馮立玲，胥文玲，吳 倩，張志會，王清華，白曉玲

蒙牛乳業(yè)（灤南）有限責(zé)任公司，河北唐山 063500

0 引言

乳及其制品中營養(yǎng)物質(zhì)豐富，脂肪是其中一種重要的營養(yǎng)物質(zhì)。由于脂肪容易水解，也容易氧化酸敗，在檢測過程中會受到酸堿性試劑、溫度等因素的影響，因此建立實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制體系并切實運用到實驗室日常檢測活動中是非常必要的[1]。實驗室質(zhì)量控制方法包括空白實驗、校準曲線的核查、儀器設(shè)備的標定、平行樣分析、加標樣分析以及使用質(zhì)量控制圖等[2]。本文通過采用質(zhì)控樣品、能力驗證、留樣再測、方法對比、人員間對比及質(zhì)量控制圖共計6 種質(zhì)量控制方式對脂肪檢測項目進行監(jiān)控，對驗證監(jiān)控數(shù)據(jù)進行分析，對檢測過程中存在的異常因素采取控制措施，以確保檢測結(jié)果的準確性。

1 試驗方法

1.1 儀器與試劑

電子天平（MS105DU），梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；恒溫水箱（HHS-2），上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；電熱鼓風(fēng)干燥箱（WGL-230B）），天津市泰斯特儀器有限公司；氨水（批號：20211010）、95%乙醇（批號：20211012）、無水乙醚（批號：20210801）、石油醚（批號：20211117）、剛果紅（批號：20180507），試劑廠家均為福晨（天津）化學(xué)試劑有限公司。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法

采用《GB 5009.6—2016食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》[3]中堿水解法，通過使用無水乙醚和石油醚抽提樣品的堿性水解液，再通過水浴蒸發(fā)去除溶劑，測定溶于溶劑中的抽提物的質(zhì)量來進行脂肪項目的檢測試驗。

（1）樣品稱取

稱取充分混勻試樣10 g（精確至0.0001 g）于抽脂瓶中。加入2.0 mL氨水，充分混合后放入（65±5）℃的水浴中，加熱15~20 min，不時取出振蕩，冷卻至室溫，靜置30 s。

（2）抽提

加入10 mL95%乙醇，搖勻；再加入2 滴剛果紅溶液，25 mL乙醚，塞好瓶塞，100 次/min振蕩1 min；然后再加入25 mL石油醚，輕輕振蕩30 s。至少靜置30 min，直到上層液體澄清，明顯出現(xiàn)液層分離。小心地打開瓶塞，用少量乙醚和石油醚的混合溶劑來沖洗瓶塞及瓶頸內(nèi)壁，將上層清液盡可能地倒入脂肪收集瓶中。再用少量醚類混合試劑沖洗瓶頸外部，沖洗液也收集到脂肪收集瓶中。向抽脂瓶中加入5mL95%乙醇，15 mL乙醚和15 mL石油醚，進行第2次和第3次抽提。采用10 mL水代替試樣，做空白試驗。

（3）稱量

合并所有提取液，沸水浴蒸干。將脂肪收集瓶放入（100±5）℃的烘箱中1 h，取出后于干燥器內(nèi)冷卻0.5 h后進行稱量，重復(fù)操作至恒重（直至兩次稱量的差不超過2 mg）。

1.2.2 質(zhì)量控制方法

（1）質(zhì)控樣品

一種存儲條件能夠得到滿足，數(shù)量充足、穩(wěn)定且充分均勻的材料，其物理和化學(xué)特性與常規(guī)檢測試樣相同或充分相似，可用于長期確定和監(jiān)控系統(tǒng)的精密度和穩(wěn)定性[4]。

（2）能力驗證

利用實驗室間比對，按照預(yù)先制定的準則評價參加者的能力[5]。

（3）留樣再測

留樣再測是指在不同的時間再次對已完成檢測的留存樣品或備份樣品進行檢測的方法。

（4）方法對比

方法對比是指對相同項目采用不同的檢測方法進行結(jié)果對比。

（5）人員間對比

由不同的檢測人員對某一樣品使用相同的方法檢測，將不同人員檢測結(jié)果進行對比，以驗證檢測結(jié)果的可靠性。

（6）質(zhì)量控制圖

質(zhì)量控制圖是實驗室進行內(nèi)部質(zhì)量控制最重要的工具之一，其基礎(chǔ)是將質(zhì)控樣品與待測樣品放在一個分析批中一起進行分析，然后將質(zhì)控樣品的結(jié)果（控制值）繪制在控制圖上，實驗室可以從控制圖中控制值的分布及變化趨勢評估分析過程是否受控、分析結(jié)果是否可以接受[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同質(zhì)控樣品的檢測結(jié)果

本實驗室采用中國檢驗檢疫科學(xué)研究院測試評價中心的3 個不同特性值范圍的有證書的質(zhì)控樣品，進行人員檢測能力的監(jiān)控。在不同日期要求實驗人員進行檢測，具體檢測結(jié)果如表1。

表1 質(zhì)控樣品檢測結(jié)果 單位：g/100 g

2.2 能力驗證檢測結(jié)果

定期參加能力驗證，能有效提高實驗室技術(shù)操作能力和分析鑒定能力，找出差距并加以改進，從而提高實驗室檢測能力[7]。本實驗室參加了ACASPT774 奶粉中蛋白質(zhì)、脂肪的測定能力驗證計劃，具體檢測結(jié)果如表2。

表2 能力驗證檢測結(jié)果 單位：g/100 g

2.3 留樣再測

實驗室選取保質(zhì)期為6 個月的滅菌乳樣品，初次檢測完成后，在連續(xù)4 個月內(nèi)共計進行28 次該批樣品脂肪項目的復(fù)測，檢測結(jié)果見表3，并將所有檢測數(shù)據(jù)繪制折線圖，具體如圖1所示。

由圖1可知，該批滅菌乳樣品脂肪初檢結(jié)果為4.32 g/100 g，復(fù)測最低檢測結(jié)果為4.27 g/100 g，復(fù)測最高檢測結(jié)果為4.35 g/100 g，不同時間復(fù)測結(jié)果呈現(xiàn)的波動趨勢在實驗室可接受范圍內(nèi)。

圖1 留樣再測數(shù)據(jù)圖

2.4 方法對比

本實驗室脂肪項目除使用國標堿水解方法檢測之外，還使用快速儀器方法進行檢測，日常通過兩種方法的數(shù)據(jù)對比，可以了解檢測結(jié)果的差異性，及時采取糾偏措施。

實驗室以國標堿水解法檢測的脂肪結(jié)果4.29 g/100 g作為基準值，通過與不同日期和時間快速儀器檢測結(jié)果進行對比發(fā)現(xiàn)，在檢測前期快速儀器檢測結(jié)果偏高于國標檢測結(jié)果，達到4.36 g/100 g時兩種方法最大偏差為0.07，這時的偏差超出實驗室可接受范圍，因此，判斷該時段乳成分分析儀存在系統(tǒng)誤差，需要進行調(diào)節(jié)來降低方法間的檢測差異。通過對儀器進行調(diào)節(jié)后，儀器檢測結(jié)果與國標方法檢測基準值上下波動，處于實驗室可接受范圍之內(nèi)。具體如圖2所示。

圖2 方法對比趨勢圖

2.5 人員間對比

實驗室通過人員比對可以發(fā)現(xiàn)不同檢測人員對檢測方法的理解和掌握程度，避免人為因素對檢測結(jié)果產(chǎn)生偏離。

實驗室兩名檢測人員分別在相同實驗條件下分別對相同樣品進行檢測，累計積累6 組數(shù)據(jù)，分析結(jié)果見表4。

表4 人員間對比結(jié)果 單位：g/100 g

由上可以看出，兩名檢測人員的檢測結(jié)果無顯著性差異。為持續(xù)考評衡量人員間操作差異性，實驗室應(yīng)制定操作比對計劃[8]。

2.6 質(zhì)量控制圖

實驗室選取一批滅菌調(diào)制乳樣品，通過Excel軟件對累計135 次脂肪檢測結(jié)果進行計算，得到標準偏差及表5中相關(guān)繪制質(zhì)控圖的數(shù)據(jù)。

表5中以x為中心線（CL）并向外設(shè)定3 個區(qū)間，x±S（UAL，LAL），x±2S為（UWL，LWL），x±3S為（UCL，LCL）。

依據(jù)表5，以參考值為中心線（CL），x±2s為上下警戒限（U/LWL），x±3s為上下控制限（U/LCL），制作質(zhì)控圖（圖3）。

表5 質(zhì)控圖數(shù)據(jù) 單位：g/100 g

圖3 滅菌調(diào)制乳脂肪項目檢測質(zhì)量控制

本文使用Westgard多規(guī)則[9，10]對圖3所繪制的質(zhì)量控制圖中的數(shù)據(jù)進行分析，以此來判斷檢測結(jié)果是否處于受控狀態(tài)。Westgard多規(guī)則包括12s、13s、22s、R4s、41s、10x 6種，經(jīng)過分析質(zhì)控圖各數(shù)據(jù)與規(guī)則的對應(yīng)情況發(fā)現(xiàn)，除在13s規(guī)則下圖3中共有2個點（檢測結(jié)果均為3.04）超過上控制限，這2 個點最終確定屬于隨機誤差。

通過上述分析可以看出，實驗室乳及乳制品脂肪項目的檢測過程中不存在系統(tǒng)誤差，日常檢測結(jié)果準確可信。

3 結(jié)論

本實驗室通過采用質(zhì)控樣品、能力驗證、留樣再測、方法對比、人員間對比及質(zhì)量控制圖共計6種質(zhì)量控制方式對乳及乳制品脂肪檢測項目進行監(jiān)控，實現(xiàn)了檢測環(huán)節(jié)的全過程控制，可以及時掌握脂肪項目的檢測趨勢。同時，為實驗室開展人員檢測能力監(jiān)控評價、檢測驗證結(jié)果出具的準確性和符合性評價提供了參考依據(jù)，也為實驗室開展能力驗證等實驗室間比對常態(tài)化對比工作，以及實驗室質(zhì)量管理提供了方法學(xué)依據(jù)和技術(shù)支撐。