張潔 朱文倩 夏明聰 孫潤(rùn)紅 武超 徐文 陳穎 楊麗榮

摘要 南方根結(jié)線蟲Meloidogyne incognita引起的根結(jié)線蟲病已經(jīng)成為我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的重要威脅，利用生物防治的方法控制根結(jié)線蟲病是一種安全有效的植保措施。本研究在日光大棚探究不同劑量的生物菌肥YB-04對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防治效果，并利用Biolog-Eco板研究YB-04對(duì)番茄根圍土壤微生物群落功能的影響。結(jié)果顯示，不同劑量的YB-04菌肥均能顯著降低土壤中根結(jié)線蟲的數(shù)量和番茄植株的根結(jié)指數(shù)，其中YB-04 300 kg/hm2溝施處理的線蟲減退率和防治效果分別達(dá)66.0%和63.5%，且增產(chǎn)效果達(dá)20.2%。同時(shí)，番茄根圍土壤微生物對(duì)碳源利用率增多，Shannon指數(shù)、McIntosh指數(shù)和豐富度指數(shù)顯著增高，PCA分析結(jié)果顯示土壤微生物群落功能與對(duì)照有明顯差異。結(jié)果表明，YB-04生物菌肥既具有防病促生功能，又能改善土壤微生物群落功能，具有較大開發(fā)利用前景。

關(guān)鍵詞 根結(jié)線蟲; 生物防治; 生物菌肥; 防治效果

中圖分類號(hào)： S436.412.19

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2021009

Abstract The root-knot nematode Meloidogyne incognita has become a great threat to agricultural production. Biological control is a safe and effective measure. In this study， the effects of different doses of YB-04 bioorganic fertilizer against root-knot nematode were measured in a sunlight greenhouse， and the influence of YB-04 bioorganic fertilizer on the function of microbial community in tomato rhizosphere soil was studied using Biolog-Eco plates. The results showed that the number of nematode in soil and the root-knot index of tomato were significantly reduced after applying different doses of YB-04 bioorganic fertilizer. The nematode reduction rate and control efficacy of YB-04 300 kg/hm2 applying along the rows reached 66.0% and 63.5%， respectively， with a yield increase of 20.2%. The utilization ratios of carbon sources， the Shannon-Wiener index， McIntosh index and richness index of microorganisms in the rhizosphere soil in the treatment group with YB-04 300 kg/hm2 were significantly higher than that of the control. PCA analysis also showed that the function of soil microbial communities was significantly different from that of the control. The results indicated that YB-04 bioorganic fertilizer not only controlled root-knot nematode effectively and promoted plant growth， but also improved soil microbial community function， which have great potential for the management of root-knot nematodes.

Key words root-knot nematode; biological control; bioorganic fertilizer; control efficacy

根結(jié)線蟲Meloidogyne spp.是一種在全世界發(fā)生和分布的植物內(nèi)寄生線蟲，寄主種類達(dá)到3 000多種，嚴(yán)重威脅著世界農(nóng)業(yè)的安全生產(chǎn)[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年因根結(jié)線蟲病害造成的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)損失達(dá)1 000億美元[2]。近年來我國(guó)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)逐漸轉(zhuǎn)變，蔬菜種植面積不斷擴(kuò)大，日光溫室栽培面積和復(fù)種指數(shù)不斷增加，根結(jié)線蟲病發(fā)生日益加重，成為我國(guó)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的主要障礙[34]。番茄是對(duì)根結(jié)線蟲最為敏感的作物之一。為害我國(guó)番茄的主要是南方根結(jié)線蟲Meloidogyne incognita，其次為爪哇根結(jié)線蟲M.javanica和花生根結(jié)線蟲M. arenaria [5]。番茄受害后側(cè)根形成多個(gè)根結(jié)，水分和養(yǎng)料的運(yùn)輸受阻，導(dǎo)致番茄植株矮小瘦弱，類似肥水不足癥，一般能造成減產(chǎn)25%，嚴(yán)重時(shí)可達(dá)60%，甚至絕產(chǎn)[67]。

隨著人類經(jīng)濟(jì)文化水平的提高，人們對(duì)生態(tài)環(huán)境和食品安全提出了更高的要求，開發(fā)安全高效的生防制劑刻不容緩。生防微生物對(duì)生態(tài)環(huán)境安全友好，是實(shí)現(xiàn)農(nóng)藥“減施增效”的有效途徑[89]。近年來，越來越多的線蟲生防微生物被發(fā)現(xiàn)，但是生防菌施入到環(huán)境中后往往受土壤、氣候和人為條件等多種因素的影響，防效不穩(wěn)定，很難達(dá)到理想效果。有研究表明，將生防菌添加到有機(jī)肥中是一種促進(jìn)生防菌定殖并穩(wěn)定發(fā)揮防效的重要方法[1011]。生物菌肥無污染、無公害，既能達(dá)到一定的防治效果，又能改善連作土壤環(huán)境，促進(jìn)作物生長(zhǎng)發(fā)育[12]。目前，很多學(xué)者試圖利用含有線蟲拮抗菌和其他有益菌的生物菌肥控制線蟲病害的發(fā)生并調(diào)節(jié)土壤微生物區(qū)系。解淀粉芽胞桿菌Bacillus amyloliquefaciens XZ-173、吉氏芽胞桿菌B.gibsonii SL-25和多黏類芽胞桿菌Paenibacillus polymyxa KS-62與有機(jī)肥混合制成的生物菌肥能夠顯著降低番茄植株上的根結(jié)數(shù)和蟲卵數(shù)，且對(duì)番茄植株具有較好的促生作用[13];王立偉等[14]發(fā)現(xiàn)施用生物菌肥不僅能改善番茄連作土壤的有機(jī)質(zhì)含量、土壤酸堿度，增加土壤中堿解氮、速效磷和速效鉀含量，另一方面還能增加設(shè)施番茄連作土壤中微生物數(shù)量，提高植株抗根結(jié)線蟲病的能力。楊婷等[15]報(bào)道以淡紫紫孢菌Purpureocillium lilacinum、橄欖色鏈霉菌Streptomyces olivaceus和假格里尼翁蒼白桿菌Ochrobactrum pseudogrignonense為主要成分的復(fù)合微生物菌肥對(duì)生菜上南方根結(jié)線蟲的防治效果為34.9%，還能促進(jìn)生菜的株高和鮮重，具有一定的增產(chǎn)作用。

施用生物菌肥防治根結(jié)線蟲安全、高效，經(jīng)濟(jì)效益高，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有重要意義，但目前能夠應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)的生物菌肥還比較少?；诖耍狙芯坷们捌诤Y選出來的線蟲生防菌甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌Bacillus methylotrophicus YB-04菌株，從生物菌肥的角度來防治根結(jié)線蟲，利用室內(nèi)盆栽和日光大棚試驗(yàn)研究其生防效果，并利用Biolog-Eco微平板法分析YB-04生物菌肥對(duì)土壤微生物群落功能的影響，為YB-04菌肥的進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及供試大棚

YB-04生物菌肥由甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌Bacillus methylotrophicus菌體濃縮物（5億cfu/g）、氨基寡糖素、腐殖酸和草炭粉按照質(zhì)量比0.99∶0.01∶5∶94混合而成（專利申請(qǐng)?zhí)枺篊N 201810096832.6）;0.5%阿維菌素顆粒劑（GR）由諾普信農(nóng)化股份有限公司（中國(guó)，深圳）提供。供試番茄品種為‘金棚秋盛’，由河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所提供。含31種碳源的生態(tài)板（Biolog-Eco）由美國(guó)Biolog公司提供。

日光大棚試驗(yàn)地點(diǎn)位于河南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究開發(fā)基地，該科技示范園常年使用大棚種植黃瓜、番茄、茄子等果蔬且根結(jié)線蟲病發(fā)生嚴(yán)重。試驗(yàn)期間未使用其他任何化學(xué)農(nóng)藥，番茄移栽前采用Z字形取樣法采集0～30 cm的土壤樣品，利用貝曼漏斗法分離根結(jié)線蟲，測(cè)定得到土壤中線蟲初始種群密度為（850±76）條/100 g，病原線蟲經(jīng)鑒定確定為南方根結(jié)線蟲。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 室內(nèi)盆栽試驗(yàn)

在根結(jié)線蟲病發(fā)生嚴(yán)重的大棚中采集發(fā)病番茄根結(jié)，用清水沖洗干凈，剪成0.5 cm的小段，用1% NaClO消毒2 min，用玻璃棒拍打后收集根結(jié)線蟲卵粒，經(jīng)沖洗與離心得卵粒懸浮液，將卵粒懸浮液置于（28±0.5）℃的恒溫箱中孵化5～7 d后收集2齡幼蟲，經(jīng)沖洗與離心得2齡幼蟲懸浮液（1 000條/mL）備用。室內(nèi)盆栽試驗(yàn)設(shè)置4個(gè)處理：5億cfu/g YB-04生物菌肥6.7、13.4 g/株穴施，0.5%阿維菌素GR 2 g/株穴施和空白對(duì)照。番茄移栽前穴施菌肥和阿維菌素，用無菌土將其覆蓋1 cm深度后，將1株番茄幼苗移栽至穴中，重復(fù)9次，在（25±2）℃氣候室內(nèi)培養(yǎng)，番茄移栽一周后，在距離番茄根5 cm處對(duì)稱打2個(gè)1 cm深的小孔，注入線蟲懸浮液，每株接種1 000條。移栽35 d后，根據(jù)線蟲分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病情調(diào)查[16]，記載病情級(jí)別，計(jì)算根結(jié)指數(shù)和防治效果。同時(shí)調(diào)查各處理中番茄植株的株高、地上部鮮重和地下部鮮重。

1.2.2 日光大棚試驗(yàn)

YB-04生物菌肥對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的大棚防效試驗(yàn)共設(shè)置以下4個(gè)處理：5億cfu/g YB-04菌肥150、300 kg/hm2溝施，0.5%阿維菌素GR 45 kg/hm2溝施和空白對(duì)照。每處理3個(gè)重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。YB-04生物菌肥及阿維菌素均在番茄移栽前施用，番茄采取高壟雙行種植，株距45 cm，行距60 cm，每小區(qū)24 m2。移栽后90 d，用打孔器取0～30 cm的土壤樣品，每小區(qū)取15點(diǎn)，利用貝曼漏斗分離土壤中的根結(jié)線蟲，調(diào)查土壤中的根結(jié)線蟲密度并計(jì)算線蟲減退率。線蟲減退率=（對(duì)照線蟲數(shù)-處理線蟲數(shù)）/對(duì)照線蟲數(shù)×100%。

此外，每小區(qū)隨機(jī)取15株番茄植株調(diào)查發(fā)病情況。番茄移栽60 d后每小區(qū)隨機(jī)調(diào)查15株番茄植株的地上部株高、鮮重、莖粗、最大葉長(zhǎng)和最大葉寬，分析不同處理對(duì)番茄植株生長(zhǎng)的影響。在番茄生長(zhǎng)期間按批次收獲番茄并記錄產(chǎn)量，分析不同處理對(duì)番茄產(chǎn)量的影響。

1.2.3 生物菌肥對(duì)番茄根圍土壤微生物群落功能多樣性的影響

在上述日光大棚防治試驗(yàn)中，在番茄移栽60 d后，以五點(diǎn)取樣法采集5億cfu/g YB-04菌肥300 kg/hm2 溝施處理和空白對(duì)照中的番茄根圍土壤，利用Biolog-Eco板分析不同處理根圍土壤微生物群落功能多樣性。Biolog-Eco板含有31種碳源，分為氨基酸類、糖類、羧酸類、胺/氨類、雙親化合物及聚合物6類物質(zhì)[17]。樣品具體處理步驟：1）取1 g土樣加入99 mL無菌蒸餾水;2）在搖床中160 r/min振蕩培養(yǎng)20 min;3）4℃冰箱靜置30 min，取上清液;4）用8通道電動(dòng)移液器向Biolog-Eco板每孔加入150 μL上清液;5）置于（25±0.5）℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)120 h，每隔24 h讀取各孔在590 nm（顏色+濁度）和750 nm（濁度）波長(zhǎng)下的吸光度，微生物代謝活性用590 nm下的吸光度減去750 nm下的吸光度表示，其中數(shù)值小于0.06時(shí)按0處理。分別計(jì)算孔的平均顏色變化率（average well color development，AWCD）[18]、Shannon指數(shù)[19]、McIntosh指數(shù)[20]和豐富度指數(shù)[21]，并利用各樣品72 h的AWCD值進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PCA）[22]。計(jì)算公式如下：

其中Ci代表所測(cè)定的第i個(gè)非對(duì)照孔的吸光度，R代表對(duì)照孔的吸光度;n代表碳源種類（本試驗(yàn)中為31）。

其中pi代表所測(cè)定的第i個(gè)非對(duì)照孔和對(duì)照孔的吸光度差值和整體總差的比值。

其中ni代表第i孔的相對(duì)吸光度（Ci-R）。

豐富度指數(shù)為被利用的碳源的總數(shù)目，即（Ci-R）的值大于0.25的孔數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2007和SPSS 21.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;采用單因素（One way ANOVA）和Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析和差異顯著性檢驗(yàn)（P<0.05）;利用Excel 2007軟件作圖，圖表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)盆栽條件下YB-04生物菌肥對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防治效果

從室內(nèi)盆栽結(jié)果可以看出（表1），5億cfu/g YB-04生物菌肥6.7、13.4 g/株處理番茄的根結(jié)指數(shù)為8.7和6.5，均顯著低于對(duì)照（21.6），防治效果達(dá)59.7%和69.8%，與0.5%阿維菌素GR 2 g/株處理（73.6%）無顯著差異。5億cfu/g YB-04生物菌肥13.4 g/株處理的株高、地上部鮮重和地下部鮮重分別為52.8 cm、20.2 g和2.6 g，分別比對(duì)照顯著增加53.0%、69.7%和85.7%，而YB-04生物菌肥6.7 g/株處理的株高、地上部鮮重和地下部鮮重與對(duì)照相比差異不顯著。由此可見，5億cfu/g YB-04生物菌肥13.4 g/株處理室內(nèi)盆栽番茄防病和促生效果最明顯。

2.2 日光大棚條件下YB-04生物菌肥對(duì)根結(jié)線蟲病的防治效果及對(duì)番茄生長(zhǎng)和產(chǎn)量的影響

2.2.1 YB-04生物菌肥對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防治效果

大棚試驗(yàn)結(jié)果顯示（表2和圖1），施用5億cfu/g YB-04 生物菌肥后，土壤中的線蟲密度和根結(jié)指數(shù)均顯著低于對(duì)照，其中，300 kg/hm2處理的土壤中線蟲密度和番茄根結(jié)指數(shù)分別為118.0條/100g和19.1，線蟲減退率和防治效果分別達(dá)66.0%和63.5%，與0.5%阿維菌素GR 45 kg/hm2處理無顯著差異。YB-04菌肥150 kg/hm2處理的線蟲密度和根結(jié)指數(shù)分別為154.3條/100g和23.0，線蟲減退率和防治效果分別達(dá)55.5%和56.1%，低于對(duì)照0.5%阿維菌素GR處理。

2.2.2 YB-04生物菌肥對(duì)日光大棚番茄植株生長(zhǎng)的影響

通過測(cè)定不同處理中番茄的株高、鮮重、莖粗、最大葉長(zhǎng)和最大葉寬評(píng)價(jià)YB-04生物菌肥對(duì)番茄植株生長(zhǎng)的影響。從表3可以看出，YB-04生物菌肥處理后番茄的株高和莖粗均比對(duì)照顯著增加，5億cfu/g YB-04菌肥150 kg/hm2和300 kg/hm2處理的株高分別為123.6 cm和130.7 cm，分別比對(duì)照增加12.2%和18.6%;莖粗分別為5.1 cm和5.3 cm，分別比對(duì)照增加21.4%和26.2%。5億cfu/g YB-04菌肥300 kg/hm2處理的鮮重為713.3 g，比對(duì)照顯著增加20.3%，而150 kg/hm2處理的鮮重與對(duì)照相比差異不顯著。此外，所有處理中的最大葉長(zhǎng)和最大葉寬均與對(duì)照沒有顯著差異。

2.2.3 YB-04生物菌肥對(duì)日光大棚番茄產(chǎn)量的影響

在番茄生長(zhǎng)期間分批記錄番茄產(chǎn)量，計(jì)算各小區(qū)的番茄產(chǎn)量。從調(diào)查結(jié)果可以看出（圖2），對(duì)照產(chǎn)量為9.4 t/hm2，5億cfu/g YB-04菌肥300 kg/hm2處理的產(chǎn)量為11.3 t/hm2，比對(duì)照顯著增加20.2%，150 kg/hm2處理的產(chǎn)量為10.3 t/hm2，與對(duì)照相比沒有顯著差異，0.5%阿維菌素GR處理的產(chǎn)量為11.1 t/hm2，比對(duì)照顯著增加18.1%。

2.3 生物菌肥對(duì)番茄根系土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響

2.3.1 土壤微生物代謝功能的AWCD變化特征

AWCD是土壤微生物利用單一碳源的能力的重要指標(biāo)，反映了土壤微生物利用碳源的整體能力及微生物活性，可作為土壤微生物活性的有效指標(biāo)[23]。本研究中土壤樣品微生物利用31種碳源的AWCD變化曲線如圖3所示，培養(yǎng)24 h內(nèi)土壤微生物的活性較低，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，微生物活性逐漸增加，96 h后微生物活性趨于平穩(wěn)。與對(duì)照相比，菌肥處理土樣AWCD值在整個(gè)培養(yǎng)過程均強(qiáng)于對(duì)照，其中24、48 h和72 h時(shí)菌肥處理土壤樣品中的微生物活性分別為對(duì)照的1.47、1.22倍和1.11倍，說明生物菌肥處理后土壤微生物代謝活性增強(qiáng)。

2.3.2 微生物對(duì)各類碳源的利用特征

隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，不同處理土壤微生物的AWCD值均呈現(xiàn)逐漸增高的趨勢(shì)（圖4），表明其對(duì)6類碳源的利用率逐漸增加。在各個(gè)測(cè)定時(shí)期中，生物菌肥處理后土壤微生物對(duì)羧酸類物質(zhì)、氨基酸、聚合物、雙親化合物和胺/氨類的利用率均高于對(duì)照，而對(duì)糖類物質(zhì)的利用變化不大。其中，培養(yǎng)72 h時(shí)，5億cfu/g YB-04菌肥處理后土壤微生物對(duì)聚合物、羧酸類和胺/氨類物質(zhì)的利用率與對(duì)照相比有顯著差異（P<0.05），分別比對(duì)照顯著增高19.0%、27.9%和10.8%。

2.3.3 土壤微生物群落功能多樣性分析

施入5億cfu/g YB-04菌肥后（表4），土壤中的Shannon指數(shù)、McIntosh指數(shù)和豐富度指數(shù)均比對(duì)照顯著增高（P<0.05），說明施入YB-04菌肥后土壤微生物群落功能的多樣性顯著增加。

2.3.4 土壤微生物群落功能多樣性的主成分分析

對(duì)培養(yǎng)72 h的Biolog-Eco板中處理和對(duì)照的AWCD值進(jìn)行主成分分析，結(jié)果顯示（圖5），兩個(gè)主成分累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)60.49%，處理和對(duì)照的樣本分布在不同區(qū)域，且樣點(diǎn)離散程度較大，其中對(duì)照主要分布在第二和第三象限;生物菌肥處理樣點(diǎn)主要分布在第一象限和第四象限，結(jié)果表明施入生物菌肥的土壤微生物群落與對(duì)照有明顯的分異，說明其在碳源代謝上與對(duì)照存在明顯的差異，生物菌肥對(duì)土壤微生物群落功能有顯著影響。

3 結(jié)論與討論

根結(jié)線蟲寄主范圍廣、危害重，每年對(duì)我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，利用生防微生物防治根結(jié)線蟲是實(shí)現(xiàn)農(nóng)藥減量使用的一種有效措施。芽胞桿菌是植物病害中的一類重要生防因子，其中堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿菌Bacillus firmus[24]、蠟質(zhì)芽胞桿菌B.cereus[25]等已經(jīng)廣泛用于根結(jié)線蟲病的生物防治中。但是目前甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌防治根結(jié)線蟲的報(bào)道較少，尤其是將甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌添加到生物菌肥中防控根結(jié)線蟲病還未見報(bào)道。Zhou等[26]報(bào)道甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌R2-2菌株培養(yǎng)液（3×108 cfu/mL） 50 mL/株灌根處理對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的大棚防治效果為44%～55%。而本研究中含5億 cfu/g甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌YB-04的生物菌肥300 kg/hm2溝施處理對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的大棚防治效果達(dá)63.5%，且具有顯著的促生和增產(chǎn)效果。

生防微生物防效的發(fā)揮既取決于其在土壤中的存活能力以及與其他微生物競(jìng)爭(zhēng)碳源和氮源的能力，也受到各種環(huán)境條件的影響[27]。生防菌株施入土壤中后，由于土壤抑菌因子的存在，其作為外源菌株難以打破土壤環(huán)境中原有的生態(tài)平衡定殖成為優(yōu)勢(shì)種群，導(dǎo)致防效不穩(wěn)定并很難達(dá)到理想效果。本研究將線蟲拮抗生防菌甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌添加到有機(jī)肥中，有機(jī)肥可以作為生防微生物施用到土壤中的載體，避免生防菌在土壤中與抑菌因子的直接接觸，有機(jī)添加物降解后還可為生防微生物提供營(yíng)養(yǎng)，降低土壤抑菌因子對(duì)生防菌的影響，促進(jìn)生防菌在土壤中的定殖和擴(kuò)繁并穩(wěn)定發(fā)揮防效[2829]，從而改善生防菌株在環(huán)境中適應(yīng)性不足的缺點(diǎn)。此外，有機(jī)肥還能快速為作物提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，達(dá)到防病和增產(chǎn)的雙重目的。

YB-04生物菌肥由甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌菌體濃縮物、氨基寡糖素、腐殖酸和草炭粉按照一定比例混合而成。其中，氨基寡糖素是一種外源植物誘抗劑，能夠激發(fā)植物的免疫反應(yīng)使植物獲得系統(tǒng)抗性，具有抗病、抗蟲、抗逆等多重作用，目前已報(bào)道其對(duì)多種植物病害具有較好的防治效果[3031]，多種氨基寡糖素單劑及其與噻唑膦的復(fù)配制劑已在我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部登記為殺線蟲劑，用于根結(jié)線蟲病的防治中。腐殖酸因?yàn)槠渚哂懈牧纪寥馈⒋偕约霸鰪?qiáng)作物抗逆性的功能被廣泛添加到有機(jī)肥中。但是，目前尚未見利用線蟲拮抗菌甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌與氨基寡糖素、腐殖酸有機(jī)肥等聯(lián)合防治根結(jié)線蟲病的報(bào)道。YB-04生物菌肥不同組分的作用機(jī)制不同，具有協(xié)同增效的作用，能夠提高其對(duì)根結(jié)線蟲病防效及增產(chǎn)的穩(wěn)定性。

Qiu等[32]的研究發(fā)現(xiàn)，在感染禾谷孢囊線蟲病田中施用生物有機(jī)肥能夠調(diào)節(jié)小麥根際土壤的真菌群落結(jié)構(gòu)，并抑制禾谷孢囊線蟲在土壤中的擴(kuò)繁。蔣曉玲[33]發(fā)現(xiàn)，在玉米根際土壤中施加含有解淀粉芽胞桿菌Y19的微生物菌肥能改善根際土壤微環(huán)境，提高根際微生物群落對(duì)碳水化合物類、氨基酸和羧酸類化合物的利用，從而發(fā)揮促生和防病的雙重功能。土壤微生物是土壤中較活躍的部分，也是土壤物質(zhì)循環(huán)的主要?jiǎng)恿34]。本研究利用Biolog-Eco方法解析施入YB-04菌肥對(duì)土壤微生物群落功能多樣性的影響，結(jié)果顯示，施用生物菌肥后土壤微生物對(duì)碳源利用率增多，代謝活性增強(qiáng)，對(duì)雙親化合物、聚合物、羧酸類、氨基酸和胺/氨類的利用率均高于對(duì)照，而對(duì)糖類物質(zhì)的利用變化不大，說明施入YB-04菌肥后，有利于土壤中對(duì)羧酸類物質(zhì)、氨基酸、雙親化合物、聚合物和胺/氨類物質(zhì)利用率較高的微生物聚集。此外，施入生物菌肥后，土壤中的Shannon指數(shù)、McIntosh指數(shù)和豐富度指數(shù)均比對(duì)照顯著增高，說明施入生物菌肥后土壤微生物群落功能多樣性顯著增加。PCA分析結(jié)果也表明施用YB-04菌肥的土壤微生物群落與對(duì)照有明顯的差異，說明其在生理代謝上存在明顯的差異，生物菌肥對(duì)土壤微生物群落功能有顯著的影響。從上述結(jié)果可以看出，施入YB-04生物菌肥能夠改善土壤微生物的生存環(huán)境，提高微生物群落功能多樣性，從而增強(qiáng)番茄對(duì)根結(jié)線蟲及其他病蟲害的抵御能力。由此可見，YB-04生物菌肥具有較大的開發(fā)利用前景。

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