王煥森,王寶維*,凡文磊,孔 敏,張名愛,邢 月,劉晨龍,汪 超,王巧莉
(1.青島農(nóng)業(yè)大學優(yōu)質(zhì)水禽研究所,國家水禽產(chǎn)業(yè)技術體系營養(yǎng)與飼料研究室,山東青島 266109;2.重慶市畜牧科學院,重慶 402460;3.青島普興生物科技有限公司,山東青島 266113)
煙酸(Niacin)是一種水溶性B 族維生素,其作為組成輔酶煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸及輔酶煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的直接前體,在禽類體內(nèi)主要以還原型輔酶II(NADPH)和還原型輔酶I(NADH)的形式存在。NADPH 為脂類合成供氫或作為輔酶參與戊糖磷酸循環(huán),NADH 為體內(nèi)許多氧化反應提供電子。段晨磊等研究發(fā)現(xiàn),在飼糧中添加煙酸能夠提高1~16 周齡生長期五龍鵝種鵝抗氧化能力和免疫性能。劉政等研究發(fā)現(xiàn),在1~6 周肉雞飼糧中添加煙酸能夠改善其抗氧化能力。研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加煙酸能夠提高反芻動物的抗氧化能力、緩解應激。目前,產(chǎn)蛋期種鵝煙酸需要量還未見報道。本試驗旨在研究在飼糧中添加不同水平的煙酸對種鵝繁殖性能、血清生殖激素、血清抗氧化性能及養(yǎng)分利用率的影響,篩選產(chǎn)蛋期種鵝飼糧中煙酸的適宜需要量,為進一步完善我國種鵝營養(yǎng)需要量數(shù)據(jù)庫提供理論依據(jù)。
1.1 試驗動物及設計 選用體況相近34 周齡五龍鵝180只,隨機分成6 組,每組6 個重復,每個重復5 只(4母1 公)。各組飼糧煙酸添加量為0、10、20、30、40、50 mg/kg。預試期7 d,正試期70 d。試驗鵝由青島農(nóng)業(yè)大學優(yōu)質(zhì)水禽育種基地提供。
1.2 試驗飼糧 基礎飼糧組成與營養(yǎng)成分見表1,采用高效液相色譜法測得基礎飼糧中煙酸含量為29.16 mg/kg。煙酸(有效成分99%)為綿陽市崴尼達醫(yī)藥科技有限責任公司產(chǎn)品。
表1 基礎飼糧組成與營養(yǎng)成分(風干基礎)
1.3 飼養(yǎng)管理 試驗前對鵝舍和需要用到的器具進行細致沖洗及消毒。試驗種鵝均采用地面飼養(yǎng),自由采食及飲水。每組選取大小相近、外觀完整的120 個種蛋,總計720 個,1 個月孵化1 次,統(tǒng)計入孵蛋的數(shù)量、未受精蛋的數(shù)量、孵化的數(shù)量、健康雛的數(shù)量等。
1.4 測定指標及方法
1.4.1 繁殖性能 繁殖性能測定與計算方法按照《家禽生產(chǎn)性能名詞術語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T823-2004)標準進行。
1.4.2 血清生殖激素指標 試驗進行到77 d,每個重復中抓取2 只體況相近的母鵝進行翅靜脈采血,3 000 r/min離心10 min 制備血清,分裝成3 份,放入-40℃冰箱。血清促卵泡素、雌二醇、催乳素、睪酮、黃體生成素含量采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗測定。試劑盒均為南京建成生物研究所產(chǎn)品。
1.4.3 血清抗氧化指標 血清總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶活性、總抗氧化能力和丙二醛含量均采用試劑盒測定(南京建成生物研究所)。
1.4.4 養(yǎng)分利用率 飼養(yǎng)試驗進行到77 d,從每重復選取體況相近的試驗鵝1 只,每組6 只,共36 只,單籠飼養(yǎng)進行代謝試驗。試驗預試期4 d,禁食1 d(禁食12 h 時補飲6% 葡萄糖水),正試期3 d。待胃排空的24 h 后,連續(xù)喂3 d 待測飼料,每天喂200 g,在代謝籠下放置集糞盤,每天定點、單獨收集每只鵝全部糞尿便,連續(xù)收集3 d,煙酸固氮(按每100 g 鮮糞尿中加入10% 煙酸10 mL),混合后取樣。在65~75℃烘箱中烘干,自然狀態(tài)下回潮24 h,制成風干樣品,后用小型萬能粉碎機將干糞尿樣粉碎留存。
粗纖維使用ANKOM2000 Fiber Analyzer(NY14450)儀器(ANKOM 公司)檢測。粗蛋白質(zhì)采用FOSS TEC ATOR QUALITY ASSURANCE 儀器(FOSS Analytical A/S)進行檢測。粗脂肪直接選用乙氧基乙烷測定。鈣和磷采用本校中心試驗室的ICP-OES–Optima 8x00 光譜儀(美國PE 公司)進行測定。
1.5 統(tǒng)計分析 采用SPSS 22.0 軟件進行 One-Way ANOVA 分析,采用Duncan's 進行多重比較,分析日糧煙酸不同添加量的影響及各組間差異。<0.05 表示差異顯著,<0.01 表示差異極顯著,>0.05 表示差異不顯著。數(shù)據(jù)以平均值和均值標準誤表示。
2.1 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能的影響 由表2 可知,飼糧中添加不同水平的煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝種蛋合格率、種蛋受精率、種蛋孵化率及健雛率影響均不顯著。
表2 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能的影響 %
2.2 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清生殖激素的影響 由表3 可知,飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清中促卵泡素、雌二醇、催乳素、睪酮及黃體生成素影響均不顯著。
表3 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清生殖激素的影響
2.3 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清抗氧化指標的影響 由表4 可知,飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清過氧化氫酶活性、丙二醛、總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶影響不顯著,但丙二醛、總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶呈線性關系(<0.01),10~50 mg/kg 組丙二醛含量較0 mg/kg 組分別降低了4.3%、16.5%、27.9%、33.4%、37.3%;10~50 mg/kg 組總超氧化物歧化酶活性較0 mg/kg 組分別提高了1.1%、3.7%、3.4%、8.3%、10.1%;10~50 mg/kg組谷胱甘肽過氧化物酶活性較0 mg/kg 組分別提高了2.1%、5.8%、8.9%、11.0%、12.3%。20、30、40、50 mg/kg 組血清總抗氧化能力高于0 mg/kg 組和10 mg/kg 組(<0.01)。
表4 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清抗氧化指標的影響
將總抗氧化能力、丙二醛、總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶(Y)分別與飼糧中煙酸添加量(X)進行二次曲線擬合,建立回歸方程:
=6.654+0.089–0.001(=0.757,<0.001)
=15.78–0.166+0.01(=0.351,=0.011)
=229.934+0.213+0.05(=0.381,=0.006)
=179.727+0.644–0.003(=0.378,=0.007)
根據(jù)曲線回歸方程得出,丙二醛、總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的二次曲線擬合度低,故此水平不做參考。飼糧中煙酸添加量為44.5 mg/kg 時,血清總抗氧化能力最高。
2.4 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝養(yǎng)分利用率的影響 由表5 可見,飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝粗蛋白質(zhì)和鈣的利用率無顯著影響。30、40、50 mg/kg 組粗纖維表觀利用率高于0 mg/kg 組(<0.05);40 mg/kg 組和50 mg/kg 組粗脂肪、磷的表觀利用率均高于0 mg/kg 組(<0.05)。
表5 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝養(yǎng)分利用率的影響 %
3.1 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能的影響 目前,關于煙酸對禽類繁殖性能的研究很少。文杰等研究發(fā)現(xiàn),種母雞飼糧中添加煙酸對種蛋的受精率和孵化率影響不顯著。本試驗結(jié)果也表明,飼糧煙酸添加水平對產(chǎn)蛋期五龍鵝種蛋合格率、種蛋受精率、種蛋孵化率及健雛率影響不顯著,表明飼料原料中煙酸含量已能夠滿足種鵝產(chǎn)蛋期繁殖性能的需要。
3.2 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清生殖激素指標的影響 關于煙酸對禽類生殖激素的影響,尚未見相關報道。李新建等研究發(fā)現(xiàn),在泌乳中期荷斯坦奶牛飼糧中添加煙酸對血清中催乳素含量影響不顯著。孫先枝等研究發(fā)現(xiàn),在熱應激奶牛飼糧中添加煙酰胺對血清中催乳素含量影響不顯著。本試驗結(jié)果也表明,飼糧煙酸添加水平對產(chǎn)蛋期種五龍鵝促卵泡素、雌二醇、催乳素及睪酮的影響不顯著,表明飼料原料中煙酸含量已能夠滿足產(chǎn)蛋期種鵝生殖激素分泌的需要,無需為此額外添加。
3.3 飼糧添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝血清抗氧化能力的影響 動物為清除活性氧自由基對機體造成的損傷,形成了一套由總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶等組成的高效抗氧化系統(tǒng)??偝趸锲缁竿ㄟ^歧化作用消除超氧陰離子,降低活性氧自由基對細胞的損害。谷胱甘肽過氧化物酶主要作用是清除脂類氫過氧化物,還能替代過氧化氫酶消除HO。總抗氧化能力水平能夠反映機體面對外來刺激時抗氧化酶系統(tǒng)和非酶抗氧化系統(tǒng)的應對能力。丙二醛是脂質(zhì)過氧化分解的小分子產(chǎn)物,反映脂質(zhì)過氧化程度及細胞受損傷程度。段晨磊等研究發(fā)現(xiàn),1~16 周齡五龍鵝飼糧中添加80 mg/kg 煙酸可顯著提高總超氧化物歧化酶活性,極顯著提高血清谷胱甘肽過氧化物酶活性,極顯著提高血清總抗氧化能力,極顯著降低血清丙二醛含量。研究表明,在肉雞、雜交鱘幼魚、大鼠飼糧中添加煙酸均能提高血清或肌肉中抗氧化酶活性及總抗氧化能力,并降低丙二醛含量。本試驗結(jié)果顯示,飼糧中添加煙酸可以極顯著增強產(chǎn)蛋期種五龍鵝血清總抗氧化能力,對血清過氧化氫酶活性、丙二醛、總超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶影響不顯著。飼糧中添加煙酸可增強抗氧化系統(tǒng)清除活性氧自由基的能力和增強分解過氧化物能力,在動物機體維持正常生理代謝中起到重要作用。本試驗結(jié)果中,除抗氧化能力與上述結(jié)果一致外,其他幾項指標均未達到差異顯著,這可能與煙酸添加劑量或試驗時間有關,也反映出煙酸對機體具有敏感性,其機理有待于繼續(xù)研究。
3.4 飼糧中添加不同水平煙酸對產(chǎn)蛋期種鵝養(yǎng)分利用率的影響 煙酸是禽類所需的一種重要的維生素,適宜水平的煙酸可促進禽類的健康生長和飼料轉(zhuǎn)化率。段晨磊等研究發(fā)現(xiàn),在1~16 周齡五龍鵝飼糧中添加煙酸對粗脂肪和磷的利用率有顯著影響。王雪瑩等研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加煙酸能夠提高熱應激牦牛的粗脂肪表觀消化率。Real 等研究發(fā)現(xiàn),豬飼糧中添加煙酸能夠促進其養(yǎng)分利用率。奶牛飼料中添加8 g/d 煙酸可以顯著提高粗纖維、粗脂肪和磷的利用率。本研究結(jié)果顯示,五龍鵝種鵝飼糧中添加不同水平煙酸對粗蛋白質(zhì)和鈣的利用率影響不顯著,對粗纖維、粗脂肪和磷的利用率有顯著影響。
綜上所述,NRC(1994)給出種鵝的煙酸添加量為20 mg/kg。王煥森等前期研究發(fā)現(xiàn),種鵝煙酸額外添加量為40 mg/kg 時,能夠獲得較好的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)。結(jié)合本文結(jié)果可以看出,飼料原料中煙酸含量(29.16 mg/kg)比較豐富,能夠初步滿足正常條件下產(chǎn)蛋鵝繁殖性能和機體生殖激素分泌的需要,但考慮增強機體抗氧化能力、適應各種應激狀態(tài)條件以及提高飼料養(yǎng)分利用率還必須補充添加,建議煙酸添加量為40~50 mg/kg。
本研究結(jié)果表明,飼糧中額外添加20~50 mg/kg煙酸可顯著提高產(chǎn)蛋期種鵝血清總抗氧化能力;添加40~50 mg/kg 煙酸可顯著提高產(chǎn)蛋期種鵝粗纖維、粗脂肪及磷的表觀利用率。本試驗條件下,建議產(chǎn)蛋期種鵝飼糧中添加煙酸40~50 mg/kg。