用流動(dòng)注射法(流速為0.5 mL·min-1)對(duì)20批復(fù)方兩面針含片的不同時(shí)間溶出液進(jìn)行紫外掃描(波長(zhǎng)190～400 nm)，以最后取樣時(shí)間的圖譜為基準(zhǔn)，采用“中藥溶出紫外指紋圖譜定量相似度數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)3.0”軟件計(jì)算制劑溶出度，45 min時(shí)溶出度均超過(guò)70%。

孫國(guó)祥課題組[7，74]對(duì)全國(guó)14家以上廠家的復(fù)方甘草片進(jìn)行了紫外全指紋溶出度測(cè)定，基于標(biāo)準(zhǔn)制劑結(jié)合定量指紋圖譜和多Q-markers的精準(zhǔn)定量控制，提出在相同溶出試驗(yàn)條件下，用不同批次固體制劑的全部溶出液的宏定性相似度Sm≥0.9和宏定量相似度70%≤Pm≤110%作為判定中藥溶出曲線的一致性的新方法和評(píng)價(jià)新標(biāo)準(zhǔn)，該方法收錄在“中藥主組分一致性數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)3.0”軟件中，考慮到大多數(shù)中藥成分具有紫外吸收的特性，監(jiān)控190～400 nm的全紫外吸收成分的溶出情況，可體現(xiàn)中藥整體成分的溶出狀態(tài)，并且操作簡(jiǎn)便快捷，測(cè)定1個(gè)樣品的時(shí)間約1 min，為大量溶出數(shù)據(jù)的測(cè)定節(jié)約了寶貴時(shí)間，并可計(jì)算溶出曲線相似性因子f2，適用于化學(xué)藥和中藥固體制劑一致性評(píng)價(jià)中溶出度曲線相似性的計(jì)算。對(duì)于取液后的“補(bǔ)液法”和“棄液法”可對(duì)應(yīng)采取不同的計(jì)算公式和校正處理方法。

在復(fù)方甘草片質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)中，選擇北京國(guó)藥工業(yè)集團(tuán)有限公司的3批復(fù)方甘草片作為對(duì)照制劑，以水為溶出介質(zhì)，評(píng)價(jià)廣州粵華制藥有限公司的3批申報(bào)制劑的溶出曲線的宏定性相似度均Sm≥0.90和宏定量相似度均70%≤Pm≤110%，分別為81.0%、75.8%和83.8%，據(jù)此，我們判定廣州粵華的復(fù)方甘草片在水中溶出曲線與北京國(guó)藥的溶出曲線相似，這個(gè)方法的好處是把被評(píng)價(jià)廠家的溶出情況給出一個(gè)程度溶出度Pm，它能詳細(xì)底揭示被評(píng)制劑的具體溶出情況(溶出藥效物質(zhì)總量情況)。

4.5 組分權(quán)重系數(shù)法 根據(jù)中藥多成分的特點(diǎn)，有學(xué)者提出將制劑中各成分效應(yīng)(如物質(zhì)量、藥效等)與總效應(yīng)之間的比值作為權(quán)重系數(shù)，對(duì)各成分的溶出曲線進(jìn)行加權(quán)得到整合溶出曲線，表征制劑整體的溶出行為[23，75-76]。鄭娟等[75]采用HPLC法測(cè)定六味五靈片中五味子甲素、特女貞苷和連翹苷的溶出度，并根據(jù)各成分的質(zhì)量權(quán)重得到制劑的整合溶出度，同時(shí)基于制劑溶出液對(duì)LX-2肝星狀細(xì)胞的抑制率得到制劑的生物效應(yīng)溶出度，采用相似因子法對(duì)各單一成分和整合溶出度與生物效應(yīng)溶出度進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)整合溶出度與生物效應(yīng)溶出度相似性最好，可反映制劑的整體溶出特性。

5 結(jié)論

中藥固體制劑一致性評(píng)價(jià)的關(guān)鍵問(wèn)題之一是溶出度的控制與測(cè)定，采用的方法應(yīng)能評(píng)價(jià)中藥復(fù)雜樣品體系整體組分溶出的一致性，能夠考量制劑工藝的重復(fù)性和恒定性。中藥固體制劑在完成藥效總物質(zhì)的恒定性和一致性控制后，關(guān)鍵問(wèn)題應(yīng)該是溶出度一致性控制的問(wèn)題，因?yàn)槿艹龆戎苯雨P(guān)系到藥效的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。中藥制劑藥效物質(zhì)總量的一致性固然重要，但控制并不難，最難的應(yīng)是溶出度的一致性控制，藥效物質(zhì)的溶出一致性才是保證藥效一致性的必要基礎(chǔ)。中藥一致性評(píng)價(jià)的重點(diǎn)和難點(diǎn)應(yīng)是溶出度控制，它是比總藥效物質(zhì)控制更難的一個(gè)技術(shù)問(wèn)題，也是更重要的關(guān)鍵一步。

溶出度作為固體制劑體外質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)應(yīng)用日益廣泛，針對(duì)中藥藥效成分復(fù)雜多樣的特點(diǎn)，在溶出度研究過(guò)程中應(yīng)注重整體性，物質(zhì)組和全成分指紋圖譜法、生物效應(yīng)法等技術(shù)的應(yīng)用可實(shí)現(xiàn)中藥制劑整體溶出特性評(píng)價(jià)的要求，可根據(jù)藥效物質(zhì)特性選擇相應(yīng)的溶出檢測(cè)方法，同時(shí)有些問(wèn)題還需進(jìn)一步探討，如指紋圖譜法依據(jù)指紋峰進(jìn)行溶出度評(píng)價(jià)，如何確立指紋峰？指紋峰對(duì)應(yīng)物質(zhì)是否與藥效作用相關(guān)等？需與中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究相結(jié)合。多學(xué)科交叉融合，如色譜技術(shù)、光譜成像技術(shù)、化學(xué)計(jì)量學(xué)、機(jī)械設(shè)備技術(shù)等，可提升中藥固體制劑溶出度的研究水平和應(yīng)用價(jià)值，實(shí)現(xiàn)制劑溶出度快速在線檢測(cè)，探討制劑藥效成分的溶出機(jī)制和控制因素，保證現(xiàn)代中藥固體制劑的質(zhì)量一致性和可控性。本文推薦使用紫外全指紋溶出度測(cè)定法，該法在我國(guó)第一個(gè)主要成分為中藥組分的復(fù)方甘草片質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)中獲得成功應(yīng)用。