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云浮市人民醫(yī)院，廣東云浮 527300

耳聾是人類殘疾中的常見類型，隨著分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的深入研究，遺傳因素導(dǎo)致的耳聾逐步被人們重視。我國每年約有2 000萬新生兒出生，新生兒先天性耳聾的發(fā)生率在 0.93%～7.70%[1]，新生兒耳聾基因攜帶率可達5.00%[2]。我國常見耳聾基因主要有GJB2、SLC26A4、GJB3和線粒體DNA(mtDNA)基因，且不同地區(qū)、民族突變熱點和頻率各有不同[3]，故積極開展耳聾基因篩查有重要的臨床意義。本研究通過分析云浮地區(qū)1 983例新生兒遺傳性耳聾基因篩查結(jié)果，初步了解云浮地區(qū)新生兒遺傳性耳聾基因突變特點，為云浮地區(qū)的遺傳性耳聾防治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2021年3月在云浮市人民醫(yī)院出生并接受遺傳性耳聾基因篩查的新生兒1 983例作為研究對象，其中男嬰1 100例，女嬰883例。所有監(jiān)護人同意新生兒接受遺傳性耳聾基因篩查和聽力篩查并由監(jiān)護人簽署知情同意書。

1.2方法 采集所有新生兒足跟血斑點標(biāo)本，采用PCR+導(dǎo)流雜交法對4個常見遺傳性耳聾易感基因(GJB2、SLC26A4、GJB3和 mtDNA)13個突變位點進行檢測。13個突變位點分別是：GJB2基因的 235delc、299delAT、176del16、35delG、155delTCTG，SLC26A4基因的IVS7-2A>G、1229C>T、2168A>G，GJB3基因的538C >T，以及mtDNA基因的12SrRNA1555A>G、12SrRNA1494C>T、tRNA7445A>G、tRNA12201T>C。耳聾易感基因檢測試劑盒購自廣州凱普醫(yī)藥科技有限公司。使用耳聲發(fā)射器進行聽力篩查，儀器購自德國麥科(Maico)聽力儀器設(shè)備公司。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 利用Excel 2007建立數(shù)據(jù)庫，應(yīng)用SPSS23.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗，當(dāng)期望頻數(shù)小于5時采用Fisher精確檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1不同性別常見遺傳性耳聾基因攜帶率分析 1 983例新生兒4個常見遺傳性耳聾基因突變攜帶率為2.72%(54/1 983)，其中男嬰遺傳性耳聾基因突變攜帶率為2.45%(27/1 100)，女嬰遺傳性耳聾基因突變攜帶率為3.06%(27/883)，男女遺傳性耳聾基因突變攜帶率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.673，P>0.05)。

2.24個常見遺傳性耳聾基因突變攜帶率分析 GJB2基因攜帶率為1.51%(30/1 983)，占比為55.56%(30/54)。SLC26A4基因攜帶率為0.96%(19/1 983)，占比為35.19%(19/54)。GJB3基因攜帶率為0.10%(2/1 983)，mtDNA基因攜帶率為0.15%(3/1 983)。以GJB2基因攜帶為主，SLC26A4基因次之。4個常見遺傳性耳聾基因突變攜帶率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=40.320，P<0.001)。

2.34個常見遺傳性耳聾基因13個突變位點情況分析 4個常見遺傳性耳聾基因13個基因位點突變頻率以GJB2 235delC(33.33%)最高，SLC26A4 IVS7-2A>G(25.93%)次之，mtDNA 12SrRNA1494C>T和mtDNA tRNA12201T>C未檢出。GJB2基因以雜合突變?yōu)橹?，占比?6.67%(29/30)，僅有1例是GJB2基因純合突變，為GJB2 155delTCTG，未檢出GJB2基因復(fù)合雜合突變。SLC26A4和GJB3 538C>T均為雜合突變，而mtDNA異質(zhì)突變和均質(zhì)突變均有檢出。見表1。

表1 1 983例新生兒4個遺傳性耳聾基因13個突變位點情況分析

2.454例耳聾基因突變新生兒聽力篩查情況分析 54例耳聾基因突變新生兒循醫(yī)囑在本院完成聽力篩查的有34例。其中有32例為雙耳均通過聽力篩查，有1例新生兒聽力篩查結(jié)果為雙耳均不通過，是GJB2 235delC基因雜合突變，有1例新生兒聽力篩查結(jié)果為左耳不通過、右耳通過，是GJB2 299delAT基因雜合突變。

3 討 論

耳聾是人類主要的殘疾病之一，主要由遺傳因素引起，占60%～70%[4]。在已開展耳聾基因篩查的機構(gòu)中，4個基因9個位點及4個基因20個位點的篩查方案應(yīng)用較廣，其中以GJB2基因及SLC26A4基因變異最為常見[2]。本研究對4個常見遺傳性耳聾基因13個基因位點的檢測結(jié)果進行分析，并對耳聾基因突變的新生兒進行聽力篩查追蹤分析。

本研究分析本地區(qū)1 983例新生兒遺傳性耳聾基因篩查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，遺傳性耳聾基因突變攜帶率為2.72%(54/1 983)，低于其他地區(qū)報告的攜帶率(3.56%～3.85%)[5-8]?？紤]本研究檢測的是4個常見遺傳性耳聾基因13個基因位點，通過增加檢測相關(guān)基因及突變位點個數(shù)，新生兒的常見遺傳性耳聾基因攜帶檢出率是否會升高，有待進一步的研究。分析本地區(qū)不同性別新生兒常見遺傳性耳聾基因攜帶率發(fā)現(xiàn)，男嬰和女嬰之間的遺傳性耳聾基因突變攜帶率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.673，P>0.05)，與韓佳佳等[9]報道的結(jié)果一致。4個常見遺傳性耳聾基因之間突變攜帶率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=40.320，P<0.001)，提示云浮地區(qū)不同基因突變位點的攜帶率有所不同，以GJB2基因攜帶為主，SLC26A4基因次之。

GJB2基因突變與遲發(fā)性耳聾存在一定的相關(guān)性，存在種族、地區(qū)差異性[10]，而GJB2 235 delC突變在東亞較常見[11]。本研究中，GJB2基因攜帶率為1.51%，以GJB2 235delC(33.33%)突變頻率最高，提示云浮地區(qū)新生兒235delC是GJB2基因上的熱點突變，與梁少明等[12]報道的粵西部分地區(qū)耳聾患者一致，而梁少明等[12]同時發(fā)現(xiàn)GJB2 109G>A也是粵西地區(qū)GJB2基因的突變熱點。云浮地區(qū)是否需要將GJB2 109G>A突變位點作為耳聾基因篩查的常規(guī)項目，有待進一步的臨床研究。本研究檢出1例為GJB2 155delTCTG純合突變，該病例聽力初篩通過，雖然為非先天性聾兒，但也應(yīng)及早進行干預(yù)，避免由聾致啞。SLC26A4基因與耳聾-甲狀腺腫綜合征、大前庭導(dǎo)水管綜合征的關(guān)系非常密切。本研究SLC26A4基因攜帶率為0.96%，以IVS7-2A>G(25.93%)位點突變?yōu)橹鳎陀谟嗉t等[13]報道的新生兒SCL26A4檢出率(1.17%)，但與其IVS7-2A>G位點突變構(gòu)成比(25.47%)一致。本研究檢出3例為SLC26A4 1229C>T雜合突變，均能通過聽力初篩。GJB3基因位屬常染色體顯性或隱性遺傳，該基因突變往往會導(dǎo)致高頻聽力損失或后天性耳聾[14]。本研究檢出2例新生兒GJB3 538C>T雜合突變(0.10%)，這2例新生兒均能通過聽力初篩。mtDNA 12SrRNA1555A>G和12SrRNA1494C>T與藥物性耳聾關(guān)系密切，部分患者對氨基糖甙類抗菌藥物高度敏感，可致攜帶者不可逆轉(zhuǎn)的聽力損失[15]。本研究中云浮地區(qū)雖然暫未檢出12SrRNA1494C>T，但有檢出2例患者是12SrRNA1555A>G異質(zhì)突變(0.10%)，提示臨床對這2例患者應(yīng)禁止使用氨基糖苷類抗菌藥物進行治療。本研究檢出1例為tRNA7445A>G均質(zhì)突變，能通過聽力初篩，未檢出tRNA12201T>C。通過分析云浮地區(qū)與其他地區(qū)[5-9]的4個耳聾基因(GJB2、SLC26A4、GJB3和 mtDNA)的攜帶情況，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)相同耳聾基因的攜帶率各有特點，所以各地區(qū)應(yīng)積極開展遺傳性耳聾基因篩查工作，了解區(qū)域內(nèi)的耳聾基因突變特點，采取合適的防治措施。

綜上所述，云浮地區(qū)新生兒遺傳性耳聾基因以GJB2基因攜帶為主、SLC26A4基因次之，而GJB3基因與mtDNA基因攜帶相對少見。基因位點突變頻率以GJB2 235delC(33.33%)最高，SLC26A4 IVS7-2A>G(25.93%)次之。同一地區(qū)不同耳聾基因突變位點的攜帶率不同，不同地區(qū)相同耳聾基因的攜帶各有特點，需要根據(jù)當(dāng)?shù)剡z傳性耳聾基因突變特點采取合適的防治措施。