田羽軒，張占鵬

（中檢科（北京）測試技術(shù)有限公司，北京 100088）

0 引言

化妝品的質(zhì)量和安全問題歷來受到廣泛的重視。我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2007）中有1286種以上的違禁物質(zhì)；限用物質(zhì)73種（類），56種限用防腐劑，28種限用防曬劑，盡管這些物質(zhì)對人體都有一定的毒性和不良反應(yīng)，但是一些公司出于經(jīng)濟(jì)利益的考慮，在某些產(chǎn)品中非法加入違禁物質(zhì)，以達(dá)到某些特定的效果，比如美白祛痘等。長期使用此類化妝品，會對身體產(chǎn)生各種急性和慢性傷害。所以，對化妝品中有毒有害物質(zhì)的檢測手段進(jìn)行研究，既可以增強(qiáng)國家對其進(jìn)行監(jiān)督，又可以保護(hù)消費(fèi)者的權(quán)益和身體健康。目前，化妝品的檢測方法主要有HPLC、液相色譜、液相色譜、液相色譜、毛細(xì)管電泳等。根據(jù)檢驗(yàn)對象的種類，介紹了近年來最新的樣品預(yù)處理技術(shù)及測試技術(shù)，為化妝品檢驗(yàn)的研究工作提供借鑒。

1 化妝品過敏原

1.1 防腐劑

作為最常見的致敏源，防腐劑可以分為三大類：抗菌劑、抗氧化劑和紫外線吸收劑?？咕鷦┯挚煞譃椋杭兹?、甲醛、非甲醛、季銨鹽-15、雙咪唑烷基脲、咪唑烷基脲、2-溴-2-2-硝基-1,3-丙二醇、DMDMH等。無甲醛可釋出的防腐劑有：對羥基苯甲酸、卡松、MDBGN-PE、IPBC等，有必要注意的是尼泊金酯類的防腐劑，其化學(xué)結(jié)構(gòu)以甲基酯類為主；丙酯、芐酯等，短鏈能有效地抑制細(xì)菌，而長鏈則能有效地抵抗真菌，所以它們通常被用作混合劑，其含量高達(dá)0.8%。尼泊金酯是一種比較微弱的變態(tài)反應(yīng)，一般用在損傷皮膚上會導(dǎo)致過敏。

1.2 香料

在化妝品工業(yè)中，人們經(jīng)常使用香料來掩飾其他的化學(xué)物質(zhì)，使人們感到舒服。在化妝品中，常用的香料是最常用的香料。歐盟化妝品與非食物科學(xué)理事會將26種致敏性的芳香化合物列入化妝品中，以限制或禁止使用?；瘖y品的香味是導(dǎo)致濕疹的主要原因，其中30%～40%是由化妝品的香味物質(zhì)引起的，而這些香味物質(zhì)可能會導(dǎo)致皮膚炎癥或者是光敏性的接觸性皮炎。

1.3 對苯二胺

對苯二胺是繼香水、防腐劑之后，導(dǎo)致皮膚變態(tài)反應(yīng)的主要原因。對苯二胺在頭發(fā)中的角質(zhì)具有很高的親和性，它的氧化作用就是染色后的染色。它是最有效的染發(fā)劑，同時(shí)也是最可能對人類健康造成威脅的一種物質(zhì)。有報(bào)告稱，有2.8%的人對苯二胺反應(yīng)呈陽性，而染發(fā)過敏者對苯二胺的陽性率為 97.4%。對苯二胺的變態(tài)反應(yīng)發(fā)生率很高，而慢性的過敏性皮膚炎可導(dǎo)致頭皮持續(xù)發(fā)癢，甚至脫發(fā)；急性反應(yīng)可導(dǎo)致皮膚發(fā)紅、流出、滲出液體，嚴(yán)重時(shí)會影響到眼睛、脖子、甚至整個身體。

1.4 其他過敏原

隨著人們對化妝品的要求越來越高，越來越多的化妝品以滿足消費(fèi)者的需要，例如：美白、防曬等；除皺產(chǎn)品，祛斑產(chǎn)品，以及在產(chǎn)品中加入植物和中藥的成分也日益受到人們的歡迎。而從植物和中藥中提取的部分則會變成某些具有一定的過敏源。茶樹油在香皂，除臭劑，牙膏，漱口液，刮臉油中得到了廣泛的應(yīng)用。乳液中的潤滑劑、防曬霜中的紫外線吸收、抗皺霜、眼霜中的收斂、美白產(chǎn)品中的某些增白劑都會使你的皮膚變得敏感。指甲油中含有的甲醛、甲苯磺酰胺等，屬于比較常見的過敏原。對化妝品中的防曬成分進(jìn)行了分析，結(jié)果表明：對苯甲酸、二苯酮、肉桂酸鹽、水楊酸鹽、甲基亞芐亞基樟腦等均有可能導(dǎo)致皮膚過敏。近年來，-羥基酸被大量應(yīng)用于化妝品，具有潤膚、去皺、促進(jìn)細(xì)胞再生等功效，但其會透過表皮屏障增強(qiáng)皮膚對紫外線的敏感性，從而導(dǎo)致皮膚發(fā)癢、皮膚發(fā)紅、皮膚發(fā)黑等不良反應(yīng)。另外，也存在著抗氧化劑、抗菌劑、乳化劑等。

2 過敏成分的檢測方法

2.1 斑貼試驗(yàn)

斑貼試驗(yàn)主要是為了鑒別化妝品的變態(tài)反應(yīng)，并對變態(tài)反應(yīng)的原因進(jìn)行分析。選用符合條件的人群，使用標(biāo)準(zhǔn)斑紋測試設(shè)備進(jìn)行斑紋測試，根據(jù)斑紋測試結(jié)果進(jìn)行主觀評定，通過統(tǒng)計(jì)和分析，確定致敏性和致敏性。斑貼實(shí)驗(yàn)是根據(jù)一系列的過敏原，包括最常見的過敏源，以及對過敏病人所提供的疑似的化妝品和成份進(jìn)行斑貼實(shí)驗(yàn)，并在實(shí)驗(yàn)對象與志愿者的肌膚接觸一段時(shí)間后，觀察到受試者與肌膚的接觸所造成的紅色、干燥；通過對臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)、分析，確定其過敏源和變態(tài)反應(yīng)的程度。許多學(xué)者都是采用斑點(diǎn)貼實(shí)驗(yàn)來發(fā)現(xiàn)過敏源，而斑貼實(shí)驗(yàn)是一種不可替代的方法。

2.2 香料的檢測

目前，常用的氣-質(zhì)聯(lián)用、高效液相法對化妝品中的芳香物質(zhì)進(jìn)行分析。GB/T24800.10-2009標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了十九種香料的氣-質(zhì)聯(lián)用方法。王超等采用毛細(xì)管 GC—MS技術(shù)，對16種香料進(jìn)行了分析，其回收率為82.3%～108.2%，精密度為1.6～4.7%，檢出限為10mg/kg，具有較高的準(zhǔn)確度和較低的檢出限。J.Pablo Lamas等建立了一種新的氣-質(zhì)結(jié)合后固相分散加壓液相萃取技術(shù)，用于分析化妝品中26種可能的香料過敏源。

2.3 防腐劑的檢測

王健輝等以RP-HPLC法測定了化妝品中的重氮烷基脲，對羥基苯甲酸酯和對羥基苯甲酸丙酯，其回收率為97.3%～102%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差3.6%～8.2%。馮靚等建立了一種高效液相色譜法，能同時(shí)檢出12種不同的防腐劑，其回收率為87.4%～139%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.16～5.81%。通過使用GC法，對15種化妝品中的防腐劑進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，樣品的檢出率為86.3%～103.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.3～4.7%，與標(biāo)準(zhǔn)值的相關(guān)性為0.997。

Bousquet利用HPLC和電化學(xué)檢測器對化妝品中的山梨酸和十一碳烯酸進(jìn)行了測定，結(jié)果顯示該方法適用于某些含山梨酸的復(fù)雜化妝品中的成分。武婷等以RP-HPLC方法對24種化妝品中的苯甲醇、山梨酸、苯氧乙基醇進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，該方法的回收率為90.6%～97.8%，標(biāo)準(zhǔn)偏差1.3%～3.3%。

2.4 芳香類物質(zhì)的檢測

在芳香性變應(yīng)原的檢測方面，主要采用氣-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)和HPLC方法。王超等采用毛細(xì)管GC—MS法對16種香料進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，16種香料的回收率為88.3%～108.2%，精確度為0.6%～4.7%，檢測限為10mg/kg。本方法具有較高的精確度、敏感性、樣品量小、預(yù)處理方便等優(yōu)點(diǎn)。Niederer等采用容積排阻色譜和氣相色譜-質(zhì)譜相結(jié)合的方法，對24種化妝品的致敏揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行了預(yù)處理，利用排阻色譜技術(shù)對樣品進(jìn)行預(yù)處理，由于其易于溶于化妝品中，導(dǎo)致部分組分含量下降，甚至失去，從而導(dǎo)致檢測困難。Sgorbini等采用膠帶吸附提取與層析質(zhì)譜相結(jié)合的方法對化妝品中某些易揮發(fā)的可疑變態(tài)反應(yīng)進(jìn)行了定量分析，結(jié)果表明，本方法具有較高的可信性，可以對化妝品、藥品的直接或間接的皮膚滲入進(jìn)行測定，并對某些成分、生物衍生物及標(biāo)記物進(jìn)行了評估。馬強(qiáng)等采用固相萃取—同位素稀釋—GC—串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，對化妝品中的二甲苯麝香進(jìn)行了測定。J Pablo Lamas等采用固相分散加壓液相萃取技術(shù)對化妝品中的疑似芳香性致敏源進(jìn)行了分析，Villa等人則使用HPLC對24種芳香性變應(yīng)源進(jìn)行了測定。

2.5 其他物質(zhì)的檢測

染發(fā)劑會導(dǎo)致皮膚敏感，但目前所報(bào)告的測試方法中并沒有太多的檢測指標(biāo)。用氣相色譜法、GC-MS法、HPLC法測定染發(fā)劑中的對苯二胺含量法。劉麗等對氧化染發(fā)劑中含有苯酚和鄰苯二酚的16種染料進(jìn)行了分析；鄰苯二胺，間苯二酚，間氨基苯酚，對苯二胺，間苯二胺，鄰氨基茴香，對氨基茴香醚等。羅紹強(qiáng)等利用RP-HPLC色譜-二極管列陣檢測器，對美白日霜中4-甲基芐基樟腦、丁基甲氧基肉桂酸乙基己酯、甲氧基肉桂酸乙基己酯三種防曬劑進(jìn)行了分析。目前，紫外線吸收劑主要采用HPLC法，祛斑組分等檢測手段比較多，例如：GC、液相色譜、TLC、GC、質(zhì)譜聯(lián)用等。

3 結(jié)語

總之，化妝品的過敏性問題是一個很復(fù)雜的問題，導(dǎo)致過敏的物質(zhì)種類很多，在檢測過敏物質(zhì)方面也沒有太大的突破。目前，對變態(tài)反應(yīng)病人的變應(yīng)原仍以斑貼法為主，但其操作復(fù)雜、煩瑣。質(zhì)譜法和其他的分析方法比較煩瑣，成本也比較高。因此，有必要研制出一種能夠迅速商業(yè)化的快速檢測方法，模擬殺蟲劑的免疫測試也是一種有意義的探索。此外，開發(fā)安全、健康、有效的化妝品也是目前化妝品過敏癥的一個重要課題。提高化妝品的安全水平，既能滿足顧客的需求，又能促進(jìn)整個行業(yè)的健康、穩(wěn)定發(fā)展。