潘思安 黃永凱 歐陽(yáng)倩 朱瀟鵬

(湖南省株洲市中心醫(yī)院1 康復(fù)治療科，2 神經(jīng)外科，株洲市 412000，電子郵箱：rpfdkm@163.com)

髓母細(xì)胞瘤屬后顱窩惡性膠質(zhì)瘤，占兒童腦腫瘤的8%～10%，是兒童常見(jiàn)的惡性神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤之一，患兒常有顱壓增高、頭痛、嗜睡、厭食、惡心、嘔吐等表現(xiàn)，腫瘤壓迫小腦時(shí)可出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)現(xiàn)象[1-2]。目前，臨床上常采用手術(shù)、顱脊髓照射和化療等方法治療髓母細(xì)胞瘤，雖然這些方法可顯著提高患者生存率，延長(zhǎng)生存期，但仍有約三分之一的患者在確診后5年內(nèi)死亡，而且現(xiàn)有療法的長(zhǎng)期副作用明顯，可引起患者神經(jīng)認(rèn)知和聽(tīng)力受損、內(nèi)分泌功能障礙、繼發(fā)惡性腫瘤的發(fā)生率增加等情況[3-4]。因此，尋找新的治療方法治療髓母細(xì)胞瘤是臨床亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題。微小RNA是指長(zhǎng)度為19～25個(gè)核苷酸的非編碼單鏈小RNA，主要通過(guò)與目的基因的3′非翻譯區(qū)結(jié)合從而調(diào)控mRNA翻譯，可作為候選生物標(biāo)志物用于疾病的診斷和治療[5-6]。多項(xiàng)研究表明，微小RNA-22(microRNA-22,miR-22)在乳腺癌、宮頸癌、結(jié)腸癌、胃癌等惡性腫瘤中的表達(dá)下調(diào)，具有腫瘤抑制作用[7-8]。但關(guān)于miR-22在髓母細(xì)胞瘤發(fā)生和發(fā)展中作用的研究報(bào)告較少，其調(diào)節(jié)作用機(jī)制尚未清楚。故本研究通過(guò)觀察miR-22對(duì)髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響,并基于磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信號(hào)通路分析其潛在的作用機(jī)制，為髓母細(xì)胞瘤的治療尋找新的靶標(biāo)。

1 材料和方法

1.1 細(xì)胞來(lái)源與培養(yǎng) 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系UW402、UW473、DAOY和ONS-76細(xì)胞，以及正常人神經(jīng)細(xì)胞RGC-5細(xì)胞，均購(gòu)自美國(guó)ATCC公司。將細(xì)胞培養(yǎng)于含有10%胎牛血清的杜氏改良伊戈?duì)柵囵B(yǎng)基(Dulbecco′s modified Eagle medium，DMEM)，培養(yǎng)條件為37℃、飽和溫度、5% CO2。每2～3 d傳代一次，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 20只無(wú)特定病原體級(jí)6周齡雄性BALB/c裸鼠，體重18～20 g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)碼：SCXK(京)2017-0011]。飼養(yǎng)條件：室溫(22±1)℃，濕度(50±10)%，每天定時(shí)換氣，保持12 h：12 h光暗照明，自由進(jìn)食、飲水。

1.3 試劑與儀器 DMEM培養(yǎng)基(貨號(hào)：31600)、細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)(cell counting kit-8,CCK-8)試劑盒(貨號(hào)：CA1210)、Transwell小室(貨號(hào)：G4740)、基質(zhì)膠(貨號(hào)：M8370)、結(jié)晶紫染液(貨號(hào)：C8470)、胎牛血清(貨號(hào)：S9020)、青鏈霉素混合液(100×，貨號(hào)：P1400)、胰蛋白酶-乙二胺四乙酸消化液(貨號(hào)：T1300)、TRIzol裂解液(貨號(hào)：R1100)、膜聯(lián)蛋白Ⅴ(Annexin V)-異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)凋亡檢測(cè)試劑盒(貨號(hào)：CA1020)、RIPA裂解液(貨號(hào)：R0010)、二喹啉甲酸蛋白濃度測(cè)定試劑盒(貨號(hào)：PC0020)均購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司；吉姆薩染色試劑盒(貨號(hào)：E607314)購(gòu)自上海生工生物工程股份有限公司；LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染試劑盒(貨號(hào)：11668027)、RevertAidTMfirst Strand cDNA Synthesis Kit試劑盒(貨號(hào)：K1622)購(gòu)自美國(guó)ThermoFisher公司；實(shí)時(shí)熒光PCR引物、miRNA NC/mimics由廣州銳博生物科技有限公司合成；PI3K、磷酸化PI3K(phosphorylated PI3K，p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt(phosphorylated Akt，p-Akt)兔單抗購(gòu)自美國(guó)CST公司(批號(hào)：4249、17336、4691、4060)，兔抗人甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)多抗及辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔二抗購(gòu)自英國(guó)Abcam公司(批號(hào)：ab181602、ab205718)；740Y-P(PI3K激動(dòng)劑)購(gòu)自大連美侖生物技術(shù)有限公司。IX53型顯微鏡購(gòu)自日本奧林巴斯；TGL16MB型高速冷凍離心機(jī)購(gòu)自長(zhǎng)沙湘智離心機(jī)儀器有限公司；ELx800型酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Tek公司；CytoFLEX S流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)Beckman Coulter公司；DYCZ-24KS型雙板垂直電泳儀購(gòu)自北京六一儀器廠；G:BOX型多功能凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)自Syngene公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)細(xì)胞miR-22表達(dá)水平：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的W402、UW473、DAOY、ONS-76和RGC-5細(xì)胞，胰酶消化、2 000 r/min離心15 min后收集細(xì)胞沉淀，加入適量TRIzol裂解液提取細(xì)胞總RNA，檢測(cè)RNA濃度和純度后，按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū)的步驟將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。PCR反應(yīng)體系包括dNTPs 0.5 μL、5×Buffer 5 μL、Taq酶0.3 μL、MgCl21.5 μL、cDNA模板2 μL、上下游引物各1 μL，加去離子水至總體積為25 μL。反應(yīng)參數(shù)為95℃ 5 min，95℃ 30 s、62℃ 30 s、72℃ 30 s，重復(fù)40個(gè)循環(huán)，最后72℃ 10 min，4℃ 5 min終止反應(yīng)。以U6為內(nèi)參基因，采用2-ΔΔCt的方法計(jì)算目的基因相對(duì)表達(dá)水平，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。引物序列見(jiàn)表1。

表1 基因的引物序列

1.4.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及分組：收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的DAOY細(xì)胞，以5×105個(gè)/孔接種到6孔板中，加入DMEM培養(yǎng)基。將DAOY細(xì)胞分為對(duì)照組、miR-22 NC組、miR-22 mimics組、miR-22 mimics+740Y-P組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)融合至70%～80%時(shí)，參照LipofectamineTM2000試劑說(shuō)明書(shū)給予miR-22 NC組、miR-22 mimics組、miR-22 mimics+740Y-P組細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染miR-22 NC、miR-22 mimics、miR-22 mimics，對(duì)照組僅加入LipofectamineTM2000試劑，miR-22 mimics+740Y-P組細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-22 mimics 24 h后添加10 μmol/L的740Y-P 200 μL。各組轉(zhuǎn)染6 h后更換為正常培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48 h后通過(guò)檢測(cè)對(duì)照組、miR-22 NC組、miR-22 mimics組細(xì)胞的miR-22表達(dá)情況評(píng)估轉(zhuǎn)染效率，然后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.4.3 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力：轉(zhuǎn)染48 h后，收集各組細(xì)胞，消化、800 r/min離心5 min、重懸后計(jì)數(shù)，以3×103個(gè)/孔的濃度接種于96孔板中，置于5% CO2培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)0 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h后加入CCK-8試劑，繼續(xù)放置于培養(yǎng)箱中孵育4 h，于酶標(biāo)儀630 nm波長(zhǎng)處讀取光密度值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.4.4 Transwell法檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力：轉(zhuǎn)染48 h后，收集各組細(xì)胞，將細(xì)胞消化、800 r/min離心5 min、重懸后，采用無(wú)血清的DMEM培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞，按照2×104個(gè)/孔的濃度接種于已鋪有基質(zhì)膠的上室，每孔200 μL，下室加入600 μL的DMEM完全培養(yǎng)基，置5% CO2培養(yǎng)箱中37℃繼續(xù)培養(yǎng)48 h后，取出上室，用甲醇固定20 min，棉簽擦掉上室殘余細(xì)胞，1%的結(jié)晶紫染色15 min，磷酸緩沖鹽溶液沖洗2遍，置于顯微鏡下觀察，選取4個(gè)高倍視野(400×)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，取平均值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.4.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況：轉(zhuǎn)染48 h后，收集各組細(xì)胞，胰酶消化使用磷酸緩沖鹽溶液洗滌3次，1 mL 結(jié)合緩沖液重懸，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個(gè)/mL，每管加入100 μL細(xì)胞，再加入5 μL Annexin V-FITC，室溫避光孵育10 min，加入5 μL PI，室溫避光孵育5 min，加入磷酸緩沖鹽溶液至500 μL，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.4.6 蛋白免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞PI3K/Akt信號(hào)通路蛋白磷酸化水平：轉(zhuǎn)染48 h后，收集各組細(xì)胞，加入RIPA裂解液提取細(xì)胞蛋白，并采用二喹啉甲酸蛋白濃度測(cè)定試劑盒進(jìn)行蛋白定量，測(cè)定蛋白濃度。每個(gè)樣本取30 μg蛋白進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳，濃縮膠80 V、分離膠120 V電泳2 h，60 V轉(zhuǎn)膜2 h將蛋白轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜后，將膜置于5%脫脂奶粉中室溫環(huán)境下封閉2 h，放入相應(yīng)一抗(稀釋比例均為1∶2 000)于4℃孵育過(guò)夜，第2天用TBST清洗3次，10 min/次，加入二抗(稀釋比例為1∶1 000)于37℃孵育2 h，TBST清洗3次，滴加發(fā)光液，放入凝膠成像系統(tǒng)顯影。ImageJ軟件分析各個(gè)蛋白對(duì)應(yīng)的灰度值，以GAPDH為內(nèi)參照，計(jì)算蛋白的相對(duì)表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.4.7 裸鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)：小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、miR-22 NC組、miR-22 mimics 組、miR-22 mimics+ 740Y-P組，每組5只。將1.4.2中轉(zhuǎn)染48 h后的對(duì)照組、miR-22 NC組、miR-22 mimics 組、miR-22 mimics+740Y-P組細(xì)胞(100 μL，1×107個(gè)/mL)注射至相應(yīng)組別小鼠的右前肢皮下。待腫瘤組織生長(zhǎng)至約100 mm3時(shí)，使用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤體積，瘤體積(mm3)=0.5×長(zhǎng)徑(mm)×短徑2(mm2)，每周測(cè)量1次，取第4周(第28天)時(shí)的測(cè)量結(jié)果進(jìn)行分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，GraphPad Prism 8.0作圖。計(jì)量資料以(x±s)表示，多樣本比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 5種細(xì)胞中miR-22的表達(dá)水平 與正常人神經(jīng)細(xì)胞RGC-5細(xì)胞比較，人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系UW402、UW473、DAOY和ONS-76中miR-22細(xì)胞的相對(duì)表達(dá)水平均降低(均P<0.05)，其中DAOY細(xì)胞miR-22的相對(duì)表達(dá)水平最低(均P<0.05)，見(jiàn)表2。選擇miR-22相對(duì)表達(dá)水平最低的DAOY細(xì)胞為研究對(duì)象進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

表2 5種細(xì)胞的miR-22相對(duì)表達(dá)水平比較(x±s)

2.2 轉(zhuǎn)染效率的評(píng)估結(jié)果 與對(duì)照組比較，轉(zhuǎn)染miR-22 NC未改變DAOY細(xì)胞中miR-22的表達(dá)水平(P>0.05)，轉(zhuǎn)染miR-22 mimics后，DAOY細(xì)胞中miR-22的表達(dá)水平升高(P<0.01)，證明轉(zhuǎn)染成功。見(jiàn)表3。

表3 3組細(xì)胞的miR-22相對(duì)表達(dá)水平比較(x±s)

2.3 miR-22對(duì)DAOY細(xì)胞增殖能力的影響 轉(zhuǎn)染48 h后，繼續(xù)培養(yǎng)24～120 h，miR-22 NC組DAOY細(xì)胞的增殖能力與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，而miR-22 mimics組DAOY細(xì)胞增殖能力均低于對(duì)照組和miR-22 NC組(均P<0.05)，miR-22 mimics+740Y-P組DAOY細(xì)胞的增殖能力均高于miR-22 mimics組(均P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 4組細(xì)胞增殖能力的比較(x±s，吸光度值)

2.4 miR-22對(duì)DAOY細(xì)胞侵襲能力和凋亡情況的影響 與對(duì)照組比較，miR-22 NC組穿膜細(xì)胞數(shù)量和凋亡率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與對(duì)照組和miR-22 NC組比較，miR-22 mimics組的穿膜細(xì)胞數(shù)量減少，且凋亡率增加(P<0.05)；與miR-22 mimics組比較，miR-22 mimics+740Y-P組的穿膜細(xì)胞數(shù)量增加，且凋亡率降低(P<0.05)。見(jiàn)表5和圖1、圖2。

表5 4組細(xì)胞侵襲能力和凋亡率的比較(x±s)

圖1 4組DAOY細(xì)胞的侵襲能力(×400)

圖2 4組DAOY細(xì)胞凋亡情況

2.5 miR-22對(duì)DAOY細(xì)胞PI3K/Akt信號(hào)通路蛋白磷酸化水平的影響 與對(duì)照組比較，miR-22 NC組DAOY細(xì)胞PI3K和Akt磷酸化水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)；與對(duì)照組和miR-22 NC組比較，miR-22 mimics 組PI3K和Akt磷酸化水平降低(均P<0.05)；與miR-22 mimics組比較，miR-22 mimics+740Y-P組細(xì)胞PI3K和Akt磷酸化水平升高(均P<0.05)。見(jiàn)表6和圖3。

表6 4組細(xì)胞DAOY細(xì)胞PI3K/Akt信號(hào)通路蛋白磷酸化水平的比較(x±s)

圖3 miR-22對(duì)DAOY細(xì)胞PI3K/Akt信號(hào)通路蛋白的表達(dá)及磷酸化水平的影響

2.6 miR-22對(duì)DAOY細(xì)胞皮下移植瘤的影響 與對(duì)照組比較，miR-22 NC組裸鼠皮下移植瘤體積差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與對(duì)照組和miR-22 NC組比較，miR-22 mimics組裸鼠皮下移植瘤體積減小(均P<0.05)；與miR-22 mimics組比較，miR-22 mimics+740Y-P組裸鼠皮下移植瘤體積增大(P<0.05)。見(jiàn)表7和圖4。

表7 4組裸鼠皮下移植瘤體積的比較(x±s，mm3)

圖4 4組裸鼠皮下移植瘤大小

3 討 論

髓母細(xì)胞瘤是最常見(jiàn)的兒童惡性腦腫瘤，其5年總生存率低至40%，盡管髓母細(xì)胞瘤的早期檢查和治療方法已有很大改進(jìn)，但該病仍是導(dǎo)致兒童死亡的主要原因之一，且其轉(zhuǎn)移率和復(fù)發(fā)率均較高[9-10]。因此，尋找新的治療靶標(biāo)對(duì)于髓母細(xì)胞瘤的臨床治療具有重要意義。

人類基因組中所包含的具有編碼蛋白質(zhì)功能的基因約20 000個(gè)，僅占整個(gè)基因組的1.5%左右，其余的基因被稱為非編碼RNA[11]。非編碼RNA最初被認(rèn)為是基因組的轉(zhuǎn)錄“噪音”，隨著研究的不斷深入，學(xué)者們逐漸發(fā)現(xiàn)無(wú)論是長(zhǎng)鏈或是短鏈非編碼RNA，均對(duì)多種人類疾病具有調(diào)控作用[12]。研究證明，成熟的微小RNA可以通過(guò)3′-非翻譯區(qū)、5′-非翻譯區(qū)甚至mRNA編碼序列的不精確互補(bǔ)來(lái)調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)[13]。最近的研究表明，miR-22是哺乳動(dòng)物中高度保守的微小RNA，在腫瘤發(fā)生和進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮雙重作用，例如miR-22在白血病和前列腺癌中具有致癌作用，而在肺癌和結(jié)腸癌中發(fā)揮抑癌作用[14-15]。然而，目前miR-22在髓母細(xì)胞瘤中的作用尚未清楚。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)，與正常人神經(jīng)細(xì)胞相比，髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系UW402、UW473、DAOY和ONS-76細(xì)胞中miR-22均呈低表達(dá)狀態(tài)，提示miR-22的低表達(dá)可能與髓母細(xì)胞瘤的發(fā)生過(guò)程有關(guān)。為了進(jìn)一步研究miR-22低表達(dá)與髓母細(xì)胞瘤的關(guān)系，本研究以miR-22表達(dá)水平最低的DAOY細(xì)胞為研究對(duì)象，給予轉(zhuǎn)染miR-22后，采用CCK-8法、Transwell法和流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性、侵襲能力及凋亡情況。結(jié)果表明，上調(diào)miR-22的表達(dá)可抑制DAOY細(xì)胞的增殖、侵襲等生物學(xué)行為，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡，提示在髓母細(xì)胞瘤中miR-22可能發(fā)揮抑癌作用。

PI3K信號(hào)通路對(duì)于機(jī)體正常發(fā)育，以及包括癌癥在內(nèi)的多種疾病的進(jìn)展都具有重要作用，PI3K可通過(guò)與不同的結(jié)構(gòu)域結(jié)合而被激活，Akt是PI3K下游關(guān)鍵蛋白之一，活化的p-PI3K可與Akt結(jié)合，促使Akt磷酸化活化，激活PI3K/Akt信號(hào)通路，進(jìn)而影響腫瘤發(fā)生和發(fā)展過(guò)程[16]。例如，Duan等[17]研究發(fā)現(xiàn)，PI3K/Akt信號(hào)通路在結(jié)直腸癌細(xì)胞中處于活化狀態(tài)，該信號(hào)通路的激活可促進(jìn)結(jié)腸癌的發(fā)生和發(fā)展；Wang等[18]的研究表明，抑制PI3K/Akt信號(hào)通路可抑制肺癌A549細(xì)胞的遷移、侵襲及上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程。研究表明，微小RNA可通過(guò)調(diào)節(jié)多種信號(hào)通路及基因表達(dá)參與惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[19]。因此我們進(jìn)一步檢測(cè)各組細(xì)胞中PI3K和Akt磷酸化水平，探討miR-22的抑癌作用與PI3K/Akt信號(hào)通路的潛在關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，上調(diào)miR-22的表達(dá)可降低PI3K和Akt磷酸化水平，抑制PI3K/Akt信號(hào)通路激活，這提示miR-22改變DAOY細(xì)胞增殖、侵襲及促凋亡的作用可能與調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路的表達(dá)有關(guān)。為了進(jìn)一步驗(yàn)證miR-22是否通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路發(fā)揮作用，本研究使用PI3K激活劑740Y-P對(duì)細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示，740Y-P提高了PI3K和Akt磷酸化水平，激活PI3K/Akt信號(hào)通路，削弱了miR-22 mimics抑制細(xì)胞增殖、侵襲的作用，降低了細(xì)胞凋亡率。隨后，我們將轉(zhuǎn)染處理后的各組細(xì)胞移植于裸鼠皮下，觀察miR-22對(duì)DAOY細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力的影響，發(fā)現(xiàn)miR-22表達(dá)上調(diào)后，DAOY細(xì)胞移植瘤的體積小于對(duì)照組和miR-22 NC組，使用740Y-P處理細(xì)胞后，DAOY細(xì)胞移植瘤的體積大于miR-22 mimics組，與上述研究結(jié)果一致。這提示，miR-22可能通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路影響DAOY細(xì)胞的體內(nèi)及體外惡性生物學(xué)行為。

綜上所述，miR-22在髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中表達(dá)下調(diào)，上調(diào)miR-22的表達(dá)可抑制DAOY細(xì)胞的增殖、侵襲并促進(jìn)細(xì)胞凋亡，同時(shí)可抑制皮下移植瘤的生長(zhǎng)，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路的表達(dá)有關(guān)，miR-22可作為髓母細(xì)胞瘤的潛在治療靶點(diǎn)。