駱 雪 俞偉輝

（岳陽職業(yè)技術學院，湖南 岳陽 414000）

稻蝗是對直翅目、斑腿蝗科、稻蝗屬昆蟲所有種類的統(tǒng)稱。在我國分布有無齒稻蝗、山稻蝗、擬山稻蝗、中華稻蝗、海南稻蝗等14種。一般是出現(xiàn)在多項農作物中，分別表現(xiàn)為水稻、玉米、高粱、豆類等，對農作物產生的危害性是非常高的。一般情況下，稻蝗將植物的莖桿咬斷，無法正常生長，甚至嚴重的情況下還會吃光稻葉。針對于此種情況，在本篇文章中，結合稻蝗感染顆粒物、細菌以及農藥等，采取合理的方式重點檢驗稻蝗血細胞形態(tài)以及數(shù)量變化情況，明確血細胞內的參與免疫細胞類型，科學合理的評價稻蝗體液免疫能力。本文以中華稻蝗的特征體現(xiàn)為主，結合實際情況引進了合理的方式，得出了基本的實驗結論。

1 中華稻蝗的特征體現(xiàn)

在1982年提出了有關于中華稻蝗的分類特征，同時相關研究人員對蝗蟲展開了分類處理，分別表現(xiàn)為昆蟲綱、直翅目以及蝗亞目等。中華稻蝗的組成結構為頭、胸以及腹，顏色呈現(xiàn)出了綠色和黃綠色，對于齒雌成蟲來講，和雄性長蟲相比較來看自身的長度是非常長的，個頭是非常小的。在胸部三體節(jié)中相互連接到一起，成為一項整體，不過存在著連接的痕跡，需要明確認識到的一方面是，難以單獨的進行活動，腹部的體節(jié)涉及到多個，其中就屬混合體腔最為明顯。所謂混合體腔，是指稻蝗的體壁和內臟之間相互組合形成，被稱之為混合體腔，而在有著諸多血液的情況下叫做血體腔。一般情況下，在長江流域內的稻區(qū)中出現(xiàn)概率極高，其除了對水稻產生不良影響之外，同時還直接危害著其他農作物。通常來講，中華稻蝗一年發(fā)生一次，成蟲產卵期間普遍是處于相對潮濕和向陽以及堤岸等領域，在冬季的時候氣溫處于干燥狀態(tài)，可以為卵化存活提供可能性，秋天的時候雨水比較少，成蟲產卵的概率非常高。稻蝗每年出現(xiàn)一次，一般是處于五月份的時候進行發(fā)育，五次蛻皮子到七月下旬發(fā)育成成蟲，每一次蛻皮屬于一項齡期，長江流域以南的區(qū)域出現(xiàn)蝗災的現(xiàn)象極為嚴峻，稻蝗是植食水稻葉，直接威脅著玉米和小麥等方面的正常生長。

2 采取的方法

2.1 顆粒物感染

其一，顆粒物感染。取出一百只中華稻蝗，首先，認真的清理蝗蟲腹部，特別是第一腹結位置，配置相應比例的乙醇，將腹節(jié)處徹底清理干凈，保持整潔性，同時添加相應的溶液，提升溶液的均勻程度，將該項溶液注射到蝗蟲體內，注射以后的4h、8h、12h以及24h進行取血，每一次取二十只稻蝗的血，檢驗酶活。

其二，受細菌方面感染因素的影響，針對于細菌感染情況，要想有效治理，就需要有效的對濃度加以制備，添加細菌溶液，以100只中華稻蝗成蟲為主，和以上流程是一樣的，也是全面處理蝗蟲的腹節(jié)位置，采取合理比例的乙醇對腹結位置的雜物進行清除干凈，添加相關的溶液，注射于蝗蟲腹節(jié)處。注射以后的4h、8h、12h以及24h進行取血，每一次取二十只稻蝗的血，檢驗酶活。該項操作流程和顆粒物感染是一樣的。

其三，農藥感染。結合濃度實際情況將100只中華稻蝗成蟲取出，對蝗蟲的腹節(jié)處進行清洗，清洗的方式為清水，具體流程和以上相同。

2.2 制備和觀察光學顯微鏡樣品

當注射了外源物4h、8h、24h、48h以后，需要將中華稻蝗成蟲取出，數(shù)量為20只，其次，采取清水的方式將稻蝗的腹部以及胸部徹底清理干凈，定期對稻蝗內部實施相關的消毒作業(yè)，扎破稻蝗的胸部以及腹部，從中將血液取出，滴入載玻片內，涂片處理，將剩下的稻蝗血壓放置在PC管內，檢驗酶活，等到載玻片內的血膜徹底干燥以后，采取染液進行染色處理，完成染色工作以后，洗凈干載玻片，進行封片處理。最后采取光學顯微鏡的方式加以檢驗。

2.3 酶活檢測方式

在處理樣品期間，需要提前取出從冰箱內存放稻蝗血液的PC管，使血液處于融化的狀態(tài)，然后在低溫冷凍離心機中加以處理，達到離心的目的，放置上清液，為后期留做備用。

2.4 處理圖片以及分析數(shù)據(jù)

在實際實驗開展過程中，需要采取統(tǒng)計學的方式獲取準確的實驗數(shù)據(jù)，確保實驗結果的完善性，動態(tài)性的實施差異顯著性，分析開展差異性檢驗工作。

3 基本的實驗結論

3.1 當中華稻蝗感染了外源物以后血細胞呈現(xiàn)出了變化狀態(tài)

當前階段，通過相關分析來看，采取顯微鏡的方式認識到了中華稻蝗血細胞涉及到了諸多方面，類型多種多樣，具體表現(xiàn)為原細胞漿血包等多種類型，當受到了外源物的感染之后，稻蝗血細胞將會呈現(xiàn)出一系列的轉變狀態(tài)，具體情況如下所示。

其一，呈現(xiàn)出空泡化狀態(tài)。通常來講，細胞中普遍存在著空泡現(xiàn)象，對于有的細胞來講，將會形成諸多透明的大面積空泡，逐漸的對細胞核造成擠壓。而有的細胞也會隨之分離，形成諸多的空泡現(xiàn)象，這些空泡的數(shù)量隨之增加。

其二，粒細胞脫粒情況。對于粒細胞內的顆粒物來講，通常是從細胞質內留出，彌散于細胞周圍，細胞核將會增加溶血現(xiàn)象出現(xiàn)概率。

其三，細胞核出現(xiàn)了變形情況。正常細胞的細胞核變巖有著光滑性特征，除了處于蠕形狀態(tài)下的細胞形狀為梭形以外，其他的細胞核表現(xiàn)為圓形狀態(tài)。當外源物對細胞核產生感染以后，細胞核出現(xiàn)了嚴重的變形現(xiàn)象，周圍邊緣不再呈現(xiàn)出光滑性特征，逐漸發(fā)生了凹凸不平的情況，自身形狀變化規(guī)則性缺失，甚至還會移動到細胞一側。

其四，產生了凋亡小體。通常表現(xiàn)為漿血胞內，漿血胞內的細胞核逐漸形成了逐個小圓球，在相關細胞質內，將從細胞質內逐漸分離。

3.2 當中華稻蝗感染了外源物以后血細胞出現(xiàn)了吞噬和包囊等情況

第一，蝗蟲的血細胞呈現(xiàn)出了免疫現(xiàn)象。當感染了C粉以后，清楚的了解到參與吞噬的細胞類型是漿血包，在4h的情況下發(fā)現(xiàn)了漿血包逐漸吞噬了C粉顆粒，同時伴隨著包囊出現(xiàn)，經過了12h以后，了解到了吞噬C粉顆粒的漿血包慢慢的縮小，血細胞中包含的胞囊和結節(jié)也隨之消失。C粉以及Fe粉和Si粉三者有著相似性特征，只不過結節(jié)和包囊出現(xiàn)以及消失的時間不一樣。

第二，在受到了農藥影響以后，漿血細胞發(fā)生了變化，日益固縮，經過固縮狀態(tài)下的漿血包顏色較黑。而處于正常狀態(tài)下的漿血包因為包含了固縮的漿血包，所以形成了結節(jié)以及包囊。

第三，感染大腸桿菌以后蝗蟲血細胞的免疫情況。從稻蝗漿血胞以及粒血胞實際情況來看，這兩方面具備相同的效果，都可以將大腸桿菌徹底吞噬，當大腸桿菌進入了漿細胞內，并不會發(fā)生不良的破裂情況，經過4h以后，漿血胞子能夠吞噬大腸桿菌，在形成結節(jié)和包囊的基礎上產生了漿血胞和粒血胞。8h以后，稻蝗血細胞內的結節(jié)以及包囊隨之消除。12h以后，大腸桿菌被消化，呈現(xiàn)出了圓形。

第四，當感染了枯草芽孢桿菌之后蝗蟲血細胞受到的相關影響以及產生的一系列反應。從稻蝗免疫枯草芽孢桿菌實際情況來看，包含的環(huán)節(jié)是非常多的，具體表現(xiàn)為三方面。分別是吞噬、附著以及消化。通過分析來看，血細胞內芽孢桿菌的菌體消化流程是。首先，在初期推入階段中，菌體顏色發(fā)生了變化，逐漸為深藍色，菌體狀態(tài)也發(fā)生了改變，朝著小型狀態(tài)發(fā)展，或者是轉變?yōu)榱似渌愋偷臓顟B(tài)。即便發(fā)生了變化也可以處于染色狀態(tài)。當枯草芽孢桿菌周圍生存環(huán)境不符合要求的情況下，將會產生相應的保護結構芽孢，無論是在稻蝗的體內還是血細胞期間都會增加芽孢出現(xiàn)的概率。其次，血細胞中芽胞逐漸消化方面如下所示，當從菌體中形成了芽孢以后，可以發(fā)現(xiàn)芽孢處于無法染色的狀態(tài)，不過需要注意的一方面是，菌體可以染上色，經過一段時間以后，菌體隨之消失，不過無法染上色的芽孢并不會消失，對于該項芽孢來講，體積慢慢的縮小，隨后消失，與此同時，在稻蝗血液內包含的芽孢也處于消化狀態(tài)。通過檢查體液來看，可以查看到染不上色的芽孢。

第五，當感染了金黃色葡萄球菌之后蝗蟲血細胞形成了一系列反應。在感染了金黃色葡萄球菌之后，稻蝗血細胞免疫呈現(xiàn)出了吞噬和消化狀態(tài)，從實質情況來看，血細胞形態(tài)變化其實和大腸桿菌浸泡環(huán)節(jié)是一致的，主要表現(xiàn)為形成血細胞結節(jié)和包囊的現(xiàn)象，并且還表現(xiàn)為處于細胞中細菌慢慢的消失。

3.3 中華稻蝗血淋巴中P450和CES的活性變化情況探究

其一，感染顆粒物以后中華稻蝗血淋巴內P450的活性變化。結合稻蝗血淋巴中P450酶活性變化可以看出，C粉在4h時P450活性明顯低于溶劑對照組（P<0.05），在12h和24h時P450的活性則是遠遠低于溶劑對照組（P<0.01），和空白對照組相互比較分析，P450活性在4h-24h的情況下逐漸升高（P<0.01）。自從感染Fe粉后以后的P450活性和溶劑對照組間并沒有十分明顯的差異性（P>0.05）。

其二，感染細菌后中華稻蝗血淋巴中P450的活性變化。在感染大腸桿菌后，血淋巴中P450的活性在4h和24h時遠遠低于溶劑對照組（P<0.05），在48h時低于溶劑對照組（P<0.01）。其次，在4h和8h的情況下顯著高出了空白對照組（P<0.05），在2h和48h中明顯高于空白對照組（P<0.01）。當感染了枯草芽孢桿菌后，稻蝗血淋巴內包含的P450活性處于24h時有效低于溶劑對照組（P<0.05），

4 結語

以上所述，結合中華稻蝗特征進行了分析，從而獲取了準確的實驗結果，了解了差異之處。