張佳晨,王晉宇,丁 尤
(蘇州蘇水環(huán)境監(jiān)測(cè)服務(wù)有限公司,江蘇 蘇州 215000)
氟樂靈是一種選擇性芽前二硝基苯胺類除草劑,常用于防除棉花、豆類田間生長的雜草,具有易揮發(fā)、水溶性極小等特點(diǎn),在水體和土壤中的殘留時(shí)間較長,不易降解,具有蓄積性和遷移性.氟樂靈農(nóng)藥經(jīng)人體吸入,可誘導(dǎo)腎臟和膀胱腫瘤,大劑量食入,會(huì)引起類似蕈毒堿樣作用和因呼吸抑制而死亡[1-2].
目前,在各類水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中,對(duì)氟樂靈最大殘留量的限值規(guī)定較少,僅世界衛(wèi)生組織(WHO)在飲用水質(zhì)準(zhǔn)則(第四版)中以及深圳地方標(biāo)準(zhǔn)《生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》(DB4403/T 60—2020)在附錄A中規(guī)定[3-4],水中氟樂靈的最高質(zhì)量濃度應(yīng)低于0.02 mg/L,但二者均沒有規(guī)定對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法.
在食品、水產(chǎn)品領(lǐng)域,國內(nèi)外有關(guān)氟樂靈的檢測(cè)方法多為色譜法.姜國華等[5]采用氣相色譜法測(cè)定花生中的氟樂靈殘留量.劉慧慧等[6]采用氣相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中的氟樂靈含量.文娜[7]采用超高效液相色譜法測(cè)定氟樂靈.而有關(guān)水中氟樂靈殘留量檢測(cè)的報(bào)道相對(duì)較少.卞戰(zhàn)強(qiáng)等[8]采用固相膜萃取-氣相色譜/質(zhì)譜法測(cè)定了水中的3種除草劑含量.羅方方等[9]采用液液萃取氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)定了漁業(yè)用水中8種除草劑的殘留量.上述兩種水中氟樂靈檢測(cè)方法中,氟樂靈的檢出限均低于1.0 μg/L,但是均使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,其設(shè)備價(jià)格較高,并且檢測(cè)過程存在一定的基體效應(yīng)[10],不易大量推廣使用.水中氟樂靈預(yù)處理方法中,液液萃取的預(yù)處理方法操作簡單,分析時(shí)間少,固相萃取預(yù)處理方法的回收率高,自動(dòng)化程度高.作者通過對(duì)兩種預(yù)處理方法的優(yōu)化,得到靈敏度較高、干擾少、操作簡便的水中氟樂靈檢測(cè)方法,其檢出限能夠滿足WHO限值的要求.
Varian CP 3800型氣相色譜儀,電子捕獲檢測(cè)器(ECD)(美國Varian公司);HP-5毛細(xì)管色譜柱 (30 m×0.32 mm,0.25 μm,美國Agilent公司);全自動(dòng)固相萃取儀(美國Caliper LifeScience公司);TurboVap II型氮吹濃縮儀(美國Caliper LifeScience公司);甲醇(色譜純,美國Merck公司);正己烷、乙酸乙酯(農(nóng)殘級(jí),美國Fisher公司);超純水(美國Millipore公司);C18固相萃取小柱(美國Waters公司,美國Thermo公司,德國CNW公司);氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液:1 000 mg/L(甲醇基體,美國AccuStandard公司);氯化鈉、無水硫酸鈉(分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司).
生活飲用水樣品取自蘇州市相城區(qū)市政自來水水質(zhì)監(jiān)測(cè)點(diǎn)位,地表水樣品取自長三角地區(qū)集中式飲用水廠水源地取水口.
進(jìn)樣口溫度220 ℃;分流進(jìn)樣,分流比為5∶1,進(jìn)樣體積1 μL;ECD檢測(cè)器溫度為300 ℃;載氣為高純氮?dú)?純度為99.99%),流量1.0 mL/min;升溫程序:初始溫度40 ℃,以40 ℃/min速率升到240 ℃,保持6 min,整個(gè)分析時(shí)間為11 min.
1.3.1 液液萃取預(yù)處理
取水樣100 mL,置于250 mL分液漏斗中,加入氯化鈉3 g后振搖,使氯化鈉完全溶解.加入正己烷5 mL,充分振蕩3~5 min,靜置10 min,棄去水相,有機(jī)相加入裝有無水硫酸鈉的試管中脫水,用氮吹濃縮儀在40 ℃恒溫水浴濃縮到1 mL,按色譜條件進(jìn)行分析.
1.3.2 固相萃取預(yù)處理
將固相萃取小柱安裝到自動(dòng)固相萃取儀上,使用5 mL甲醇活化,10 mL純水過柱,100 mL水樣以約5.0 mL/min的流速通過已經(jīng)活化過的小柱,當(dāng)所有水樣都通過小柱后,使用10 mL純水沖洗樣品瓶內(nèi)壁,并將沖洗液一起過柱,5 mL正己烷淋洗小柱,淋洗液收集后加入無水硫酸鈉脫水,使用氮吹濃縮儀在40 ℃恒溫水浴濃縮到1 mL,按色譜條件進(jìn)行分析.
使用正己烷稀釋氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液,得到質(zhì)量濃度為10 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液,按色譜條件進(jìn)樣1 μL,得到氟樂靈檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖,如圖1所示.由圖1可見,保留時(shí)間為5.8 min.
圖1 氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖
取一定量的氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液加入100 mL水中,其質(zhì)量濃度為1.0 μg/L.按照1.3.1節(jié)方法,分別采用正己烷、乙酸乙酯和正己烷-乙酸乙酯(體積比1∶1)三種溶劑進(jìn)行萃取濃縮后上機(jī)檢測(cè).結(jié)果表明,采用乙酸乙酯為萃取劑,氟樂靈的回收率顯著小于采用正己烷和正己烷-乙酸乙酯(體積比1∶1)為萃取劑時(shí)的結(jié)果.考慮操作的便捷性和氮吹濃縮的穩(wěn)定性,最終選擇正己烷單一溶劑作為液液萃取溶劑.
2.3.1 固相萃取小柱的選擇
文獻(xiàn)[8]表明,采用C18填料的固相萃取小柱對(duì)氟樂靈進(jìn)行富集和分離,能夠得到相對(duì)較高的回收率.試驗(yàn)時(shí),分別選擇Waters Sep-Pak Vac C18柱、Thermo HYPERSEP C18柱以及CNWBOND HC-C18SPE柱為固相萃取柱,按試驗(yàn)方法(1.3.2)進(jìn)行固相萃取操作,進(jìn)行回收率分析,每種固相萃取小柱進(jìn)行4次平行試驗(yàn).試驗(yàn)結(jié)果表明,采用CNWBOND HC-C18SPE柱時(shí),氟樂靈峰面積時(shí)高時(shí)低,說明該小柱穩(wěn)定性差.Waters Sep-Pak Vac C18柱和Waters Sep-Pak Vac C18柱穩(wěn)定性均較好,二者市場價(jià)格差異不大,但Waters Sep-Pak Vac C18柱的氟樂靈回收率略高.因此,選擇Waters Sep-Pak Vac C18作為固相萃取柱.
2.3.2 固相萃取上樣速率和洗脫溶劑的選擇
在固相萃取操作的過程中應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)纳蠘铀俾?速率過大,目標(biāo)化合物缺少在固定相上充分分配的時(shí)間,從而使得回收率降低.速率減小,雖可以提高回收率,但總體萃取時(shí)間會(huì)增加.作者試驗(yàn)了0.5、1.0、2.0、5.0、8.0、10.0 mL/min流量對(duì)萃取效果的影響,結(jié)果如圖2所示.
圖2 固相萃取上樣速率的影響
由圖2可見,當(dāng)上樣速率為0.5~5.0 mL/min時(shí),氟樂靈回收率較高且差異小,上樣速率為8.0和10.0 mL/min時(shí),萃取效果顯著變差.綜合考慮時(shí)間和效果因素,選擇上樣速率為5.0 mL/min.
分別選擇正己烷、甲醇、乙腈、丙酮為洗脫溶劑,考察不同洗脫溶劑的影響,結(jié)果如圖3所示.
圖3 固相萃取洗脫溶劑的影響
由圖3可以看出,以正己烷為洗脫溶劑,氟樂靈峰面積較高.以甲醇、乙腈和丙酮為洗脫溶劑,峰面積極低.原因可能是上樣時(shí),氟樂靈與固相萃取小柱結(jié)合相對(duì)牢固,需要選擇極性弱的溶劑才能將氟樂靈從固相萃取小柱上洗脫.最終選擇正己烷作為淋洗溶劑.
對(duì)氟樂靈純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行分析,橫坐標(biāo)為質(zhì)量濃度,縱坐標(biāo)為峰面積,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,其線性范圍為5~100 μg/L,其回歸方程為y=1 160.1ρ+33.143(折算到稀釋100倍后水樣中).在純水中添加氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液系列,其質(zhì)量濃度范圍0.05~1.0 μg/L,按照預(yù)處理方法(1.3)進(jìn)行預(yù)處理后繪制工作曲線,液液萃取預(yù)處理的線性回歸方程為y= 936.2ρ+62.433,相關(guān)系數(shù)為0.999 4,固相萃取預(yù)處理的線性回歸方程為y=1 278.1ρ+36.497,相關(guān)系數(shù)為0.999 5.參照文獻(xiàn)[11],本方法matrix effect(ME)值為10.2%~19.3%,即當(dāng)ME值為-20%~20%時(shí),表現(xiàn)為可忽略的弱基質(zhì)效應(yīng).
當(dāng)信噪比為3∶1時(shí),方法的檢出限均為0.02 μg/L.
使用100 mL超純水進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn),標(biāo)準(zhǔn)加入量分別為0.100、0.500、0.800 μg/L,采用液液萃取和固相萃取各測(cè)定3次,結(jié)果如表1所列.由表1可見,回收率為84.0%~98.0%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.0%~5.8%.
表1 氟樂靈加標(biāo)試驗(yàn)平均回收率和精密度
干擾試驗(yàn)采用蘇州相城區(qū)市政自來水作為樣品基體,水中含有常規(guī)消毒副產(chǎn)物三鹵甲烷類,試驗(yàn)中還添加1.0 μg/L氯苯類和有機(jī)氯類化合物作為干擾物,按試驗(yàn)方法對(duì)該干擾樣品進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如圖4所示.
圖4 干擾試驗(yàn)色譜圖
由圖4可以看出,水中常規(guī)消毒副產(chǎn)物(組A)、人工添加的氯苯類干擾物(組B)和有機(jī)氯干擾物(組C)與氟樂靈保留時(shí)間有一定差距,并不相互干擾.
選取長三角地區(qū)5份地表水樣品和蘇州市相城區(qū)5份市政自來水樣品,按試驗(yàn)方法分別采用液液萃取和固相萃取進(jìn)行預(yù)處理后上機(jī)分析,氟樂靈均未檢出.
研究了用氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器法檢測(cè)水中的氟樂靈,優(yōu)化了預(yù)處理方法和檢測(cè)條件.其中液液萃取的預(yù)處理方法操作簡單,分析用時(shí)少,回收率能達(dá)到84.0%~94.0%,固相萃取預(yù)處理方法的回收率能達(dá)到92.0%~98.0%,且能夠進(jìn)行自動(dòng)化,節(jié)省勞力.采用兩種預(yù)處理方法來測(cè)定水中氟樂靈,其方法檢出限均能滿足WHO和深圳地方標(biāo)準(zhǔn)的要求.本方法不需使用昂貴的質(zhì)譜儀器,精密度(RSD為3.0%~5.8%)及加標(biāo)回收率(84.0%~98.0%)均滿足分析方法的質(zhì)量要求,具有較強(qiáng)的實(shí)用性,適用于水中氟樂靈的檢測(cè).