近年來甲狀腺癌的發(fā)病率在全球范圍迅速上升，位居內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤的首位。其中甲狀腺乳頭狀癌（PTC）是最常見的類型，約占甲狀腺癌的80%以上。目前細(xì)針穿刺活檢（FNAB）是臨床上最常用的甲狀腺結(jié)節(jié)診斷手段，可通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)評(píng)估結(jié)節(jié)的良惡性。由于甲狀腺良惡性腫瘤的細(xì)胞學(xué)特征經(jīng)常發(fā)生重疊，約有10%～30%的FNAB診斷為不明確的細(xì)胞學(xué)結(jié)果。因此急需探索新的標(biāo)志物以提高甲狀腺良惡性鑒別的準(zhǔn)確性。

DNA甲基化是最常見的表觀遺傳學(xué)改變，它是指在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下，真核生物基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號(hào)碳位共價(jià)鍵結(jié)合一個(gè)甲基基團(tuán)，該過程不涉及基因序列的改變。DNA甲基化水平異常是癌癥發(fā)生發(fā)展的早期事件和伴隨事件，其在癌癥診斷、治療和預(yù)后方面具有重要價(jià)值。

透明質(zhì)酸酶2（HYAL2）是一種廣泛分布于人體組織中的透明質(zhì)酸酶。其作用是將高相對(duì)分子質(zhì)量透明質(zhì)酸（HA）降解為相對(duì)分子質(zhì)量為20000的HA片段，并進(jìn)一步被HYAL1降解為小分子HA片段，后者通過刺激癌癥相關(guān)炎癥、腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移等促進(jìn)癌癥的發(fā)生發(fā)展。既往研究表明，HYAL2參與了癌癥的發(fā)生、進(jìn)展和預(yù)后等多個(gè)過程。此前，我們發(fā)現(xiàn)與乳腺良性腫瘤相比，乳腺癌惡性組織中基因啟動(dòng)子區(qū)域cg27091787 位點(diǎn)DNA 高甲基化水平顯著升高。然而，目前還沒有基因DNA甲基化改變與甲狀腺癌的關(guān)聯(lián)研究，也沒有評(píng)估其作為甲狀腺良惡性腫瘤鑒別診斷分子標(biāo)志物價(jià)值的文獻(xiàn)報(bào)道。

因此，本研究分析了190對(duì)甲狀腺良惡性腫瘤組織中基因DNA甲基化水平差異，同時(shí)檢測(cè)了另外55對(duì)甲狀腺良惡性甲狀腺腫瘤組織中HYAL2蛋白水平。研究結(jié)果有利于評(píng)估基因DNA甲基化改變?cè)诩谞钕倌[瘤鑒別診斷中的價(jià)值。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象

本研究中所有福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）的甲狀腺組織均來自于徐州醫(yī)科大學(xué)附屬淮安醫(yī)院病理科。甲狀腺癌分期以2017年美國(guó)癌癥聯(lián)合會(huì)甲狀腺癌分期系統(tǒng)（第八版）為依據(jù)。甲狀腺癌納入標(biāo)準(zhǔn)為：具有乳頭狀結(jié)構(gòu)和典型核特征的早期（病理分期Ⅰ～Ⅱ期）甲狀腺乳頭狀癌病例；尚未進(jìn)行手術(shù)或相關(guān)治療；無其他癌癥或轉(zhuǎn)移癌。排除標(biāo)準(zhǔn)為：濾泡變異型甲狀腺乳頭狀癌（FVPTC）；具有乳頭狀核特征的非侵襲性甲狀腺濾泡型腫瘤（NIFTP）。良性腫瘤入組標(biāo)準(zhǔn)為與惡性腫瘤年齡、性別和住院年份匹配的甲狀腺腺瘤。所有樣本診斷均由兩位有經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)師確認(rèn)，且有完整的臨床數(shù)據(jù)記錄。最終，本研究選取于2019年1月～2020年6月收集的190對(duì)甲狀腺乳頭狀癌和甲狀腺腺瘤病例檢測(cè)其基因DNA甲基化水平，其中男性40對(duì)，女性150 對(duì)。PTC 病例中位（四分位數(shù)間距；IQR）年齡為51.00（44.00～57.00）歲；I期病例173人（91.05%），Ⅱ期病例17 人。甲狀腺腺瘤病例中位（IQR）年齡為53.00（46.00～60.25）歲。

此外，本研究還收集了同一時(shí)期另外55對(duì)（34對(duì)女性）年齡、性別均衡可比的早期PTC和甲狀腺腺瘤患者的FFPE組織切片并檢測(cè)了HYAL2蛋白表達(dá)水平。良性和惡性甲狀腺腫瘤病例的中位（IQR）年齡分別為47.00（36.00～52.00）和43.00（31.00～51.00）歲。

SPSS 25.0和GraphPad Prism 8對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。多因素校正的logistic回歸用于評(píng)估基因的CpG位點(diǎn)甲基化水平改變與PTC的關(guān)聯(lián)，并計(jì)算其比值比（OR）和95%置信區(qū)間（CI）。批次效應(yīng)校正是將批次變量值（1和2）作為名義變量納入logistic回歸分析。工作特征曲線（ROC曲線）用來評(píng)估其在甲狀腺癌鑒別診斷中的診斷效能。統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均為雙側(cè)，<0.05被認(rèn)為是差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

B段音樂反復(fù)之后，接著是重復(fù)A段的“勞動(dòng)呼聲”。然后進(jìn)入C段音樂。這一段音樂好像是一位健壯勞動(dòng)者的“男中音獨(dú)唱”，左手以壯健、飽滿的和聲給予襯托：

本研究得到南京醫(yī)科大學(xué)和徐州醫(yī)科大學(xué)附屬淮安醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)［南醫(yī)大倫審（2019）234號(hào)］。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2 基因組DNA提取與重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化

采用FastPure FFPE DNA Isolation Kit試劑盒（諾維贊）提取石蠟包埋組織切片的DNA。采用EZ-96 DNA Methylation Kit 試劑盒（Zymo Research）對(duì)1 μg DNA進(jìn)行重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化。

從土塞效應(yīng)形成機(jī)理、影響因素及力學(xué)分析出發(fā)，對(duì)以密實(shí)砂層為持力層的開口鋼管樁土塞效應(yīng)計(jì)算適當(dāng)簡(jiǎn)化， 推演得出可運(yùn)用于水運(yùn)工程規(guī)范計(jì)算開口鋼管樁豎向極限承載力的土塞效應(yīng)折減系數(shù)，并結(jié)合海利公式、高應(yīng)變動(dòng)力檢測(cè)對(duì)比分析，得出以下結(jié)論與建議：

HYAL2蛋白表達(dá)由兩名合格的病理學(xué)家根據(jù)染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比，使用半定量免疫反應(yīng)評(píng)分進(jìn)行獨(dú)立評(píng)估。染色強(qiáng)度的細(xì)胞評(píng)分為0到3分：0=無，1=弱，2=中等，3=強(qiáng)。陽(yáng)性細(xì)胞的百分比得分如下：0（0%～10%），1（11%～30%），2（31%～50%），3（51%～70%）和4（71%～100%）。染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比之和即為HYAL2表達(dá)水平的總分（0-7）。

1.3 引物設(shè)計(jì)及目的片段擴(kuò)增

Logistic 回歸結(jié)果提示，在校正年齡、性別和批次效應(yīng)后，_CpG_3 甲基化水平每降低10%，PTC患病風(fēng)險(xiǎn)增加51%（OR=1.51，95%：1.17-1.93，=0.001；表1）。_CpG_2甲基化水平降低及_CpG_4水平增加也與PTC風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)，但呈現(xiàn)邊緣性顯著（_CpG_2：OR=1.18，95%：1.00-1.39，=0.054；_CpG_4：OR=0.83，95%：0.68-1.02，=0.075；表1）。尚未觀察到_CpG_1 與PTC的關(guān)聯(lián)。

(4)礦質(zhì)混合料比例的確定。首先對(duì)組成材料進(jìn)行篩分，收集原始數(shù)據(jù)，然后計(jì)算材料配合比，最后是配合比調(diào)整?；旌狭系募?jí)配應(yīng)選擇連續(xù)級(jí)配或合理的間斷級(jí)配。

1.4 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDITOF）半定量檢測(cè)甲基化水平

MALDI-TOF（Agena）用于半定量檢測(cè)本研究中所有樣本的甲基化水平。其操作流程已在前期研究中詳述。在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入蝦堿性磷酸鹽孵育，再加入TCleavage反應(yīng)體系37 ℃孵育3 h，最后用樹脂進(jìn)行去離子化操作。產(chǎn)物離心后將微量上清上樣到384SpectroCHIP 進(jìn)行飛行時(shí)間質(zhì)譜分析。通過SpectroACQUIRE v3.3.1.3 軟件收集數(shù)據(jù)，并在MassArray EpiTyper v1.2軟件上實(shí)現(xiàn)可視化。

將FFPE切片脫蠟并固定在硅烷涂層的載玻片上。將其與多克隆兔抗HYAL2抗體在4 ℃搖床上緩慢搖動(dòng)孵育過夜（ab68608）。隨后，采用ultraView Universal DAB Detection Kit（Roche）進(jìn)行檢測(cè)。

1.5 甲狀腺腫瘤組織免疫組化及其評(píng)估

運(yùn)用公式分別計(jì)算各類型文物在各朝代(或時(shí)代)和各市州分布的標(biāo)準(zhǔn)差[23-24]，其中Sj為j類型文物的時(shí)間或空間分布的標(biāo)準(zhǔn)差，Xij為i朝代(或時(shí)代)或市州的j類型文物的數(shù)量,為j類型文物時(shí)間或空間的平均值.

近日，國(guó)家衛(wèi)健委、國(guó)務(wù)院扶貧辦聯(lián)合印發(fā)的《貧困地區(qū)健康促進(jìn)三年攻堅(jiān)行動(dòng)方案》（以下簡(jiǎn)稱“《方案》”）提出，到2020年實(shí)現(xiàn)貧困地區(qū)居民健康教育全覆蓋。

1.2.6 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)miR-454-3p對(duì)SW480細(xì)胞侵襲能力的影響 將以無血清細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋的Matrigel基質(zhì)膠包被transwell小室基底膜的上室表面,加入100 μL無血清培養(yǎng)基稀釋的各組細(xì)胞懸液,在小室下層孔板中加入含10%血清的完全培養(yǎng)液，置于37℃孵箱培養(yǎng)培養(yǎng)24 h后取出培養(yǎng)小室的,濕棉簽輕輕拭去上層小室內(nèi)的基質(zhì)膠和細(xì)胞，4%多聚甲醛固定后行結(jié)晶紫染色，晾干后，顯微鏡下選5個(gè)視野計(jì)數(shù)穿出細(xì)胞數(shù)目。

本研究中所有的PTC 病例和良性腫瘤均平行處理。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

沖砂支洞的開挖也較特殊，使用高峰質(zhì)點(diǎn)速度控制技術(shù)，從現(xiàn)場(chǎng)和檢測(cè)數(shù)據(jù)顯示，即保證了隧洞開挖質(zhì)量和速度，又保證了永久砼襯砌不被干擾。說明在這種條件下爆破施工可以保證質(zhì)量和安全。

2 結(jié)果

2.1 HYAL2基因啟動(dòng)子區(qū)域DNA甲基化水平改變與甲狀腺腫瘤的關(guān)聯(lián)

基于前期研究，本研究圍繞cg27091787位點(diǎn)進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，得到位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)（TSS）1500 bp位置（啟動(dòng)子區(qū)域）處長(zhǎng)度為220 bp的擴(kuò)增片段，共包含4個(gè)CpG 位點(diǎn)。正向引物：aggaagagagTGGGGTTTATTT TTAAATTTAGTAGGG；反向引物：cagtaatacgactcact atagggagaaggctAACACATTATCCTATCACACAAAA TA；擴(kuò)增片段：TGGGGCCCATCCTCAAATCCAGT AGGGTGTGAGAGGATGGGGTCAGGTGGTGGTG CTTTTGGGAGTCAAAATACTTGGGGGTCGTTCA GCTGATGGTCCCCCAGAGCAGGTGCCCAAGAA GGGAACTAGCCTTGGGGGGAGGGTCGGGGGGA CTTCCAGTAGCTGAGTCCGTTTTTTTCCACTGA GAGCTTCCGCATCCTGTGTGACAGGACAATGTG TT（大寫字母表示特定于序列的區(qū)域，非特定標(biāo)記以小寫字母表示。引物和CpG位點(diǎn)上均不存在常見單核苷酸多態(tài)性）。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增目的片段，反應(yīng)體系包括經(jīng)重亞硫酸鹽處理的基因組DNA 1 μL，PCR CoralLoad緩沖液0.5 μL，DNA聚合酶0.05 μL，甲基化特異性上游引物0.5 μL，甲基化特異性下游引物0.5 μL，無酶水補(bǔ)齊至5 μL。190對(duì)樣本PCR實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)批次完成（批次1∶95例PTC95例甲狀腺腺瘤；批次2∶95例PTC95例甲狀腺腺瘤），每批次中良惡性腫瘤患者的年齡和性別均匹配。

為探討基因特定位點(diǎn)甲基化水平改變與早期PTC的關(guān)聯(lián)，我們進(jìn)一步排除了17位Ⅱ期PTC患者后進(jìn)行l(wèi)ogistic回歸，并調(diào)整了年齡、性別和批次效應(yīng)。與總?cè)巳褐薪Y(jié)果一致，_CpG_3甲基化水平降低與I期PTC 風(fēng)險(xiǎn)增加呈現(xiàn)穩(wěn)健的正相關(guān)聯(lián)（OR=1.42，95%：1.10-1.83，=0.007；表2）。_CpG_1 甲基化水平降低和_CpG_4水平增加則與I期PTC風(fēng)險(xiǎn)增加呈現(xiàn)邊緣性關(guān)聯(lián)（_CpG_2：OR=1.19，95%：1.00-1.41，=0.050；_CpG_4：OR=0.80，95%：0.65-1.00，=0.048；表2）。

2.2 年齡分層分析中HYAL2基因甲基化水平改變與甲狀腺腫瘤的關(guān)聯(lián)

為了消除年齡的混雜效應(yīng)，我們以50歲為臨界點(diǎn)對(duì)研究人群進(jìn)行分組。在任一年齡組中，均觀察到_CpG_3甲基化水平降低的對(duì)象，其PTC風(fēng)險(xiǎn)升高。且_CpG_3甲基化水平每降低10%，低年齡組對(duì)象的PTC風(fēng)險(xiǎn)顯著高于高年齡組對(duì)象（<50歲：OR=1.89，95%：1.20-2.98，=0.006；≥50 歲：OR=1.37，95%：1.02-1.84，=0.035；表3）。此外，僅在年齡<50歲人群中良惡性甲狀腺腫瘤組織中觀察到_CpG_4甲基化水平差異（OR=0.47，95%：0.30-0.75，=0.035；表3）。尚未觀察到其他位點(diǎn)甲基化水平改變與PTC事件的關(guān)聯(lián)。

2.3 HYAL2基因甲基化改變作為甲狀腺良惡性腫瘤鑒別診斷標(biāo)志物的價(jià)值

校正年齡、性別、批次效應(yīng)后，總?cè)巳褐星€下面積（AUC）為0.671（95%：0.617-0.725，=9.518E-09；圖1A），對(duì)應(yīng)的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（PPV）和陰性預(yù)測(cè)值（NPV）分別為74.07%，52.94%，61.40%和66.90%（表4）。排除Ⅱ期PTC 病例后，AUC 為0.666（95%：0.611-0.722，=4.897E-08；圖1B），對(duì)應(yīng)的靈敏度、特異度、PPV 和NPV 分別為50.29%，74.87%，64.90%和61.90%（表4）。按照年齡分組后，在年齡小于50歲的對(duì)象中，AUC為0.787（95%：0.712-0.862，=3.071E-09；圖1C），靈敏度為92.50%，特異度為52.31%，PPV為70.5%，NPV為85.0%（表4）。然而，在年齡≥50歲的病例中，AUC為顯著降低，為0.614（95%：0.542-0.687，=0.003；圖1D），靈敏度為59.63%，特異度為60.66%，PPV為57.5%，NPV為62.7%（表4）。

2.4 甲狀腺良惡性腫瘤中HYAL2蛋白表達(dá)水平評(píng)估

在另一組55對(duì)年齡、性別匹配的甲狀腺良惡性腫瘤人群中，我們?cè)u(píng)估了其HYAL2蛋白的表達(dá)水平。免疫組化結(jié)果顯示甲狀腺腺瘤組織（圖2A、B）和早期PTC（圖2C、D）組織切片的染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比呈現(xiàn)顯著差異。經(jīng)Mann-Whitney檢驗(yàn)分析，PTC組織化學(xué)評(píng)分顯著高于良性腫瘤組織（=7.30E-05；圖2E）。

3 討論

DNA甲基化改變因其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的重要作用受到廣泛研究。盡管有研究提示DNA甲基化能較好地區(qū)分甲狀腺癌和癌旁正常組織、不同亞型甲狀腺癌的組織學(xué)特征，然而目前關(guān)于DNA甲基化和甲狀腺癌的相關(guān)研究十分有限。既往研究發(fā)現(xiàn)外周血基因甲基化水平降低是早期頭頸部腫瘤，早期乳腺癌及早期胰腺癌的潛在分子標(biāo)志物。此外，基因甲基化水平改變還與三陰性乳腺癌和結(jié)腸癌的預(yù)后相關(guān)。因此，本研究基于190對(duì)年齡性別匹配的甲狀腺良惡性腫瘤樣本分析了基因特定CpG位點(diǎn)甲基化水平的差異。本研究結(jié)果表明，基因甲基化水平降低與早期PTC之間存在顯著關(guān)聯(lián)，且在I期PTC中，該關(guān)聯(lián)依舊穩(wěn)健。類似地，我們前期研究發(fā)現(xiàn)乳腺惡性腫瘤中基因甲基化水平高于乳腺良性腫瘤。此外，體外研究顯示與非致癌乳腺細(xì)胞相比，乳腺癌細(xì)胞呈現(xiàn)較高的HYAL2表達(dá)水平，且經(jīng)去甲基化試劑處理后，其表達(dá)水平進(jìn)一步增加。

研究表明DNA甲基化譜與年齡密切相關(guān)。甲狀腺癌發(fā)病率自15歲開始升高，在50～54歲達(dá)到最大值，此外，2019年中國(guó)甲狀腺癌疾病負(fù)擔(dān)數(shù)據(jù)顯示，50～54歲甲狀腺癌患者占比最高。為了消除年齡的混雜效應(yīng)，我們以50歲為臨界點(diǎn)對(duì)研究人群進(jìn)行分組。盡管本研究中年齡分層分析表明低年齡組和高年齡組中均觀察到基因甲基化改變與PTC的關(guān)聯(lián)，但該關(guān)聯(lián)在低年齡人群中顯著強(qiáng)于高年齡組。ROC曲線下面積也支持基因甲基化改變?cè)诘湍挲g組人群中具有更高的預(yù)測(cè)價(jià)值。本研究中，與≥50 歲的人群相比，<50歲的低年齡人群的基因低甲基化和甲狀腺癌具有更強(qiáng)的關(guān)聯(lián)。相應(yīng)的研究表明，隨著生活環(huán)境的改變，PTC疾病負(fù)擔(dān)呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)，尤其是在30～49歲女性人群中。此外，本研究中女性和男性患者人數(shù)為3.75∶1。雌激素是甲狀腺癌的重要危險(xiǎn)因素之一。中國(guó)女性絕經(jīng)的平均年齡是49歲，即我們低年齡組（<50歲）的女性大多數(shù)尚未絕經(jīng)。因此我們推測(cè)低年齡組患者PTC風(fēng)險(xiǎn)升高還受雌激素水平的影響。此外，隨著年齡增加，促進(jìn)甲狀腺癌的危險(xiǎn)因素不斷堆積，弱化了基因DNA甲基化改變與早期甲狀腺癌的關(guān)聯(lián)。然而，由于本研究對(duì)象來自醫(yī)院，缺乏相關(guān)的生活習(xí)慣等信息，且亞組中樣本量有限，因此建立信息完整的前瞻性隊(duì)列研究更能反映歸因于基因DNA 甲基化改變的PTC 風(fēng)險(xiǎn)。盡管年齡對(duì)于基因DNA甲基化異常和PTC關(guān)聯(lián)的影響尚未完全闡明，但這提示我們?cè)谘芯緿NA 甲基化水平與PTC風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，應(yīng)校正年齡的影響。

此外，我們通過檢測(cè)另外55對(duì)年齡、性別匹配的早期PTC和甲狀腺腺瘤患者FFPE組織中HYAL2的蛋白表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)早期PTC病例中的HYAL2表達(dá)水平顯著高于良性腫瘤。不同的是，基因位于染色體3p21.3區(qū)域，該區(qū)域基因缺失常常導(dǎo)致癌癥的發(fā)生。然而，有研究報(bào)道是一種功能拮抗性基因。類比于同樣位于此區(qū)域的同家族基因HYAL1，HYAL2的促癌或抗癌作用也可能受其濃度及癌癥種類影響，但尚無相關(guān)研究。此外，HYAL2還可能通過影響CD44前體可變剪接而發(fā)揮促纖維化或抗纖維化作用。因此，HYAL2表達(dá)與癌癥的關(guān)聯(lián)仍值得進(jìn)一步探索。值得說明的是本研究中目的序列位于TSS1500區(qū)域（啟動(dòng)子區(qū)域），該區(qū)域DNA 甲基化水平負(fù)向調(diào)控基因表達(dá)。我們推測(cè)基因可能通過上調(diào)啟動(dòng)子區(qū)域特定位點(diǎn)甲基化水平而促進(jìn)其蛋白表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)癌癥的發(fā)生。因此，后續(xù)的功能實(shí)驗(yàn)將有利于闡明HYAL2基因DNA甲基化改變調(diào)控PTC發(fā)生的可能機(jī)制。

本研究是首個(gè)探討基因DNA甲基化水平改變與甲狀腺良惡性腫瘤關(guān)聯(lián)的研究。不同于多數(shù)基于癌癥和癌旁組織的鑒別診斷，本研究聚焦于甲狀腺良惡性腫瘤的鑒別，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。在DNA甲基化水平分析的基礎(chǔ)上，我們還進(jìn)一步補(bǔ)充下游蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。此外，基于質(zhì)譜的DNA甲基化水平檢測(cè)手段具有高分辨率、高靈敏度和高重復(fù)性等特點(diǎn)，增強(qiáng)了本研究結(jié)果的可靠性。另外，本研究中仍然存在一些局限性，首先本研究為單一中心來源的病例對(duì)照研究，仍需要多中心研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行驗(yàn)證。由于FFPE組織量不足，DNA甲基化和蛋白質(zhì)表達(dá)數(shù)據(jù)來自不同人群，是本研究另一主要不足之處，在一定程度上削弱了DNA甲基化改變與PTC關(guān)聯(lián)的可解釋性。

綜上所述，我們的研究揭示了基因啟動(dòng)子區(qū)域DNA甲基化水平改變與早期PTC之間存在顯著關(guān)聯(lián)，尤其是在年齡低于50歲的人群中。本研究支持了DNA甲基化改變?cè)诩谞钕倭紣盒阅[瘤鑒別診斷中的價(jià)值，但仍需要大樣本的前瞻性隊(duì)列研究和功能試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。