由嚴(yán)重創(chuàng)傷引起的創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）是導(dǎo)致死亡和殘疾的主要原因，已成為全球公共衛(wèi)生問題。TBI 以頭部的原發(fā)性穿透性或非穿透性損傷為特征，它不是孤立事件，而是與許多非神經(jīng)損傷相關(guān)的生物學(xué)過程，例如涉及胃腸系統(tǒng)的全身炎癥和器官功能障礙。這些通常在最初的大腦機(jī)械損傷后數(shù)分鐘到數(shù)月發(fā)生，并在很大程度上導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率。腸黏膜是內(nèi)部環(huán)境與外部環(huán)境相互作用的最大表層。腸上皮將管腔內(nèi)容物隔開，防止病原抗原侵入。腦損傷后，腸上皮細(xì)胞功能障礙或凋亡可能由于缺血和/或缺氧、氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)而發(fā)生，繼而腸粘膜的通透性增加。TBI誘導(dǎo)的腸道通透性可引起腸道內(nèi)毒素和細(xì)菌的移位，進(jìn)一步誘發(fā)或加重全身炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致多器官功能衰竭和死亡。維持腸黏膜結(jié)構(gòu)的完整性，保護(hù)腸屏障功能可以改善TBI的預(yù)后。因此，尋找兼具抗氧化和抗炎效應(yīng)的藥物可能是治療TBI后腸損傷的有效途徑。

虎杖苷（PD）作為中國傳統(tǒng)中藥虎杖的根莖提取物，具有對抗氧化應(yīng)激及炎性損傷的生物學(xué)效應(yīng)。最近，有研究表明虎杖苷可以減輕TBI的繼發(fā)性腦損傷和急性肺損傷。然而，虎杖苷在TBI后的腸道保護(hù)作用和機(jī)制尚不清楚。有臨床研究表明補(bǔ)充虎杖苷可以有效緩解腸易激綜合征患者的臨床癥狀，改善腸道功能；虎杖苷在燒傷及膿毒癥引起的腸道損傷中被證實具有減少促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α的釋放，降低氧化應(yīng)激反應(yīng)，減輕腸粘膜損傷的作用。我們既往研究表明，虎杖苷可能通過激活Sirt1繼而去乙?；趸锲缁福⊿OD）2和高遷移率族蛋白B1（HMGB1）分別在失血性休克腸損傷和腎損傷發(fā)揮作用。上述研究回顧，提示虎杖苷可能通過腸道氧化應(yīng)激水平和炎癥反應(yīng)發(fā)揮減輕TBI的作用。本文旨在探討虎杖苷對創(chuàng)傷性顱腦損傷繼發(fā)性腸粘膜損傷的保護(hù)效應(yīng)及其潛在機(jī)制，為TBI后腸損傷的藥物治療提供潛在選擇。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物SPF級雄性SD大鼠，體質(zhì)量220～300 g，購自南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，所有動物的安置和飼養(yǎng)依照《南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物管理辦法（試行）》進(jìn)行，動物實驗符合南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物倫理委員會制定的動物實驗標(biāo)準(zhǔn)，許可證號：SCXK（粵）2016-0041。在動物房飼養(yǎng)1～2周適應(yīng)環(huán)境后進(jìn)行試驗。取25只大鼠隨機(jī)分假手術(shù)組（Sham 組）及TBI后12、24、48 和72 h組，5只/組，在對應(yīng)時間點處死大鼠。另取15只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、腦創(chuàng)傷+生理鹽水組（TBI+NS組）和腦創(chuàng)傷+虎杖苷治療組（PD組），5只/組，48 h后處死大鼠后進(jìn)行腦組織和腸道組織取材。

1.1.2 試劑與儀器 液壓顱腦損傷儀器（Model01-B，NEWSUN），動物腦立體定向儀（瑞沃德，深圳），正置顯微鏡（Nikon，ECLIPSE FNI），酶標(biāo)儀（Thermo ScientificMultiskanFC），Image-Pro Plus 6.0圖像分析系統(tǒng)，虎杖苷（深圳海王藥業(yè)有限公司），TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Roche），甲苯胺藍(lán)染料（北京索萊寶科技有限公司），逆轉(zhuǎn)錄和PCR 試劑盒（南京諾唯贊生物科技有限公司），D-乳酸（D-LAC）檢測試劑盒（Biovision），二胺氧化酶（DAO）檢測試劑盒（南京建成科技有限公司），脂質(zhì)過氧化物（LPO）檢測試劑盒（武漢伊萊瑞特生物科技有限公司），活性氧（ROS）檢測試劑盒（上海貝博生物科技有限公司），免疫沉淀試劑盒和BCA蛋白定量檢測試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司），Sirt1 Activity Assay Kit（Abcam）。

1.2 方法

1.2.1 TBI模型建立及各組干預(yù)措施 大鼠經(jīng)異氟醚吸入麻醉后，將其固定于腦立體定向儀上，逐層分離骨膜并暴露顱骨。在大鼠冠狀縫后5 mm，矢狀縫左側(cè)3 mm處，手動以4 mm直徑腦殼鉆頭鉆出骨窗并夾出骨片，保證硬腦膜完整。用502膠將連接管與骨窗平面連接，以義齒基托樹脂進(jìn)行加固并測試管道密閉性，待大鼠出現(xiàn)掐尾反射后則進(jìn)行液壓損傷打擊，本實驗造成的損傷程度為3±0.2 atm峰值沖擊壓力，為重度顱腦損傷模型，打擊后TBI大鼠會出現(xiàn)短暫性的呼吸暫停，常需立即給予預(yù)防性的人工胸部按壓。假手術(shù)組僅做手術(shù)操作不進(jìn)行液壓沖擊，TBI時間梯度組為進(jìn)行液壓沖擊，造模成功后在相應(yīng)時間點一并稱量Sham組和TBI組大鼠的體質(zhì)量，并取糞便計算糞便含水量；TBI+NS組在損傷后30 min于腹腔注射等量生理鹽水，PD組在液壓沖擊損傷后30 min于腹腔注射虎杖苷（30 mg/kg，溶于0.5 mL生理鹽水中，劑量參考）。

與假手術(shù)組相比，TBI 后大鼠空腸組織IL-1β 和TNF-α的mRNA相對表達(dá)均明顯增高（<0.05），但I(xiàn)L-6的mRNA表達(dá)無差異（0.0517，圖3A）；TBI后大鼠促炎因子蛋白表達(dá)水平均顯著升高（<0.01）?；⒄溶仗幚砗箫@著降低了IL-1β和TNF-α的mRNA水平（<0.05，圖3A），但I(xiàn)L-6的mRNA表達(dá)水平無差異（0.1294）；虎杖苷也降低了TBI大鼠空腸組織的促炎因子IL-6、IL-1β蛋白表達(dá)量（<0.01），TNF-α有下降趨勢但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（=0.0867，圖3E）。

與假手術(shù)組大鼠相比，TBI 48 h大鼠腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，可見明顯的腦挫裂傷（圖1A）；病理結(jié)果顯示腦膜不連續(xù)，皮層出現(xiàn)明顯的神經(jīng)元壞死和凋亡（圖1B），且在48 h最為明顯；TBI組大鼠在24 h和48 h體質(zhì)量逐步下降，72 h后部分恢復(fù)（均<0.001，圖1C）；TBI大鼠糞便含水量在前48 h呈下降趨勢，72 h下降尤為明顯（=0.0094，圖1D）；TBI大鼠血清DAO 水平在12 h開始明顯增加（<0.001），D-LAC 水平在24 h 增加明顯（=0.0085）兩者隨時間增加其表達(dá)水平逐漸升高，48 h最為明顯（均<0.001，圖1E、F）。

1.2.4 血清D-乳酸和二胺氧化酶檢測 標(biāo)本收集前尾靜脈取血，靜置4 h，3000 r/min 4 ℃離心15 min，收集上清液，-80 ℃保存。比色法檢測血清中D-LAC和DAO的含量，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒操作說明書完成。

1.2.3 標(biāo)本收集 各組大鼠經(jīng)異氟醚麻醉后，尾靜脈采血，開胸暴露心臟，100 mL生理鹽水溶液快速灌注沖洗全身循環(huán)血液，灌注完成后，斷頭取腦并置于4%多聚甲醛中固定，取約4～6 cm空腸組織清洗干凈，除去脂肪和腸系膜，置于-80 ℃保存，另取4～6 cm空腸清洗干凈后于4%多聚甲醛固定。

近年來，因火災(zāi)引起的車輛事故時有發(fā)生，按照起火原因，汽車火災(zāi)大致分為自燃、引燃、碰撞起火、爆炸和雷擊五種類型，這五種類型的前三項，成為了司法鑒定的重點。本文結(jié)合一起實際案例，利用激光拉曼光譜法對現(xiàn)場殘留物進(jìn)行成分分析，使用“排除法”確證了現(xiàn)場起火的根本原因。保險公司的理賠工作提供了法律依據(jù)。[1-3]

1.2.5 組織活性氧和脂質(zhì)過氧化物檢測 將新鮮的空腸組織取出后用微量電子天平稱重后置入4 ℃PBS中制作10%（組織重量∶PBS=1∶9）的組織勻漿，12 0004 ℃離心15 min，取上清液進(jìn)行檢測。采用二氯熒光素乙酰乙酸鹽（DCFH-DA）熒光分光光度法檢測ROS，采用比色法檢測LPO 水平，檢測步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

與假手術(shù)組相比，TBI 組大鼠空腸組織ROS 和LPO 生成明顯增加而SOD2 蛋白水平降低（均<0.001）；PD處理后TBI大鼠空腸組織SOD2蛋白表達(dá)量顯著提高（=0.0079），ROS 和LPO 水平顯著降低（<0.001，圖3H、I）。

1.2.8 腸道組織病理 取空腸組織標(biāo)本按常規(guī)脫水、透明、包埋，石蠟切片4 μm，按組別進(jìn)行蘇木素-伊紅染色（HE染色），在光學(xué)顯微鏡下觀察腸粘膜受損情況并進(jìn)行腸道粘膜損傷評價。參照方法評估大鼠腸粘膜黏膜萎縮、壞死以及出血，中性粒細(xì)胞浸潤，黏膜層結(jié)構(gòu)完整情況。將染色后的各組大鼠空腸切片置于10倍鏡下隨機(jī)視野觀察，測量腸切片5根最長腸絨毛及所對應(yīng)的隱窩深度和絨毛寬度，最后進(jìn)行拍照保存。

1.2.7 腦組織甲苯胺藍(lán)和TUNEL染色 經(jīng)4%多聚甲醛固定48 h后的腦組織常規(guī)石蠟包埋，切片厚度為4 μm。脫蠟后的切片置于1%甲苯胺藍(lán)水溶液中染色，經(jīng)分化、脫水、透明、封片等操作后于顯微鏡下觀察尼氏小體；石蠟切片經(jīng)脫蠟至水后根據(jù)TUNEL 試劑盒說明經(jīng)0.1%Triton-X通透、3%BSA封閉、顯色、干燥、封片后于顯微鏡下觀察凋亡神經(jīng)細(xì)胞。

1.2.9 空腸組織IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA水平的測定新鮮的空腸組織各稱取20 mg，用TRIzol試劑提取空腸組織總RNA，檢測RNA水平和濃度。使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將500 ng總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，后采用熒光定量檢測試劑盒（SYBR Green）進(jìn)行實時熒光定量PCR 反應(yīng)。將IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA的相對表達(dá)水平標(biāo)準(zhǔn)化為β-actin表達(dá)，采用2方法計算mRNA表達(dá)的相對倍數(shù)變化。實時定量PCR引物通過和美國國立生物技術(shù)信息中心（NCBI）數(shù)據(jù)庫設(shè)計，引物序列如下：TNF-α（正向：5'-GTG GAA CTG GCA GAA GAG GC-3'，反向：5'-AGA CAG AAG AGC GTG GTG GC-3'）；IL-1β（正向：5'-CTG TGT CTT TCC CGT GGA CC-3'，反向：5'-CAG CTC ATA TGG GTC CGA CA-3'）；IL-6（正向：5'-TTC CAT CCA GTT GCC TTC TT-3'，反向：5'-CAG AAT TGC CAT TGC ACA AC-3'）；β-actin（正向：5'-TGCTGTCCCTGTATGCCTCTG-3'，反 向：5'-TGATGTCACGCACGATTTCC-3'）。同一樣本重復(fù)3次，反應(yīng)條件為95 ℃10 s；95 ℃10 s，60 ℃30 s，共40個循環(huán)；溶解曲線反應(yīng)條件為95 ℃15 s，60 ℃60 s，95 ℃15 s。

1.2.10 免疫沉淀 從-80 ℃冰箱中取出各組大鼠空腸組織，稱取30 mg組織，加入500 μL含蛋白酶抑制劑的IP專用裂解液，將組織提取物蛋白與抗體孵育過夜，以使溶液中的蛋白質(zhì)-抗體相互作用，然后與蛋白A/G偶聯(lián)的瓊脂糖珠孵育4 h，使用緩沖液洗滌珠子后用蛋白質(zhì)印跡法檢測蛋白乙?；?。

1.2.11 蛋白印跡法 從-80 ℃冰箱中取出各組大鼠空腸組織，稱取100 mg組織，用蛋白提取試劑盒提取組織蛋白，使用BCA法測定蛋白含量。煮沸8 min使蛋白質(zhì)變性，上樣電泳。首先調(diào)節(jié)電壓80 V，電泳30 min，隨后升高電壓至120 V，電泳120 min，濕法轉(zhuǎn)至0.45 μm PVDF膜，5%BSA 于室溫封閉1 h，分別加入兔抗claudin-5（AF5216，AFFINITY，1∶1000）、ZO-1（AF5145，AFFINITY，1∶1000）、SOD2（A19576，ABclonal，1∶1000）、TNF-α（AF7014，AFFINITY，1∶1000）、IL-6（DF6087，AFFINITY，1∶1000）、IL-1β（YT2322，IMMUNOWAY，1∶1000）、HMGB1（orb195321，Biorbyt，1∶5000）、Acetyl-HMGB1-K29（A16002，ABclonal，1∶1000）、Acetyl-SOD2-K68（ab137037，Abcam，1∶1000）、β-actin（AF7018，AFFINITY，1∶10000），4 ℃過夜孵育16 h，TBST洗膜，加入山羊抗兔二抗（稀釋度1∶10000），室溫孵育1 h后，TBST洗膜、ECL顯色、暗室曝光觀察，采用Image J軟件分析。

新體制激發(fā)新活力。資本的多元化、人才隊伍結(jié)構(gòu)的優(yōu)化與實力的提升、新技術(shù)新方法的大規(guī)模應(yīng)用匯成推動新聞出版業(yè)大發(fā)展大繁榮的三大動能。新的動能為我國新聞出版業(yè)注入了強(qiáng)大的發(fā)展活力。40年來，我國新聞出版業(yè)在市場體系與要素市場建設(shè)、市場主體建設(shè)和新業(yè)態(tài)發(fā)展方面展現(xiàn)出全新的活力。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS26.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。符合正態(tài)分布的計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較采用單因素方差分析。當(dāng)<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TBI加重大鼠腸損傷

1.2.2 體質(zhì)量變化和糞便含水量測定 大鼠經(jīng)干預(yù)處理后，觀察大鼠一般情況。將大鼠放在籠中自由進(jìn)食和飲水，按照分組記錄各組大鼠的體質(zhì)量變化。收集糞便顆粒進(jìn)行稱重（m），然后將糞便顆粒在烤箱中干燥后再次稱重（m），計算糞便含水量，糞便含水量=（m-m）/m×100%。

2.2 虎杖苷減輕TBI大鼠腸損傷

與TBI組相比，虎杖苷治療組部分恢復(fù)了TBI后大鼠的體質(zhì)量，48 h 尤為明顯（<0.001），同時也增加了TBI大鼠糞便含水量（=0.0147，圖2A、B）。此外，虎杖苷顯著降低了TBI 后48 h 大鼠血清的D-LAC（=0.0116）和DAO水平（=0.0048）。Western blot測定空腸組織中ZO-1和claudin-5蛋白含量。與假手術(shù)組相比，TBI組空腸組織緊密連接蛋白ZO-1和claudin-5蛋白表達(dá)量顯著降低；虎杖苷部分恢復(fù)了TBI后大鼠空腸組織ZO-1（=0.0056）和claudin-5（=0.0156）的含量。腸組織病理方面，假手術(shù)組的大鼠空腸黏膜結(jié)果基本正常，絨毛和上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、排列整齊，無炎性細(xì)胞浸潤。與假手術(shù)組相比，TBI組空腸黏膜部分區(qū)域壞死結(jié)構(gòu)不連續(xù)，絨毛脫失明顯，高度明顯降低，排列紊亂或出現(xiàn)斷裂；虎杖苷導(dǎo)致TBI大鼠空腸組織壞死減少，結(jié)構(gòu)相對連續(xù)，絨毛脫落減少，高度增加，排列趨向整齊（圖2 I）。不僅如此，絨毛高度及與隱窩深度的比值得到顯著提高（<0.001，表1），但隱窩深度未見明顯增加（=0.083，表1）。

應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，[n（%）]表示計數(shù)資料，行 χ2檢驗，（±s）表示計量資料，行 t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.3 虎杖苷降低TBI大鼠空腸組織的促炎細(xì)胞因子水平和氧化應(yīng)激水平

本文研究結(jié)果顯示,觀察組切口感染率為3.57%,對照組為21.43%,觀察組切口感染率低于對照組。觀察組患者護(hù)理滿意度為94.64%,對照組為78.57%,觀察組護(hù)理滿意度高于對照組,說明在骨科切口感染中融入手術(shù)室護(hù)理干預(yù),有助于降低患者切口感染發(fā)生率,提升患者護(hù)理滿意度[4]。

案例的難易要恰當(dāng)，也就是說既不能太難，防止分析問題無從入手，使學(xué)生失去學(xué)習(xí)的興趣和動力；也不能過于簡單，否則無法充分進(jìn)行分析討論，不能有效激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性。只有案例難度適中，才能夠充分調(diào)動學(xué)生積極地進(jìn)行辯論，并通過論證來選取最優(yōu)的問題解決方案，培養(yǎng)學(xué)生多方面能力[17]。

1.2.6 Sirt1活性測定 新鮮空腸組織取出稱重后勻漿反應(yīng)于500 μL免疫沉淀緩沖液中提取蛋白，取上清加入含有熒光肽段溶液和蛋白瓊脂糖珠的混合物進(jìn)行反應(yīng)，使用酶標(biāo)儀進(jìn)行熒光定量（激發(fā)光340 nm，發(fā)射光460 nm），以1～2 min間隔的熒光強(qiáng)度測量NAD依賴性脫乙酰酶活性，酶活性的最終表現(xiàn)形式為相對于Sham組的吸光度比率，檢測步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

2.4 虎杖苷能夠激活大鼠空腸組織的Sirt1活性并降低SOD2和HMGB1的乙酰化水平

與假手術(shù)組相比，TBI后空腸組織Sirt1活性降低（=0.0135），SOD2和HMGB1乙?；缴撸?0.001）；但給予虎杖苷處理后Sirt1 活性恢復(fù)（=0.0011），HMGB1和SOD2乙?；浇档停ň?0.001）。

3 討論

本研究證實TBI大鼠腸道屏障功能受損，氧化應(yīng)激和促炎細(xì)胞因子水平增加；而虎杖苷治療能夠減輕TBI后的腸損傷，其機(jī)制可能和上調(diào)去乙?；窼irt1介導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)和促炎細(xì)胞炎癥因子釋放的抑制有關(guān)。據(jù)我們所知，這項研究首次明確了虎杖苷在TBI后腸道保護(hù)的作用和提出了可能的保護(hù)機(jī)制。

自古以來，藍(lán)寶石就有“帝王之石”之稱。傳說藍(lán)寶石可讓佩戴者免遭人妒忌，并可蒙受神靈垂愛，于是古代國王就在頸間配戴藍(lán)寶石，作為避免受傷的強(qiáng)力防御物。19世紀(jì)，正是由于一顆被世人譽(yù)為“擁有它者必為王”的卡魯大帝的護(hù)身藍(lán)寶石，改變了拿破侖一世和愛妻約瑟芬的命運(yùn)。

嚴(yán)重創(chuàng)傷性顱腦損傷患者中，胃腸功能障礙常見。由于缺血缺氧、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等，腸粘膜屏障功能受損，內(nèi)毒素和腸道菌群移位入血，激活機(jī)體免疫細(xì)胞，增加了TBI患者的死亡率。D-乳酸和腸黏膜上皮細(xì)胞分泌的二胺氧化酶（DAO）在腸道通透性增高時可以發(fā)生腸道移位，其水平可用于評估腸道損傷嚴(yán)重程度和腸上皮細(xì)胞屏障功能。緊密連接是腸上皮細(xì)胞維持腸道屏障功能的主要連接方式，其中ZO-1 和claudin-5是構(gòu)成緊密連接的主要骨架蛋白，其表達(dá)量的變化反映了腸粘膜結(jié)構(gòu)的完整性。本研究中TBI大鼠血清D-乳酸、DAO水平升高，空腸ZO-1、claudin-5蛋白表達(dá)水平下降，與既往研究結(jié)果一致，本研究證實了TBI后出現(xiàn)了腸道粘膜損傷。

本研究探討了虎杖苷作為新藥在TBI后腸道保護(hù)作用和可能機(jī)制。虎杖苷是一種傳統(tǒng)中藥虎杖的提取物，具有抗炎、抗氧化、抗休克、改善微循環(huán)等藥理學(xué)作用。在潰瘍性結(jié)腸炎中，PD可以降低MPO表達(dá)、脂質(zhì)過氧化物水平從而減輕氧化應(yīng)激損傷；此外，PD也可通過促進(jìn)核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）的核轉(zhuǎn)錄，增加血紅素加氧酶-1（HO-1）的表達(dá)，在DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎中發(fā)揮抗氧化作用。我們既往研究表明虎杖苷可以通過激活沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）和SIRT3減輕失血性休克對于腸損傷的打擊，其機(jī)制可能和去乙酰化SOD2有關(guān)。我們的這項研究關(guān)注了TBI對于腸道損傷的影響，和既往研究一致，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)TBI大鼠空腸組織氧化應(yīng)激水平相關(guān)因子（ROS、LPO）明顯增加而抗氧化因子SOD2表達(dá)下降，證實TBI后腸道存在顯著的氧化應(yīng)激損傷。此外，研究發(fā)現(xiàn)加入虎杖苷治療后，空腸組織ROS、LPO蛋白表達(dá)水平降低，SOD2含量增加，反映虎杖苷可以抑制TBI后腸道脂質(zhì)過氧化反應(yīng)從而減輕腸道氧化應(yīng)激損傷。具體的機(jī)制而言，虎杖苷部分上調(diào)了SOD2的蛋白水平，但我們推測虎杖苷上調(diào)SOD2的蛋白水平是間接的，其分子機(jī)制部分來源于去乙?；疭OD2繼而增加SOD2的活性發(fā)揮了有效的抗氧化應(yīng)激作用，這在我們的實驗結(jié)果中得到了證實。另一方面，虎杖苷通過保護(hù)線粒體發(fā)揮作用，而線粒體的破壞也是ROS過度釋放的來源。綜合而言，虎杖苷在TBI 后的腸損傷保護(hù)作用可能是基于去乙?；疭OD2和保護(hù)線粒體繼而減少氧化應(yīng)激發(fā)揮作用的。

創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）的管理需要了解影響周圍器官的繼發(fā)性后遺癥，包括胃腸道（GI）。腦-腸軸由雙向途徑組成，TBI引起的神經(jīng)炎癥和神經(jīng)變性通過這些途徑影響腸道功能，由此產(chǎn)生了TBI誘導(dǎo)的粘膜通透性增加。繼發(fā)性腸道炎癥的存在延長了系統(tǒng)性炎癥，加重了TBI。因此，抗炎是一個有希望的針對TBI 的治療方向。既往研究表明虎杖苷通過抑制炎癥因子IL-1β、TNF-α和IL-6的產(chǎn)生，減輕炎癥性腸病及創(chuàng)傷性休克引起的腸道損傷，保持腸道上皮的完整性。TBI后腸道損傷后的氧化應(yīng)激損傷往往伴有炎癥反應(yīng)，過量的自由基堆積可以引起促炎細(xì)胞因子的分泌，IL-6、IL-1β和TNF-α的水平會迅速升高，同時也會破壞腸道上皮屏障。另有研究表明，虎杖苷通過減少小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥，從而減輕創(chuàng)傷性脊髓損傷。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)TBI后大鼠空腸組織促炎因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）釋放顯著增加，證實TBI后腸道存在顯著炎癥損傷；而在加入虎杖苷治療后，空腸組織L-6、IL-1β、TNF-α mRNA和蛋白表達(dá)水平降低，提示虎杖苷可以抑制TBI后腸道過度的炎癥反應(yīng)，從而減輕腸道受損，這在既往是未見報道的。此外，本研究證實了虎杖苷能夠降低HMGB1的乙?；剑@可能是虎杖苷直接抑制炎癥反應(yīng)的直接分子機(jī)制。本研究為PD應(yīng)用于TBI的治療提供了實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

本實驗存在一定的局限性。首先，我們未采用敲基因動物和更多化學(xué)抑制劑或激動劑探討具體的上下游分子機(jī)制；其次，本實驗也未檢測TBI后免疫功能和多個器官損傷情況，TBI后對于全身器官的免疫可能也造成了損傷，我們尚沒有開展這方面的研究；此外，TBI對于腸損傷的影響絕非腦-腸之間的氧化應(yīng)激和炎癥兩個方面影響的，其他的器官損傷也參與了其中，另外腸道微生物菌群的結(jié)構(gòu)和數(shù)量改變，代謝產(chǎn)物的變化也參與了TBI 后腸損傷。這些都將是我們以后研究的重點方向。

浮盤導(dǎo)靜電裝置，浮盤上的導(dǎo)靜電裝置對浮盤安全運(yùn)行十分重要，在浮盤運(yùn)行中需要一年不少于2次檢測，一般春季、秋季各一次，要求接地電阻<10Ω為合格，否則必須采取有效措施予以防控。靜電導(dǎo)出裝置，應(yīng)采用不銹鋼鋼絲繩，其截面積不得小于φ2mm。當(dāng)罐徑≤21m時，每臺鋁(鋼)制內(nèi)浮頂設(shè)置不少于2根；當(dāng)儲罐徑>21m時，每臺設(shè)置不少于3根。靜電導(dǎo)出所采用鋼絲繩的兩端采用不銹鋼鼻子與鋁(不銹鋼)制內(nèi)浮頂和儲罐罐體連接。

綜上所述，虎杖苷可減輕TBI對大鼠腸粘膜的損傷，其機(jī)制和激活Sirt1，去乙?；疭OD2和HMGB1，減輕氧化應(yīng)激損傷和促炎因子的釋放有關(guān)。