崔健　謝廣源　韋家歡　莫婷婷　王滿?！盍垺≈苡昵纭●R家寶　楊正騰

摘要 目的：建立麻杏二陳止咳顆粒（麻黃，陳皮，甘草）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并進(jìn)行顆粒劑型的常規(guī)檢查。方法：對(duì)麻杏二陳止咳顆粒進(jìn)行粒度、水分、干燥失重、溶化性、裝量差異、微生物限度檢查。薄層色譜法（TLC）對(duì)陳皮和甘草進(jìn)行定性鑒別;高效液相色譜法（HPLC）對(duì)馬兜鈴酸Ⅰ（CHNO）進(jìn)行限量檢查，對(duì)鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果：麻杏二陳止咳顆粒的粒度、水分、干燥失重、溶化性、裝量差異、微生物限度檢查均符合《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版的相關(guān)規(guī)定;確定每克該顆粒中馬兜鈴酸Ⅰ（CHNO）不得超過(guò)0.66 μg;陳皮和甘草的TLC斑點(diǎn)清晰，陰性無(wú)干擾;HPLC色譜中陰性對(duì)照無(wú)干擾;鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿分別在10.04～100.4 μg、5.14～61.68 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.999 9），平均加樣回收率分別為101.50%（RSD=1.15%）、100.68%（RSD=1.97%）。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確、穩(wěn)定、可行，可用于麻杏二陳止咳顆粒的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞 麻杏二陳止咳顆粒;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制;薄層色譜法;高效液相色譜法;馬兜鈴酸Ⅰ;鹽酸麻黃堿;鹽酸偽麻黃堿

Study on the Quality Standard for Maxing Erchen Zhike Granules

CUI Jian，XIE Guanyuan，WEI Jiahuan，MO Tingting，WANG Manfu，YANG Lilong，ZHOU Yuqing，MA Jiabao，YANG Zhengteng

（The First Affiliated Hospital of Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning 530023，China）

Abstract Objective：To establish the quality standard of Maxing Erchen Granules（Ephedra，Citrus Peel，Licorice）and carry out routine inspection.Methods：The granularity，moisture，weight loss，solubility，loading difference and microbial limit of Maxing Erchen Granules were examined.Thin Layer Chromatography（TLC）was used to qualitatively identify Pericarpium Citri Reticulatae and Radix Glycyrrhizae; High Performance Liquid Chromatography（HPLC）was used for limited inspection of aristolochic acid Ⅰ（CHNO）.The ephedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride were determined.Results：The particle size，moisture content，drying weight loss，solubility，loading difference and microbial limit test of Maxing Erchen granules all conform to the relevant provisions of the 2015 edition of the Chinese Pharmacopoeia.It was determined that the content of aristolochic acid Ⅰ（CHNO）in the granule should not exceed 0.66μg/g.The TLC spots of Pericarpium Citri Reticulatae and Radix Glycyrrhizae were clear，the negative reference were without interference.HPLC chromatograms revealed no interference due to negative reference.Ephedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride showed good linear relationship（r=0.999 9）in the range of 10.04～100.4 μg and 5.14～61.68 μg/ml，respectively.The average recoveries of ephedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride were 101.50%（RSD=1.15%）and 100.68%（RSD=1.97%）respectively.Conclusion：This accurate，stable and feasible method can be used for the quality control of Maxing Erchen Granules.

Keywords Maxing Erchen Granules; Quality standard control; Thin layer chromatography; High Performance Liquid Chromatography; Ephedrine hydrochloride I; Aristolochic acid; Pseudoephedrine hydrochloride

中圖分類(lèi)號(hào)：R289.5;R284文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2022.06.001

麻杏二陳止咳顆粒是在麻杏二陳湯基礎(chǔ)上加減研發(fā)制備的顆粒劑型。麻杏二陳止咳原湯劑是廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院全國(guó)名中醫(yī)王力寧教授的經(jīng)驗(yàn)方，由炙麻黃、杏仁、細(xì)辛、射干、僵蠶、半夏、陳皮、茯苓、萊菔子和甘草十味藥組成，該方根據(jù)小兒特稟質(zhì)咳嗽（痰濕質(zhì)咳嗽）的特點(diǎn)，辨證論治，在治療小兒特稟質(zhì)咳嗽方面效果奇佳[1-5]。方中炙麻黃、杏仁宣降肺氣，細(xì)辛宣肺散寒，射干、僵蠶解痙祛風(fēng)，半夏、陳皮，茯苓燥濕化痰健脾行水，萊菔子化痰降逆，甘草和中調(diào)和諸藥。諸藥合用，標(biāo)本兼顧，共奏逐寒化痰止咳之效。由于近年來(lái)藥材價(jià)格的上升和湯劑使用的局限性，因此考慮將該處方由湯劑開(kāi)發(fā)成顆粒劑，既可保留原處方的有效性，又符合小兒服藥特點(diǎn)，還便于攜帶與保存，同時(shí)提高制劑穩(wěn)定性。目前，關(guān)于麻杏二陳止咳顆粒的報(bào)道主要以制備工藝的研究為主，包括楊正騰等[6]通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)選出了麻杏二陳止咳顆粒的提取工藝，并采用高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）建立了方中橙皮苷含量測(cè)定的方法;葉信等[7]通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以揮發(fā)油與β-環(huán)糊精比例、包合溫度、包合時(shí)間作為考察因素，以揮發(fā)油利用率和包合物得率的綜合評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選出了β-環(huán)糊精包合麻杏二陳止咳顆粒中陳皮、細(xì)辛揮發(fā)油的最佳包合工藝條件等。但未見(jiàn)麻杏二陳止咳顆粒完整的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面的報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器與試劑 高效液相色譜儀（安捷倫公司，美國(guó)，型號(hào)：1260），Agilent ZORBAX C SB-Aq分析色譜柱（安捷倫公司，美國(guó)，型號(hào)：4.6×250 mm型）;水純化系統(tǒng)（Millipore公司，美國(guó)，型號(hào)：Milli-QIntergral），分析天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司，型號(hào)：SQP]，電熱恒溫水浴鍋（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司，型號(hào)：HWS-26）。橙皮苷對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110721-200512）;甘草對(duì)照藥材（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：120904-201015）。硅膠G（青島海洋化工廠，批號(hào)：20180603）;甲醇色譜純（飛世爾科學(xué)世界公司，美國(guó)，批號(hào)：201606）、乙腈色譜純（飛世爾科學(xué)世界公司，美國(guó)，批號(hào)：201701），麻杏二陳止咳顆粒（廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，批號(hào)：20190901、20181001、20181201、20181202、20181203）。

1.2 方法

1.2.1 檢查方法

各檢查項(xiàng)按《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部通則0104“顆粒劑”項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行檢驗(yàn)。檢查項(xiàng)目有：粒度、水分、溶化性、裝量差異、微生物限度[8]。

1.2.1.1 粒度 按《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部通則0104“顆粒劑”項(xiàng)下“粒度”檢查了3批樣品（批號(hào)：20181201、20181202、20181203），按照粒度和粒度分布測(cè)定法（通則0982第二法雙篩分法）測(cè)定，不能通過(guò)一號(hào)篩與能通過(guò)五號(hào)篩的總和不得超過(guò)15%。結(jié)果均符合規(guī)定。見(jiàn)表1。

1.2.1.2 水分 按照《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部通則0832“水分測(cè)定法”檢查了3批樣品（批號(hào)：20181201、20181202、20181203），水分不得超過(guò)8.0%。結(jié)果均符合規(guī)定。見(jiàn)表2。

1.2.1.3 溶化性 取供試品1袋，加熱水200 mL，攪拌5 min，立即觀察。檢查了3批樣品（批號(hào)：20181201、20181202、20181203），結(jié)果3批顆粒均全部溶化，有輕微渾濁，未見(jiàn)焦屑等異物。

1.2.1.4 裝量差異 按照《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部通則0104“顆粒劑”項(xiàng)下“裝量差異”檢查了3批樣品（批號(hào)：20181201、20181202、20181203）。取供試品10袋，除去包裝，分別精密稱定每袋內(nèi)容物的重量，求出每袋內(nèi)容物的裝量與平均裝量。裝量差異限度為標(biāo)示裝量的±7%（5.58～6.42 g），每袋裝量與標(biāo)示裝量比較，超出裝量差異限度的顆粒劑不得多于2袋，并不得有1袋超出裝量差異限度1倍。結(jié)果均符合規(guī)定。見(jiàn)表3。

1.2.1.5 微生物限度 按照《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部通則“1105、1106非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查法”有關(guān)規(guī)定，對(duì)中試3批樣品進(jìn)行了檢查，結(jié)果均符合規(guī)定。見(jiàn)表4。

1.2.2 馬兜鈴酸Ⅰ的限量檢查[9-12]

1.2.2.1 溶液的制備 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取馬兜鈴酸Ⅰ對(duì)照品10.26 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻（102.6 μg/mL）;精密量取0.2 mL置100 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成1 mL中含0.205 2 μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取本品，研細(xì)，取5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇50 mL，超聲處理（500 W，40 kHz）30 min，放冷，濾過(guò)，取續(xù)濾液25 mL蒸干，殘?jiān)?.1 mol/L氫氧化鈉溶液25 mL使溶解，溶液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加三氯甲烷提取2次，25 mL/次，棄去三氯甲烷液，加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～2，用三氯甲烷提取3次，25 mL/次，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，并轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

陰性樣品溶液的制備：陰性樣品溶液是按處方比例稱取除細(xì)辛外的其余味藥，按制法制成細(xì)辛陰性樣品，再取此陰性樣品按上述“供試品溶液的制備”方法制備缺細(xì)辛的陰性樣品溶液。

1.2.2.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 色譜柱：十八烷基鍵合硅膠為填充劑（Agilent ZORBAX C SB-Aq 4.6 mm×250 mm）;以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05%磷酸溶液為流動(dòng)相B，按表5中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫;檢測(cè)波長(zhǎng)為319 nm。色譜見(jiàn)圖1～3。

1.2.2.3 限度的確定 根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版一部230頁(yè)細(xì)辛馬兜鈴酸Ⅰ（CHNO）限量項(xiàng)下規(guī)定，按干燥品計(jì)算，含馬兜鈴酸Ⅰ（CHNO）不得過(guò)0.001%;經(jīng)計(jì)算，本品每克含細(xì)辛藥材0.066 7 g，按藥材限量和完全轉(zhuǎn)移計(jì)算，本品理論含量為每克含馬兜鈴酸Ⅰ（CHNO）為0.667 μg，本次測(cè)定馬兜鈴酸Ⅰ含量為0.184 μg/g。因此，按照藥典要求，可暫定本品中馬兜鈴酸Ⅰ限度為：本品每克含馬兜鈴酸Ⅰ（CHNO）不得過(guò)0.66 μg。

1.2.3 定性鑒別[13-14]

1.2.3.1 陳皮薄層色譜法（Thin Layer Chromatography，TLC）鑒別 取麻杏二陳止咳顆粒4 g，研細(xì)，加70%乙醇30 mL，加熱回流1 h，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，用正丁醇提取2次，15 mL/次，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液。照薄層色譜法（《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。見(jiàn)圖4。

1.2.3.2 甘草薄層色譜鑒別 取甘草對(duì)照藥材1 g，加70%乙醇30 mL，加熱回流1 h，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，用正丁醇提取2次，15 mL/次，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取“1.2.3.1”項(xiàng)下的供試品溶液及上述對(duì)照藥材溶液各5～10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-無(wú)水乙醇-丙酮-濃氨試液（10∶1∶5∶2）為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出晾干，依次噴以三氯化鋁試液和10%硫酸乙醇溶液，105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。見(jiàn)圖5。

1.2.4 HPLC含量測(cè)定

1.2.4.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 菲羅門(mén)Synergi Polar-RP 80A 4.6×250 mm，4 μm，流動(dòng)相：以甲醇（A）-0.092%磷酸溶液（B）（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）為流動(dòng)相，等度洗脫1.5∶98.5;流速：1 mL/min，柱溫：30 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm;進(jìn)樣量為10 μL。理論塔板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算大于3 000[15-16]。

1.2.4.2 對(duì)照品溶液的制備 取鹽酸麻黃堿對(duì)照品約10 mg，精密稱定為10.04 mg，置10 mL量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻（1.004 mg/mL）;取鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品約10 mg，精密稱定為10.28 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻（1.028 mg/mL）;精密量取鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液0.4 mL，鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品溶液0.15 mL置同一10 mL量瓶，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（鹽酸麻黃堿：40.16 μg/mL，鹽酸偽麻黃堿：15.42 μg/mL）[15-16]。

1.2.4.3 供試品溶液的制備 將本品研細(xì)，精密稱取3批次樣品各5 g，置500 mL圓底燒瓶中，加氯化鈉20 g、8%氫氧化鈉溶液150 mL，混勻，蒸餾（流速1 mL/min），用盛有1 mol/L鹽酸10 mL的100 mL量瓶接收餾出液至約95 mL，加水稀釋至刻度，搖勻，超聲10 min，即得[15-16]。

1.2.4.4 陰性樣品溶液的制備 按處方比例精密稱取除蜜麻黃外的其余味藥，按制法制成蜜麻黃陰性樣品，再取此陰性樣品按“1.2.4.3”項(xiàng)下方法制備，即得缺蜜麻黃的陰性樣品溶液。

1.2.4.5 專屬性試驗(yàn) 取“1.2.4.2”-“1.2.4.4”項(xiàng)下溶液各10 μL，在“1.2.4.1項(xiàng)”色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)圖6～10。由圖可知，對(duì)照品色譜峰分離度良好，陰性無(wú)干擾。

1.2.4.6 檢測(cè)限、定量限考察 取“1.2.4.2”項(xiàng)下對(duì)照品適量，將2種溶液成倍稀釋，以S/N=3為檢測(cè)限，S/N=10為定量限。結(jié)果，鹽酸麻黃堿檢測(cè)限和定量限分別為2.10 ng、8.10 ng，鹽酸偽麻黃堿分別為2.21 ng、8.05 ng[17-18]。

1.2.4.7 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密移取“1.2.4.2”項(xiàng)下鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液（濃度：1.004 mg/mL）0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.8 mL、1 mL，精密量取鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品溶液（濃度：1.028 mg/mL）0.05 mL、0.1 mL、0.15 mL、0.3 mL、0.6 mL，分別置同一10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，制成1 mL含鹽酸麻黃堿10.04 μg、20.08 μg、40.16 μg、80.32 μg、100.4 μg及鹽酸偽麻黃堿5.14 μg、10.28 μg、15.42 μg、30.84 μg、61.68 μg的系列濃度的混合對(duì)照品溶液。按“1.2.4.1”項(xiàng)下色譜條件，分別進(jìn)樣10 μL，測(cè)定，以峰面積積分A對(duì)鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的進(jìn)樣量C（μg）進(jìn)行線性回歸分析，得線性回歸方程：鹽酸麻黃堿：A=1.48×10C-1.17×10（n=5），r=0.999 9;鹽酸偽麻黃堿：A=1.55×10C+2.46×10（n=5），r=0.999 9。表明鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在0.100 4～1.004 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，并且直線通過(guò)原點(diǎn)，可用單點(diǎn)外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定和計(jì)算;鹽酸偽麻黃堿進(jìn)樣量在0.051 4～0.616 8 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，并且直線通過(guò)原點(diǎn)，可用單點(diǎn)外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定和計(jì)算。

1.2.4.8 精密度試驗(yàn) 取鹽酸麻黃堿（40.16 μg/mL）及鹽酸偽麻黃堿（15.42 μg/mL）混合對(duì)照品溶液，按上述色譜條件，依法測(cè)定，重復(fù)進(jìn)樣6次，計(jì)算鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿峰面積A的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的平均峰面積分別為594705，242929，RSD值分別為0.06%，0.18%，表明儀器精密度良好。

1.2.4.9 對(duì)照品純度檢查 取鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液（濃度：1.004 mg/mL）和鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品溶液（濃度：1.028 mg/mL），按上述色譜條件，分別進(jìn)樣10 μL，測(cè)定，用峰面積歸一化法計(jì)算，鹽酸麻黃堿純度為98.75%，鹽酸偽麻黃堿純度為98.53%，符合含量測(cè)定要求，計(jì)算時(shí)按100%計(jì)算。

1.2.4.10 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品（批號(hào)：20181001），按“1.2.4.3項(xiàng)”供試品溶液的制備方法進(jìn)行，分別在放置0、2、4、6、8及24 h后，依法測(cè)定鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的峰面積A，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的平均峰面積分別為531 255，191 225，RSD值分別為0.97%，0.78%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。

1.2.4.11 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一樣品（批號(hào)：20181001），按“1.2.4.3項(xiàng)”供試品溶液的制備方法進(jìn)行，制備6份供試品溶液，依法測(cè)定，計(jì)算鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果，供試品中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的平均含量分別為0.711 mg/g，0.247 mg/g，RSD值分別為0.37%，1.88%，表明該方法重復(fù)性良好。

1.2.4.12 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已測(cè)知含量的樣品（批號(hào)：20181001，鹽酸麻黃堿含量0.711 mg/g，鹽酸偽麻黃堿含量0.247 mg/g）約2.5 g，精密稱定，置500 mL圓底燒瓶中，再分別精密加入1.993 mg/mL的鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液（精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品19.93 mg，置10 mL量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻）1 mL，1.072 mg/mL的鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品溶液（精密稱取鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品10.72 mg，置10 mL量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻）0.6 mL，加氯化鈉20 g、8%氫氧化鈉溶液150 mL，混勻，照“供試品溶液制備方法”試驗(yàn)，平行6份，依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果表明方法回收率較好。見(jiàn)表6、表7。

2 結(jié)果

2.1 樣品含量測(cè)定 取4個(gè)不同批號(hào)的麻杏二陳止咳顆粒（n=4），按“1.2.4.3項(xiàng)”下供試品制備方法進(jìn)行，以峰面積外標(biāo)法品中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量。結(jié)果表明顆粒劑有效成分鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定，根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版一部320頁(yè)。見(jiàn)表8～10。麻黃項(xiàng)下規(guī)定，按干燥品計(jì)算，含鹽酸麻黃堿（CHNO·HCl）和鹽酸偽麻黃堿（CHNO·HCl）的總量不得少于0.80%，本品每克含蜜麻黃藥材0.167 g，鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿為水溶性成分，按藥材含量低限和轉(zhuǎn)移率40%計(jì)算，本品理論含量為每克含鹽酸麻黃堿（CHNO·HCl）和鹽酸偽麻黃堿（CHNO·HCl）0.53 mg，因此，暫定本品含量限度為：本品每克以鹽酸麻黃堿（CHNO·HCl）和鹽酸偽麻黃（CHNO·HCl）的總量計(jì)不得少于0.53 mg。

3 討論

本顆粒劑中含有細(xì)辛中藥材，雖用量較少，但是出于用藥安全性的考慮，對(duì)其含有的毒性成分進(jìn)行了限量測(cè)定。在馬兜鈴酸類(lèi)化合物中，主要的毒性成分為馬兜鈴酸Ⅰ和馬兜鈴酸Ⅱ，在硝基還原酶的催化下，一部分馬兜鈴酸Ⅰ被還原為馬兜鈴內(nèi)酰胺，另一部分在還原過(guò)程中進(jìn)一步與DNA作用，形成加合物。其中馬兜鈴酸Ⅰ是馬兜鈴屬植物中毒性最強(qiáng)的成分。另有研究發(fā)現(xiàn)，不但馬兜鈴酸具有很強(qiáng)的腎毒性，其代謝產(chǎn)物馬兜鈴內(nèi)酰胺同樣具有腎毒性。又通過(guò)對(duì)馬兜鈴酸代謝過(guò)程及代謝酶的研究證實(shí)，馬兜鈴酸致突變和致癌毒性是由其代謝的中間產(chǎn)物馬兜鈴內(nèi)酰胺氮離子引起的，因?yàn)樗哂泻軓?qiáng)的親電能力，能與DNA堿基環(huán)外氨基親電結(jié)合，生成相應(yīng)的加合產(chǎn)物，使RAS基因和P53基因發(fā)生突變，進(jìn)而誘發(fā)腫瘤。為了本品安全可控，我們須對(duì)本品中馬兜鈴酸Ⅰ含量進(jìn)行控制，建立其限量檢查的方法[19]。

《中華人民共和國(guó)藥典》[20]（2015年版）收載麻黃為麻黃科植物草麻黃、中麻黃或木賊麻黃的干燥草質(zhì)莖，主要藥用成分為左旋麻黃堿、右旋偽麻黃堿、左旋甲基麻黃堿、右旋甲基偽麻黃堿、左旋去甲基偽麻黃堿、右旋去甲基偽麻黃堿等生物堿以及揮發(fā)油類(lèi)、鞣質(zhì)類(lèi)、黃酮類(lèi)、糊粉、菊粉、果膠、纖維素、葡萄糖等多糖類(lèi)、草酸、檸檬酸和蘋(píng)果酸等有機(jī)酸類(lèi)[21]。本顆粒劑型中，麻黃作為君藥，起到宣肺平喘之效。其作為平喘和止咳之要藥，多種中成藥制劑種均含有。本研究也將其含有的麻黃堿和偽麻黃堿成分作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定的首選。試驗(yàn)研究過(guò)程中，考慮更好地發(fā)揮君藥的功效，采取了水提和乙醇回流的方式進(jìn)行了麻黃藥材的提取工作，以麻黃堿的含量和小鼠的止咳藥效學(xué)2個(gè)指標(biāo)進(jìn)行了觀察，發(fā)現(xiàn)雖然乙醇回流提取的方式麻黃堿的含量較高，但是在止咳藥效方面，水提取的麻黃鎮(zhèn)咳效果更加明顯，這與孟碩等[22]研究麻荊顆粒中麻黃提取的方法優(yōu)化論述一致，原因可能是水提物成分更多、更復(fù)雜，在鎮(zhèn)咳方面發(fā)揮了綜合的作用，而乙醇提取物成分經(jīng)過(guò)純化，雖保留了較高的活性成分，但是缺乏了多種物質(zhì)之間的相互作用，這也恰恰體現(xiàn)了中醫(yī)藥在治療疾病方面的整體思想和針對(duì)某些病癥治標(biāo)又治本的綜合優(yōu)勢(shì)。

參考文獻(xiàn)

[1]鄧玉芝，王力寧，黃美芬，等.王力寧治療小兒咳嗽經(jīng)驗(yàn)[J].湖南中醫(yī)雜志，2017，33（2）：37-39.

[2]王力寧，馮春輝，陳金月，等.麻杏二陳湯煮散治療小兒特稟質(zhì)咳嗽的臨床研究[J].中醫(yī)兒科雜志，2012，8（5）：32-35.

[3]王力寧.王力寧教授治療小兒特稟質(zhì)咳嗽的經(jīng)驗(yàn)介紹[C].第二十九次全國(guó)中醫(yī)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)暨“小兒感染性疾病的中醫(yī)藥預(yù)防”培訓(xùn)班論文匯編.北京：中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)兒科分會(huì)，2012.

[4]王力寧.麻杏二陳湯加減治療小兒咳嗽變異性哮喘的近期療效觀察[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，22（5）：797.

[5]陳金月，王力寧，李海英，等.麻杏二陳湯煮散與飲片止咳祛痰作用的比較[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2015，21（17）：39-41.

[6]楊正騰，葉信，馬家寶，等.麻杏二陳特稟咳顆粒的提取工藝優(yōu)選及含量測(cè)定研究[J].廣西中醫(yī)藥，2016，39（5）：72-75.

[7]葉信，楊正騰，陳勇，等.麻杏二陳特稟咳顆粒中揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合優(yōu)選工藝[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2017，26（9）：14-15，19.

[8]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（四部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：7.

[9]孫婉瑾，金實(shí)，姜楠，等.理氣消癭片中馬兜鈴酸A的限量檢查及急性毒性試驗(yàn)[J].湖北大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2019，41（5）：501-505.

[10]呂情花.追風(fēng)透骨膠囊中馬兜鈴酸A的限量檢查[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2015，9（15）：285-286.

[11]侯帥紅，李晶晶，韓林濤，等.細(xì)辛不同藥用部位馬兜鈴酸的含量測(cè)定[J].湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，20（6）：42-44.

[12]劉新，林於.細(xì)辛中馬兜鈴酸的HPLC限量測(cè)定方法探討[J].中成藥，2008，30（6）：896-899.

[13]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：86，191.

[14]麥榮國(guó)，郭曉鑾，招麗娟，等.麻黃湯不同配伍對(duì)苦杏仁和甘草有效成分的影響[J].世界中醫(yī)藥，2018，13（3）：735-738.

[15]羅奕，姚文麗，吳琳琳，等.HPLC法同時(shí)測(cè)定咳速停膠囊中4種成分[J].中成藥，2017，39（1）：102-106.

[16]張蓓，羅旭明，李默影，等.芪仙地花顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].中成藥，2019，41（3）：521-525.

[17]余新華，周虹，邵永生，等.基于指紋圖譜評(píng)價(jià)麻黃湯中藥物的成分分析研究[J].世界中醫(yī)藥，2017，12（7）：1656-1659.

[18]周雪紅，李志浩，陳銀華，等.SPE-HPLC法測(cè)定麻黃止嗽丸中馬兜鈴酸A的含量[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2015，21（14）：44-46.

[19]侯改靈，黃巖杰，楊曉青，等.從臨床表現(xiàn)和致病機(jī)制再認(rèn)識(shí)馬兜鈴酸類(lèi)中藥的腎毒性[J].中藥藥理與臨床，2019，35（2）：162-166.

[20]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：322-323.

[21]陳光瑋，田彥芳，萬(wàn)海同，等.麻黃湯有效組分對(duì)發(fā)熱大鼠的解熱作用及與藥動(dòng)學(xué)相關(guān)性研究[J].中國(guó)中藥雜志，2020，45（3）：655-663.

[22]孟碩，張鵬，葛爭(zhēng)艷，等.結(jié)合藥效學(xué)優(yōu)選麻荊顆粒中麻黃提取方法[J].中藥新藥與臨床藥理，2016，27（1）：118-121.

（2020-02-11收稿 本文編輯：張雄杰）

基金項(xiàng)目：廣西科技廳重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目（AB19110003）——醫(yī)院制劑壯藥毒結(jié)清丸的研發(fā);廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院院級(jí)科研項(xiàng)目（2017ZJ006）——麻杏二陳特稟咳顆粒藥效及毒性探究

作者簡(jiǎn)介：崔?。?987.09—），女，碩士，主管藥師，研究方向：中藥及其制劑質(zhì)量分析，E-mail：18776728630@163.com

通信作者：楊正騰（1970.09—），男，碩士，主任藥師，研究方向：中藥及其制劑質(zhì)量分析，E-mail：674632459@qq.com