黃 屾，李長忠，李梓瑄，劉艷慧，柳 芳，祁洪芳，汪 洋，金文杰

(1.青海大學(xué) 生態(tài)環(huán)境工程學(xué)院，青海 西寧 810016； 2.青海湖裸鯉救護(hù)中心，青海湖裸鯉繁育與保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青海 西寧 810016)

青海湖裸鯉(Gymnocyprisprzewalskii)，屬鯉形目鯉科裂腹魚亞科裸鯉屬[1]，是青海湖中重要的野生經(jīng)濟(jì)魚類，在青海湖水生生態(tài)系統(tǒng)平衡中起重要作用[2]。青海湖是我國最大的內(nèi)陸咸水湖泊，湖水的鹽度約為15，由于其特殊的高原地理環(huán)境，湖中的青海湖裸鯉生長十分緩慢。因具有耐鹽堿、耐高寒、耐低氧等優(yōu)良特性，青海湖裸鯉受到廣泛關(guān)注[3]。每年的4—7月，性成熟的青海湖裸鯉由青海湖溯河洄游到布哈河、沙柳河、泉吉河等5條主要的淡水支流河道的靜水區(qū)中產(chǎn)卵繁殖，繁殖后的親魚及孵化后的幼體再降河洄游到青海湖[4]。在洄游過程中將面臨貧營養(yǎng)、高鹽度等一系列的環(huán)境變化[2]。自2002年開始，青海湖裸鯉救護(hù)中心協(xié)同多個科研院所全面開展了青海湖漁業(yè)生態(tài)環(huán)境和青海湖裸鯉資源的探測工作，進(jìn)行了持續(xù)十余年的青海湖裸鯉增殖放流工作，累計(jì)向青海湖放流青海湖裸鯉大規(guī)格1齡魚種1.2億尾，青海湖裸鯉的資源量由2002年的2.569×103t恢復(fù)至2017年的8.12×104t，人工增殖放流對青海湖裸鯉資源的貢獻(xiàn)率達(dá)到23%[5]。然而，在青海湖裸鯉魚種放流后洄游至青海湖的過程中，其生存狀況和適應(yīng)機(jī)制尚未明確。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用1齡青海湖裸鯉取自青海湖裸鯉救護(hù)中心。選取健康、規(guī)格均一的試驗(yàn)魚在淡水中暫養(yǎng)7 d后開始試驗(yàn)。試驗(yàn)前禁食2 d后稱量質(zhì)量。初始體質(zhì)量(18.414±0.613) g，初始體長(10.960±0.288) cm。

1.2 不同鹽度下1齡青海湖裸鯉的生長

在80 cm× 30 cm× 60 cm魚缸中注入充分曝氣的自來水120 L，并添加一定量的海水晶(江西鹽通科技有限公司)完成各鹽度調(diào)配，放入1齡青海湖裸鯉35尾，暫養(yǎng)7 d后，進(jìn)行為期30 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)。設(shè)置0、5、10、15共4個鹽度組，每個鹽度組設(shè)置2個平行。投喂粒徑1.5 mm的溫格爾裸鯉稚魚配合飼料(山東漢業(yè)生物科技有限公司)，日投喂2次，日投喂量為體質(zhì)量的3%[24]。投喂2 h后吸底1次，吸出殘余的餌料和糞便。日換水1/2，以保持水質(zhì)良好。試驗(yàn)期間嚴(yán)格控制水溫、溶解氧和pH。生長試驗(yàn)期間未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。脅迫15 d和30 d時，每個鹽度組隨機(jī)撈取1齡青海湖裸鯉10尾，用丁香酚(1∶10 000，質(zhì)量比)麻醉后進(jìn)行取樣，并測定體質(zhì)量、體長等形態(tài)學(xué)指標(biāo)。

1.3 滲透調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達(dá)

選取活力正常的200尾魚，在魚缸中暫養(yǎng)。暫養(yǎng)期間正常投喂，每日10:00和16:00各投喂1次，投喂量為青海湖裸鯉體質(zhì)量的3%。水溫(17.5±0.5) ℃，水缸保持持續(xù)充氣，保證其暫養(yǎng)期間溶氧量(7.0±0.5) mg/L，每日吸底1次，清除魚缸底部殘留的餌料及糞便，暫養(yǎng)期間試驗(yàn)魚無死亡情況。3 d后，挑選180尾轉(zhuǎn)移至魚類毒理實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖系統(tǒng)(青島金水海洋生物設(shè)備有限公司)進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)分對照組(淡水，鹽度0)、低鹽度組(鹽度5)、高鹽度組(鹽度15)，每組設(shè)置3個平行，每個平行飼養(yǎng)20尾魚。各鹽度組分別在脅迫0、3、6、12、24、48、96 h時間點(diǎn)取樣，經(jīng)間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽麻醉后，取鯉鰓、腎臟和肝臟組織放入無RNA酶凍存管，液氮速凍后放入-80 ℃冰箱儲存。

1.4 總RNA的提取

使用總RNA提取試劑盒[天根生化科技(北京)有限公司]提取總RNA，使用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA完整性。

1.5 實(shí)時熒光定量PCR

設(shè)計(jì)實(shí)時熒光定量PCR引物(表1)，以β-actin基因?yàn)閮?nèi)參，用熒光定量PCR儀(Light Cycler 96 SW1.1，羅氏)測定不同脅迫條件下的NKCC1、NBC1、AQP1、NHE1基因表達(dá)量的變化。實(shí)時熒光定量PCR試驗(yàn)使用天根生化科技(北京)有限公司試劑盒完成。PCR反應(yīng)體系為20 μL：2×miRcute Plus miRNA Premix 10.0 μL，上、下游引物各0.4 μL，cDNA模板1 μL，ddH2O 8.2 μL。反應(yīng)程序：95 ℃預(yù)變性15 min；94 ℃變性30 s，60 ℃退火60 s，循環(huán)40次。

表1 NKCC1、NBC1、AQP1、NHE1基因?qū)崟r熒光定量PCR引物參數(shù)

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)魚的存活率(RS，%)、肝體指數(shù)(ωHIS，%)、肥滿度(CF)、平均體質(zhì)量增長率(wWGR，%)、平均體長增長率(RLG，%)、特定生長率(RSG，%/d)按下式計(jì)算[25]：

RS=nt/n0×100%

(1)

wHIS=mg/mk×100%

(2)

CF=100m/L3

(3)

wWGR=(mt-m0)/m0×100%

(4)

RLG=(Lt-L0)/L0×100%

(5)

RSG=(lnmt-lnm0)/t×100%

(6)

式中，n0為幼魚試驗(yàn)初始數(shù)量(尾)，nt為終末數(shù)量(尾)，t為試驗(yàn)幼魚的飼養(yǎng)天數(shù)(d)，mk為魚體去除內(nèi)臟的質(zhì)量(g)，mg為肝質(zhì)量(g)，m為幼魚體質(zhì)量，L為幼魚體長，m0為初始體質(zhì)量(g)，mt為終末體質(zhì)量(g)，L0為初始體長(mm)，Lt為終末體長(mm)。

各基因表達(dá)均以β-actin基因?yàn)閮?nèi)參，使用2-ΔΔCt法[26-27]對基因的表達(dá)量進(jìn)行分析。所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，并用SPSS 25.0軟件進(jìn)行單因素方差分析和鄧肯多重比較，做歸一化處理后，使用Origin 2018作圖。

2 結(jié) 果

2.1 不同鹽度下青海湖裸鯉的生長性能

經(jīng)15 d的飼養(yǎng)，不同鹽度條件下體質(zhì)量與鹽度均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，鹽度0組終末體質(zhì)量最高，且與鹽度10組和鹽度15組相比差異顯著(P<0.05)。鹽度5組與鹽度10組間差異不顯著(P>0.05)(表2)。平均體質(zhì)量增長率和特定生長率最大值均出現(xiàn)在鹽度0組，且鹽度0組與鹽度5組間、鹽度10組和鹽度15組間差異不顯著(P>0.05)，但鹽度5組和鹽度10、15組間差異顯著(P<0.05)。終末體長在鹽度0組最高，鹽度15組最低，且差異顯著(P<0.05)。

表2 不同鹽度脅迫15 d后體質(zhì)量、體長變化(n=10；平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)

脅迫30 d時，隨著鹽度的升高體質(zhì)量呈現(xiàn)下降趨勢，鹽度0組和鹽度5組間、鹽度10組和鹽度15組間差異不顯著(P>0.05)(表3)。鹽度0組和鹽度5組特定生長率差異不顯著(P>0.05)；鹽度15組的特定生長率最低，且與其他組差異顯著(P<0.05)。鹽度15組終末體長最低，與其他組差異顯著(P<0.05)。鹽度0組平均體長增長率最高，鹽度15組最低，且均與其他組差異顯著(P<0.05)。

表3 不同鹽度脅迫30 d后體質(zhì)量、體長變化(n=10，平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)

不同鹽度下飼喂15 d時，終末肝體比與鹽度亦呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，鹽度0組與鹽度5組差異不顯著(P>0.05)，且與鹽度10組差異不顯著(P>0.05)，但與鹽度15組差異顯著(P<0.05)，鹽度10組和鹽度15組差異不顯著(P>0.05)(表4)。鹽度0組和鹽度10、15組終末臟體比差異顯著(P>0.05)，但鹽度0組和鹽度5組終末臟體比差異不顯著。鹽度5組肥滿度最高，與鹽度0組、鹽度10組差異不顯著；鹽度15組肥滿度最低，與鹽度0組差異顯著(P<0.05)。

經(jīng)過30 d的飼養(yǎng)，鹽度0組肝體比最大，與鹽度10組和鹽度15組差異顯著(P<0.05)(表5)。鹽度5組臟體比最高，與鹽度0組差異不顯著(P>0.05)，與鹽度10、15組有顯著差異。鹽度10組肥滿度最低，與其他3組差異顯著(P<0.05)，鹽度0、5、15組之間的肥滿度差異不顯著(P>0.05)。

表4 不同鹽度脅迫15 d后存活率、臟器系數(shù)、肥滿度變化(n=10，平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)

表5 不同鹽度脅迫30 d后存活率、臟器系數(shù)、肥滿度變化(n=10，平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)

2.2 淡水養(yǎng)殖條件下青海湖裸鯉NKCC1、NBC1、AQP1、NHE1基因的相對表達(dá)

檢測淡水養(yǎng)殖條件下的NKCC1基因的相對表達(dá)量，腎臟中NKCC1基因的相對表達(dá)量最高，顯著高于鰓和肝臟中的相對表達(dá)量(P<0.05)，鰓和肝臟中的相對表達(dá)量差異不顯著(P>0.05)(圖1a)。NBC1基因在鰓、腎臟、肝臟中均表達(dá)，腎臟中的相對表達(dá)量顯著高于鰓和肝臟中的相對表達(dá)量(P<0.05)，鰓和肝臟中的相對表達(dá)量差異不顯著(P>0.05)(圖1b)。AQP1基因在各個組織中均有表達(dá)，且3個組織中的相對表達(dá)量差異均不顯著(P>0.05)(圖1c)。NHE1基因在肝臟中的相對表達(dá)量本底值最高，與鰓和腎臟的相對表達(dá)量相比差異顯著(P<0.05)，鰓和腎臟中的相對表達(dá)量差異不顯著(P>0.05)(圖1d)。

2.3 不同鹽度脅迫下各基因的相對表達(dá)

2.3.1 NKCC1基因的相對表達(dá)

NKCC1基因的相對表達(dá)結(jié)果(圖2)顯示：鹽度5脅迫下青海湖裸鯉鰓中NKCC1基因相對表達(dá)量急劇上調(diào)，在6 h時達(dá)到峰值且與對照組差異顯著(P<0.05)，6 h后相對表達(dá)量降至與對照組差異不顯著(P>0.05)；腎臟中的相對表達(dá)量趨勢為下調(diào)，且直至試驗(yàn)結(jié)束仍與對照組差異顯著(P<0.05)；NKCC1基因在肝臟中的相對表達(dá)量一直低于對照組，且差異顯著(P<0.05)。鹽度15脅迫下青海湖裸鯉鰓中NKCC1基因相對表達(dá)量呈先上調(diào)后下調(diào)的趨勢，在24 h時達(dá)到峰值，且與對照組差異顯著(P<0.05)，隨后下調(diào)至與對照組相比差異不顯著(P>0.05)；腎臟中相對表達(dá)量先呈下調(diào)趨勢，但12 h時有顯著上調(diào)，上調(diào)之后與對照組差異不顯著(P>0.05)；鹽度15組脅迫后NKCC1基因在肝臟中的相對表達(dá)量與鹽度5組類似。

圖1 淡水養(yǎng)殖條件下青海湖裸鯉NKCC1、NBC1、NHE1、AQP1基因的表達(dá)Fig.1 Expression level of NKCC1, NBC1, NHE1 and AQP1 genes in G. przewalshii under freshwater culture不同小寫字母表示各組織之間差異顯著(P<0.05).Different letters indicate significant differences between tissues (P<0.05).

圖2 NKCC1基因的相對表達(dá)Fig.2 Relative expression level of NKCC1 gene不同字母或數(shù)字表示同一處理不同時間點(diǎn)差異顯著(P<0.05)，相同字母或數(shù)字表示同一處理不同時間點(diǎn)差異不顯著(P>0.05)，下同.Different letters or numbers denote significant differences from the same treatment at different time (P<0.05); the same letter or number means no significant differences from the same treatment at different time (P>0.05). et sequentia.

2.3.2 NBC1基因的相對表達(dá)

NBC1基因的相對表達(dá)結(jié)果(圖3)顯示：鹽度5脅迫下青海湖裸鯉鰓中NBC1基因的相對表達(dá)量急劇上調(diào)，在6 h時達(dá)到峰值，與對照組差異顯著(P<0.05)，隨后下調(diào)至與對照組相比差異不顯著(P<0.05)；腎臟中的相對表達(dá)量趨勢為先上調(diào)后下調(diào)，24 h時達(dá)到最大值且與對照組差異顯著(P<0.05)，24 h后下調(diào)至正常水平；NBC1基因在肝臟中的相對表達(dá)量一直低于對照組，且差異顯著(P<0.05)。鹽度15脅迫下青海湖裸鯉鰓中NBC1基因的相對表達(dá)量呈上調(diào)趨勢，在24 h時相對表達(dá)量達(dá)到最大值，與對照組差異顯著(P<0.05)，隨后顯著下調(diào)，96 h時下調(diào)至正常水平(P<0.05)；腎臟中的相對表達(dá)量在試驗(yàn)期間未發(fā)生明顯變化，各個時間點(diǎn)的相對表達(dá)均與對照組差異不顯著(P<0.05)；NBC1基因在肝臟中的相對表達(dá)量一直低于對照組，且差異顯著(P<0.05)(圖3b)。

圖3 NBC1基因的相對表達(dá)Fig.3 Relative expression level of NBC1 gene

2.3.3 NHE1基因的相對表達(dá)

NHE1基因的相對表達(dá)結(jié)果(圖4)顯示：鹽度5脅迫下青海湖裸鯉鰓中NHE1基因相對表達(dá)量急劇上調(diào)，在6 h時相對表達(dá)量達(dá)到峰值，與對照組差異顯著(P<0.05)，隨后下調(diào)至正常水平；腎臟中的相對表達(dá)量為先上后下的趨勢，12 h時相對表達(dá)量最高，且與對照組間差異顯著(P<0.05)，24 h后下調(diào)至與對照組差異不顯著的水平；NHE1基因在肝臟中的相對表達(dá)量一直低于對照組，且差異顯著(P<0.05)。鹽度15脅迫下青海湖裸鯉鰓中NHE1基因相對表達(dá)量呈上調(diào)趨勢，在48 h時達(dá)到峰值，與對照組間差異顯著(P<0.05)，隨后下調(diào)至與對照組相比差異不顯著的水平(P<0.05)；腎臟中的相對表達(dá)量呈現(xiàn)上調(diào)趨勢，48 h時表達(dá)量達(dá)到最高，且與對照組間差異顯著(P<0.05)，直至96 h試驗(yàn)結(jié)束，腎臟中NHE1基因的相對表達(dá)量仍顯著高于對照組；鹽度15組NHE1基因在肝臟中的相對表達(dá)模式與鹽度5組相同。

2.3.4 AQP1基因的相對表達(dá)

AQP1基因的相對表達(dá)結(jié)果(圖5)顯示：鹽度5脅迫下青海湖裸鯉鰓中AQP1基因相對表達(dá)量急劇上調(diào)，在6 h時表達(dá)量達(dá)到峰值，隨后呈下調(diào)趨勢，且與對照組差異不顯著(P>0.05)；腎臟中的表達(dá)量呈先上調(diào)后下調(diào)的趨勢，6 h至24 h時均顯著高于對照組(P<0.05)，隨后恢復(fù)至與對照組差異不顯著的水平(P>0.05)；AQP1基因在肝臟中的相對表達(dá)量一直低于對照組，且差異顯著(P<0.05)。鹽度15脅迫下青海湖裸鯉鰓中AQP1基因相對表達(dá)量急劇上調(diào)，在24 h時達(dá)到峰值，與對照組差異顯著(P<0.05)，隨后呈顯著下調(diào)趨勢，但直至96 h試驗(yàn)結(jié)束，AQP1基因的表達(dá)水平仍顯著高于對照組(P<0.05)；腎臟中的相對表達(dá)量為下調(diào)的趨勢，96 h時表達(dá)量達(dá)到峰值，且與對照組差異顯著(P<0.05)；鹽度15組AQP1基因在肝臟中的相對表達(dá)量與鹽度5組類似。

圖4 NHE1基因的相對表達(dá)Fig4 Relative expression level of NHE1 gene

圖5 AQP1基因的相對表達(dá)Fig.5 Relative expression level of AQP1 gene

3 討 論

3.1 鹽度對青海湖裸鯉生長性能的影響

鹽度作為水體重要的環(huán)境因子之一，是影響廣鹽性魚類生存的重要因素[24]，鹽度的轉(zhuǎn)變會引起魚體的應(yīng)激反應(yīng)。有研究顯示，急劇變化的鹽度會導(dǎo)致低鹽度組或高鹽度組魚類的生長速度變緩，面對高鹽度環(huán)境時，魚體內(nèi)有大量鹽分積累，高鹽環(huán)境會對皮膚和鰓等器官造成損傷，并擾亂體內(nèi)外的滲透平衡，進(jìn)而影響生理機(jī)能，甚至可能造成死亡[20]。魚類在面對鹽度改變時，需要消耗大量能量去調(diào)節(jié)體內(nèi)滲透壓以維持機(jī)體的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，調(diào)節(jié)滲透壓所需能量通常占基本生命活動所必需總能量的10%～20%，甚至高達(dá)或多于50%[28]。褐菖鲉(Sebastisucusmarmoratus)[29]的幼魚對鹽度有非常強(qiáng)的耐受力，鹽度7.5～30下均能正常存活，而鹽度15～25下該魚特定生長率較大。這表明鹽度10～25更適宜褐菖鲉幼魚生長。黃姑魚(Nibeaalbiflora)[30]在鹽度42的條件下，其特定生長率、肝體比均比低鹽度下小且差異顯著(P<0.05)。在本試驗(yàn)中，經(jīng)不同鹽度試驗(yàn)15 d和30 d后，鹽度10、15組與其余鹽度組的各生長指標(biāo)差異顯著(P<0.05)，高鹽度下青海湖裸鯉體質(zhì)量、體長、特定生長率、肝體比、臟體比和肥滿度均較小。這表明在本試驗(yàn)中高鹽度對青海湖裸鯉的生長存在抑制。原因可能為：青海湖裸鯉在對鹽度變化的過程中需要消耗大量能量來維持體內(nèi)外滲透壓穩(wěn)定，從而影響其生長發(fā)育。由此可見，鹽度也是野生型青海湖裸鯉相較人工淡水養(yǎng)殖條件生長速度緩慢的原因之一。

3.2 不同鹽度脅迫對青海湖裸鯉滲透相關(guān)基因表達(dá)的影響

NKCCla是一種電中性跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，其進(jìn)行離子跨膜運(yùn)輸?shù)倪\(yùn)輸比例為：1Na+∶1K+∶2Cl-，NKCCla存在NKCC1和NKCC2兩種亞型[31]。鰓的滲透調(diào)節(jié)機(jī)制和離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的表達(dá)與鹽度適應(yīng)有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，泌氯細(xì)胞內(nèi)部大量分布有像Na+/K+-ATP酶、NKCC、NHE3等蛋白，這些蛋白與離子運(yùn)輸密切相關(guān)[32-33]，且均具有調(diào)節(jié)吸收和分泌K+、Na+、Cl-離子的功能[34]，機(jī)體內(nèi)外滲透壓的平衡主要依靠這些鰓上的蛋白進(jìn)行調(diào)節(jié)。有研究表明，莫桑比克羅非魚(Oreochromismossambicus)[35]經(jīng)過不同鹽度條件的脅迫，NKCCla在其鰓組織中高度表達(dá)，該結(jié)果可能與滲透壓調(diào)節(jié)活動及鰓絲氯細(xì)胞鹽分泌關(guān)聯(lián)甚廣。在本試驗(yàn)中，經(jīng)不同鹽度脅迫后，青海湖裸鯉鰓中NKCC1基因的表達(dá)量均顯著上調(diào)，但在腎臟中出現(xiàn)下調(diào)趨勢，這種現(xiàn)象的出現(xiàn)可能因?yàn)槟I中調(diào)控機(jī)制與鰓有所不同，推測NKCC1基因表達(dá)量的降低可能與蛋白酪氨酸激酶或環(huán)嘌呤核苷酸依賴的激酶降低了其對滲透壓的敏感性有關(guān)[36]。

NHE是一種雙向離子交換載體蛋白，一般處于細(xì)胞的頂膜或基底膜外側(cè)，具有催化細(xì)胞內(nèi)H+和細(xì)胞外Na+的電中性交換的作用[38]。Edwards等[39]研究顯示，NHE基因可能參與滲透調(diào)節(jié)，特別是在魚類適應(yīng)鹽度變化的環(huán)境時發(fā)揮重要作用。在本試驗(yàn)中，面臨鹽度壓力時，青海湖裸鯉鰓和腎臟中的NHE1基因表達(dá)均出現(xiàn)顯著上調(diào)。有研究顯示，大菱鲆(Scophthalmusmaximus)經(jīng)鹽度脅迫后，NHE1基因在鰓、腎臟、腸道中的表達(dá)量均顯著升高[40]。這與本試驗(yàn)結(jié)果一致，推測NHE1基因也參與了青海湖裸鯉的滲透調(diào)節(jié)過程。

AQPs是一組跨膜蛋白家族，作為水分的傳輸通道，允許水在細(xì)胞膜中自由流動，對維持參與滲透調(diào)節(jié)和體液穩(wěn)態(tài)的器官中的水分的平衡具有重要作用[41]。暗紋東方鲀(Takifuguobscurus)[42]和卵形鯧鲹(Trachinotusovatus)[43]在鹽度脅迫下腸道和腎臟中的AQP1基因表達(dá)量上升，在低滲脅迫下腎臟和腸道中的AQP1基因表達(dá)量則下降。而低鹽脅迫后的大菱鲆[40]AQP1基因在腎臟和腸道中的表達(dá)量顯著升高，在鰓中的表達(dá)量無明顯變化，說明AQP1基因在不同物種和組織中的功能特異。本試驗(yàn)中，經(jīng)鹽度脅迫后，青海湖裸鯉鰓和腎臟中的AQP1基因的表達(dá)顯著上調(diào)，推測是因?yàn)榍嗪：沲幨茺}度影響后，鰓和腎臟中AQP1基因大量表達(dá)，以排出體內(nèi)多余水分。

4 結(jié) 論

起始體質(zhì)量為(18.414±0.613) g的青海湖裸鯉在鹽度0、5、10、15條件下，30 d內(nèi)呈現(xiàn)出不同的生長趨勢，高鹽度下青海湖裸鯉體質(zhì)量、體長、特定生長率、肝體比、臟體比和肥滿度均較低，各項(xiàng)指標(biāo)表現(xiàn)出鹽度和時間依賴性，高鹽度可能對青海湖裸鯉的生長產(chǎn)生抑制。NKCC1、NBC1、NHE1、AQP1 4個基因在應(yīng)對不同鹽度、不同時間時呈現(xiàn)出不同的表達(dá)模式并表現(xiàn)出組織特異性。面臨鹽度脅迫時，各基因在鰓組織中均有明顯上調(diào)，在腎臟組織中也有不同變化，但在肝臟中的表達(dá)受到了抑制。表明其參與青海湖裸鯉滲透調(diào)節(jié)時發(fā)揮著不同的作用。鰓、腎臟和肝臟共同參與了滲透壓的調(diào)節(jié)，對維持青海湖裸鯉體內(nèi)外的動態(tài)平衡起到重要作用。本研究結(jié)果可為后續(xù)對青海湖裸鯉滲透調(diào)節(jié)作用機(jī)制的研究提供前期研究依據(jù)，也可為青海湖裸鯉人工養(yǎng)殖及增殖放流提供理論支持。