陳小存，魏譚軍，陳飛，肖成，陳勇

（1.達(dá)州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，達(dá)州 635000；2.成都地奧集團(tuán)天府藥業(yè)有限公司，達(dá)州 635027）

陰虛胃痛顆粒由麥冬、北沙參、白芍等7 味中藥組成，具有養(yǎng)陰益胃、緩急止痛的功效，臨床上主要用于胃陰不足及慢性胃炎引起的胃脘隱隱灼痛、口干舌燥、納呆干嘔等病癥的治療[1]?，F(xiàn)代研究表明陰虛胃痛顆粒聯(lián)合三聯(lián)療法對(duì)陰虛型慢性胃炎治療效果顯著，可明顯改善患者臨床癥狀，且不良反應(yīng)較少[2]。

中藥及其制劑，尤其是中成藥復(fù)方制劑，由多味中藥材按照中醫(yī)基礎(chǔ)理論配伍組方而來(lái)，具有多成分-多靶點(diǎn)-多途徑的整體特點(diǎn)，不同成分的生物活性各異，方中藥物所含化學(xué)成分相互協(xié)同、相互制約以達(dá)到臨床治療效果。《中華人民共和國(guó)藥典》（2020 年版）陰虛胃痛顆粒[1]項(xiàng)下僅對(duì)佐藥白芍所含芍藥苷進(jìn)行定量測(cè)定，暫無(wú)對(duì)該制劑所含成分的文獻(xiàn)報(bào)道，難以全面反映陰虛胃痛顆粒的整體質(zhì)量。本研究參考中藥質(zhì)量標(biāo)志物以君藥所含成分為首選，兼顧臣、佐、使藥成分的確認(rèn)原則，選取君藥北沙參所含活性成分法卡林二醇和人參炔醇、麥冬所含特征成分麥冬甲基黃烷酮A 和甲基麥冬二氫高異黃酮B，以及佐藥白芍所含主要成分氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和苯甲酰芍藥苷為定量控制指標(biāo)成分，采用高效液相一測(cè)多評(píng)（HPLC-QAMS）法對(duì)上述成分含量同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，建立陰虛胃痛顆粒多指標(biāo)成分質(zhì)量控制模式，以期全面評(píng)價(jià)陰虛胃痛顆粒的整體質(zhì)量，指導(dǎo)藥品生產(chǎn)企業(yè)提升制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，完善制劑生產(chǎn)過(guò)程和原藥材來(lái)源質(zhì)量控制，為指導(dǎo)臨床合理用藥提供基礎(chǔ)保障。

1 儀器與試藥

對(duì)照品芍藥苷（批號(hào)110736-202044，質(zhì)量分?jǐn)?shù)96.8%）來(lái)源于中國(guó)食品藥品檢定研究院；對(duì)照品氧化芍藥苷（批號(hào)PRF9040222，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.4%）、芍藥內(nèi)酯苷（批號(hào)PRF8101147，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.6%）、苯甲酰芍藥苷（批號(hào)PRF8040621，質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.2%）、麥冬甲基黃烷酮A（批號(hào)PRF8041122，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.9%）、甲基麥冬二氫高異黃酮B（批號(hào)PRF7102423，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.3%）、法卡林二醇（批號(hào)PRF9061222，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.4%）和人參炔醇（批號(hào)PRF8033144，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.5%）均來(lái)源于成都普瑞法科技開(kāi)發(fā)有限公司；陰虛胃痛顆粒（規(guī)格：每袋裝10 g，批號(hào)分別為20190501、20200221 和20200309）來(lái)源于遼寧華潤(rùn)本溪三藥有限公司；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。Agilent 1260 Infinity Ⅱ型高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent 公司）、島津LC-2030 型高效液相色譜儀（日本島津公司）；Agilent HC C18、Kromasil C18和Xtimate C18色譜柱（規(guī)格250 mm×4.6 mm，5 μm）；Quintix125D-1CN 型十萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）；CSA-10BT 型超聲波發(fā)生器（上海沙鷹科學(xué)儀器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 混合對(duì)照品溶液的配制 各取氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇對(duì)照品適量，精密稱定，用稀乙醇制成1 mL 含氧化芍藥苷0.454 mg、芍藥內(nèi)酯苷1.208 mg、芍藥苷3.516 mg、苯甲酰芍藥苷0.322 mg、麥冬甲基黃烷酮A 0.270 mg、甲基麥冬二氫高異黃酮B 0.138 mg、法卡林二醇0.212 mg 和人參炔醇0.396 mg 的混合對(duì)照品貯備液。精密吸取上述貯備液1.0 mL，用稀乙醇稀釋至25 mL，制成混合對(duì)照品溶液（氧化芍藥苷18.16 μg/mL、芍藥內(nèi)酯苷48.32 μg/mL、芍藥苷140.64 μg/mL、苯甲酰芍藥苷12.88 μg/mL、麥冬甲基黃烷酮A 10.80 μg/mL、甲基麥冬二氫高異黃酮B 5.52 μg/mL、法卡林二醇8.48 μg/mL 和人參炔醇15.84 μg/mL）。

2.2 供試品溶液的配制 取陰虛胃痛顆粒適量，精密稱定研細(xì)后細(xì)粉2.0 g，加稀乙醇20 mL，對(duì)供試品超聲處理30 min，放冷并用稀乙醇稀釋至25 mL，搖勻，0.45 μm 微孔濾膜過(guò)濾，續(xù)濾液作為陰虛胃痛顆粒供試品溶液。取按照陰虛胃痛顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)處方比例和制法制備的缺白芍、缺麥冬、缺北沙參的陰性供試品各適量，按上述方法制得陰性供試品溶液。

2.3 色譜條件及系統(tǒng)適用性 色譜柱為Agilent HC C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱溫30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)分別為230 nm（0～25 min 測(cè)定氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和苯甲酰芍藥苷）[3-5]、296 nm（25～34 min 測(cè)定麥冬甲基黃烷酮A 和甲基麥冬二氫高異黃酮B）[6-7]和254 nm（34～55 min，測(cè)定法卡林二醇和人參炔醇）[8-9]；流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸，梯度洗脫（0～9 min，16.0%乙腈；9～25 min，16.0%→48.0%乙腈；25～34 min，48.0%A→55.0%乙腈；34 ～46 min，55.0%→78.0%乙腈；46 ～55 min，78.0%→16.0%乙腈），流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量10 μL。理論塔板數(shù)按各成分色譜峰計(jì)均應(yīng)≥4 500。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 專屬性 精密吸取“2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液及“2.2”項(xiàng)下溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄所測(cè)色譜圖，見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示陰虛胃痛顆粒供試品溶液中氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇與相鄰色譜峰分離良好，分離度均＞1.5；所測(cè)指標(biāo)成分色譜峰峰形對(duì)稱，拖尾因子符合《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定；陰性供試品對(duì)陰虛胃痛顆粒中氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的同時(shí)測(cè)定無(wú)干擾。

圖1 高效液相色譜圖

2.4.2 線性關(guān)系 精密吸取“2.1”項(xiàng)下氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇混合對(duì)照品貯備液0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 和2.5 mL，置于不同的20 mL 容量瓶中，用稀乙醇稀釋至20 mL 配制成6 個(gè)不同濃度的混合對(duì)照品溶液，各精密吸取10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，以質(zhì)量濃度（μg/mL）為X 軸，峰面積為Y 軸進(jìn)行線性回歸分析，得回歸方程及線性范圍。見(jiàn)表1。

表1 陰虛胃痛顆粒中氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的回歸方程及線性范圍

2.4.3 日內(nèi)精密度和日間精密度 精密吸取批號(hào)為20190501 的陰虛胃痛顆粒同一份供試品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，重復(fù)操作6 次，測(cè)得8 種成分峰面積的RSD 值分別為1.11%、0.86%、0.53%、1.07%、1.20%、1.13%、0.99%和0.85%，表明該方法日內(nèi)精密度良好；連續(xù)3 d，每日重復(fù)進(jìn)樣3 次進(jìn)行日間精密度考察，結(jié)果8 種成分峰面積的RSD 值分別為1.05%、0.79%、0.63%、1.20%、1.16%、1.19%、0.92%和1.07%，表明該方法日間精密度良好。

2.4.4 重復(fù)性 取批號(hào)為20190501 的陰虛胃痛顆粒6 份，按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，各精密吸取10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積并計(jì)算各成分含量，結(jié)果8 種成分含量的RSD 值分別為1.08%、0.91%、0.60%、1.15%、1.19%、1.07%、1.02%和0.96%。

2.4.5 穩(wěn)定性 取批號(hào)為20190501 的陰虛胃痛顆粒同一份供試品溶液，于0、2、4、8、16 和24 h 各精密吸取10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，結(jié)果陰虛胃痛顆粒供試品溶液24 h 內(nèi)穩(wěn)定，8 種成分峰面積的RSD 值分別為1.82%、1.35%、0.96%、1.42%、1.80%、0.89%、1.74%和1.62%。

2.4.6 加樣回收率 取已知氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇含量的批號(hào)為20190501 的陰虛胃痛顆粒細(xì)粉9 份，每份1.0 g，精密稱定，隨機(jī)平分成3 組，每組精密加入混合對(duì)照品溶液（氧化芍藥苷0.242 mg/mL、芍藥內(nèi)酯苷0.752 mg/mL、芍藥苷1.858 mg/mL、苯甲酰芍藥苷0.174 mg/mL、麥冬甲基黃烷酮A 0.130 mg/mL、甲基麥冬二氫高異黃酮B 0.058 mg/mL、法卡林二醇0.114 mg/mL、人參炔醇0.218 mg/mL）0.8、1.0 和1.2 mL，使加入量與所取陰虛胃痛顆粒中各目標(biāo)成分含量之比約控制在0.8∶1、1∶1 和1.2∶1，再按“2.2”項(xiàng)下方法制備成加樣供試品溶液。各精密吸取10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積并計(jì)算各成分加樣回收率及RSD 值。結(jié)果表明陰虛胃痛顆粒中8 種成分的平均加樣回收率及RSD分別為98.90%（1.01%）、100.02%（0.94%）、99.52%（0.76%）、97.88%（1.35%）、99.14%（1.42%）、96.85%（0.65%）、97.83%（0.92%）和98.65%（1.24%）。

2.5 HPLC-QAMS 法的質(zhì)量評(píng)價(jià)模式建立

2.5.1 建立相對(duì)校正因子（RCF） 精密吸取“2.4.2”項(xiàng)6 個(gè)不同濃度的混合對(duì)照品溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，用質(zhì)量濃度與峰面積之比計(jì)算各成分校對(duì)因子，將待測(cè)成分與內(nèi)參物的校正因子之比計(jì)算為各成分的RCF，即RCFk/s=fk/fs=（Wk/Ak）/（Ws/As）=（Wk×As）/（Ws×Ak），f、W 和A 分別代表RCF、質(zhì)量濃度和峰面積，k、s 分別代表其他待測(cè)成分及內(nèi)參物。以芍藥苷為內(nèi)參物，根據(jù)上述公式分別計(jì)算得芍藥苷對(duì)氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的RCF。見(jiàn)表2。

表2 芍藥苷對(duì)氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的RCF

2.5.2 不同儀器及色譜柱對(duì)RCF 的影響 在不同儀器（Agilent 1260 Infinity Ⅱ型和島津LC-2030 型高效液相色譜儀）和色譜柱（Agilent HC C18、Kromasil C18和Xtimate C18柱）條件下，精密吸取“2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，計(jì)算得芍藥苷對(duì)氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的RCF。見(jiàn)表3。

表3 不同儀器及色譜柱對(duì)RCF 的影響

2.5.3 不同流速對(duì)RCF 的影響 在不同流速（0.8、0.9、1.0、1.1 和1.2 mL/min）條件下，精密吸取“2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，計(jì)算得芍藥苷對(duì)氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的RCF。見(jiàn)表4。

表4 不同流速對(duì)RCF 的影響

2.5.4 不同柱溫對(duì)RCF 的影響 在不同柱溫（28、29、30、31 和32 ℃）條件下，精密吸取“2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，計(jì)算得芍藥苷對(duì)氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的RCF。見(jiàn)表5。

2.5.5 色譜峰定位 待測(cè)物色譜峰的準(zhǔn)確定位是HPLC-QAMS 法可行性的基礎(chǔ)，在不同儀器（Agilent 1260 Infinity Ⅱ型和島津LC-2030 型高效液相色譜儀）和色譜柱（Agilent HC C18、Kromasil C18和Xtimate C18柱）條件下，精密吸取“2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀中進(jìn)樣檢測(cè)，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇色譜峰的保留時(shí)間，將待測(cè)成分與內(nèi)參物保留時(shí)間之比計(jì)算各成分的相對(duì)保留時(shí)間值（RRT），計(jì)算得芍藥苷對(duì)氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的RRT。見(jiàn)表6。

表6 不同儀器及色譜柱對(duì)RRT 的影響

2.6 HPLC-QAMS 法與外標(biāo)法（ESM）測(cè)定結(jié)果的比較 為驗(yàn)證所建立的HPLC-QAMS 方法的準(zhǔn)確性和可行性，各取3 個(gè)批次的陰虛胃痛顆粒適量，按“2.2”項(xiàng)方法制備陰虛胃痛顆粒供試品溶液（每個(gè)批次平行制備3 份），各精密吸取上述供試品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀中，記錄氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的峰面積，分別采用ESM 和HPLC-QAMS 法計(jì)算陰虛胃痛顆粒中氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的含量，并采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)兩種方法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果顯示兩種方法所得結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。見(jiàn)表7。

表7 陰虛胃痛顆粒中氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的ESM 和HPLC-QAMS 法含量測(cè)定結(jié)果（n=3）mg/g

3 討論

陰虛胃痛顆粒由白芍、麥冬、北沙參、石斛、玉竹、川楝子和炙甘草組方而來(lái)，北沙參養(yǎng)陰清肺、益胃生津，麥冬養(yǎng)陰生津、潤(rùn)肺清心，合為君藥；石斛益胃生津、滋陰清熱，玉竹養(yǎng)陰潤(rùn)燥、生津止渴，共為臣藥；白芍養(yǎng)血斂陰、柔肝止痛，川楝子疏肝泄熱、行氣止痛，合為佐藥；炙甘草補(bǔ)脾和胃、益氣復(fù)脈、調(diào)和諸藥，為使藥。7 味中藥材所含化學(xué)成分相互協(xié)調(diào)、相互制約，共達(dá)養(yǎng)陰益胃、緩急止痛的臨床功效。為全面評(píng)價(jià)陰虛胃痛顆粒的整體質(zhì)量，本研究參考中藥質(zhì)量標(biāo)志物的確認(rèn)原則[10]，以君藥所含成分為首選，兼顧臣、佐、使藥所含成分，選取君藥北沙參活性成分法卡林二醇和人參炔醇、麥冬特征成分麥冬甲基黃烷酮A 和甲基麥冬二氫高異黃酮B，以及佐藥白芍主要成分氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和苯甲酰芍藥苷8 種成分進(jìn)行定量控制研究。內(nèi)參物的選擇對(duì)所建立HPLC-QAMS 法的準(zhǔn)確性和可行性至關(guān)重要，本研究選取成分較為穩(wěn)定、樣品中含量較高、價(jià)格低廉易得、出峰時(shí)間適中的芍藥苷為內(nèi)參物。

以陰虛胃痛顆粒中目標(biāo)成分氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的分離效果為主要考察指標(biāo)，兼顧分析檢測(cè)用時(shí)、色譜圖基線平穩(wěn)等因素，考察了不同流動(dòng)相洗脫系統(tǒng)，結(jié)果顯示乙腈-水[6-7，9]優(yōu)于甲醇-水流動(dòng)相洗脫，但目標(biāo)成分氧化芍藥苷、人參炔醇達(dá)不到有效分離。以乙腈為有機(jī)相，參考文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)乙腈-0.1%磷酸溶液[3-5]、乙腈-0.1%甲酸溶液[7-8]進(jìn)行對(duì)比考察，選取乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，通過(guò)對(duì)流動(dòng)相中有機(jī)相和水相比例的不斷摸索，最終確定以“2.3”項(xiàng)下的梯度洗脫程序?qū)﹃幪撐竿搭w粒中氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇含量同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果提示在此條件下，各成分分離效果較好，色譜圖基線平穩(wěn)，雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)成分的測(cè)定干擾較小。本實(shí)驗(yàn)在處理陰虛胃痛顆粒供試品溶液時(shí)，依次考察了甲醇[6]、70%甲醇[7]、稀乙醇[3-5，8]等提取溶劑以及超聲[3-9]和加熱回流提取兩種提取方式，以氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇的綜合提取率為首要指標(biāo)，兼顧雜質(zhì)干擾程度，最終確定以稀乙醇超聲處理30 min 對(duì)陰虛胃痛顆粒進(jìn)行供試品制備。

4 結(jié)論

自“2.6”項(xiàng)下氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B、法卡林二醇和人參炔醇含量檢測(cè)結(jié)果可以看出，HPLC-QAMS 法的計(jì)算結(jié)果與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值之間無(wú)明顯差異，表明本研究所建立的HPLC-QAMS法結(jié)果準(zhǔn)確，可用于對(duì)陰虛胃痛顆粒中8 種指標(biāo)成分的同時(shí)測(cè)定，能夠作為陰虛胃痛顆粒多指標(biāo)成分的質(zhì)量控制方法。同時(shí)也反映出8 種目標(biāo)成分存在一定的批間差異，尤其氧化芍藥苷、麥冬甲基黃烷酮A、法卡林二醇和人參炔醇含量差異較為明顯，表明多指標(biāo)成分的質(zhì)量控制對(duì)穩(wěn)定陰虛胃痛顆粒產(chǎn)品質(zhì)量、確保臨床用藥療效一致性具有重要意義，有助于藥品生產(chǎn)企業(yè)和監(jiān)管部門(mén)不斷提升陰虛胃痛顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，建立健全該制劑原藥材來(lái)源及內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，不斷細(xì)化完善制劑生產(chǎn)過(guò)程的操作參數(shù)控制，以期保證陰虛胃痛顆粒產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，為指導(dǎo)臨床合理用藥提供有效參考依據(jù)。