吳靜芳

[摘要] 目的 建立氨咖黃敏片中對乙酰氨基酚的溶出度測定方法。 方法 采用槳法，以900 ml水作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/min，以高效液相色譜法測定。采用C18柱，以乙腈-水-三乙胺（15∶85∶1.5）（用磷酸調(diào)pH至3.0）為流動相，檢測波長為243 nm。 結(jié)果 對乙酰氨基酚在0.0625～0.3750 mg/ml的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系（r=0.9995），平均回收率為100.1%，RSD值為0.39%（n=9）。樣品溶出均一性好，在30 min時6片中對乙酰氨基酚的溶出度均達(dá)90%以上。 結(jié)論 本方法快速、簡便、結(jié)果準(zhǔn)確，可作為該制劑中對乙酰氨基酚的溶出度測定方法。

[關(guān)鍵詞] 氨咖黃敏片；對乙酰氨基酚；溶出度；高效液相色譜法

[中圖分類號] R965 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2015）01（b）-0007-03

Dissolution determination of acetaminophen from paracetamol，caffein，artificial cow-bezoar and chlophenamine maleate tablets

WU Jing-fang

Institute for Drug Control of Guangzhou City，Guangzhou 510160，China

[Abstract] Objective To establish a dissolution determination method of acetaminophen from paracetamol，caffein，artificial cow-bezoar and chlophenamine maleate tablets. Methods The paddle method was used and with 900 ml water as dissolution medium at the rotation speed of 50 r/min，the acetaminophen was determined by HPLC.The C18 column was used with the mobile phase of acetonitrile-water-triethylamine（15∶85∶1.5）（pH was adjusted to 3.0 by phosphoric acid）at the detection wavelength of 243 nm. Results The linear range of acetaminophen was 0.0625-0.3750 mg/ml（r=0.9995），the average recovery（n=9）was 100.1%（RSD=0.39%）.The sample was dissolved uniformly，and the solubilities of the 6 tablets were above 90%. Conclusion The method is rapid，simple and accurate for dissolution determination of acetaminophen from paracetamol，caffein，artificial cow-bezoar and chlophenamine maleate tablets.

[Key words] Paracetamol，caffein，artificial cow-bezoar and chlophenamine maleate tablets；Acetaminophen；Dissolution；High performance liquid chromatography

氨咖黃敏片為對乙酰氨基酚、咖啡因、人工牛黃和馬來酸氯苯那敏的復(fù)方制劑，臨床上為抗感冒藥，曾用名為速效傷風(fēng)片。現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)收載于《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第三冊[1]，標(biāo)準(zhǔn)中采用外指示劑氧化還原滴定法測定對乙酰氨基酚的含量，操作較為繁瑣，且未對其溶出度進(jìn)行控制。溶出度是考察藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)，且該組方中對乙酰氨基酚占比重較大，為確保其藥效的充分發(fā)揮，建立對乙酰氨基酚的溶出度測定方法非常重要[2-11]。本文采用高效液相色譜法測定氨咖黃敏片中對乙酰氨基酚的溶出度，方法簡便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，國內(nèi)目前尚無相關(guān)文獻(xiàn)報道。

1 儀器與試劑

美國Waters Alliance 2695液相色譜儀，配備Empower色譜工作站；水為超純水；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。對乙酰氨基酚對照品（批號：100018-200408，含量：100.0%）購自中國食品藥品檢定研究院；氨咖黃敏片由3個廠家共提供3批樣品（A廠，生產(chǎn)批號：131001；B廠，生產(chǎn)批號：20121211；C廠，生產(chǎn)批號：20121201）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱采用Agilent C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相為乙腈-水-三乙胺（15∶85∶1.5）（用磷酸調(diào)pH至3.0）；流量：1.0 ml/min；柱溫：40 ℃；檢測波長：243 nm；進(jìn)樣量：20 μl。

2.2 溶出方法的考察

2.2.1 溶出介質(zhì)的選擇 分別采用900 ml鹽酸水溶液（24 ml稀鹽酸，用水稀釋定容至1000 ml）和900 ml水作為溶出介質(zhì)進(jìn)行試驗發(fā)現(xiàn)，樣品均能在上述兩種溶出介質(zhì)中較好溶出。為簡化條件、提高試驗效率并實現(xiàn)環(huán)保的原則，本研究選用900 ml水作為溶出介質(zhì)。

2.2.2 轉(zhuǎn)速的選擇 取同一批（A廠，批號：131001）樣品6片，按溶出度測定法，轉(zhuǎn)速分別設(shè)置為50、75、100 r/min進(jìn)行操作，于30 min時，取溶液5 ml，用0.45 μm微孔濾膜濾過，精密吸取續(xù)濾液20 μl，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)行檢測，計算其溶出量。結(jié)果50、75、100 r/min的溶出度分別為：96.8%、97.1%、96.7%，三者無明顯差異，故選擇轉(zhuǎn)速為50 r/min。

2.2.3 溶出時間的選擇 取同一批（A廠，批號：131001）樣品6片，照溶出度測定法進(jìn)行試驗，經(jīng)5、10、20、30、45、60 min時，取溶液5 ml濾過，精密吸取續(xù)濾液20 μl，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)行測定并繪制溶出度曲線，結(jié)果表明在30 min時6片的溶出度均達(dá)90%以上（表1、圖1），故選擇30 min為溶出時間。

2.2.4 溶出方法和限度的確定 按照溶出度測定法（2010版中國藥典附錄XC第二法），以水900 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/min，于30 min時，取溶液5 ml濾過，取續(xù)濾液20 μl按“2.1”項下色譜條件進(jìn)行檢測即得每片溶出量。根據(jù)溶出曲線（圖1）可知，至30 min時，樣品的溶出量均>90%，故將溶出限度確定為80%，即可滿足產(chǎn)品質(zhì)量控制的要求。

2.3 高效液相色譜法測定方法的考察

2.3.1 專屬性試驗 按處方量取輔料，加溶出介質(zhì)稀釋至與供試品濃度一致的空白溶液，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果表明在與對乙酰氨基酚相應(yīng)的保留時間處無任何輔料色譜峰出現(xiàn)，說明空白輔料不干擾樣品測定（圖2）。

2.3.2 線性關(guān)系考察 精密稱取對乙酰氨基酚對照品適量，用溶出介質(zhì)溶解并稀釋制成濃度為0.0625、0.1250、0.2000、0.2500、0.3000、0.3750 mg/ml的對照品溶液，精密量取各溶液20 μl，按“2.1”項下色譜條件測定并記錄色譜圖。以峰面積為縱坐標(biāo)（A），濃度為橫坐標(biāo)（C）作圖并計算回歸方程：A=37315746C+387355，r=0.9995。結(jié)果表明，對乙酰氨基酚在0.0625～0.3750 mg/ml濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.3.3 回收率試驗 照加樣回收的方法，精密稱取樣品（A廠，批號：131001；含量：100.7%）共9份，分別精密加入一定量的對乙酰氨基酚對照品，制成溶出度測定濃度65%、100%、120%的溶液各3份，按“2.1”項下色譜條件測定并計算回收率，結(jié)果見表2。

2.3.4 精密度試驗 取同一份供試品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果測得對乙酰氨基酚的溶出量分別為100.2%、100.0%、100.2%、100.1%、100.0%和100.1%，平均溶出量為100.1%，RSD為0.09%（n=6），說明儀器精密度良好。

2.3.5 溶液穩(wěn)定性試驗 取同一份供試品溶液，分別在0、3、5、12、24 h進(jìn)行測定，測得樣品的溶出量分別為100.4%、100.8%、99.7%、100.1%和100.0%，平均溶出量為100.2%，RSD為0.42%（n=5），結(jié)果表明溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4 溶出度測定

取3個廠家的3批樣品，按“2.2.4”項下溶出度測定法進(jìn)行試驗，結(jié)果表明樣品的平均溶出度良好（表3）。

3 討論

3.1 檢測波長的選擇

用流動相配制含對乙酰氨基酚對照品0.25 mg/ml的溶液，在200～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在243 nm處對乙酰氨基酚有最大吸收，故為了提高檢測靈敏度，減少雜質(zhì)干擾，選擇243 nm作為檢測波長。

3.2 流動相的選擇

筆者對幾種流動相進(jìn)行了考查[12-14]，結(jié)果表明，用乙腈-水-三乙胺（15∶85∶1.5）（用磷酸調(diào)pH至3.0）作為流動相時，樣品中對乙酰氨基酚出峰時間短、峰形對稱，且無其他成分干擾。

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（收稿日期：2014-08-25 本文編輯：李亞聰）