曾韋珊 黃林旺 陳曼鈺 毛積鵬,2黃少偉 寧華珙 劉天頤
(1. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院/ 廣東省森林植物種質(zhì)創(chuàng)新與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州 510642;2. 臺(tái)山市紅嶺種子園,廣東 臺(tái)山 529223; 3. 英德市林業(yè)科學(xué)研究所,廣東 英德 513055)
由于松屬植物中含有豐富的化學(xué)物質(zhì),常作藥用植物,據(jù)《本草綱目》記載:“松葉,名為松毛,性溫苦,無(wú)毒,入肝、腎、肺、脾諸經(jīng),治各臟腫毒,風(fēng)寒濕癥。還能治療腫皰,促進(jìn)毛發(fā)再生,強(qiáng)健肝、腎、心、脾、肺五臟,能夠充饑,延年益壽”[1]。據(jù)分析,松屬植物松針中含有萜類、黃酮類、木質(zhì)素類、揮發(fā)油類、氨基酸類等化學(xué)物質(zhì),如南方馬尾松Pinus massoniana松針中含有單萜和倍半萜[2],王巍等[3]從馬尾松松針中分離出木犀草素、槲皮素、雙氫槲皮素等黃酮類化合物,周維純等[4]從馬尾松針葉中測(cè)定出18種氨基酸,從黑松P. thunbergii針葉中亦測(cè)定出18種氨基酸,高巖等[5]從紅松P. koraiensis松針中分離出7 個(gè)黃酮苷類化合物,松針活性成分逐步被明晰,這也使其在醫(yī)藥保健應(yīng)用中廣受關(guān)注[6]。
火炬松P. taeda為松科松屬喬木,原產(chǎn)北美東南部,是美國(guó)南方松中最重要的速生針葉樹種之一[7-8]。我國(guó)引種火炬松已有70 多年的歷史,但對(duì)火炬松松針和樹皮中活性成分的研究尚未見有關(guān)報(bào)道。鑒于此,本研究利用UPLC-MS/MS 代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)火炬松的主要藥用部位包括針葉、樹皮部位主要代謝物成分進(jìn)行測(cè)定并做比較分析,旨在為火炬松代謝物成分鑒定、分布特性及其開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。
火炬松樣本材料取自于廣東省英德市林業(yè)科學(xué)研究所(N 23°50′31″,E 112°45′15″)。2019 年8月隨機(jī)選取9 個(gè)8 年生的火炬松無(wú)性系(28-7-43、19-11-44、7-15-14、15-4-15、44-2-6、34-1-9、44-13-5、26-Ⅲ-4、西2-1-1)取樣,采取了生長(zhǎng)旺盛、無(wú)病蟲害的火炬松針葉和樹皮組織部位,將任意3 個(gè)無(wú)性系的相同部位混在一塊作為一份樣本,每個(gè)樣本3 個(gè)生物學(xué)重復(fù),剪碎后放入50 mL無(wú)菌的離心管中,隨即放入液氮中,在-80 ℃條件下保存。
在凍干機(jī)(Scientz-100F)中真空冷凍干燥火炬松各組織部位樣品,之后用研磨儀(MM 400,Retsch)研磨樣品至粉末狀,稱取約100 mg 粉末溶解于1.2 mL 70%甲醇(色譜級(jí), Merck)中。在4 ℃ 條件下提取12 h,每2 h 渦旋震蕩1 次,以提高提取率。12 000 rpm 條件下離心10 min,然后取上清,用微孔濾膜(0.22 μm,pore size)過(guò)濾樣本,隨后保存于進(jìn)樣品中用于UPLC-MS/MS 分析。
色譜數(shù)據(jù)采集儀器:超高效液相色譜(SHIMADZU Nexera X2, https://www.shimadzu.com.cn)。采集條件:Agilent SB-C18 色譜柱(1.8 μm,2.1 mm×100 mm);A 相超純水(加入0.1%的甲酸),B 相乙腈(色譜級(jí),Merck)的流動(dòng)相;洗脫梯度:0.00 min,B 相比例為5%,B 相比例在9.00 min 內(nèi)線性增加到95%,并維持95% 1 min,10.00—11.10 min,B 相比例降至5%,在5%條件下平衡至14 min;流速設(shè)為0.35 mL/min,柱溫40 ℃,進(jìn)樣量4 μL。
質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集儀器:串聯(lián)質(zhì)譜(Applied Biosystem 4500 QTRAP, http://www.appliedbiosystem.com.cn)儀器。采集條件為:溫度550 ℃電噴霧離子源(Electrospray Ionization,ESI),質(zhì) 譜 電 壓5 500 V(正模式)/-4 500 V(負(fù)模式),簾氣(Curtain gas,CUR)25 psi,碰撞誘導(dǎo)電離(Collision-Activated Dissociation, CAD)參數(shù)設(shè)置為高。根據(jù)優(yōu)化的簇電壓(Declustering Potential,DP)和碰撞能進(jìn)行三重四級(jí)桿中每個(gè)離子對(duì)的掃描檢測(cè)[9]。
委托邁特維爾生物科技有限公司基于自建數(shù)據(jù)庫(kù)MWDB(metware database)根據(jù)二級(jí)譜信息對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析,分析時(shí)將含K+離子、Na+離子NH4+離子和同位素信號(hào)重復(fù)信號(hào)去除。利用三重四級(jí)桿質(zhì)譜的多反應(yīng)檢測(cè)模式進(jìn)行代謝物定量分析。首先四級(jí)桿篩選出目標(biāo)物質(zhì)的前體離子,前體離子經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)電離后形成碎片離子,之后碎片離子通過(guò)三重四級(jí)桿過(guò)濾選擇出特征碎片離子。隨后進(jìn)行峰面積積分,并積分校正其中同一代謝物在不同樣本中的質(zhì)譜出峰[10]。
質(zhì)譜數(shù)據(jù)的處理:利用MultiaQuant 軟件和Analyst 1.6.3 軟件打開和處理數(shù)據(jù)。隨后積分并校正色譜峰,每個(gè)色譜峰的面積代表對(duì)應(yīng)物質(zhì)的相對(duì)含量,最后導(dǎo)出所有色譜峰面積積分?jǐn)?shù)據(jù)保存。樣本數(shù)據(jù)分析:用主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判別分析(Orthogonal Partial Least Squares—Discriminant Analysis,OPLS-DA)方法進(jìn)行分析,PCA 用R軟件中的Prcomp 函數(shù)對(duì)進(jìn)行歸一化處理后的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,OPLS-DA 在原始數(shù)據(jù)進(jìn)行l(wèi)og2 轉(zhuǎn)換后,再進(jìn)行中心化處理,利用R 軟件中的MetaboAnalystR 包的OPLSR.Anal 函數(shù)進(jìn)行分析。差異代謝物的篩選:通過(guò)載荷圖和變量重要性投影(Variable Importance in Projection,VIP)值大于等于1 來(lái)篩選差異代謝物。
利用UPLC—MS/MS 法可從火炬松針葉和樹皮組織中共鑒定出523 種代謝物成分,其正離子模式下混合樣本的質(zhì)譜分析總離子流圖如圖1 所示,各峰分離效果良好。其中氨基酸及其衍生物40 種、酚酸類物質(zhì)66 種、核苷酸及其衍生物38種、類黃酮化合物165 種、木脂素和香豆素類化合物28 種、鞣質(zhì)類20 種、生物堿24 種、萜類化合物4 種、有機(jī)酸30 種,脂質(zhì)55 種、其它類化合物53 種。165 種類黃酮代謝化合物中,查爾酮有4 種、二氫黃酮10 種、二氫黃酮醇6 種、花青素17 種、黃酮55 種、黃酮醇59 種、黃酮碳糖苷1 種、黃烷醇類11 種、異黃酮2 種。
圖1 正離子模式下火炬松混合樣本的質(zhì)譜分析總離子流Fig.1 Total ions current of mass spectrometry analysis of mixed samples of P. taeda in positive ion mode
為比較火炬松針葉和樹皮樣本之間總體代謝差異和組內(nèi)樣本之間的變異度大小,對(duì)火炬松針葉和樹皮代謝物進(jìn)行主成分(PCA)分析(圖2A)。結(jié)果表明,第一主成分(PC1)的解釋率達(dá)到61.95%,第二(PC2)和第三主成分(PC3)共解釋了25.58%,其中PC2 的解釋率為18.73%。如圖2B 所示,火炬松樹皮(SP)3 個(gè)樣品均位于PC1 負(fù)半軸,火炬松針葉(SZ)3 個(gè)樣品均位于PC1 正半軸,不同組織分離明顯,說(shuō)明2 種不同部位樣品在代謝物成分上有明顯差異。同時(shí),同一組織部位的不同樣本也相對(duì)分散,說(shuō)明組內(nèi)樣本間也存在一定差異。
圖2 火炬松針葉和樹皮組織樣本的多元統(tǒng)計(jì)分析Fig.2 Figure 2 Multivariate statistical analysis of Pinus taeda needle and bark tissue samples
另外,運(yùn)用OPLS-DA 法構(gòu)建S-plot(圖3A)可知,火炬松針葉和樹皮區(qū)分明顯,且很大一部分代謝物的VIP 值大于或等于1,表明這些代謝物成分在火炬松針葉和樹皮中的含量差異顯著。從OPLS-DA 模型的置換驗(yàn)證結(jié)果發(fā)現(xiàn)(圖3B),建立的OPLS-DA 模型共得到兩個(gè)主成分,R2X=0.724,R2Y=1,Q2=0.98,這3 個(gè) 模 型 參 數(shù) 均 大 于0.5,OPLS-DA 模型擬合準(zhǔn)確較好,具有意義,因此本研究所建立的OPLS-DA 模型能夠有效解釋火炬松針葉和樹皮之間的代謝差異。
圖3 OPLS-DA 分析Fig.3 OPLS-DA analysis
差異代謝物的篩選根根據(jù)單變量分析的差異倍數(shù)(Fold change)值和多元統(tǒng)計(jì)分析OPLS-DA模型的VIP 值來(lái)選擇,F(xiàn)old change 小于等于0.5或大于等于2,且VIP 值大于等于1 的代謝物認(rèn)為差異顯著。鑒定到523 種代謝物中,221 種代謝物成分的含量在火炬松的針葉和樹皮組織部位中沒(méi)有顯著差異,另外302 種代謝物成分則在火炬松的針葉和樹皮組織部位中差異顯著。差異顯著的代謝物成分中,147 種代謝物成分在火炬松針葉組織部位中的含量高于樹皮組織中的含量,其中包括70 種類黃酮化合物和7 種氨基酸及其衍生物,如表1 所示。而另外155 種代謝物成分則在火炬松樹皮組織部位中的含量顯著高于針葉組織,其中包含35 種類黃酮化合物和20 種氨基酸及其衍生物,如表2 所示。此外,分析發(fā)現(xiàn)柚皮素、山姜素、山奈酚、澤蘭黃素、秦皮甲素等在火炬松針葉組織中的含量顯著高于樹皮組織;而槲皮素、矢車菊素、原花青素、丁香樹脂酚、表兒茶素等高生物代謝活性成分則在火炬松樹皮組織中的含量顯著高于針葉組織。
表1 在火炬松針葉組織中含量顯著高于樹皮組織的70 種類黃酮化合物和7 種氨基酸及其衍生物Table 1 The content of 70 kinds of flavonoids and 7 kinds of amino acids and their derivatives in P. taeda needle tissue is significantly higher than that in bark tissue
差異倍數(shù)Fold change C16H12O7 鼠李素 黃酮醇 90-19-7 0.000 147 C16H12O6 羥基芫花素 黃酮 20243-59-8 0.000 621 C30H26O14 槲皮素-3-O-(6’’-反式對(duì)香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷 黃酮 - 0.000 699 C23H22O13 槲皮素-3-O-(6’’-O-乙酰)-半乳糖苷 黃酮醇 - 0.000 733 C30H26O13 山奈酚-7-O-β-d-(6’’-O-(E)-對(duì)香豆酰)半乳糖苷 黃酮醇 - 0.002 431 C30H26O13 木犀草素-咖啡酰鼠李糖苷 黃酮 - 0.002 974 C30H26O13 銀鍛苷 黃酮醇 20316-62-5 0.003 180 C30H26O13 山柰酚-3-O-(2’’-反式對(duì)香豆?;?-β-D-半乳糖苷 黃酮 - 0.003 208 C17H14O7 3,7-二-O-甲基槲皮素 黃酮醇 2068/2/2 0.003 963 C22H22O11 紅車軸草素-7-O-吡喃葡萄糖苷 黃酮 36191-03-4 0.009 172 C17H14O8 丁香亭 黃酮醇 4423-37-4 0.009 769 C28H32O15 香葉木素-7-O-蕓香糖苷 黃酮 - 0.010 681 C28H32O15 香葉木素-7-O-新橘皮糖苷 黃酮 38665-01-9 0.011 555 C21H20O11 山奈酚-7-O-葡萄糖苷 黃酮醇 16290-07-6 0.012 044 C15H12O4 喬松素 二氫黃酮 480-39-7 0.018 814 C23H24O12 檸檬素-3-鼠李糖苷 黃酮 - 0.031 201 C15H12O5 柚皮素 二氫黃酮 480-41-1 0.039 770 C23H24O12 鳶尾新苷 異黃酮 94396-09-5 0.041 780 C15H12O5 短葉松素 二氫黃酮醇 548-82-3 0.041 861 C21H20O11 山奈酚-3-O-葡萄糖苷(紫云英苷)(黃芪苷) 黃酮醇 480-10-4 0.043 946 C15H12O5 柚皮素查爾酮 查耳酮 73692-50-9 0.044 580 C15H12O5 紫鉚素 二氫黃酮 492-14-8 0.050 885 C22H22O11 異鼠李素-3-O-鼠李糖苷 黃酮醇 - 0.059 920 C17H14O6 5,6-二羥基-7,4’-二甲氧基黃酮 黃酮 10176-71-3 0.066 028 C21H20O11 山奈酚-3-O-半乳糖苷(三葉豆苷) 黃酮醇 23627-87-4 0.074 476 C16H14O4 球松素 二氫黃酮 480-37-5 0.091 710 C20H18O10 胡桃苷 黃酮醇 5041-67-8 0.092 208 C22H22O12 甲基槲皮素 O-己糖苷 黃酮醇 - 0.124 060 C21H20O13 楊梅素-3-O-半乳糖苷 黃酮醇 15648-86-9 0.131 126 C28H33O16+ 牽牛花素-3-O-蕓香糖苷 花青素 - 0.179 466 C21H20O12 6-羥基山奈酚-7-O-葡萄糖苷 黃酮醇 - 0.189 316 C21H20O10 芹菜素 5-O-葡萄糖苷 黃酮 28757-27-9 0.190 507 C27H31O15+ 矢車菊素 3-O-蕓香糖苷 花青素 28338-59-2 0.207 924 C21H18O12 山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷 黃酮醇 - 0.238 008 C27H30O15 木犀草素-7-O-蕓香糖苷 黃酮 3563-98-2 0.252 641 C21H18O12 野黃芩素-7-氧-葡萄糖醛酸苷 黃酮 27740-01-8 0.254 472 C20H18O12 楊梅素-3-O-阿拉伯糖苷 黃酮醇 132679-85-7 0.267 021 C21H18O12 4-羥基黃酮-7-O-葡萄糖苷 黃酮 - 0.269 932 C25H31O11+ 錦葵色素-3-O-葡萄糖醛酸 花青素 - 0.288 216 C21H20O12 槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(異槲皮苷) 黃酮醇 482-35-9 0.320 298化學(xué)式Formula物質(zhì)Compounds物質(zhì)二級(jí)分類Class ⅡCAS 號(hào)CAS Number
注:差異倍數(shù)為SP/SZ 值。SP 表示樹皮組織,SZ 表示針葉組織。Note: fold change value was calculated by SP/SZ. SP is bark tissue. SZ is pine needle tissue.
表2 在火炬松樹皮組織中含量顯著高于松針組織的35 種類黃酮化合物和20 種氨基酸及其衍生物Table 2 The content of 35 kinds of flavonoids and 20 kinds of amino acids and their derivatives in P. taeda bark tissue are significantly higher than that in pine needle tissue
注:差異倍數(shù)為SP/SZ 值。SP 表示樹皮組織,SZ 表示針葉組織。Note: fold change value was calculated by SP/SZ. SP is bark tissue. SZ is pine needle tissue.
為了對(duì)有顯著差異代謝物的組織變化規(guī)律及其通路分布情況有更方便和直觀的了解,我們對(duì)有顯著差異的代謝物成分進(jìn)行了聚類和KEGG 富集分析。由聚類分析熱圖可知,氨基酸及其衍生物、脂質(zhì)和鞣質(zhì)類化合物在樹皮組織中的含量較針葉組織高,L-天冬氨酸是樹皮組織中含量最高的氨基酸及其衍生物類物質(zhì),反油酸是樹皮組織和針葉組織中含量最高的脂質(zhì)類化合物,而圣草酚是樹皮組織中含量最高的類黃酮物質(zhì)。木脂素和香豆素類化合物在針葉組織中含量較高。此外,黃酮類物質(zhì)和酚酸類物質(zhì)在針葉和樹皮組織中所占比重也較大,黃酮類化合物在針葉組織中含量高于樹皮組織中的含量,其總量是樹皮組織的1.74 倍。通過(guò)結(jié)合兩種不同組織的分組情況及定量信息,比較檢測(cè)得到的化合物差異倍數(shù)變化,其中,樹皮組織中含量高于針葉組織的差異化合物共有155 個(gè),而針葉組織中含量高于樹皮組織的差異化合物共有147 個(gè)。用KEGG 數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)檢測(cè)得到的差異化合物進(jìn)行通路富集分析,結(jié)果表明,含量差異顯著的代謝物顯著富集于類黃酮生物合成通路、黃酮與黃酮醇生物合成通路、氨酰tRNA 生物合成通路、氨基酸生物合成通路及淀粉和蔗糖代謝通路(圖5)。
圖4 差異代謝物聚類熱圖Fig.4 Different metabolites cluster heatmap
圖5 差異代謝物KEGG 富集分析Fig.5 The KEGG enrichment analysis of differential metabolites
從火炬松的針葉和樹皮中共鑒定出523 種代謝物成分,主要為氨基酸類、酚酸類、有機(jī)酸類、鞣質(zhì)、脂質(zhì)類和黃酮類等化合物。其中,221 種代謝物成分的含量在火炬松的針葉和樹皮組織部位中沒(méi)有顯著差異,另外302 種代謝物成分則在火炬松的針葉和樹皮組織部位中差異顯著?;鹁嫠舍樔~和樹皮組織部位之間代謝物成分含量差異顯著,其中槲皮素、矢車菊素、原花青素、丁香樹脂酚、表兒茶素等物質(zhì)在樹皮組織中的含量顯著高于針葉組織,而柚皮素、山姜素、山奈酚、澤蘭黃素、秦皮甲素等物質(zhì)則在火炬松針葉組織中含量更高。
目前,對(duì)代謝物的分析方法主要有核磁共振技術(shù)(NMR)、氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GCMS)、液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)、超高效液相串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)技術(shù)等,如戶連榮等[11]用GC-MS 分析萼翅藤(Calycopteris floribunda)果實(shí)揮發(fā)油化學(xué)成分,袁興華等[12]用GC-MS 技術(shù)對(duì)木荷Schima superba鮮花的揮發(fā)性成分進(jìn)行了分析;黃浩等[13]采用GC-MS 技術(shù)分析了龍腦型陰香Cinnamomum burmannii葉片精油的主要成分。而UPLC—MS/MS 代謝組學(xué)技術(shù)由于分離速度快、靈敏度高、準(zhǔn)確性強(qiáng)而被廣泛運(yùn)用于植物高生物活性物質(zhì)的鑒定,如陳張金等[14]用UPLC-MS/MS 方法分析測(cè)定了青錢柳Cyclocarya paliurus中6 種黃酮類成分的含量;劉杰等[15]用UPLC—MS/MS 法測(cè)定白芍飲片中的10 種主要成分,宋楠楠等[16]用UHPLC -QTOF/MSE 技術(shù)對(duì)文冠果Xanthoceras sorbifolium的不同組織部位進(jìn)行了代謝組學(xué)分析。本研究利用UPLC—MS/MS 代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)火炬松的針葉和樹皮組織部位的代謝物成分進(jìn)行了鑒定和分析。火炬松針葉和樹皮組織部位中共鑒定出代謝物成分523 種,主要包括氨基酸及其衍生物、酚酸類、核苷酸及其衍生物、鞣質(zhì)、脂質(zhì)和黃酮等化合物。關(guān)于松屬植物化學(xué)成分的研究之前已有報(bào)道,如Feng 等[17]對(duì)云南松樹皮的化學(xué)成分進(jìn)行分析,從中分離鑒定出2 個(gè)新的二萜酸和8 個(gè)已知的二萜類化合物;鐘勝佳等[18]從油松P. tabuliformis松針出分離鑒定出4 個(gè)黃酮苷類化合物;顧劍等[19]對(duì)樟子松P. sylvestris樹皮的水提液及醇提液進(jìn)行紙色譜法、試管預(yù)試法檢測(cè),從樟子松樹皮中檢測(cè)出多糖、黃酮、有機(jī)酸、鞣質(zhì)、酚性物等成分;王莉等[20]采用試管預(yù)試法、紙色譜法對(duì)樟子松松塔提取物的不同極性部位檢測(cè),鑒定出樟子松松塔中含有氨基酸、酚性物、黃酮、香豆素、揮發(fā)油、皂苷、蒽醌、油脂等化合物。
黃酮類化合物是一種重要的次生代謝產(chǎn)物,在植物界中廣泛存在,其在植物體內(nèi)的分布是不均勻的。如王瓊等[21]發(fā)現(xiàn)慈竹Neosinocalamus affinis葉中的總黃酮含量要顯著高于枝和桿中;Wang 等[22]研究發(fā)現(xiàn)興安落葉松樹皮中的總黃酮含量高于針葉、枝條和莖部組織,本研究火炬松中的總黃酮含量為針葉組織高于樹皮組織的結(jié)果與之相反,可能與植物種類不同有關(guān);唐純翼等[23]研究表明欒樹Koelreuteria paniculata不同部位總黃酮含量不同,其果實(shí)中的含量明顯高于枝和葉。本研究發(fā)現(xiàn)總黃酮在火炬松針葉和樹皮組織中均有分布,但不同組織中含量有差異,可能與植物組織所承擔(dān)的功能有關(guān)。黃酮類化合物異槲皮苷在火炬松針葉和樹皮組織中所占含量均較高,報(bào)道顯示,其在抗高血壓[24]、抗氧化活性[25]、抗癌[26]、抗炎[27]等方面具有積極作用,這為火炬松在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用提供了一定信息。
本研究從火炬松針葉和樹皮組織部位中鑒定出的化學(xué)成分與其他松屬植物含有的化學(xué)成分類似,如黃酮類物質(zhì)中有與鐘勝佳等[18]從油松松針中鑒定出的異鼠李素-3-O-葡萄糖苷化合物;王巍等[3]從馬尾松松針中分離純化得到的木犀草素、槲皮素、二氫槲皮素、楊梅素類黃酮化合物,在火炬松中也鑒定出;在木脂素化合物中,火炬松中鑒定出的7S,8R-蘇式-3′,4,9′-三羥基-3-甲氧基-7,8-二氫苯并呋喃-1′-丙醇基新木脂素-9-O-α-L- 吡 喃 鼠 李 糖 苷、7S,8R- 蘇 式-3′,9,9′- 三羥基-3-甲氧基-7,8-二氫苯并呋喃-1′-丙醇基新木脂素-4-O-α-L- 吡喃鼠李糖苷、7S,8S- 蘇式-3′,4,7,9-四羥基-3-甲氧基-8-O-4′-新木脂素-9′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、7R,8S-赤式-3′,4,9,9′-四羥基-3-甲氧基-8-O-4′-新木脂素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷與張靜嬌等[28]從紅松松針中分離得到的木脂素類化合物相同。用UPLC—MS/MS 法測(cè)定更快捷、準(zhǔn)確,為火炬松代謝物成分的組織器官分布特征及其活性成分的鑒定提供了重要信息,同時(shí)為火炬松藥用價(jià)值上的研究提供了參考。