郭新穎，陳 峰，葉青華，顧 俊

（南通市疾病預(yù)防控制中心，江蘇 南通 226007）

阿司匹林（Aspirin,ASP），是一種常見的解熱鎮(zhèn)痛藥物。阿司匹林的有效成分是乙酰水楊酸（Acetyl salicylic acid,ASA,化學(xué)式C9H8O4），制藥上最早用水楊酸（C7H6O3）與乙酸酐（C4H6O3）合成乙酰水楊酸（乙?；乃畻钏幔?，故而乙酰水楊酸是水楊酸的衍生物。久置于空氣的阿司匹林會(huì)受潮生成刺激毒性物水楊酸（Salicylic acid,SA），不僅影響藥效，還會(huì)危害健康。目前，有關(guān)阿司匹林含量的測定方法主要集中在高效液相色譜法[1-3]和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[4]等，以上方法雖精密度高但操作繁瑣且儀器昂貴，難以在一般基層單位推廣應(yīng)用。因此，開發(fā)一種造價(jià)低廉、儀器簡便、測定快速的針對阿司匹林片中乙酰水楊酸含量的測定方法對于基層檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)來說極其重要。本法是利用紫外-可見分光光度法，結(jié)合一種簡單樣品前處理方法，實(shí)現(xiàn)了阿司匹林中乙酰水楊酸含量的快速定量測定。經(jīng)驗(yàn)證，本法具有操作簡便、分析快速、試劑便宜、方法穩(wěn)定等特點(diǎn)，適用于單一及批量阿司匹林片劑中乙酰水楊酸含量的快速定量測定。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)品（JL190811001，20mg，江萊生物）；無水乙醇（AR國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；阿司匹林（100mg·片-1拜耳醫(yī)藥保健有限公司）。

TU-1950型紫外可見分光光度計(jì)（北京普析儀器有限公司）。

1.2 樣品處理

將阿司匹林片研磨過篩，準(zhǔn)確稱取粉末0.05g于容量瓶中，用無水乙醇定容至50mL，溶解混勻后用濾紙過濾，移取4mL過濾液于容量瓶中，用無水乙醇定容至50mL（以阿司匹林含量計(jì)，相當(dāng)于質(zhì)量濃度80μg·mL-1），放置待測，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取0.01g阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)品（精確到0.0001g），加入無水乙醇定容至10mL，配制成1.0mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)母液。分別稀釋不同倍數(shù)得到質(zhì)量濃度分別為5.0，10.0，15.0，20.0，30.0，40.0，50.0，60.0，80.0，100.0μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)使用液。

1.4 樣品測定

采用光譜掃描法確定最佳吸收波長，固定276nm處的紫外檢測波長測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度，得到乙酰水楊酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。同樣方法測定待測樣品的吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線求得樣品中乙酰水楊酸的含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的測定

將濃度為60.0μg·mL-1的乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液在紫外波長200～400nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)阿司匹林在選擇276nm波長處有一最大吸收峰，見圖1。

圖1 乙酰水楊酸的紫外吸收圖譜Fig.1 UV absorption spectrum of acetylsalicylic acid

由圖1可知，此時(shí)溶液吸光度A值為0.418，故試驗(yàn)選擇276nm為阿司匹林的測定波長。

2.2 樣品溶劑的選擇

由于乙酰水楊酸是弱酸類化合物，其水解易受溶液的酸堿性影響，且水解程度堿性大于酸性；同時(shí)考慮到乙酰水楊酸在不同溶劑中的溶解性和樣品溶劑的毒性，實(shí)際測定時(shí)選用無水乙醇這一常用、中性、低毒溶劑作為樣品溶劑進(jìn)行試驗(yàn)考察。結(jié)果表明，5.0～100.0μg·mL-1范圍內(nèi)的一系列不同濃度的乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液呈現(xiàn)不同的吸光度值，且線性良好，可以滿足實(shí)際測試要求。故綜合考慮，本試驗(yàn)選擇無水乙醇作為樣品處理和標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋溶劑。

2.3 檢測時(shí)間的選擇

試驗(yàn)選擇無水乙醇作為溶劑，考察乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)品在該溶劑中的穩(wěn)定性試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，某一固定濃度的乙酰水楊酸-無水乙醇溶液體系的吸光度在較短時(shí)間內(nèi)波動(dòng)不大，并未發(fā)生明顯變化；過夜放置的該溶液體系在304nm處出現(xiàn)一弱吸收，提示阿司匹林溶液在乙醇溶液中發(fā)生一定程度的水解作用生成了水楊酸。故綜合考慮，在實(shí)際樣品測定時(shí)，阿司匹林溶液不宜長時(shí)間放置，以短時(shí)間4℃冷藏保存且現(xiàn)用現(xiàn)配為宜。

2.4 線性方程和線性范圍

在276nm波長處測定一系列濃度范圍的乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，以濃度（x）和吸光度（y）作線性回歸方程，繪制乙酰水楊酸在不同濃度時(shí)對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。結(jié)果表明，乙酰水楊酸在5.0～100.0μg·mL-1的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性方程y=0.0076x-0.0372，r=0.9998。

2.5 精密度和回收率

為驗(yàn)證試驗(yàn)方法的精密度，按上述方法對基體樣品進(jìn)行了3個(gè)不同濃度加標(biāo)量的精密度和回收率試驗(yàn)，經(jīng)過6次處理和測量，計(jì)算得到不同濃度加標(biāo)的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。同樣的方法對基體樣品進(jìn)行3個(gè)不同加標(biāo)濃度的回收率試驗(yàn)，以驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確性。加標(biāo)樣品按照本法進(jìn)行處理和測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差和回收率結(jié)果見表1。

表1 精密度和回收率試驗(yàn)結(jié)果Tab.1 Precision and recovery test results

由表1可知，低、中、高3個(gè)加標(biāo)量對應(yīng)的樣品回收率分別為97.15%、99.90%和98.39%，回收率范圍在97.15%～99.90%之間，平均回收率為98.48%。不同加標(biāo)量對應(yīng)的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為4.87%、1.16%和2.71%，重復(fù)性良好。試驗(yàn)結(jié)果表明，本法精密度和準(zhǔn)確度均可滿足試驗(yàn)檢測要求，結(jié)果可靠。

2.6 實(shí)際樣品的測定

將某一批次的阿司匹林片按照上述前處理方法配制成質(zhì)量濃度為80μg·mL-1的樣品待測液。依照本法進(jìn)行阿司匹林中乙酰水楊酸含量的測定（n=6），得到阿司匹林樣品中乙酰水楊酸的檢測濃度范圍為78.84～79.50μg·mL-1，折合百分含量（%）范圍為98.55%～99.38%，平均百分含量為98.86%，相當(dāng)于每片片劑含有有效成分98.86mg。測定結(jié)果見表2。

表2 實(shí)際樣品測定結(jié)果（n=6）Tab.2 Determination results of actual samples（n=6）

由表2可知，經(jīng)計(jì)算得到此時(shí)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.33%，測定結(jié)果令人滿意。

3 結(jié)論

本文建立了一種紫外光譜法結(jié)合簡單前處理方法對阿司匹林有效成分——乙酰水楊酸含量進(jìn)行快速定量測定的分析方法。試驗(yàn)通過確定測試體系的最佳吸收波長，對不同溶劑試劑的選擇和測定時(shí)間的影響進(jìn)行分析，繪制以濃度和吸光度為橫縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，同時(shí)進(jìn)行方法的精密度和回收率試驗(yàn)，驗(yàn)證了紫外分光光度法快速定量測定阿司匹林中乙酰水楊酸含量的可行性，結(jié)果可靠、令人滿意。該法操作簡便，試劑廉價(jià)易得，準(zhǔn)確度高，適用于單一和批量阿司匹林中乙酰水楊酸含量的快速定量測定，提供了一種控制阿司匹林質(zhì)量及快速測定其有效含量的方法。