鄭麗珠，葉圣，宋瑋婷

寧德市婦幼保健院兒童保健科，福建寧德 352100

遺傳代謝?。╥nherited metabolic disorders,IMD）是指由于基因突變使合成的酶、受體或載體等蛋白功能缺陷，導致機體生化物質代謝紊亂，而出現(xiàn)的一系列臨床癥狀[1]。IMD 包含的病種多達上千種，其中常見病種有500～600 種[2]。在國外IMD 的發(fā)病率約0.1%～0.13%[3-4]。新生兒遺傳代謝病的臨床表現(xiàn)多種多樣，無特異性，各個系統(tǒng)、器官均可受累，且發(fā)病年齡跨度大，任何年齡段均可發(fā)病，病死率、致殘率高，故早期篩查與診斷意義重大。應用串聯(lián)質譜技術能在短時間內檢測出氨基酸、游離肉堿、?；鈮A相對值，從而實現(xiàn)對40 余種疾病，包括氨基酸、有機酸、脂肪酸代謝異常疾病的篩查。目前該技術廣泛應用于全國各個地區(qū)的新生兒IMD 篩查，且取得良好效果[5]。寧德市婦幼保健院于2016年9 月開始進行新生兒IMD 的篩查工作，為了解閩東地區(qū)新生兒IMD 患病率及疾病譜，現(xiàn)將寧德市2016 年9 月—2020 年12 月出生的135 148 例 新生 兒串聯(lián)質譜代謝病篩查情況進行回顧性分析，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取在本院新生兒疾病篩查中心進行新生兒遺傳代謝病篩查的135 148 例新生兒為研究對象。

1.2 方法

1.2.1 標本采集與遞送 足月出生的健康新生兒在3～7 d 內經過充分哺乳（≥6 次）后采血；疾病狀態(tài)兒、早產兒、低體重兒或提前出院等情況未采血者，采血時間<20 d，所有樣本均按照《新生兒疾病篩查血片采集技術規(guī)范》進行采集[6]。由接產醫(yī)院采集足跟血，滴于新生兒疾病篩查濾紙卡，要求血斑直徑≥8 mm，雙面滲透良好，在室溫中自然陰干，封存于密封袋，置于2～8℃冰箱保存,并于5 d 內通過新篩冷鏈系統(tǒng)，遞送至本中心應用串聯(lián)質譜技術進行標本檢測。

1.2.2 儀器和試劑 Waters 1525 Binary HPLC Pump（1525 高效液相色譜儀）和Waters TQ Detector 串聯(lián)質譜儀購自美國Waters 公司。使用非衍生法檢測標本中氨基酸、琥珀酰丙酮及肉堿的試劑盒是由芬蘭的PerKin Elmer 公司提供。

1.2.3 檢測方法 取合格的血濾紙卡片用打孔器取出直徑3 mm 圓形樣本，置于96 孔板中，將含有內標的萃取溶液加入孔中萃取樣本中的氨基酸、酰基肉堿，吸取萃取液置于96 孔V 型板中，覆蓋鋁膜上機檢測。

1.2.4 篩查結果的判讀及診斷 根據新生兒IMD 在串聯(lián)質譜檢測結果中的相關指標進行篩查。結合本地區(qū)串聯(lián)質譜檢測結果參考值進行分析。首次檢測異常者為初篩可疑陽性，需要原血片復查，若仍是陽性則為初篩陽性。對初篩陽性新生兒及時召回再次采集血標本檢測，召回樣本如仍為陽性者，需進一步行尿有機酸分析、血氣分析、生化、乳酸等相關檢查。可疑患兒行致病基因檢測。結合基因檢測等結果可確診新生兒IMD。確診為IMD的患兒將建立檔案由專人進行專案管理，跟蹤患兒的治療。

2 結果

閩東地區(qū)新生兒IMD 篩查的結果：本中心共篩查135 148 例新生兒，初篩陽性患兒1 738 例，初篩陽性率1.29%，召回1 625 例，召回率93.5%，召回復查陽性患兒134 例,召回復查陽性率8.2%?？梢苫颊哌M一步進行生化、尿有機酸檢測，并通過基因檢測及父母家系驗證確診，均為純合或復合雜合突變。最終確診48 例，總體陽性預測值為2.95%，總體患病率為1/2 816。涉及三大類型（氨基酸、有機酸、脂肪酸）14 種遺傳代謝病病種，其中氨基酸代謝病4 種（不含苯丙酮尿癥），11 例（1/12 286），有機酸代謝病5 種，12 例（1/11 262），脂肪酸代謝病5 種，25 例（1/5 406）。見表1。

表1 閩東地區(qū)135 148 例新生兒IMD 篩查情況

3 討論

IMD 臨床表現(xiàn)多種多樣，可累及多器官、多系統(tǒng)，最常見累及神經系統(tǒng)，可造成不可逆的神經系統(tǒng)損害，同時該病急性期可致患兒猝死。IMD 中大部分疾病通過早期診斷與治療，可使患兒生長發(fā)育與正常同齡兒相同。故早期發(fā)現(xiàn)、診斷與治療具有十分重大的意義。近年來隨著串聯(lián)質譜技術在我國的廣泛應用，使既往難以發(fā)現(xiàn)的IMD 得到了早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。

應用串聯(lián)質譜技術篩查閩東地區(qū)新生兒IMD結果顯示,閩東地區(qū)新生兒IMD 初篩陽性率為1.29%，總體陽性預測值為2.95%,與我國其他地區(qū)報道的初篩陽性率1.2%～2.21%[7-8]及總體陽性預測值2.6%～3.38%[9]相似。因本資料中不包含苯丙酮尿癥患兒,故本研究所得初篩陽性率可能較實際低。其次初篩陽性患兒1 738 例，最終確診48 例，由此可見應用串聯(lián)質譜技術進行新生兒IMD 篩查的假陽性率較高,可能與串聯(lián)質譜技術具有高靈敏度,同時該技術為篩查試驗而非確診試驗有關，目前國內其他地區(qū)亦存在此問題。因此，對假陽性結果進行大數(shù)據分析、比對，不斷優(yōu)化篩查標準，降低假陽性，提高篩查率是今后工作的重點。

資料中135 148 例新生兒中檢出48 例IMD 患兒，在不含苯丙酮尿癥患兒情況下總體患病率已達到1/2 816。高于浙江省的患病率1/4 937[10-12]，低于河北省石家莊市的患病率1/1 259[13]，而與河南省的患病率1/2 805[14]相似。提示了新生兒IMD 在不同地區(qū)的患病率不同，具有地域差異性。這可能與不同地區(qū)人群種族不同以及實驗過程中標本采集、遞送方式不同和對異常指標的把控不同等都有一定相關性。需要更多數(shù)據分析確認。

48 例患兒，包含14 種疾病，其中前5 位病種順位分別為原發(fā)性肉堿缺乏癥、2-甲基丁酰輔酶A 脫氫酶缺乏癥、希特林缺乏癥、戊二酸血癥1 型、多種酰基輔酶A 脫氫酶缺乏癥，在本地區(qū)患病率較高的2-甲基丁酰輔酶A 脫氫酶缺乏癥、戊二酸血癥1型，與鐘錦平等[15]報道一致，提示可能是福建地區(qū)的高發(fā)病種。這些疾病的發(fā)現(xiàn)，擴大了閩東地區(qū)新生兒IMD 的疾病譜，同時對本地區(qū)相關臨床醫(yī)師積累更多的診療經驗具有重要意義。

本研究分析了閩東地區(qū)新生兒IMD 的總體患病率及疾病譜情況。因IMD 除了少數(shù)為性染色體遺傳，大部分為常染色體隱性遺傳。已生育過IMD 的家庭，仍有較大可能性再次生育出IMD 的患兒。早期篩查出新生兒IMD 還可以指導此類家庭在再次妊娠期間利用胎盤絨毛膜細胞及羊水細胞進行基因突變情況分析，做好出生缺陷二級預防。故串聯(lián)質譜技術應用于新生兒IMD 篩查意義重大，值得推廣。