馬愛霞，齊艷君，陳鳳梅，郭建強(qiáng)，楊正茂，胡士林

(山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東濰坊 261061)

肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征是因長(zhǎng)途運(yùn)輸所致的應(yīng)激因素導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，引起呼吸道、消化道乃至全身病理性反應(yīng)的綜合癥候群[1-2]。當(dāng)前異地育肥依然是肉牛養(yǎng)殖的主要模式，不同地區(qū)間必然會(huì)有溫度、濕度和飼養(yǎng)管理的差異，不同地域間長(zhǎng)途運(yùn)輸是導(dǎo)致肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征發(fā)生的主要原因。當(dāng)前研究集中在長(zhǎng)途運(yùn)輸對(duì)機(jī)體各種指標(biāo)的影響[3-6]，以及如何通過改善運(yùn)輸條件和抗應(yīng)激處理[7-10]來(lái)降低運(yùn)輸應(yīng)激。研究表明，采取的措施能夠緩解但無(wú)法避免肉牛運(yùn)輸應(yīng)激，所以如何實(shí)現(xiàn)在運(yùn)輸后盡快提升肉牛的生理機(jī)能、免疫功能和抗病能力，減少應(yīng)激綜合征的發(fā)病率和病死率對(duì)牛場(chǎng)的效益有至關(guān)重要的影響。在使用中藥緩解運(yùn)輸應(yīng)激的影響方面做了研究[11-13]，賀叢等[14]發(fā)現(xiàn)科特壯(主要成分布他磷)具有促進(jìn)肝臟功能，幫助肌肉運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)消除疲勞的作用，能夠降低應(yīng)激反應(yīng)，結(jié)合本課題組的前期研究表明肉牛運(yùn)輸應(yīng)激損傷肝腎功能[15]，該病主要病理變化集中在呼吸系統(tǒng)，研制了以疏肝解郁、宣肺止咳、健脾理氣、扶正祛邪為主的中藥方劑“健牛散”，提升肉牛的全身機(jī)能，提高肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征的防控效果。為了探索“健牛散”防控肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征的效果，進(jìn)行了本試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 中藥方劑“健牛散”組方 魚腥草、黃連、黃芩、龍膽草、梔子、澤瀉、生地、當(dāng)歸、桑白皮、柴胡、甘草等藥物按照質(zhì)量比4∶3∶3∶2∶3∶3∶3∶1∶2∶2∶2組成，將藥物混勻打碎至180目粉劑。

1.1.2 試劑和中藥材 總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒，南京建成生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；免疫指標(biāo)檢測(cè)試劑盒北京科美東雅生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；中草藥，購(gòu)自濰坊頤卜生醫(yī)藥有限公司。

1.1.3 器械和設(shè)備 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀(BC-5300)，邁瑞醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)品；羅氏全自動(dòng)生化分析儀(COBAS INTEGRA 800)；酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀，芬蘭Thermo Labsystems公司產(chǎn)品；牛用投藥瓶、10 mL注射器、抗凝管、促凝管保存于牛羊病實(shí)驗(yàn)室。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 2019年11月17日在內(nèi)蒙古自治區(qū)某肉牛交易市場(chǎng)上隨機(jī)挑選24頭12月齡左右、體重230 kg±10.32 kg、臨床檢查健康的西門塔爾雜交肉牛，運(yùn)至山東安丘。隨機(jī)分為2組：試驗(yàn)組12頭，運(yùn)達(dá)后栓系飼養(yǎng)，試驗(yàn)人員于當(dāng)天開始將600 g中藥“健牛散”加入500 mL生理鹽水中使用牛用投藥瓶灌服，連續(xù)服用7 d，每頭牛600 g/d；對(duì)照組12頭，同樣方法灌服等量生理鹽水。稱量所有參與試驗(yàn)牛試驗(yàn)前后體重，記錄發(fā)病情況，計(jì)算平均日增重、發(fā)病率；采集所有參與試驗(yàn)牛試驗(yàn)前后靜脈血，每頭牛采集10 mL，其中2 mL用抗凝管保存，進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)；8 mL用促凝管保存，分離血清后進(jìn)行血液生化、免疫因子、抗氧化指標(biāo)的測(cè)定，以上指標(biāo)的測(cè)定按照相應(yīng)儀器和試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.2 到場(chǎng)后的飼養(yǎng)管理 到場(chǎng)后卸車入圈后先讓牛休息2 h～3 h，做好牛舍的防風(fēng)、保溫措施，給牛創(chuàng)造舒適的環(huán)境，牛舍要干凈、干燥、安靜，不要立即拴系。及時(shí)補(bǔ)水，每頭牛第1次飲水限制在15 kg～20 kg，每頭牛加人工鹽100 g/d或少量麩皮，3 h～4 h后自由飲水。先草后料，逐步加量，限量飼喂優(yōu)質(zhì)干草，每頭牛4 kg/d～5 kg/d，第2天起逐漸增加干草喂量，第4天起開始飼喂精飼料，每頭牛1 kg/d；集中進(jìn)行健康觀察和飼草料過渡2周以上，第2周逐漸加料至正常水平，逐漸加喂酒糟和青貯。購(gòu)入后進(jìn)行1次牛體消毒，用百毒殺或過氧乙酸噴霧消毒，1周內(nèi)不做驅(qū)蟲防疫處理。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 原始數(shù)據(jù)使用Excel進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析用SPSS 25.0數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.01表示差異極顯著，P<0.05表示差異顯著，P>0.05表示差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 “健牛散”對(duì)平均日增重和發(fā)病率的影響

由表1可知，兩組處理對(duì)牛運(yùn)輸后平均日增重和發(fā)病率的影響，試驗(yàn)組的平均日增重比對(duì)照組平均日增重顯著提高(P<0.05)。運(yùn)輸后7 d內(nèi)呼吸道和消化道發(fā)病率試驗(yàn)組均為16.7%，對(duì)照組分別達(dá)到50%和33.3%，試驗(yàn)組明顯低于對(duì)照組。

表1 平均日增重和發(fā)病率比較結(jié)果

2.2 “健牛散”對(duì)血常規(guī)的影響

由表2可知，試驗(yàn)組試驗(yàn)前后紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)顯著降低(P<0.05)，與試驗(yàn)組脫水得到有效改善有關(guān)，紅細(xì)胞平均體積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)顯著升高(P<0.05)，說明試驗(yàn)組貧血得到有效改善；對(duì)照組試驗(yàn)前后白細(xì)胞數(shù)(WBC)顯著升高(P<0.05)，與臨床發(fā)病率高的情況一致。

表2 血常規(guī)分析結(jié)果

2.3 “健牛散”對(duì)血液生化的影響

由表3中數(shù)據(jù)可知，試驗(yàn)組試驗(yàn)前后天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)含量顯著降低(P<0.05)，說明肝膽功能得到恢復(fù)，總蛋白(TP)顯著升高(P<0.05)、鐵(Fe)顯著降低(P<0.05)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、肌酐(CREA)、鉀(K)、鈉(Na)、磷(P)極顯著降低，尿素(UREA)極顯著升高(P<0.01)，這些指標(biāo)趨于正常值，應(yīng)激狀態(tài)得到改善；對(duì)照組試驗(yàn)前后UREA顯著升高(P<0.05)，CREA、Na顯著降低(P<0.05)，與應(yīng)激狀態(tài)得到改善有關(guān)，但均不如試驗(yàn)組差異顯著，AST、ALP極顯著升高、TP極顯著降低(P<0.01)，與臨床發(fā)病情況一致，疾病可引起肝膽功能指標(biāo)變化。

表3 血液生化分析結(jié)果

2.4 “健牛散”對(duì)免疫及抗氧化因子的影響

由表4中數(shù)據(jù)可知，試驗(yàn)組試驗(yàn)前后表中各項(xiàng)指標(biāo)均發(fā)生變化，免疫球蛋白M(IgM)、T-AOC、SOD活性變化達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，顯著升高(P<0.05)，對(duì)照組試驗(yàn)前后各項(xiàng)數(shù)據(jù)差異均不顯著，說明使用“健牛散”能夠提升免疫力。

表4 免疫及抗氧化因子檢測(cè)結(jié)果

3 討論

3.1 “健牛散”組方依據(jù)

該組方中魚腥草性寒泄降，以清解肺熱見長(zhǎng)，又具消癰排膿，清熱除濕、利尿通淋的功效，配伍黃芩，善治痰熱、咳喘。龍膽草大苦大寒，上瀉肝膽實(shí)火，下利肝經(jīng)濕熱，瀉火除濕，加黃連、梔子可以強(qiáng)清熱燥濕。柴胡疏暢肝膽，且與黃苓相合，可解肝膽之熱。桑白皮清熱瀉肺，行水消腫，主治肝火犯肺，肺熱喘逆，水飲停肺。澤瀉利尿排毒。當(dāng)歸、生地養(yǎng)血滋陰扶正。甘草既可防苦寒之品傷胃，又可調(diào)和諸藥。結(jié)合該病的癥狀和病理變化，需要改善肝功腎功、改善貧血、消炎、提高免疫力，試驗(yàn)組在使用該組方后平均日增重增加，呼吸道和消化道發(fā)病率均降低。

3.2 “健牛散”對(duì)血常規(guī)的影響

試驗(yàn)牛運(yùn)輸后處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)機(jī)體脫水造成血液濃縮引起紅細(xì)胞數(shù)量增多，血紅蛋白濃度升高，與已有研究一致[16]。試驗(yàn)牛出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)引起紅細(xì)胞平均體積減小，屬于小細(xì)胞低色素性貧血。試驗(yàn)后試驗(yàn)組紅細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)改善明顯，說明該藥物組方能改善貧血，隨著應(yīng)激的解除對(duì)照組也有改善，但差異不顯著；對(duì)照組白細(xì)胞數(shù)試驗(yàn)前后差異顯著與發(fā)病情況符合。

3.3 “健牛散”對(duì)血液生化的影響

運(yùn)輸后牛處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，天門冬氨酸氨?；D(zhuǎn)移酶和堿性磷酸酶數(shù)值較高，與天門冬氨酸氨?；D(zhuǎn)移酶升高提示肝臟合成亢進(jìn)或膽汁排出受阻，堿性磷酸酶是診斷膽道系統(tǒng)疾病時(shí)常用的指標(biāo)，堿性磷酸酶升高提示膽道有梗阻性病變、膽汁淤積性肝炎和肝外梗阻，肝臟有纖維化現(xiàn)象。膽固醇、尿素和總蛋白低于正常值，膽固醇濃度低見于肝臟發(fā)生嚴(yán)重病變，尿素氮含量降低多見于腎功能失調(diào)和肝功能衰竭，總蛋白含量降低常見于肝炎、腎病綜合征、營(yíng)養(yǎng)不良或消耗增加。試驗(yàn)組試驗(yàn)后肝腎功能指標(biāo)都趨于正常[17-18]，而對(duì)照組指標(biāo)恢復(fù)較慢，且因發(fā)病率高，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移、堿性磷酸酶有不同程度的升高，總蛋白降低。礦物質(zhì)元素在體內(nèi)代謝過程中的作用非常重要，過高過低對(duì)機(jī)體正常機(jī)能都有影響，而且對(duì)機(jī)體其他礦物質(zhì)元素的代謝也有影響。試驗(yàn)組前后鈉、鉀和磷差異顯著，與肝腎功能調(diào)節(jié)關(guān)系密切。

3.4 “健牛散”對(duì)平均日增重和發(fā)病率的影響

運(yùn)輸途中飲水和飼料的補(bǔ)充受限、胃腸道內(nèi)的食糜排空加快等造成牛體重降低，到場(chǎng)后盡快恢復(fù)體重對(duì)牛的健康影響較大，使用“健牛散”后平均日增重顯著增加，降低疾病發(fā)病率。不同牛場(chǎng)的飼養(yǎng)管理水平使牛群的健康狀況存在較大差異，對(duì)平均日增重、發(fā)病率等都有影響，也會(huì)影響藥效發(fā)揮。除了從藥物方面抗應(yīng)激處理還需要從日常管理入手，從選牛到到場(chǎng)后的護(hù)理全方位做好才能更好地減輕應(yīng)激反應(yīng)危害。