楊粉 黨曉平 賈毅 孟遠翠 鄭玲芳 陳偉國 張東平

(西安醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，陜西 西安 710038)

新生兒缺氧缺血性腦病(Hypoxic-ischemic encephalopathy of newborn，HIE)是由于各種圍生期窒息引起的部分或完全缺氧、腦血流減少或暫停而導(dǎo)致胎兒或新生兒腦損傷[1]。HIE病情重、病死率高，且據(jù)相關(guān)研究顯示，足月兒HIE的病發(fā)率為1%～3%，其中超過1/4以上的新生兒病患會伴有不同程度的后遺癥，包括智力障礙、癲癇、腦性癱瘓等，HIE也是導(dǎo)致兒童神經(jīng)系統(tǒng)傷殘的常見原因之一[2]。隨著近年來生物醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，大量研究證實，部分生物學(xué)標(biāo)志物與新生兒HIE的發(fā)生、發(fā)展以及預(yù)后息息相關(guān)[3]。tau蛋白為微管相關(guān)蛋白的一種，主要分布在神經(jīng)元軸突，是維持細胞維持微管穩(wěn)定的重要成分。相關(guān)研究指出，外源性激活素A(activin A，ACTA)對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷具有保護作用[4]。尿酸(UA)是人體嘌呤代謝的產(chǎn)物，研究發(fā)現(xiàn)缺血缺氧性腦損傷過程中會存在嘌呤代謝紊亂現(xiàn)象，從而引起UA增多[5]。為此，本研究就HIE患兒血清tau蛋白、ACTA及UA表達與其病情、神經(jīng)發(fā)育預(yù)后的關(guān)系研究進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析將2017年2月～2019年12月于我院診治的108例HIE患兒臨床資料為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患兒均符合2005年中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會新生兒學(xué)組修訂新生兒HIE診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。②均為足月兒。③均行MRI檢查。④所有患兒家屬均同意并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天性神經(jīng)系統(tǒng)感染、代謝功能紊亂患兒。②合并凝血功能障礙、腦萎縮、先天性畸形、先天性心臟病等。③存在宮內(nèi)陳舊性損傷、產(chǎn)傷、機體發(fā)育不良等因素所致的腦部異常。④臨床病例及影像學(xué)資料不完整。⑤未完成隨訪者。所有HIE患者均入住NICU接受治療，給予呼吸支持、控制驚厥、降低顱內(nèi)壓、全身亞低溫等綜合治療。另選取同期健康的新生兒98例作為對照組。

1.2 方法

1.2.1 血清因子檢測 分別采集兩組受檢者出生第7 d時空腹臍靜脈血3 mL，3000 r/min離心10 min，吸取上層血清置于EP管中，并保存在-80℃冰箱中待測。tau蛋白、ACTA均使用酶聯(lián)免疫吸附法進行檢測，試劑盒由上海酶聯(lián)生物研究所提供；UA采用尿酸酶比色法進行檢測，試劑盒由雅培公司提供；實驗步驟均按照試劑配套說明書進行。

1.2.2 神經(jīng)發(fā)育預(yù)后評估 由兩位高年資小兒康復(fù)科醫(yī)生采用格賽爾發(fā)育量表(Gesell development schedule，Gesell)對兩組患兒出生12個月神經(jīng)發(fā)育預(yù)后情況予以評估[8]，包括精細動作、大動作、語言、適應(yīng)性以及個人社交5個領(lǐng)域，對5個領(lǐng)域的發(fā)育商予以分別檢測，發(fā)育遲緩：單個領(lǐng)域及以上發(fā)育商<75分，邊緣狀態(tài)：75分～85分，神經(jīng)發(fā)育預(yù)后良好：>85分，前兩種為神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較兩組出生第7 d時tau蛋白、ACTA及UA水平。②對比不同病情HIE患兒出生第7 d時tau蛋白、ACTA及UA水平。③比較不同神經(jīng)發(fā)育預(yù)后HIE患兒出生第7 d時tau蛋白、ACTA及UA水平。④繪制受試者工作特征曲線(ROC)，分析上述因子對HIE患兒神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良的預(yù)測價值。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 研究組中男性63例，女性45例；胎齡為34～40周，平均胎齡為(38.72±2.13)周；體重為2.8～4.0 kg，平均體重為(3.12±0.53) kg；HIE病情嚴(yán)重程度(出生后7 d評估)[6]：28例輕度(肌張力持續(xù)減退或呈高度興奮狀態(tài)，無驚厥)，42例中度(昏睡，肌張力及原始反射減弱或有驚厥發(fā)作)，38例重度(驚厥頻繁發(fā)作，呼吸出現(xiàn)暫停、無活力或處于昏迷狀態(tài))。對照組中男性46例，女性52例；胎齡為35～40周，平均胎齡為(39.04±1.98)周；體重為2.7～4.1 kg，平均體重為(3.23±0.49) kg。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 兩組tau蛋白、ACTA及UA水平比較 研究組tau蛋白、ACTA及UA水平較對照組高(P<0.05)，見表1。

表1 兩組tau蛋白、ACTA及UA水平比較Table 1 Comparison of tau protein，Acta and UA levels between the two groups

2.3 不同病情HIE患兒tau蛋白、ACTA及UA水平比較 結(jié)果顯示，重度>中度>輕度(P>0.05)，見表2。

表2 不同病情HIE患兒tau蛋白、ACTA及UA水平比較Table 2 Comparison of tau protein，Acta and UA levels in HIE children with different conditions

2.4 不同神經(jīng)發(fā)育預(yù)后HIE患兒的tau蛋白、ACTA及UA水平比較 108例HIE患兒中，神經(jīng)發(fā)育預(yù)后良好84例(77.78%)，神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良24例(22.22%)。神經(jīng)發(fā)育預(yù)后良好組tau蛋白、ACTA及UA水平明顯低于神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良組(P<0.05)，見表3。

表3 不同神經(jīng)發(fā)育預(yù)后HIE患兒的tau蛋白、ACTA及UA水平比較Table 3 Comparison of tau protein，Acta and UA levels in HIE children with different neurodevelopmental prognosis

2.5 tau蛋白、ACTA及UA水平對HIE患兒神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良的預(yù)測價值 ROC結(jié)果顯示，tau蛋白、ACTA及UA檢測曲線下面積分別為0.658、0.564、0.588，明顯低于三者聯(lián)合檢測的0.745。見表4、圖1。

表4 tau蛋白、ACTA及UA水平對HIE患兒神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良的預(yù)測價值Table 4 Predictive value of tau protein，Acta and UA levels for poor prognosis of neurodevelopment in HIE children

圖1 tau蛋白、ACTA及UA水平預(yù)測HIE患兒神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良的ROC曲線圖Figure 1 ROC curve of tau protein，Acta and UA levels in predicting poor neurodevelopmental prognosis of HIE children

3 討論

HIE是引起新生兒急性死亡和慢性神經(jīng)系統(tǒng)損傷的主要原因之一，約80%的HIE是由圍產(chǎn)期窒息引起，其中中重度窒息及宮內(nèi)窒息分別占50%、40%[9]。該病死亡和傷殘率在10%～30%左右，可導(dǎo)致患兒出現(xiàn)癲癇、痙攣抽搐等癥狀，給家庭和社會帶來一定壓力[10]。導(dǎo)致HIE及疾病變化的機制較多，包括腦血管自主調(diào)節(jié)障礙、能量代謝障礙，進而導(dǎo)致神經(jīng)細胞凋亡、細胞內(nèi)Ca+超載；腦細胞氧化功能出現(xiàn)異常，使電解質(zhì)失衡，出現(xiàn)腦水腫；腦血管通透性增加，血漿流失、水腫產(chǎn)生，進而使血管受到壓迫，血液供應(yīng)受阻，缺血加重，嚴(yán)重者可造成顱內(nèi)出血，因此診斷、評估嚴(yán)重程度與預(yù)后等難度較高[11]。

tau蛋白是一種在神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布的微管相關(guān)蛋白，具有穩(wěn)定微管、維持神經(jīng)元的形態(tài)、促進軸突運輸及微管裝配的重要作用，當(dāng)神經(jīng)元存在損傷時tau蛋白可從微管上脫落。Jie等[12]研究發(fā)現(xiàn)，tau蛋白與HIE患者存在緊密聯(lián)系，可用于評估HIE患者病情嚴(yán)重程度。Zou等[13]研究指出，當(dāng)游離tau蛋白增多時會造成tau蛋白脫離微管，引起微管功能失衡，造成神經(jīng)細胞的死亡從而對神經(jīng)發(fā)育產(chǎn)生影響。ACTA是目前發(fā)現(xiàn)的13超轉(zhuǎn)化生長因子家族中的成員之一，其具備多細胞的功能，在組織損傷、炎癥修復(fù)中發(fā)揮重要作用[14]。Guan等[15]研究發(fā)現(xiàn)，UA是體內(nèi)通過黃嘌呤脫氫酶或黃嘌呤氧化酶降解嘌呤形成的最終產(chǎn)物，可作為自由基代謝指標(biāo)來反映組織缺氧缺血的變化。但目前關(guān)于血清tau蛋白、ACTA及UA與HIE患兒病情、神經(jīng)發(fā)育預(yù)后的關(guān)系研究甚少。

本研究中，與對照組比較，研究組HIE患兒tau蛋白、ACTA及UA水平更高，與He等[16]報道結(jié)果相符，表明在HIE患兒中，tau蛋白、ACTA及UA水平呈升高趨勢。tau蛋白主要分布于神經(jīng)系統(tǒng)中，當(dāng)HIE患兒神經(jīng)元損傷后，tau蛋白就會從微管中脫落，致使其表達水平上升[17]；ACTA是炎性反應(yīng)啟動階段的關(guān)鍵性炎性調(diào)節(jié)遞質(zhì)，當(dāng)HIE患兒發(fā)病后，ACTA就會調(diào)控釋放，致使患者ACTA表達水平上升[18-19]；當(dāng)腦缺氧缺血時，全身血流會重新分布，為保證重要器官的血液供應(yīng)，腎臟會出現(xiàn)血管收縮顯示，而當(dāng)腎血流減少，腎臟就會出現(xiàn)缺血缺氧情況，致使腎損傷，這時腎小球及腎小管受損，而UA的排出就會減少，致使血清UA增多[20-21]。因此在HIE患兒早期可檢測到tau蛋白、ACTA及UA水平升高[22]。

進一步比較不同病情HIE患兒tau蛋白、ACTA及UA水平發(fā)現(xiàn)，隨著HIE患兒病情加重，血清tau蛋白、ACTA及UA水平明顯升高，提示tau蛋白、ACTA及UA與HIE關(guān)系密切，在評估病情嚴(yán)重程度上具有一定價值。通過對比不同神經(jīng)發(fā)育預(yù)后HIE患兒的tau蛋白、ACTA及UA水平發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)發(fā)育預(yù)后良好組tau蛋白、ACTA及UA水平明顯低于神經(jīng)發(fā)育預(yù)后不良組。ROC曲線分析示，tau蛋白、ACTA及UA，在神經(jīng)發(fā)育預(yù)后評估方面有較高的價值，與Mou等[23]報道結(jié)果相似。但本組研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測上述因子對HIE患兒的診斷及神經(jīng)發(fā)育預(yù)后評估的價值最佳，可提高整體效能。

4 結(jié)論

HIE患兒血清tau蛋白、ACTA及UA呈高表達，可能與HIE患兒病情、神經(jīng)發(fā)育預(yù)后密切相關(guān)，檢測上述因子水平有助于評估患兒神經(jīng)發(fā)育預(yù)后。