王運(yùn)盛，姜瑞婕，王昕，國欣欣，李祥翔，趙素芬，盧巖，張成林,*

（1.北京動(dòng)物園北京 100044；2.圈養(yǎng)野生動(dòng)物技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室北京 100044）

在野生動(dòng)物飼養(yǎng)管理工作中，疾病防治工作是其重要的組成部分，而眾多的致病因素中，腫瘤較為少見，但同樣不能忽視[1]。近年來，隨著國內(nèi)圈養(yǎng)野生動(dòng)物數(shù)量的增加以及野生動(dòng)物診療工作的深入，腫瘤發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的跡象。而野生動(dòng)物腫瘤疾病發(fā)生后如何快速確診，成為了現(xiàn)階段需要關(guān)注的問題。北京動(dòng)物園獸醫(yī)院于2019 年收到一例獅子皮下腫物，通過組織病理學(xué)方法進(jìn)行病理學(xué)診斷，以期為今后野生動(dòng)物腫瘤病理學(xué)診斷提供對應(yīng)思路和診療方案。

1 材料與方法

1.1 病料（病例概述）

獅子，雄性，自2019 年5 月份以來出現(xiàn)食欲不振，步態(tài)不穩(wěn)、眼觀左側(cè)最后肋弓處有一腫物，腫物凸起直徑約8cm，為判斷腫物性質(zhì)及制定后續(xù)治療方案，決定對腫物進(jìn)行手術(shù)切除，并進(jìn)行病理學(xué)診斷。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 血樣化驗(yàn)室診斷獅子術(shù)前血樣采集，采血前1d 進(jìn)行隔離觀察，禁食16h，采血后進(jìn)行外周血生理常規(guī)檢測。

1.2.2 病理樣本采集腹側(cè)皮下腫物取樣后迅速投入10%的福爾馬林溶液，進(jìn)行病理組織切片前處理。

1.2.3 H.E.染色石蠟切片分別經(jīng)二甲苯I、II 脫蠟5min，之后浸入無水乙醇/二甲苯（1：1）混合液中5min，依次經(jīng)無水乙醇I、無水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度復(fù)水，下行至雙蒸水中，蘇木精染色10min，1%鹽酸酒精分色數(shù)秒，水洗返藍(lán)15min，再依次通過50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脫水后，伊紅染色1min，95%乙醇洗滌3 次，再經(jīng)無水乙醇I、II 各5min，二甲苯I、II 各透明5min，最后用中性樹膠封片。切片放置于37℃溫箱內(nèi)過夜烘干后鏡檢。光學(xué)顯微鏡下觀察組織病理學(xué)變化情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 獅子血液生理指標(biāo)檢測結(jié)果

經(jīng)化驗(yàn)室診斷發(fā)現(xiàn)獅子中性分葉核粒細(xì)胞（82）、單核細(xì)胞（7）指標(biāo)顯著高于參考范圍，其余指標(biāo)基本在參考范圍內(nèi)。結(jié)合動(dòng)物臨床癥狀，獅子疑似出現(xiàn)感染或腫瘤（詳見表1）。

2.2 獅子腫物病理變化

腫物取材后發(fā)現(xiàn)：手觸質(zhì)地較軟（16× 13cm），內(nèi)部纖維化不多，切面濕潤，油膩感明顯，類似脂肪，腫物深部有囊腫表現(xiàn)（圖1A，圖1B）。

圖1 獅子腹側(cè)皮下腫物臨床觀察

腫物邊緣區(qū)：低倍鏡下觀察可見結(jié)締組織增生不多，增生的結(jié)締組織將腫物區(qū)分為大葉區(qū)域，大葉區(qū)域內(nèi)細(xì)胞大面積藍(lán)染，腫物與周圍軟組織無明顯界限，無特殊結(jié)構(gòu)，呈彌散性浸潤性生長（圖2A）。高倍鏡下觀察，細(xì)胞核呈橢圓形、三角形，形態(tài)各異，嗜堿性較強(qiáng)，大小不一，異型性。胞漿嗜酸性，較豐富，細(xì)胞之間有較明顯的間隙。細(xì)胞間有少量嗜酸性基質(zhì)成分。有絲分裂象可見。腫物內(nèi)部及周圍有淋巴細(xì)胞浸潤（圖2B）。

腫物實(shí)質(zhì)區(qū)：低倍鏡下觀察，腫物深層區(qū)域內(nèi)結(jié)締組織、血管增生明顯，腫物細(xì)胞呈束狀生長排列（圖2C）。高倍鏡下觀察，梭形細(xì)胞形態(tài)飽滿，生長密集，胞漿細(xì)長，膨大，卵圓形，有囊泡，部分核仁扭曲。部分區(qū)域可見核仁濃縮，染色質(zhì)深染。可能觀察到典型的紅細(xì)胞大小不均和細(xì)胞核大小不等（圖2D）。

此腫物除上述兩種表現(xiàn)區(qū)域以外，腫物內(nèi)大面積壞死，血管大量增生（圖2E），炎性細(xì)胞大量浸潤（圖2F）。

圖2 獅子腹側(cè)腫物病理學(xué)觀察

3 診斷

經(jīng)臨床特征觀察、化驗(yàn)室分析以及組織病理學(xué)診斷，獅子腹側(cè)皮下腫物為：組織細(xì)胞肉瘤（tissue s 又arcoma），同時(shí)發(fā)生感染，預(yù)后不良。

4 討論

組織細(xì)胞肉瘤起源于樹突細(xì)胞，主要分為局部型和分散型。在犬科動(dòng)物，組織細(xì)胞肉瘤兩種類型均可見到，而在貓科動(dòng)物此類病例較為少見。局部型組織細(xì)胞肉瘤多為局部生長，腫瘤發(fā)展后期趨向于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，并隨淋巴系統(tǒng)進(jìn)行全身轉(zhuǎn)移，往往預(yù)后不良。

組織細(xì)胞肉瘤診斷特點(diǎn)在于其具有多形性，其兩種主要的形式為：圓形細(xì)胞類型與紡錘形細(xì)胞類型。圓形細(xì)胞類型：腫瘤主要由大的獨(dú)立的細(xì)胞組成，胞漿雙嗜性，偶見胞漿形成空泡，呈現(xiàn)多形態(tài)和扭曲的細(xì)胞核，每個(gè)細(xì)胞核有一到兩個(gè)核仁，如本文中圖2B。紡錘形細(xì)胞類型：特點(diǎn)是梭形細(xì)胞的密集生長，胞漿細(xì)長，部分核仁扭曲，如本文中圖2D。

組織細(xì)胞肉瘤診斷難點(diǎn)在于：①局部型與分散型組織細(xì)胞肉瘤的組織病理學(xué)特征完全一致；②圓形組織細(xì)胞肉瘤可能與其它圓形細(xì)胞肉瘤相似，如多形性脂肪肉瘤；③紡錘形組織細(xì)胞肉瘤可能與其它梭形細(xì)胞肉瘤相似，如分化不良的纖維肉瘤。因此，在對組織細(xì)胞肉瘤進(jìn)行診斷時(shí)，需要仔細(xì)辨別，必要時(shí)加入免疫組化技術(shù)來進(jìn)行判斷[2]。

本病例除組織細(xì)胞肉瘤外，腫瘤內(nèi)部大面積壞死（壞死體積占腫瘤體積約50%），同時(shí)炎癥反應(yīng)較為強(qiáng)烈，此癥狀應(yīng)考慮是由于腫瘤的極速生長，導(dǎo)致腫瘤內(nèi)營養(yǎng)供應(yīng)不足引起的壞死，而炎癥反應(yīng)為壞死后出現(xiàn)。

組織細(xì)胞肉瘤雖屬于低惡性腫瘤，但其具有轉(zhuǎn)移性，故此獅子術(shù)后需做好定期檢查的準(zhǔn)備。

作為常發(fā)病，腫瘤在人醫(yī)領(lǐng)域研究已較為廣泛、深入。而由于缺乏相應(yīng)的病理診斷平臺，關(guān)于野生動(dòng)物腫瘤疾病的研究與報(bào)道還極為少見，同時(shí)野生動(dòng)物病理從業(yè)人員的缺少，也限制了野生動(dòng)物病理診斷的發(fā)展。本次獅子組織細(xì)胞肉瘤病例的完成，將病理診斷與臨床診斷、化驗(yàn)室診斷進(jìn)行了整合，為今后相關(guān)疾病的提前預(yù)判提供了參考依據(jù)，也為今后野生動(dòng)物腫瘤病理學(xué)診斷提供對應(yīng)思路。

5 結(jié)論

本研究采用病理學(xué)技術(shù)，對獅子腹側(cè)皮下腫物進(jìn)行病理學(xué)診斷，分析得出此腫物為組織細(xì)胞瘤，此病例的完成，為今后野生動(dòng)物腫瘤的診斷以及治療工作提供了較為可靠的經(jīng)驗(yàn)和方案。