王紫陽(yáng) 謝 靜 歐亞妮 邱國(guó)斌屈勇剛 黨瑞瑩 高嘉豪

（1石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832003；2動(dòng)物疾病防控兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆石河子 832003；3第四師畜牧獸醫(yī)站，新疆可克達(dá)拉 831304）

豬圓環(huán)病毒2型（porcine circovirus type 2,PCV2）屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，是圓環(huán)病毒（porcine circovirus）4個(gè)血清型中對(duì)豬群危害最大的一種血清型[1]。PCV2為無(wú)包膜的單股負(fù)鏈環(huán)狀閉合DNA病毒，是目前已知的在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)自行復(fù)制的最小DNA病毒[2]。PCV2于20世紀(jì)90年代在加拿大被首次分離報(bào)道，之后在很短的時(shí)間內(nèi)，我國(guó)也分離到該病毒（2000年）[3]。PCV2宿主譜窄，豬是該病毒的天然宿主，主要侵害豬的免疫系統(tǒng)，繼而降低豬群對(duì)其他疾病的抵抗力，病毒長(zhǎng)期存在病豬和隱性感染豬的淋巴結(jié)與呼吸道中，既可水平傳播又可垂直傳播，是造成豬圓環(huán)病毒病廣泛傳播的主要原因[4]。各階段豬群均易患豬圓環(huán)病毒?。≒orcine Circovirus Disease,PCVD）：7日齡以內(nèi)仔豬患病主要表現(xiàn)為先天性震顫（Congenital tremors,CT），仔豬出生幾小時(shí)后，開(kāi)始有規(guī)律的身體震顫，故稱“抖抖病”，通過(guò)病原檢測(cè)，可在仔豬神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)PCV2；斷奶仔豬感染PCV2后，主要表現(xiàn)為豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS），病豬生長(zhǎng)緩慢，腹式呼吸，皮毛粗亂，病死率可達(dá)30%以上，耐過(guò)豬變?yōu)榻┴i，飼料利用率變低[5]；育肥豬豬感染PCV2后，多表現(xiàn)為皮炎腎病綜合征（Porcine dermatitis nephrotic syndrome,PDNS），病初豬體表見(jiàn)小紅點(diǎn)，常誤診為蚊蟲叮咬，但隨著病程延長(zhǎng)，紅斑逐漸變大，形成丘疹，剖檢病豬可見(jiàn)腎臟腫大；母豬感染PCV2后，主要表現(xiàn)為母豬久配不孕、流產(chǎn)，死胎、木乃伊胎增多，在流產(chǎn)胎兒體內(nèi)可檢測(cè)到PCV2，說(shuō)明該病原可突破胎盤屏障，進(jìn)行垂直傳播。

目前，對(duì)于PCV2最好的預(yù)防手段就是進(jìn)行疫苗免疫，疫苗免疫可有效提高豬群抗體水平，保護(hù)豬場(chǎng)的健康養(yǎng)殖。為評(píng)價(jià)新疆地區(qū)豬群PCV2的免疫效果，本試驗(yàn)采用ELISA抗體檢測(cè)的方法對(duì)采集的475份豬血清進(jìn)行抗體檢測(cè)，以便更好指導(dǎo)該地區(qū)的健康養(yǎng)殖。

1 材料

1.1 樣品

2019年1月至2020年12月期間從新疆石河子市、伊犁哈薩克自治州、阿克蘇市、巴音郭楞蒙古自治州、奎屯市，按照地區(qū)、豬場(chǎng)及豬群類別的不同，隨機(jī)采集了475份血樣，分離血清后立即在石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院進(jìn)行檢測(cè)。其中血清樣本包含哺乳仔豬92份、保育豬80份、育肥豬52份、后備豬104份、繁殖母豬117份、種公豬30份。

1.2 材料和儀器

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司；獸用5 mL一次性采血器購(gòu)自南昌市山力畜牧器械有限公司；自動(dòng)酶標(biāo)儀購(gòu)自青島智匯谷信息技術(shù)有限公司。

2 方法

2.1 樣品及試劑準(zhǔn)備

新鮮的、冷藏（2～8℃少于8 d）的、冷凍的血清都可用于檢測(cè)；所有試劑需恢復(fù)至室溫，輕微震蕩混勻。

2.2 ELISA檢測(cè)方法

檢測(cè)方法嚴(yán)格按照各ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行操作。

2.3 結(jié)果判定

OD450nm值≥臨界值為陽(yáng)性；OD450nm值＜臨界值為陰性。

2.4 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各組數(shù)據(jù)的差異。

3 結(jié)果與分析

3.1 不同豬場(chǎng)PCV2抗體檢測(cè)結(jié)果

5個(gè)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)（用A～E表示）的475份血液樣品中，根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，在475份樣品中，有331份血清呈PCV2抗體陽(yáng)性，平均陽(yáng)性率為69.68%（331/475），S/P的平均值為1.56。

除B場(chǎng)和D場(chǎng)抗體水平達(dá)到國(guó)家規(guī)定的70%以上標(biāo)準(zhǔn)外，A、C、E場(chǎng)的抗體水平均未達(dá)到群體免疫的抗體水平和免疫標(biāo)準(zhǔn)，其中A場(chǎng)的陽(yáng)性率最低僅為48.65%。在A～E豬場(chǎng)中，A場(chǎng)與B場(chǎng)、D場(chǎng)、E場(chǎng)間均存在顯著差異（P＜0.05），B場(chǎng)與C、D、E場(chǎng)間存在顯著差異（P＜0.05），C場(chǎng)與D場(chǎng)間存在顯著差異（P＜0.05），A場(chǎng)與C場(chǎng)這2個(gè)場(chǎng)差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同豬場(chǎng)PCV2抗體檢測(cè)結(jié)果

3.2 不同類別豬群PCV2抗體檢測(cè)結(jié)果

各類別豬群中，哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備豬、繁殖母豬、種公豬陽(yáng)性率分別為51.09%（47/92）、42.50% （34/80） 、 75.00% （39/52） 、 80.77%（84/104）、86.32%（101/117）、86.67%（26/30）；其中種公豬群的抗體陽(yáng)性率最高，為86.67%，保育豬的平均阻斷率最低，為42.50%；哺乳仔豬群、保育豬群平均阻斷率與育肥豬群、后備豬群、繁殖母豬群、種公豬群存在顯著差異（P＜0.05）；哺乳豬群的平均陽(yáng)性率與保育豬群差異不顯著（P＞0.05）；育肥豬群的平均陽(yáng)性率與后備豬群、繁殖母豬群、種公豬群差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 不同類別豬群PCV2抗體檢測(cè)結(jié)果

4 討論

4.1 各豬場(chǎng)PCV2免疫效果評(píng)價(jià)

通過(guò)對(duì)新疆地區(qū)5個(gè)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)475份血清樣品進(jìn)行豬圓環(huán)病毒抗體ELISA檢測(cè)得知，有331份血清樣品檢測(cè)呈陽(yáng)性，平均抗體陽(yáng)性率僅為69.68%，未達(dá)到國(guó)家規(guī)定的70%抗體水平標(biāo)準(zhǔn)。其中B場(chǎng)抗體合格率達(dá)90%以上，達(dá)到了規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)控制PCV2疫情的水準(zhǔn)[6]。與2019年張家瑞等[7]檢測(cè)到新疆部分地區(qū)豬場(chǎng)PCV2平均抗體陽(yáng)性率70.71%相比，抗體陽(yáng)性率出現(xiàn)下降，且有3個(gè)場(chǎng)都未能達(dá)到國(guó)家規(guī)定的免疫標(biāo)準(zhǔn)。這一檢測(cè)結(jié)果應(yīng)該引起這幾個(gè)場(chǎng)管理人員的重視，可能是由于豬場(chǎng)技術(shù)人員在PCV2免疫計(jì)劃的制定上存在一定的問(wèn)題，存在免疫空白期以及免疫的密度不能達(dá)到100%，應(yīng)根據(jù)抗體檢測(cè)結(jié)果對(duì)豬群已有的免疫程序進(jìn)行優(yōu)化，及時(shí)找出抗體陽(yáng)性率不高的內(nèi)在原因，及時(shí)止損。

4.2 不同類別豬群PCV2免疫抗體的差異

通過(guò)對(duì)不同類別豬群PCV2抗體檢測(cè)結(jié)果分析得知，各類別豬群的抗體水平存在一定差異。各豬群整體的抗體陽(yáng)性率僅為69.68%。種公豬的抗體陽(yáng)性率最高，達(dá)86.67%；保育豬群的抗體陽(yáng)性率最低，低至42.50%，保育豬群作為場(chǎng)區(qū)的“經(jīng)濟(jì)命脈”，做好疫苗免疫以及抗體水平的監(jiān)測(cè)至關(guān)重要，保育豬群的優(yōu)劣，也直接關(guān)系到該場(chǎng)的效益，只有確保保育豬群的健康，才能為下一階段的育肥提供可靠的保障。該豬群抗體陽(yáng)性率不高的原因可能是由于從哺乳仔豬到保育階段存在較長(zhǎng)的免疫空白期，在此期間豬只體內(nèi)的抗體消耗殆盡，而又未及時(shí)得到補(bǔ)充，因此應(yīng)對(duì)現(xiàn)推行的免疫時(shí)間進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，確保豬群能夠及時(shí)得到免疫，降低豬群在該階段的感染風(fēng)險(xiǎn)，為豬群的健康打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)[8]。

5 小結(jié)

綜上所述，從近年來(lái)本實(shí)驗(yàn)室對(duì)新疆部分地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)豬圓環(huán)病毒2型感染狀況的調(diào)查來(lái)看，新疆地區(qū)的大多數(shù)豬場(chǎng)都存在不同程度的PCV2感染，有些豬場(chǎng)的感染率甚至達(dá)到80%以上。雖然由豬圓環(huán)病毒2型本身引發(fā)的疾病很少發(fā)生，但該病毒感染后可造成感染豬的免疫細(xì)胞和免疫器官受損，使得豬的免疫力低下，容易繼發(fā)其他病原的感染。因此，在規(guī)?；i場(chǎng)一般都要對(duì)豬群注射豬圓環(huán)病毒疫苗，防患于未然。從本次檢測(cè)的結(jié)果來(lái)看，免疫的效果不是特別理想，各場(chǎng)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況，對(duì)豬群的抗體水平進(jìn)行檢測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，并對(duì)現(xiàn)有的免疫程序進(jìn)行優(yōu)化，探索出適合本場(chǎng)的圓環(huán)病毒2型的防控方案，降低損失，確保豬場(chǎng)的長(zhǎng)久穩(wěn)定發(fā)展。