查 娜，南 丁，娜 仁

(阿拉善盟食品藥品檢驗研究中心 巴彥浩特 750306)

酸棗為鼠李科植物酸棗 Ziziphus jujuba Mill. var. spinosa (Bunge) Hu ex H.F.Chow.的干燥成熟果實。又名山棗、野棗，喜歡溫暖且干燥的環(huán)境，耐干旱、耐寒、耐堿，是普遍分布于我國華北、西北、內(nèi)蒙古、遼寧等地的野生藥用植物，也是較早被收錄在我國衛(wèi)生部頒布的藥食同源的兩用品種。中醫(yī)典籍《神農(nóng)本草經(jīng)》中很早就有記載，酸棗“味酸平”。唐代以后，入藥改果實為種仁[1]。酸棗仁是《中國藥典》收載的中藥材。目前，酸棗主要入藥部位為種子，其酸棗果肉的使用、開發(fā)、利用較少，部分被用于其附加產(chǎn)品，比如酸棗汁、酸棗糕、酸棗面等。相關(guān)報道及研究顯示酸棗果實具有相當?shù)乃幱脙r值，酸棗果肉含三萜類化合物、有機酸、礦物元素、糖類等有效成分。研究其藥用成分和含量有助于酸棗的全面利用和產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。所以，本文針對酸棗果肉多糖進行了測定及研究，為酸棗多糖的利用提供有效的科學依據(jù)和數(shù)據(jù)。

1 儀器試劑與樣品

1.1 儀器

島津公司UV-2450型紫外-可見分光光度儀

1.2 試劑

5%苯酚溶液；硫酸(優(yōu)級純)；D-無水葡萄糖對照品(批號：110833-201908，中國食品藥品檢定研究院)。

1.3 樣品(酸棗果肉)

野生酸棗3批(阿拉善、巴彥諾爾、寧夏)，網(wǎng)購酸棗4批(遼寧、山西、甘肅、新疆)，種植酸棗1批(寧夏)。

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品溶液的制備

取無水葡萄糖對照品適量，精密稱定，加水制成每1mL中含0.1mg的對照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備

樣品提取參照《中國藥典》2020年版一部枸杞子質(zhì)量標準枸杞多糖含量測定方法。經(jīng)過前期試驗最終確定取樣量為0.3g，去掉乙醚提取步驟，“加水100mL，加熱回流2小時”連續(xù)提取2次。

2.3 樣品測定條件的確定

按照供試品溶液制備方法，在300nm～600nm波長，測得酸棗果肉樣品溶液紫外吸收光譜圖(藍線)與D-無水葡萄糖對照品溶液吸收光譜圖(黑線)一致,且最大吸收波長為489nm、485nm，并參照《中國藥典》[2]，最終確定測定波長為490nm，結(jié)果見圖1。

圖1 光譜圖

2.4 標準曲線的制備

參照《中國藥典》2020年版一部枸杞子質(zhì)量標準枸杞多糖含量測定方法，制備標準曲線。得回歸方程：y=0.005714x+0.00279,r2=0.99935(n=5)。結(jié)果表明，對照品溶液在22.620μg～113.10μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，見表1。

表1 線性關(guān)系考察結(jié)果

2.5 加樣回收試驗

取酸棗果肉樣品約0.3g，精密稱定9份，按照供試品溶液制備方法制備，精密量取0.5mL，置具塞試管中，分三組，每組三份，分別精密加入D-無水葡萄糖11.31μg、22.62μg、33.93μg，照標準曲線制備方法，自“各精密加入5%苯酚溶液1mL”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中含葡萄糖的重量(μg)。計算回收率見表2。

表2 D-無水葡萄糖加樣回收試驗結(jié)果(n=9)

2.6 重復性試驗

取酸棗果肉樣品按供試品溶液方法制備6份，測定每份樣品多糖含量。結(jié)果樣品中多糖平均含量為6.2%，RSD%為1.3%，表明重復性良好見表3。

表3 樣品多糖含量測定重復性試驗結(jié)果

2.7 耐用性試驗

考察供試品溶液的穩(wěn)定性。供試品溶液在0，1h，2h，3h，4h測定其吸光度，結(jié)果無明顯差異，確定4小時內(nèi)供試品溶液較穩(wěn)定。見表4。

表4 穩(wěn)定性試驗結(jié)果

2.8 樣品含量測定

8批酸棗樣品取果肉，按照供試品溶液制備方法制備、測定，多糖含量在4.5%～6.7%范圍，結(jié)果見表5。

表5 樣品含量測定結(jié)果

3 結(jié)論

根據(jù)上述實驗，本方法操作簡單可行、分析方法驗證指標均符合要求，可作為酸棗果肉多糖含量測定的方法。研究并開發(fā)酸棗果肉當中多糖有效成分，不僅能避免酸棗藥材的資源浪費，也有助于酸棗藥材的產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

4 注意事項

4.1試驗發(fā)現(xiàn)，濃硫酸的純度及加入方式對實驗結(jié)果的影響較大，采用優(yōu)級純硫酸且沿壁緩慢加入搖勻，避免反應(yīng)液暴沸濺出比色管。

4.25%苯酚溶液需臨用現(xiàn)配。