高慧，顧燕，華深，施波，唐偉，張毅，張晨

流行病學調(diào)查顯示，精神分裂癥具有多基因遺傳特征，遺傳度高達80%[1]。精神分裂癥患者常常伴有抑郁癥狀，可見于疾病的各個階段。伴抑郁癥狀患者通常預后更差并伴有較高自殺率，給臨床診療工作帶來巨大的挑戰(zhàn)，因此精神分裂癥伴抑郁癥狀的發(fā)生機制也是目前精神醫(yī)學界研究的熱點和重點[2]。遺傳學研究顯示精神分裂癥與抑郁癥在致病機理中存在部分重疊，因此這也為探究精神分裂癥伴抑郁機制提供了研究線索[3]。亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)是葉酸和同型半胱氨酸代謝的關(guān)鍵酶之一，參與神經(jīng)精神疾病的發(fā)生過程[4]。薈萃分析發(fā)現(xiàn)，中國漢族人群MTHFR基因C677T位點與精神分裂癥具有相關(guān)性[5]；薈萃分析也顯示，C677T位點與中國漢族抑郁癥的發(fā)生有關(guān)[6]。經(jīng)本院倫理委員會審核批準，本研究探索MTHFR基因C677T位點多態(tài)性與精神分裂癥伴抑郁的關(guān)系。

1 對象和方法

1.1 對象

病例組：為2018年1月至2020年12月在上海市民政第一精神衛(wèi)生中心、浙江省金華市第二醫(yī)院、溫州市康寧醫(yī)院和上海交通大學醫(yī)學院附屬精神衛(wèi)生中心就診的精神分裂癥患者413例。入組標準：符合美國《精神障礙診斷與統(tǒng)計手冊》第4版(DSM-IV)中精神分裂癥診斷標準；年齡18～50歲，性別不限；初中及以上文化程度；入組前病情穩(wěn)定狀態(tài)>6個月；未使用抗抑郁藥治療；取得患者本人及家屬的知情同意。排除標準：6個月內(nèi)使用過無抽搐電休克治療或經(jīng)顱磁刺激治療者、物質(zhì)濫用/依賴者、患有嚴重軀體疾病者。男220例，女193例；平均年齡(28.68±3.72)歲。

對照組：為同期健康體檢者409名，均無嚴重軀體疾病史、精神疾病史及家族史。男193名，女216名；平均年齡(29.02±7.91)歲。兩組性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。所有入組者對本研究知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 臨床評估 收集病例組患者臨床資料，由培訓合格的精神科醫(yī)師進行臨床量表評估；量表評定一致性良好(r=0.82)。①陽性和陰性癥狀量表(PANSS)評定精神癥狀，包括陽性癥狀分、陰性癥狀分、一般病理分及PANSS總分。②卡爾加里抑郁癥狀評定量表(CDSS)：用于評估精神分裂癥患者抑郁癥狀，得分越高抑郁癥狀越嚴重，以≥7分為界值判斷是否抑郁。

1.2.2 MTHFR基因C677T位點多態(tài)性檢測 采集入組者靜脈血2 ml，乙二胺四乙酸抗凝備用，采用離心柱型基因組DNA試劑盒(北京天根生物有限公司，DP304型)提取外周血白細胞全基因組DNA。MTHFR基因C677T位點分型采用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法。上游引物：5'-GGGGTCAGAAGCATATCAGT-3'；下游引物：5'-CTCACCTGGATGGGAAAG A-3'，所有引物由上海英駿生物有限公司合成。PCR反應體系及酶切步驟參照我們之前的工作[7]。

2 結(jié)果

2.1 兩組MTHFR基因C677T多態(tài)性比較

兩組MTHFR基因C677T位點基因型的觀察值和期望值Hardy-Weinberg平衡吻合度良好(P>0.05)，具有群體代表性。兩組間MTHFR基因C677T位點TT型、CT型、CC型頻率及T、C等位基因頻率差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表1。

表1 兩組MTHFR基因C677T位點基因型和等位基因頻率比較(例數(shù)，%)

2.2 病例組中伴或不伴抑郁亞組間MTHFR基因C677T多態(tài)性比較

按CDSS≥7分為界值，病例組中198例歸入伴抑郁亞組，215例歸入不伴抑郁亞組。兩亞組間MTHFR基因C677T位點TT型、CT型、CC型頻率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；T、C等位基因頻率兩組比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩亞組間MTHFR基因C677T位點基因型和等位基因頻率比較(例數(shù)，%)

2.3 病例組C677T位點3種基因型患者臨床特征比較

為了排除性別、年齡、受教育年限、首發(fā)年齡和病程對臨床表型的影響，在進行C677T多態(tài)性與PANSS和CDSS關(guān)聯(lián)分析時，將這些因素作為協(xié)變量納入多因素方差分析。各基因型患者PANSS總分及各因子分比較差異無統(tǒng)計學意義；各基因型患者CDSS評分差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.03)，TT型患者CDSS評分顯著高于攜帶CT或CC型患者。見表3。

表3 病例組C677T位點不同基因型間PANSS和CDSS評分比較

3 討論

雖然精神分裂癥的病因至今未明，但神經(jīng)解剖學研究發(fā)現(xiàn)精神分裂癥患者神經(jīng)元排列和連接異常，而神經(jīng)細胞的遷移排列過程主要發(fā)生在胚胎時期，由此提出了精神分裂癥的“神經(jīng)發(fā)育假說”，即神經(jīng)發(fā)育危險因素會起到促進精神分裂癥發(fā)生的作用[8]。MTHFR基因位于染色體1p36.4區(qū)，已被證明參與神經(jīng)管發(fā)育缺陷的發(fā)生過程。C677T位點是MTHFR基因最常見的功能位點。本研究發(fā)現(xiàn)，C677T與精神分裂癥伴抑郁相關(guān)，且攜帶TT基因型的患者抑郁癥狀更為嚴重；提示該位點可能影響患者是否出現(xiàn)抑郁癥狀，TT基因型與抑郁嚴重程度相關(guān)。

有報道約30%～70%的精神分裂癥患者伴有抑郁癥狀[9]。既往研究發(fā)現(xiàn)MTHFR基因C677T位點與抑郁發(fā)生相關(guān)[10]；薈萃分析顯示，攜帶TT基因型的抑郁癥患者HAMD-17評分顯著高于CT和CC基因型組[11]；提示TT基因型是影響抑郁癥狀嚴重程度的重要因素，這與本研究結(jié)果一致。C677T位點位于MTHFR基因第4外顯子，677位單核苷酸多態(tài)性(C/T)導致丙氨酸被纈氨酸替代，影響酶的催化結(jié)構(gòu)域，形成熱不穩(wěn)定蛋白，酶活性下降。TT型突變導致酶活性下降約70%，導致血清同型半胱氨酸濃度升高。精神分裂癥患者體內(nèi)同型半胱氨酸水平升高與抑郁癥狀的發(fā)生有關(guān)[12]；同型半胱氨酸及其代謝產(chǎn)物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體通過直接毒性作用，或是通過S-腺苷同型半胱氨酸抑制中樞神經(jīng)遞質(zhì)和磷脂的甲基化來實現(xiàn)。同型半胱氨酸甲基化后生成甲硫氨酸(Met)，Met是S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的前體，SAM直接參與中樞多巴胺、去甲腎上腺素和5-羥色胺等神經(jīng)遞質(zhì)[13]。因此，攜帶TT基因型的精神分裂癥伴發(fā)抑郁癥狀可能與MTHFR催化活性降低增加同型半胱氨酸水平抑制單胺類神經(jīng)遞質(zhì)合成有關(guān)。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示MTHFR基因與精神分裂癥患者伴發(fā)抑郁之間存在相關(guān)性；但本研究采用橫斷面研究設(shè)計，缺乏縱向研究，因此無法明確MTHFR基因與抑郁的動態(tài)變化；所納入的樣本量較小，研究結(jié)果統(tǒng)計效能不足；本研究僅納入C677T位點開展研究，MTHFR基因其他位點是否參與了精神分裂癥伴抑郁的發(fā)生過程并不清楚。因此，在未來的工作中將繼續(xù)擴大樣本量，開展縱向研究，增加基因標記物數(shù)量，以驗證本研究結(jié)果，并進一步探索MTHFR基因在精神分裂癥伴抑郁發(fā)生過程中的作用機制。