上海中醫(yī)藥大學(上海，201203) 汪穎舒 尹一鳴 朱廣灝 王 楠 修彥鳳

《中華人民共和國藥典》(簡稱《中國藥典》)2020年版中收載了何首烏與制何首烏兩種規(guī)格[1]，制何首烏可以緩解生品滑腸致瀉的副作用[2]，也可以降低對肝臟的損傷[3- 5]。應(yīng)用何首烏時，生品和炮制品不區(qū)分，或炮制不當，且長期大劑量服用是造成肝損傷的主要原因[6- 7]。為了保證臨床所用何首烏的安全、有效，應(yīng)重視和規(guī)范何首烏的炮制方法。目前出版的書籍中對何首烏古今炮制方法的歸納大多趨于籠統(tǒng)，沒有具體操作方法的描述。為深入開展何首烏的炮制研究，本文查閱古代醫(yī)家記載的何首烏炮制方法及現(xiàn)代相關(guān)法規(guī)，獲得最原始的資料，對何首烏炮制方法的歷史沿革進行了追蹤和詳細歸納，為傳承何首烏炮制方法的精華和進一步創(chuàng)新提供參考依據(jù)。

清代以前的炮制方法

1.唐代以前

東漢時期的《華氏中藏經(jīng)》為最早提到何首烏炮制方法的書籍，在方劑靈烏丹中記載“如川烏法”，即“河水浸，七日換水，浸去皮尖，切片，干之”[8]。“去皮”為目前已知最早的何首烏加工方法，水浸川烏可降低毒性成分的含量，但其水浸的目的未見記載，且現(xiàn)在何首烏一般不去皮，何首烏皮與內(nèi)在成分的差異未見報道。

2.唐代

《仙授理傷續(xù)斷秘方》[9]中多個方劑說明了何首烏的炮制方法，如在首烏丸中提出“十斤何首烏與半升黑豆同煮熟”、烏丸子中“煮醋”、紅丸子中“用水煮”等，在榮衛(wèi)還魂湯中還提出應(yīng)“不犯鐵”的注意事項。輔料黑豆和醋應(yīng)用于何首烏的炮制過程中，主要炮制方法為煮法。古代醫(yī)藥家已經(jīng)發(fā)現(xiàn)何首烏易與鐵發(fā)生反應(yīng)影響療效，該觀點至今仍為炮制加工何首烏應(yīng)遵循的注意事項。

3.宋代

《太平惠民和劑局方》記載了多種方法：如在烏犀丸中“米泔浸一宿，煮過，切，焙”，何首烏丸中“用銅刀或竹刀切如棋子大，木杵臼搗”“以黑豆一斗凈淘洗曝干，用甑一所，先以豆薄鋪在甑底，然后薄鋪何首烏，又鋪豆，又薄鋪牛膝。如此重重鋪，令藥，豆俱盡，安于釜上蒸之，令豆熟為度，去黑豆，取藥曝干，又換豆蒸之，如此三遍”[10]；《蘇沈良方》中何首烏散采用“水浸一日，切厚半寸，黑豆水拌勻，令濕，何首烏重重相間，蒸豆爛，去豆，陰干”的方法，祛風丸采用“蒸”法[11]；《類編朱氏集驗醫(yī)方》主要采用銼后再焙的方法：驅(qū)風丹“銼，焙”，圣驗黑神丸“銼，用生姜汁同泡了甘草二錢，浸二宿，焙，再浸，焙”[12]。同黑豆共同加熱蒸、浸后加熱焙是應(yīng)用較多的方法。

唐代及唐代以前，何首烏的炮制方法只在方劑類書籍中提及。從宋代開始，本草著作中也出現(xiàn)了其炮制方法的描述。《開寶本草》記載何首烏“臨用之，以苦竹刀切，米泔浸經(jīng)宿，曝干，木杵臼搗之，忌鐵”[13]；《證類本草》記載蒸法和酒浸法：“新采者，去皮土后，用銅、竹刀薄切片，上甑如炊飯，蒸下用瓷石鍋”“何首烏旁別燒一鍋，常滿添水，候藥甑氣上，遂旋以熱水從上淋下，勿以滿溢，直候首烏絕無氣味，然后取一勺頭汁，白湯即可”“首烏大而有花紋者，同牛膝銼各一斤，以好酒一升，浸七宿，曝干”[14]；《太平圣惠方》提出“九蒸九曝搗羅為末”[15]；《本草圖經(jīng)》提出“乘濕以布帛拭去土，后用苦竹刀切，米泔浸一宿，曝干。忌鐵，以木臼杵搗之。九蒸九暴，乃可服”[16]。從宋代開始，炮制何首烏的輔料日漸豐富，如米泔、酒、牛膝、姜、甘草等，輔料的應(yīng)用根據(jù)方劑的不同而有差異；在炮制方法上，加熱焙法及蒸法的應(yīng)用比較多，首次明確提出了經(jīng)典的“九蒸九曬”法。

4.金元明時期

金元時期《儒門事親》不老丹中首次提出“黑豆棗蒸”：“米泔水浸軟，竹刀子刮去皮，切作片子，用瓦甑蒸，先鋪黑豆三升，干棗二升，上放何首烏，上更鋪棗二升，黑豆三升，用炊單復著上，用盆合定，候豆棗香熟取出，不用棗豆”[17]；明代《壽世保元》的多個方劑記載了何首烏的炮制方法，如長春不老仙丹“米泔浸洗，槌碎如棗核大，入黑豆同蒸三日，極黑”、青云獨步丹“赤白何首烏共一斤，用黑豆三升半煮汁，浸何首烏一晝夜，去汁水，將豆拌首烏，木甑內(nèi)蒸浸五次”，固齒明目烏須黑發(fā)方“黑豆拌蒸一次，牛膝拌蒸一次”、神秘萬靈丹“去皮，用黑豆拌，九蒸九曬，忌鐵器”，造酒烏須方“煮水制過地黃，勿犯鐵器”等[18]；《魯府禁方》的烏須固本丸，“米泔水浸三宿，竹刀刮去粗皮，切片，黑豆五升同首烏滾水浸一時，蒸熟去豆”[19]；《仁術(shù)便覽》的“炮制藥法”部分記載何首烏應(yīng)“酒浸軟，切大片，黑豆一層，何首烏一層，蒸曬各七遍，聽用。忌鐵器”[20]；《先醒齋醫(yī)學廣筆記》治中風丸“九蒸九曬，人乳拌”及烏須明目丸“蒸曬”[21]；《本草綱目》中對何首烏的九蒸九曬法進行了詳細的描述，“竹刀刮去粗皮，米泔浸一夜，切片，用黑豆三斗，每次用三升三合三勺，以水泡過，砂鍋內(nèi)鋪豆一層，首烏一層，重重鋪盡，蒸之，豆熟，取出去豆，將何首烏曬干，再以豆蒸，如此九蒸九曬，乃用”[22]；《本草品匯精要》亦提出“采得以苦竹刀切之，米泔浸經(jīng)宿，暴干，木杵臼搗之，一用大棗拌蒸，一用黑豆拌蒸，俱以棗豆熟為度，又發(fā)九蒸九暴并勿犯鐵器”[23]。明代古籍提出了“煮水過地黃”的方法，并提及用人乳炮制。蒸法已經(jīng)被醫(yī)家廣泛應(yīng)用，但蒸制時用到的輔料、蒸制方法和時間仍存在較大差異，九蒸九曬法被多次提及。

5.清代

清代，《良朋匯集經(jīng)驗神方》延年益壽不老丹“鮮者，用竹刀刮去皮，干者，用米泔水泡軟去皮，用砂鍋內(nèi)下烏羊肉一斤，黑豆半斤，量酌水用，上加篦放此藥后，覆蒸一二時辰，取出曬干”，放猴姜丸中提出炮制程度的要求“黑豆蒸至黑色為度”[24]；《成方切用》記載的炮制方法均需蒸制多次，如七寶美髯丹“去皮切片，黑大豆拌九蒸九曬”、王母桃“九蒸”、贊化血余丹“小黑豆拌蒸七次，如無豆，或人乳牛乳拌蒸”[25]；《醫(yī)方叢話》治婦女久病經(jīng)閉的方劑中提出黑豆蒸后用人乳浸“半斤，切片，用黑豆拌，九蒸九曬，為末，用人乳浸不計次數(shù)，曬得一斤重”[26]。清代，以人乳炮制何首烏的記載大量增加，并產(chǎn)生了烏羊肉與黑豆一同炮制的新方法，九蒸九曬也是何首烏的主要炮制方法。

現(xiàn)代的炮制方法

課題組通過查閱《中國藥典》2020年版和全國各個省市的炮制規(guī)范，并對目前在全國各地應(yīng)用的何首烏炮制方法進行了歸納整理，發(fā)現(xiàn)很多省市的炮制規(guī)范中收載的炮制方法與《中國藥典》一致，將不同于《中國藥典》的方法加以單獨描述。

1.蒸法

清蒸 《中國藥典》收載清蒸至何首烏內(nèi)外均呈棕褐色的方法[1]，未對蒸制時間和具體如何操作作出規(guī)定。地方規(guī)范有“蒸6 h，燜12～48 h”[27]、“蒸6～8 h，燜8～12 h，重復3次”[28]和“蒸8 h，燜過夜，翌晨上下翻動 1 次，再蒸，如此反復至內(nèi)外黑色”[29]的描述，清蒸時間不一。

黑豆汁/漿蒸 《中國藥典》收載何首烏加入黑豆汁拌勻后蒸至內(nèi)外均呈棕褐色[1]的黑豆汁蒸制法，何首烏與黑豆用量比為100∶ 10，未對蒸制時間和具體如何操作做出規(guī)定，地方規(guī)范的輔料用量與《中國藥典》中的規(guī)定相同，但有蒸至“汁液吸盡”[30]、“內(nèi)外均呈棕紅色”[31]和同黑豆汁“蒸8 h，燜4 h(成品如不黑再復蒸一次)至呈黑褐色”[29]、“蒸6 h，燜12～48 h”[27]的描述。另有黑豆?jié){蒸“與豆?jié){拌蒸6～8 h，燜8～12 h”的記載 ，黑豆1斤磨漿，未說明比例[28]。作為應(yīng)用最多的炮制方法，黑豆汁蒸制法的具體操作在全國各地差異較大，有持續(xù)加熱蒸制和蒸燜結(jié)合的不同操作方法。

黑豆/黑豆汁酒蒸 地方規(guī)范中有收載黑豆黃酒蒸“清蒸4 h，加入黑豆、黃酒與蒸鍋水拌勻，再蒸4 h；如此再蒸一次，至內(nèi)外均呈黑色”，何首烏與黑豆、黃酒用量比為100∶ 15∶ 12.5[32]；黑豆汁黃酒蒸“加黑豆汁和黃酒拌勻，悶潤4～8 h后蒸18～24 h，其間倒罐一次，成品內(nèi)外均呈棕褐色至黑褐色，汁液吸盡”，何首烏與黑豆、黃酒用量比為100∶ 10∶ 25[33]；黑豆汁蒸白酒煉蜜拌“黑豆汁蒸30～40 h后，白酒、蜂蜜調(diào)勻，拌入吸透，成品內(nèi)外均呈黑色”，何首烏與黑豆、白酒、煉蜜用量比為100∶ 15∶ 15∶ 5[34]。酒的加入，有利于蒸制時蒸汽的滲透和煎煮時成分的溶出，有利于何首烏發(fā)揮化濁降脂等作用。

黃酒蒸 《中藥大辭典》有“黃酒拌潤4～6 h，蒸6 h，加入鍋內(nèi)汁水，候汁吸盡，再蒸至內(nèi)外均呈黑色”，何首烏與黃酒用量比為100∶ 12[29]。該法在實際生產(chǎn)中應(yīng)用較少。

2.燉法

黑豆汁燉 《中國藥典》收載黑豆汁燉法，何首烏與黑豆用量比為100∶ 10，何首烏加入“黑豆汁燉至汁液吸盡”[1]，未對燉制時間作出規(guī)定，地方有“燉8～12 h”的規(guī)定[35]。

黑豆汁黃酒燉 甘肅有“黑豆汁黃酒燉一晝夜”，何首烏與黑豆、黃酒用量比為100∶ 10∶ 25[32]。

3.煮法

黑豆煮 地方規(guī)范有加“黑豆煮12 h，至藥熟透，吸盡水分”，何首烏與黑豆用量比為100∶ 5[31]；另有采用相同的黑豆用量，加“黑豆煮3～4 h，燜一夜，至外表黑色內(nèi)部褐色”[36]、“與黑豆同煮至黑豆熟爛，微火將水煮干，曬至半干蒸6～8 h，燜8～12 h，去黑豆”[28]的規(guī)定。

黑豆汁煮 地方規(guī)范有“黑豆汁煮至汁液吸盡”, 何首烏與黑豆用量比為100∶ 10[37- 38]，“黑豆汁煮4～6 h至汁液吸盡，加煉蜜拌勻收鍋”,何首烏與黑豆、煉蜜用量比為100∶ 15～20∶ 5[34]。

4.炆法

江西省有何首烏“加水浸透，加黑豆放入炆藥罐內(nèi)加入溫水，木炭干糠點燃炆1～2 天，至糠盡灰冷或藥透汁干，篩去黑豆渣；再用黃酒拌勻，待吸盡后，蒸4～6 h，?；鹈荛]一夜”的黑豆黃酒炆法，實際是黑豆浸煮后再酒蒸的方法，何首烏與黑豆、黃酒用量比為100∶ 10∶ 20[39]。

分析與討論

1.何首烏歷代炮制輔料由多樣化向單一化發(fā)展

從何首烏炮制方法的歷史沿革可以發(fā)現(xiàn)，從唐代至清代，炮制方法和輔料種類多樣化，有水浸去皮、竹刀刮去皮，米泔浸、牛膝酒浸，醋煮、水煮，黑豆蒸、黑豆牛膝蒸、黑豆棗蒸、乳拌蒸法，烏羊肉黑豆蒸、焙等法，并有“不犯鐵”的操作要求。古人將黑豆、牛膝、棗、人乳、酒、醋等不同的輔料結(jié)合不同的炮制方法應(yīng)用于不同功效方劑中的何首烏，體現(xiàn)出一定程度的療效差異，助力生何首烏由解毒、消癰、截瘧、潤腸通便功能轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂醒a肝腎、益精血、烏須發(fā)、強筋骨和化濁降脂功能的制何首烏。隨著醫(yī)藥水平的發(fā)展，沿用至今的何首烏炮制方法主要是蒸、燉和煮，炆法主要在江西省內(nèi)應(yīng)用，蒸法在全國大部分地區(qū)應(yīng)用，輔料主要為黑豆，部分地區(qū)有用酒和煉蜜，米泔、醋、牛膝、棗、人乳、羊肉等輔料較少應(yīng)用，輔料的應(yīng)用逐漸單一化。究其原因在于部分輔料的獲取和制備不能適應(yīng)現(xiàn)代化產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，如人乳、羊肉和米泔水。黑豆性味甘、平，歸脾、腎經(jīng)，其養(yǎng)血、解毒等功效易與何首烏產(chǎn)生協(xié)同增效的作用；其他輔料如牛膝、棗、醋鮮有應(yīng)用的原因未見史料報道，古人可能應(yīng)用牛膝的補肝腎、強筋骨作用協(xié)同增強何首烏的療效，但是未見史料解釋炮制意圖，因而有必要開展相關(guān)古代炮制方法的研究。

2.何首烏的古今炮制方法存在的異同與問題

古代醫(yī)家在多部著作中提到何首烏凈制和切制時需要“水浸去皮”[8]、“竹刀刮去粗皮”[19]，現(xiàn)代《中國藥典》規(guī)定，“鮮藥材釆挖后削去兩端，洗凈，個大的切成塊，干燥。藥材除去雜質(zhì)，洗凈，稍浸，潤透，切厚片或塊，干燥”，即得何首烏生飲片，未見去皮的要求。何首烏去皮的目的和意義未見研究和報道。何首烏藥材表面皺縮不平，有淺溝，現(xiàn)代生產(chǎn)不去皮的原因推測為皮的占比較少、去皮操作繁瑣，但需要對何首烏皮層內(nèi)外的成分進行研究，探究何首烏是否應(yīng)該去皮，以對古代炮制加工方法作出合理的解釋。

古今文獻中記載何首烏切制和炮制時要忌鐵器，“銅刀或竹刀切”[10]、“苦竹刀切”[16]、“不犯鐵”[9]、“用瓷石鍋”[14]、“用瓦甑蒸”[16]等，《中國藥典》也規(guī)定何首烏需要“置非鐵質(zhì)的適宜容器內(nèi)”進行炮制加工。這一操作注意事項沿襲到現(xiàn)在，因為何首烏中所含的沒食子酸等酸性物質(zhì)與鐵發(fā)生化學反應(yīng)，產(chǎn)生的化合物進入動物體可產(chǎn)生毒性反應(yīng)[40]。

古代醫(yī)家提倡何首烏需要“九蒸九曬”，因為“制非九次，勿寢其毒。非黑豆，勿殺其勢”[41]，但目前《中國藥典》規(guī)定制何首烏的炮制方法為“照燉法用黑豆汁拌勻，置非鐵質(zhì)的適宜容器內(nèi)，燉至汁液吸盡；或照蒸法，清蒸或用黑豆汁拌勻后蒸，蒸至內(nèi)外均呈棕褐色”，炮制至何首烏內(nèi)外均呈棕褐色，并無加熱炮制時間和具體操作方法的規(guī)定。拌入黑豆汁蒸、燉制和清蒸法使何首烏達到內(nèi)外棕褐色的時間肯定是不同的，《中國藥典》規(guī)定的方法過于籠統(tǒng)。目前的研究報道發(fā)現(xiàn)，何首烏與黑豆/汁從一蒸一曬到九蒸九曬和燉制過程中，化學成分發(fā)生了質(zhì)的和量的顯著變化，游離蒽醌總體呈上升趨勢，結(jié)合蒽醌和二苯乙烯苷呈下降趨勢[42- 45]，水解、脫水、異構(gòu)化和美拉德反應(yīng)等反應(yīng)機制參與了所發(fā)生的化學轉(zhuǎn)化[45]。不同的炮制操作方法直接影響制何首烏的藥效，如有學者發(fā)現(xiàn)制何首烏發(fā)揮抗炎作用的最佳蒸煮時間是10 h[46]，發(fā)揮最佳延緩衰老作用需要高壓蒸 3 h[47]。

因古法“九蒸九曬”操作太過繁瑣，需要反復蒸曬，生產(chǎn)效率很低，故如今飲片企業(yè)已不采用。如今企業(yè)多采用持續(xù)加熱蒸制一定的時間，或者蒸燜結(jié)合的方式進行炮制，炮制時間也差異較大，燉法較少應(yīng)用。每次持續(xù)加熱時間有4～24 h的不同或達到相應(yīng)的顏色則停止加熱，加熱次數(shù)有1～3次的不同，蒸煮后悶制時間有1～4 d的不同，炮制時間和次數(shù)差異如此之大，肯定影響其質(zhì)量和療效。課題組對不同省市飲片企業(yè)進行了調(diào)研，飲片企業(yè)在生產(chǎn)制何首烏時遵守當?shù)嘏谥埔?guī)范進行炮制，不同批次、不同大小的何首烏的炮制時間有差異，主要取決于藥工的經(jīng)驗，較多采用每次持續(xù)加熱4～6 h，加熱1～3次，未見“九蒸九曬”法在大型飲片生產(chǎn)企業(yè)中應(yīng)用，凡是質(zhì)量檢查合格的產(chǎn)品均可進入市場。

3.何首烏不良反應(yīng)的有關(guān)報道中所用何首烏的炮制方法

據(jù)統(tǒng)計，目前研究何首烏不良反應(yīng)的文獻報道的案例中，明確說明患者服用生何首烏和制何首烏的案例分別為 172例(占全部不良反應(yīng)案例的21.4%)和 188 例(23.4%)，其余臨床不良反應(yīng)研究報道中的患者所服藥物生制不明[6]，臨床案例不能確切地得出哪種炮制方法所得樣品的毒性大，加熱多長時間的樣品毒性小，所以，學術(shù)報道中樣品的制備方法很重要，直接關(guān)系到研究報道的結(jié)果。目前動物實驗研究結(jié)果均表明，生何首烏的毒性大于制何首烏，何首烏炮制時間過短或過長均會造成不同程度的肝損傷。用黑豆汁蒸制何首烏48 h[48]、燉制32 h最安全[49]；對大鼠長時間給予九蒸九曬何首烏水煎液，隨著蒸曬次數(shù)的增加，肝損傷程度先上升后減輕[50]；優(yōu)選的何首烏“九蒸九曬”最佳炮制工藝為蒸制4 h，曬制4 h，蒸曬11次，所得炮制品的肝細胞抑制率較低[51]，另有認為七蒸七曬的炮制品對肝臟損傷的程度低[52]。有學者提出何首烏常壓清蒸法減毒速度較慢，高壓清蒸法和高壓黑豆汁蒸法減毒速度相對較快，蒸制5～6 h毒性下降22.1%[53]，亦有報道稱高壓黑豆汁蒸至36 h后才能達到減毒的效果[54]。越來越多的研究報道發(fā)現(xiàn)，一次蒸制難以保證制何首烏的安全。

4.展望

何首烏具有增強免疫、抗炎、抗衰老、抗高脂血癥和抗癌等藥理作用，一直被廣泛應(yīng)用于中醫(yī)臨床[55]。然而，何首烏引起肝毒性的問題引起了人們對于何首烏炮制方法的關(guān)注。近期，中華中醫(yī)藥學會中成藥分會等提出基于何首烏藥物質(zhì)量的風險防控建議：何首烏肝損傷與其所含的二苯乙烯類和蒽醌類分子的結(jié)構(gòu)及含量有關(guān)，可從改進炮制技術(shù)工藝、提高質(zhì)量控制水平等方面來保證何首烏質(zhì)量安全性，降低何首烏肝損傷發(fā)生的風險[56]。明代醫(yī)藥學家陳嘉謨提出“凡藥制造，貴在適中，不及則功效難求，太過則氣味反失”，中藥炮制方法直接影響到藥物的臨床療效，同一味中藥炮制方法不同，藥效取向必然有別[57]。本文對于何首烏古今炮制方法進行梳理，發(fā)現(xiàn)古今炮制方法多用蒸煮法，但炮制輔料、是否去皮、加熱和曬、燜時間與次數(shù)等能夠影響何首烏毒性的具體操作細節(jié)在現(xiàn)代炮制方法中并未得到傳承和發(fā)揚，何首烏的毒副作用可能與炮制過程中工藝的簡化有關(guān)。大量研究表明，何首烏在炮制過程中會發(fā)生復雜的變化。何首烏應(yīng)該采用怎樣的方法炮制，才能生產(chǎn)出安全、有效的優(yōu)質(zhì)飲片？亟需對古代常用炮制方法、現(xiàn)行《中國藥典》及炮制規(guī)范中的方法開展系統(tǒng)細致地研究，從不同炮制方法和炮制時間所得制何首烏藥效成分的含量變化、藥效學、藥動學和毒副作用差異等方面開展研究。希望在《中國藥典》詳細規(guī)定不同炮制方法操作程序的基礎(chǔ)上，各地的中藥飲片炮制規(guī)范將生產(chǎn)工藝參數(shù)具體化，為生產(chǎn)質(zhì)量穩(wěn)定和安全可靠的制何首烏提供依據(jù)和法規(guī)約束。