肖 哲,李怡清,李陳薇,馮慧敏
(海南熱帶海洋學院,海南三亞 572000)
試驗材料為“粉佳人”康乃馨,采購自昆明斗南花卉市場,并空運至三亞。從其中選取80 支形態(tài)正常、顏色飽滿、大小一致、無病蟲害的康乃馨進行試驗,修剪其長度在30cm 左右,根部切口斜45°入水醒花。
準備若干500mL 錐形瓶,清洗干凈,放置晾干,作為康乃馨切花瓶插的容器。本試驗設(shè)有1 個陰性對照,1 個陽性對照,3 個處理。陰性對照A 組為2%的蔗糖溶液,處理B 組為2%蔗糖+2%乙醇溶液,處理C 組為2%蔗糖+3%乙醇溶液,處理D 組為2%蔗糖+4%乙醇溶液,陽性對照E 組為2%蔗糖+商業(yè)保鮮劑溶液,每組設(shè)置5 個錐形瓶,分別編號,在每組前3 個錐形瓶中每瓶插入3 朵康乃馨切花用來測量其形態(tài)指標變化,在后2 個錐形瓶中每瓶插入5 朵康乃馨切花用來測量其生理指標變化,置于室內(nèi)觀察。
1.3.1 瓶插壽命。目測法觀察瓶插壽命,從瓶插開始日到康乃馨枯萎、花瓣凋零為終點,每日觀察瓶插康乃馨切花的形態(tài)特征,并記錄其壽命。
1.3.2 花徑大小。采用游標卡尺測定花徑大小,從瓶插開始日到康乃馨枯萎、花瓣凋零為終點,每日使用游標卡尺測定瓶插康乃馨垂直方向的2 個最大直徑,取平均值記錄。
1.3.3 鮮重。采用稱量法測定鮮重,每2d 稱取花枝、保鮮劑、錐形瓶的總重量M1,保鮮劑、錐形瓶總重量M2,M1-M2=M3即為切花鮮重,2d 測量1 次,并記錄。
1.3.4 花瓣相對含水量。稱取0.05g 花瓣放入烘箱120℃,1h,記錄干重。再稱取0.05g 花瓣,放入蒸餾水浸泡70min,記錄飽和鮮重。相對含水量(%)=[(鮮重-干重)/(飽和鮮重-鮮重)]×100,3d 測量1 次,記錄數(shù)據(jù)。
1.3.5 可溶性糖含量。采用蒽酮法測定可溶性糖含量,取樣品花瓣0.5g,加入50mL 離心管中,加入15mL 蒸餾水,薄膜密封后在沸水浴中放置20min 取出,冷卻,用蒸餾水定容至50mL。吸取其中的0.5mL 作為待測液放于試管中,加入5mL 蒽酮試劑,搖勻后測定吸光度,通過葡萄糖標準曲線查得可溶性糖含量。每2d 測量1次,記錄數(shù)據(jù)。
1.3.6 可溶性蛋白質(zhì)。采用考馬斯亮藍法測定可溶性蛋白質(zhì)含量,取樣品花瓣0.5g 剪碎,加5mL 蒸餾水研磨至勻漿取出至試管,用4000r/min 離心10min 取上清液0.02mL,加入0.98mL 蒸餾水、5mL 考馬斯亮藍G-250 溶液,靜止5min,在595nm 下比色,測定吸光度,并通過標準曲線查得蛋白質(zhì)含量。每2d 測量1 次,記錄數(shù)據(jù)。
1.3.7 POD 酶的活性。使用索萊寶公司生產(chǎn)的BC0095過氧化物酶(POD)的活性試劑盒測定POD 酶的活性,取樣品花瓣0.1g,加入1mL POD 提取液進行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min 取上清液,置冰上待測。測定前將分光光度計預熱30min,波長調(diào)節(jié)至470nm,蒸餾水調(diào)零。并將POD 試劑一、二、三在常溫中放置10min以上。向EP 管中按順序加入試劑一120μL、試劑二30μL、試劑三30μL、蒸餾水60μL、樣品5μL 立即混勻并計時,立即取200μL 轉(zhuǎn)移至微量比色皿中,記錄470nm 下30s 時的吸光值A(chǔ)1與90s 后的吸光值A(chǔ)2,計算△A=A2-A1。POD(U/g)=△A÷0.01×V 反總÷(W÷V 樣總×V 樣)÷T=4900×△A÷W。每2d 測量1 次,記錄數(shù)據(jù)。
在不用濃度的乙醇作用下,康乃馨的瓶插壽命明顯延長。從表1 可知,B、C、D、E 組的瓶插壽命相較于A 組分別延長了28.53%、34.28%、25.71%、40.27%,其中C 組最接近E 組,其瓶插壽命為15.67d,較于A 組延長了4d,有顯著效果??的塑扒谢ǖ淖畲蠡◤皆鲩L率也受到乙醇影響,C 組的最大花徑增加率明顯高于A 組空白組,且與E 組化學保鮮劑組最為接近。由此表明,乙醇能夠延長康乃馨的瓶插壽命,提高最大花徑的增長率,且在乙醇濃度為4%時,延長效果最好。
表1 不同濃度乙醇處理對瓶插康乃馨壽命、花徑的影響
康乃馨瓶插在不同濃度的乙醇溶液影響下,抑制細菌與真菌的生長,康乃馨的鮮重變化有一定差異。由圖1 可知,隨時間的延長,康乃馨鮮重都由增長到減少,在4d 時達到最大值。且鮮重變化程度較小的為C、E 組,保鮮效果較佳;A 組鮮重變化程度最大,失水率最高,保鮮效果較差。說明乙醇溶液在一定濃度下對瓶插康乃馨的衰老有一定緩解作用。
圖1 不同濃度乙醇處理對瓶插康乃馨鮮重的變化
康乃馨瓶插在不同濃度的乙醇作用下,抑制細菌、真菌生長,減少水分流失,對花瓣的相對含水量變化有一定影響。由圖2 可知,各組的含水量都呈現(xiàn)持續(xù)減少趨勢,乙醇處理對康乃馨的保持水分有明顯作用,C、E組的含水量變化情況相對較小,水分流失少,保鮮效果較好。
圖2 不同濃度乙醇處理對康乃馨相對含水量的變化
由圖3 可知,在不同濃度乙醇處理下,各組的可溶性糖含量均由先上升變?yōu)楹笙陆?,從趨勢上可以看出,C 組與E 組的變化程度最小,A 組的變化最大。在不同濃度的乙醇作用下瓶插康乃馨的可溶性糖含量變化較小,一定程度上抑制了瓶插康乃馨中的氧化反應(yīng),延長切花壽命,達到了保鮮的目的。
圖3 不同濃度乙醇處理對瓶插康乃馨可溶性糖含量的變化
由圖4 可知,瓶插康乃馨的蛋白質(zhì)含量隨天數(shù)變化均逐步減少。A 組減少的蛋白質(zhì)最快、最多。不同濃度的乙醇通過抑制瓶內(nèi)細菌生長,減少了瓶插康乃馨的代謝行為,使蛋白質(zhì)含量減少緩慢,達到使切花延長壽命的效果。
圖4 不同濃度乙醇處理對瓶插康乃馨可溶性蛋白質(zhì)含量的變化
POD 廣泛存在于動物、植物、微生物中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用,是生物體消除自由基的重要酶。由圖5 可知,瓶插過程中,A 組的POD 活性呈先增高再降低再升高再降低變化,其他組POD 活性呈先降低再增高再降低再升高變化。由此表明,適宜濃度的乙醇對康乃馨切花的POD 酶活性具有促進效果。
圖5 不同濃度乙醇處理對瓶插康乃馨POD 含量的變化
切花的瓶插壽命、花徑、含水量均是衡量切花衰老程度以及觀賞效果的重要指標。本試驗表明,在瓶插康乃馨切花中加入不同濃度乙醇溶液,能有效延長其瓶插壽命,提高最大花徑的增長率,減少其水分流失,保持了花卉的觀賞價值,改善了花卉的水分情況。在3組乙醇處理中的C 組與保鮮劑處理組E 組保鮮效果最為接近,用3%的濃度乙醇處理康乃馨切花保鮮效果較佳,制作簡單,成本較低,可以使用3%的乙醇制作鮮切花保鮮劑,具有很大的市場潛力。