張麗娟，郭文成，王艷艷，于爽，黃莉莉，李廷利

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

焦慮情緒是身心處于壓力、危險(xiǎn)、不熟悉情況下產(chǎn)生的對(duì)預(yù)期事件不安和擔(dān)憂的體驗(yàn)?，F(xiàn)代研究認(rèn)為，焦慮主要與前額葉皮層、海馬、杏仁核(包括外側(cè)杏仁核與中央杏仁核)等結(jié)構(gòu)有關(guān)[1]。焦慮癥的發(fā)病機(jī)制尚不明確，在生化病理機(jī)制方面有多個(gè)假說(shuō)，神經(jīng)遞質(zhì)假說(shuō)是目前認(rèn)可度比較廣泛的關(guān)于焦慮-抑郁發(fā)病機(jī)制的學(xué)說(shuō)，該學(xué)說(shuō)認(rèn)為神經(jīng)細(xì)胞末梢釋放的多種物質(zhì)在體內(nèi)失衡從而引起了焦慮與抑郁等相關(guān)情緒。相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)主要有NE、DA、5-HT、Glu、GABA等[2-7]。酸棗仁始載于《本經(jīng)》，具有養(yǎng)血寧神安五臟的功效，是用來(lái)治療失眠的要藥。主要用于治療虛煩不眠，驚悸多夢(mèng)，體虛多汗，津傷口渴等癥[8]?，F(xiàn)代研究表明，生酸棗仁和炒酸棗仁都有鎮(zhèn)靜安神作用，臨床常以生、炒各半組成藥對(duì)應(yīng)用，其主治病癥主要與焦慮、抑郁等情志紊亂導(dǎo)致失眠等疾病有關(guān)，且療效顯著。但其治療焦慮的作用機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)主要以海馬、LA為載體，以單胺類(lèi)及氨基酸類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的含量變化為切入點(diǎn)，旨在為進(jìn)一步研究生與炒酸棗仁配伍對(duì)狀態(tài)性焦慮的作用及其機(jī)制。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SD大鼠，雄性，體質(zhì)量(240±10)g，SPF級(jí)，購(gòu)買(mǎi)于遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司，許可證號(hào)：SCKK(遼)2020-0001。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)的通氣籠內(nèi)；實(shí)驗(yàn)室實(shí)行12 h明暗交替；相對(duì)濕度為(50±10)%，溫度(24±2)℃，并自由攝取食物和水，聲音在40 dB以下。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑

酸棗仁：產(chǎn)地山西，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)王振月教授鑒定。陽(yáng)性對(duì)照藥：地西泮片，2.5 mg/片，山東信誼制藥有限公司，批號(hào)：191006。林格氏液(Labcoms，批號(hào)：LA20200915)、OPA(Sigma-Alorich公司，批號(hào)：1002189920)、β-巰基乙醇(美國(guó)ACS恩科化學(xué)，批號(hào)：C10876872)、四硼酸鈉(Sigma-Alorich公司，批號(hào)：74884-5Q)、硼酸(Sigma-Alorich公司，批號(hào)：C10806893)、Glu(批號(hào)：KFZA-8UP，純度：94.3%)、GABA(批號(hào)：F29H-EQSB，純度：99.8%)、5-羥色胺鹽酸鹽(批號(hào)：111656-200401，純度：99.8%)、鹽酸多巴胺(批號(hào)：F29H-EQSB，純度：99.8%)和酒石酸去甲腎上腺素(批號(hào)：KFZA-8UP，純度：94.3%)均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院。

1.3 儀器

XR-XC404-2條件性恐懼實(shí)驗(yàn)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，上海欣軟信息科技；SuperFcs條件性恐懼實(shí)驗(yàn)分析系統(tǒng)，上海欣軟信息科技；DW-2000大鼠腦立體定位儀，成都泰盟；CMA 402微量注射泵，瑞典CMA；CMA 12 Elite微透析探針，瑞典CMA； Clarity高效液相工作站，捷克DataApex；S1130高效液相泵系統(tǒng)，德國(guó)Sykam；AntecSDC電化學(xué)檢測(cè)器，荷蘭安泰克；高效液相工作站，美國(guó)Agilent；1260高效液相泵系統(tǒng)，美國(guó)Agilent。

2 方法

2.1 炒酸棗仁及OPA衍生劑的制備

炒酸棗仁的制備：取生酸棗仁，置炒鍋內(nèi)大火炒制3 min，炒后放涼，用時(shí)將炒制過(guò)的酸棗仁打成粗粉。炒酸棗仁及生炒配伍凍干粉的制備：取炒酸棗仁粗粉及生炒配伍(1∶1)粗粉230 g，各加入1.6 L蒸餾水，浸泡1 h，大火加熱至沸騰后，改用小火煎煮30 min，煮至1.2 L。依次用8層、16層紗布過(guò)濾藥液，濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至200 mL，經(jīng)凍干后得到其凍干粉。

OPA衍生劑的配置：精密稱(chēng)量OPA 25 mg，用0.6 mL甲醇溶解，加入0.05 mL β-巰基乙醇和5 mL 0.2 mol·L-1四硼酸鈉-NaOH緩沖液(pH為9.2)，振搖、超聲使之充分溶解，經(jīng)0.2 μm濾膜過(guò)濾后避光4 ℃保存。

2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥

SD大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、生與炒酸棗仁配伍組、炒酸棗仁對(duì)照組、地西泮對(duì)照組，每組6只。各給藥組分別按20 g·kg-1給予炒酸棗仁、生與炒酸棗仁配伍的混懸液，地西泮對(duì)照組按3.6 mg·kg-1給予地西泮混懸液，空白對(duì)照組和模型組給予同體積溶劑。于大鼠條件性恐懼模型復(fù)制實(shí)驗(yàn)后，經(jīng)灌胃途徑連續(xù)給藥10 d，每日早8∶00經(jīng)灌胃給藥1次。

2.3 大鼠狀態(tài)性焦慮模型的復(fù)制及行為學(xué)評(píng)價(jià)

提前將各組實(shí)驗(yàn)大鼠移入實(shí)驗(yàn)環(huán)境中適應(yīng)30 min。適應(yīng)結(jié)束后，將各組大鼠置于條件性恐懼實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)適應(yīng)180 s，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第1 min的前55 s內(nèi)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)內(nèi)部不加入任何信號(hào)干預(yù)；從第56秒開(kāi)始，由揚(yáng)聲器持續(xù)發(fā)出聲音信號(hào)(75 dB,1 000 Hz,5 s)，在聲音信號(hào)持續(xù)的最后1 s內(nèi)加以電刺激(0.5 mA,1 s)，上述操作每分鐘循環(huán)1次，共計(jì)循環(huán)15次，連續(xù)4 d進(jìn)行大鼠狀態(tài)性焦慮的復(fù)制?？瞻讓?duì)照組大鼠置于條件性恐懼實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)內(nèi)，只有聲音信號(hào)而無(wú)電刺激。末次給藥后將大鼠轉(zhuǎn)移至EPM實(shí)驗(yàn)環(huán)境中適應(yīng)1 h，適應(yīng)期結(jié)束后，將大鼠頭朝向一側(cè)開(kāi)放臂，放置在EPM的中央?yún)^(qū)域，讓大鼠自由探索5 min。觀察指標(biāo)：大鼠進(jìn)入開(kāi)放臂次數(shù)及停留時(shí)間、閉合臂次數(shù)及停留時(shí)間，通過(guò)視頻分析系統(tǒng)記錄數(shù)據(jù)。

2.4 套管植入及取樣

待大鼠充分麻醉后固定在腦立體定位儀上，充分暴露顱骨表面，確定植入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物L(fēng)A腦區(qū)微透析專(zhuān)用套管的下末端坐標(biāo)點(diǎn)(Ap=-3.5 mm，ML=-5.2 mm，DV=-5.5 mm)及海馬腦區(qū)坐標(biāo)點(diǎn)(Ap=-3.3 mm，ML=+2.0 mm，DV=-2.1 mm)，以顱骨鉆刺穿顱骨；腦立體定位儀將套管緩慢植入到指定深度后固定套管。術(shù)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單籠飼養(yǎng)并恢復(fù)3 d。此后進(jìn)行大鼠在體微透析取樣實(shí)驗(yàn)。在大鼠清醒狀態(tài)下插入探針后，以0.8 μL·min-1的速度開(kāi)始透析，每2 h內(nèi)收集的腦脊液為一個(gè)透析樣品。每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物持續(xù)收集24 h，得到12個(gè)透析樣品后停止收集。保存于-80 ℃冰箱，待檢測(cè)。

2.5 色譜條件

HPLC-ECD色譜條件：色譜柱Sykam C18(3 μm，2.1 mm×100 mm)，流動(dòng)相為Na2HPO4·H2O：13.8 g·L-1；辛烷磺酸鈉：160 mg·L-1；EDTA·H2O：10 mg·L-1；甲醇：100 ml·L-1；KCl：149.2 mg·L-1。流動(dòng)相流速0.2 mL·min-1。工作電極電壓：0.52 V。柱溫：40 ℃。工作電極：玻璃碳電極。參比電極：銀電極。進(jìn)樣量：20 μL。分析時(shí)間：25 min。

HPLC-OPA色譜條件：色譜柱Waters C18(5 μm,4.6 mm×200 mm)，流動(dòng)相A相為水∶甲醇∶四氫呋喃，760∶180.5∶9.5；B相為水∶甲醇，240∶760。流動(dòng)相流速0.8 mL·min-1。檢測(cè)波長(zhǎng)：338 nm。柱溫：35 ℃。進(jìn)樣量：40 μL。分析時(shí)間：25 min。梯度洗脫程序，0～10 min，100%～47% A；10～14 min，47% A；14～14.01 min，47%～0% A；14.01～19 min，0% A；19～20 min，0%～100% A；20～25 min，100% A。自動(dòng)進(jìn)樣程序：①?gòu)钠緼吸取40 μL；②從瓶B吸取OPA衍生劑60 μL；③將100 μL混合到針座中，10次，等待1 min；④進(jìn)樣。

2.5 方法學(xué)考察

2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍

稱(chēng)取DA、NE、5-HT標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg，定容至10 mL容量瓶中。移取混合標(biāo)準(zhǔn)品母液，用0.1 mol·L-1的HClO4溶液稀釋得到濃度為50、25、12.5、6.25和3.125 pg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。按2.4項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以各目標(biāo)物的色譜峰面積(Y)對(duì)其濃度(X,pg·mL-1)進(jìn)行線性回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)。

分別稱(chēng)取Glu、GABA標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg，放入1 mL容量瓶中定容，作為混合標(biāo)準(zhǔn)品母液。移取混合標(biāo)準(zhǔn)品母液，用超純水倍比稀釋得到濃度為12.8、3.2、0.8、0.2和0.05 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。按2.4項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以各目標(biāo)物的色譜峰面積(Y)對(duì)其濃度(X,μg·mL-1)進(jìn)行線性回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)。

2.5.2 精密度及加標(biāo)回收率

取濃度為3.125 pg·mL-1的DA、NE、5-HT標(biāo)品混合液，每次進(jìn)樣20 μL，每天進(jìn)樣5針，連續(xù)進(jìn)樣5 d，考察日內(nèi)及日間精密度。取3組已知含量的生物樣品，每個(gè)樣品取10 μL并加入10 μL濃度為12.5 pg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)樣檢測(cè)含量，利用公式計(jì)算出加樣回收率。

取濃度為3.2 μg·mL-1的Glu、GABA標(biāo)品混合液，每次進(jìn)樣40 μL，每天進(jìn)樣5針，連續(xù)進(jìn)樣5 d,考察日內(nèi)及日間精密度。取3組已知含量的生物樣品，每個(gè)樣品取20 μL并加入20 μL濃度為3.2 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)樣檢測(cè)含量，利用公式計(jì)算出加樣回收率。

2.5.3 微透析探針的體外回收率

精密稱(chēng)取5-HT、DA、NE各10 mg置入1 mL容量瓶中，用0.1 mol·L-1的HClO4溶液定容，混合均勻，得到混合標(biāo)準(zhǔn)品母液。分別稱(chēng)取Glu、GABA標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg，放入1 mL容量瓶中定容，作為混合標(biāo)準(zhǔn)品母液。將探針?lè)湃牖旌蠘?biāo)準(zhǔn)品中，連接微量進(jìn)樣泵，以林格氏溶液作為灌注液0.8 μL·min-1進(jìn)行灌注，收集2 h內(nèi)所有樣品，測(cè)得體外探針的回收率，以此折算腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的真實(shí)含量水平。

2.6 統(tǒng)計(jì)方法

3 結(jié)果

3.1 生與炒酸棗仁配伍拮抗大鼠狀態(tài)性焦慮作用的結(jié)果及探針體外回收率

與空白對(duì)照組相比，模型組大鼠OT%、OE%均減少(P<0.05，P<0.01)；與模型組相比，炒酸棗仁對(duì)照組大鼠OT%、OE%均增加(P<0.05，P<0.01)，生與炒酸棗仁配伍組大鼠OT%、OE%均增加(P<0.05，P<0.01)，地西泮對(duì)照組大鼠OT%、OE%均增加(P<0.05，P<0.01)；與地西泮對(duì)照組相比，生與炒酸棗仁給藥組大鼠OT%、OE%均增加(P<0.05，P<0.01)；與炒酸棗仁對(duì)照組相比，生與炒酸棗仁給藥組大鼠在EPM中OT%、OE%均增加(P<0.05，P<0.01)，結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 探針體外回收率(%)

表2 生與炒酸棗仁配伍拮抗大鼠狀態(tài)性焦慮作用的行為學(xué)比較

3.2 方法學(xué)考察結(jié)果

3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍

各成分在相應(yīng)濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，符合方法學(xué)要求，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 單胺類(lèi)與氨基酸類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的線性回歸方程(n=5)

3.2.2 精密度及加標(biāo)回收率

日內(nèi)、日間精密度2.2%～3.2%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各目標(biāo)物的測(cè)定結(jié)果符合方法學(xué)要求，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 日內(nèi)、日間精密度及回收率試驗(yàn)

3.3 LA腦區(qū)透析樣品中NE、DA、5-HT、Glu、GABA含量測(cè)定結(jié)果及5-HT/NE、Glu/GABA水平變化

在LA腦區(qū)中，DA、NE、5-HT、Glu、GABA含量，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值變化如下：與空白對(duì)照組相比，模型組DA、NE、5-HT、Glu、GABA含量顯著增加(P<0.05，P<0.01)，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著升高(P<0.05，P<0.01)；與模型組相比：地西泮對(duì)照組DA、5-HT、Glu、GABA含量顯著減少(P<0.05，P<0.01)，NE含量無(wú)顯著性差異，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著下降(P<0.05，P<0.01)；炒酸棗仁對(duì)照組5-HT、Glu含量顯著性減少(P<0.05，P<0.01)，DA、NE、GABA含量無(wú)顯著性差異，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著下降(P<0.05，P<0.01)；生與炒酸棗仁配伍組DA、5-HT、Glu含量顯著減少(P<0.05，P<0.01)，生與炒酸棗仁配伍組NE、GABA含量無(wú)顯著性差異，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著下降(P<0.05，P<0.01)；與地西泮對(duì)照組相比，生與炒酸棗仁配伍組DA、5-HT、NE、Glu、GABA含量無(wú)顯著差異；5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值無(wú)顯著性差異；與炒酸棗仁對(duì)照組相比，生與炒酸棗仁配伍組DA 、Glu含量顯著減少(P<0.05)，NE、5-HT、GABA含量無(wú)顯著性差異，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值無(wú)顯著性差異，見(jiàn)表5～11。

表5 各組對(duì)LA腦區(qū)24 h NE含量的影響

表6 各組對(duì)LA腦區(qū)24h DA含量的影響

表7 各組對(duì)LA腦區(qū)24 h 5-HT含量的影響

表8 各組對(duì)LA腦區(qū)24 h Glu含量的影響

表9 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠LA腦區(qū)全天24 h GABA含量的影響

表10 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠LA腦區(qū)24 h內(nèi)5-HT/NE水平的影響

表11 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠LA腦區(qū)24 h Glu/GABA水平的影響

3.4 海馬腦區(qū)透析樣品中NE、DA、5-HT、Glu、GABA含量測(cè)定結(jié)果及5-HT/NE、Glu/GABA水平變化

在海馬腦區(qū)中，DA、NE、5-HT、Glu、GABA含量，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值變化如下：與空白對(duì)照組相比，模型組大鼠DA、NE、5-HT、Glu含量顯著增加，GABA含量顯著減少，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著增加(P<0.05，P<0.01)；與模型組相比，地西泮對(duì)照組大鼠海馬腦區(qū)DA、NE、5-HT、Glu含量均顯著性減少，GABA無(wú)顯著性差異，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著減少(P<0.05，P<0.01)；炒酸棗仁對(duì)照組DA、NE、5-HT、GABA含量無(wú)明顯差異,Glu含量顯著性減少，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著減少(P<0.05，P<0.01)；生與炒酸棗仁配伍組大鼠DA、NE、5-HT、Glu含量均顯著性減少,GABA無(wú)顯著性差異，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著減少(P<0.05，P<0.01)；與地西泮對(duì)照組相比，生與炒酸棗仁配伍組DA、NE、GABA含量無(wú)顯著性差異；5-HT、Glu含量顯著性減少，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著減少(P<0.05，P<0.01)；與炒酸棗仁對(duì)照組相比，生與炒酸棗仁配伍組DA含量顯著性減少，NE、5-HT、Glu、GABA含量對(duì)比無(wú)顯著性差異，5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值顯著減少(P<0.05，P<0.01)，見(jiàn)表12～18。

表12 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠海馬腦區(qū)全天24 h NE含量的影響

表13 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠海馬腦區(qū)全天24 h DA含量的影響

表14 各組配伍對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠海馬腦區(qū)全天24 h 5-HT含量的影響

表15 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠海馬腦區(qū)全天24h Glu含量的影響

表16 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠海馬腦區(qū)全天24 h GABA含量的影響

表17 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠海馬腦區(qū)24 h內(nèi)5-HT/NE水平的影響

表18 各組對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠海馬腦區(qū)24 h內(nèi)Glu/GABA水平的影響

4 討論

本文采用腦內(nèi)微透析技術(shù)與HPLC-ECD及 HPLC-OPA分析方法相結(jié)合，研究生與炒酸棗仁配伍對(duì)大鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的影響。微透析技術(shù)[9]可在局部未結(jié)合濃度進(jìn)行采樣，從而可以直接將組織濃度與藥理作用聯(lián)系起來(lái)，可以以高時(shí)間分辨率對(duì)一只動(dòng)物進(jìn)行重復(fù)采樣，同時(shí)獲得更多信息。微透析已被證明是了解未結(jié)合目標(biāo)位點(diǎn)濃度及其與效應(yīng)關(guān)系的一種非常重要的方法。該方法有助于量化藥物的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)，在理解組織分布和濃度-效應(yīng)關(guān)系-結(jié)合數(shù)據(jù)建模方面對(duì)定量系統(tǒng)藥理學(xué)做出了非常有價(jià)值的貢獻(xiàn)。但對(duì)手術(shù)要求較高，有采樣量小，樣品不易保存等問(wèn)題。

海馬是焦慮發(fā)生的重要靶部位，參與應(yīng)激的發(fā)生和轉(zhuǎn)歸。在焦慮腦內(nèi)環(huán)路中，海馬受到杏仁核調(diào)制，進(jìn)而促進(jìn)與情緒相關(guān)記憶的增強(qiáng)；情緒記憶的編碼后加工主要在海馬中完成[10-11]。焦慮發(fā)生的同時(shí)伴有杏仁核功能的改變[12-13]。LA參與情緒的管理，參與防御反應(yīng)行為和生理機(jī)制的整合，通過(guò)調(diào)制海馬促進(jìn)與情緒刺激相關(guān)的記憶。在焦慮腦內(nèi)環(huán)路中，LA直接接受來(lái)自皮質(zhì)層中視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)區(qū)域投射的信息，并傳遞信息到中央核。各腦區(qū)結(jié)構(gòu)之間依靠神經(jīng)遞質(zhì)傳遞信息、相互作用，進(jìn)而調(diào)節(jié)情緒活動(dòng)。所以本實(shí)驗(yàn)選取LA、海馬作為藥物作用機(jī)制的研究核心，探討生與炒酸棗仁在狀態(tài)性焦慮的作用和潛在機(jī)制。

結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，生與炒酸棗仁配伍以及炒酸棗仁增加狀態(tài)性焦慮大鼠在EPM中開(kāi)放臂停留時(shí)間百分比(OT%)和進(jìn)入開(kāi)放臂次數(shù)百分比(OE%)，二者均具有拮抗大鼠狀態(tài)性焦慮的作用，且生與炒酸棗仁配伍拮抗大鼠狀態(tài)性焦慮作用效果強(qiáng)于炒酸棗仁。生與炒酸棗仁配伍可以降低海馬腦區(qū)中NE、DA、5-HT、Glu的含量。雖然GABA含量升高未見(jiàn)顯著性差異，但在給藥作用下，GABA含量仍有增加的趨勢(shì)；5-HT/NE、Glu/GABA數(shù)值均顯著下降，說(shuō)明生與炒酸棗仁配伍可以降低海馬腦區(qū)中興奮性神經(jīng)遞質(zhì)含量，通過(guò)抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性拮抗焦慮。炒酸棗仁可以降低海馬腦區(qū)中5-HT、Glu含量和Glu/GABA比值，使海馬腦區(qū)中GABA含量有增加趨勢(shì)，但沒(méi)有顯著性差異，含量水平與前人報(bào)道基本一致[14-18]。生與炒酸棗仁配伍可以降低LA腦區(qū)中NE及DA、Glu的含量，5-HT含量沒(méi)有顯著性變化，但有下降趨勢(shì)；GABA含量沒(méi)有顯著性變化，但有上升趨勢(shì)；生與炒酸棗仁配伍顯著影響了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物L(fēng)A腦區(qū)內(nèi)Glu/GABA的水平，使其比值水平接近正常值。炒酸棗仁可以降低LA腦區(qū)中NE、5-HT的Glu含量、5-HT/NE和Glu/GABA水平,含量水平與前人報(bào)道基本一致[19-22]。

本研究表明生與炒酸棗仁配伍，可以拮抗焦慮情緒，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)狀態(tài)性焦慮大鼠LA、海馬腦區(qū)中單胺類(lèi)與氨基酸類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)含量有關(guān)。本研究為探索生與炒酸棗仁配伍治療狀態(tài)性焦慮的機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。