劉本濤 李本杰 袁彩英 陳 睿, 杜 秀 王 翔

(1 廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，廣西南寧市 530001； 2 廣西中醫(yī)藥大學(xué)賽恩斯新醫(yī)藥學(xué)院，廣西南寧市 530222； 3 廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部，廣西南寧市 530023)

新型冠狀病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)是由新型冠狀病毒感染引起的急性肺炎，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、干咳、氣促、乏力等，嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)呼吸困難、急性肺損傷、心肝腎功能衰竭、呼吸窘迫綜合征、膿毒癥休克等，嚴(yán)重者甚至死亡[1-2]。新型冠狀病毒主要通過(guò)飛沫、親密接觸等途徑傳播，同時(shí)也存在氣溶膠傳播的可能[3-4]；其傳染性強(qiáng)，傳播速度快、范圍廣，且各類人群普遍易感，故嚴(yán)重危害人類健康和公共安全。

目前，臨床上尚未研制出治療COVID-19的特效藥，但是基于中醫(yī)藥的對(duì)癥和支持治療在COVID-19的防控中發(fā)揮了重要作用，這充分顯示了中醫(yī)藥的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)[5]。自疫情發(fā)生以來(lái)，國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)推出并不斷更新COVID-19的診療方案，第三版診療方案開(kāi)始納入中醫(yī)治療，第四版診療方案開(kāi)始推薦使用中藥注射液。在《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第七版)》[6]中，參麥注射液被推薦作為治療危重型內(nèi)閉外脫證患者的中成藥。

參麥注射液由紅參和麥冬兩味藥材組成，具有益氣養(yǎng)陰、復(fù)脈固脫之功效。該藥能明顯地降低支原體肺炎和重癥肺炎患者的炎癥水平[7-8]，增強(qiáng)呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎、膿毒癥和腫瘤患者的免疫功能[9-11]，在疾病治療和預(yù)后改善中發(fā)揮重要作用。上述作用也可能是其治療COVID-19的潛在作用機(jī)制。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法篩選參麥注射液治療COVID-19的活性成分和作用靶點(diǎn)，進(jìn)一步探索參麥注射液治療COVID-19的作用機(jī)制，以期為其用于治療COVID-19提供更多的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 參麥注射液化學(xué)成分和靶點(diǎn)的搜集 利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)及分析平臺(tái)(http://tcmspw.com/tcmsp.php)和BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫(kù)(http://bionet.ncpsb.org/batman-tcm/index.php)，針對(duì)參麥注射液中的主要成分紅參和麥冬進(jìn)行檢索，同時(shí)結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[12-13]，獲取參麥注射液的全部活性成分及其相關(guān)靶點(diǎn)，數(shù)據(jù)庫(kù)未收錄的活性成分則利用Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.swisstargetprediction.ch/)在線預(yù)測(cè)其靶點(diǎn)。最后，對(duì)收集到的全部靶基因進(jìn)行整理，并使用UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.uniprot.org/)校正基因名稱。

1.2 參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)的獲取 在CTD數(shù)據(jù)庫(kù)(http://ctdbase.org/)中以“coronavirus”“pneumonia”和“COVID-19”為關(guān)鍵詞分別進(jìn)行檢索，搜集與COVID-19相關(guān)的靶點(diǎn)；利用在線平臺(tái)Venny2.1.0(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html)將上述疾病靶點(diǎn)與參麥注射液活性成分相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行取交集，篩選出的共同靶點(diǎn)即為參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)。

1.3 活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及分析 獲取參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)后，可進(jìn)一步得到其對(duì)應(yīng)的活性成分。將參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)及其對(duì)應(yīng)的活性成分導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件，構(gòu)建參麥注射液治療COVID-19的活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，網(wǎng)絡(luò)中節(jié)點(diǎn)代表成分或作用靶點(diǎn)，邊代表成分與靶點(diǎn)的相互作用。最后通過(guò)軟件的“Merge”功能將紅參、麥冬的活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行整合，并利用軟件的“Network Analyzer”功能對(duì)整合網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)屬性分析，獲取活性成分和作用靶點(diǎn)的度值。

1.4 蛋白-蛋白相互作用分析 針對(duì)參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)，采用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)(https://string-db.org/)進(jìn)行蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析，物種限定為“Homo sapiens”，置信度設(shè)為>0.9，獲取PPI網(wǎng)絡(luò)。保存TSV格式的結(jié)果文件，從中獲取節(jié)點(diǎn)1、節(jié)點(diǎn)2和結(jié)合分?jǐn)?shù)的相關(guān)信息，將結(jié)果文件導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件重新構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)并進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)分析。計(jì)算網(wǎng)絡(luò)中每個(gè)靶點(diǎn)的度值，以度值設(shè)置節(jié)點(diǎn)大小及顏色，度值越高，節(jié)點(diǎn)越大、對(duì)應(yīng)顏色越深；邊的粗細(xì)代表靶點(diǎn)間的作用強(qiáng)度，且與結(jié)合分?jǐn)?shù)相關(guān)聯(lián)，結(jié)合分?jǐn)?shù)值越大、邊越粗，靶點(diǎn)間相互作用越強(qiáng)。

1.5 功能和通路富集分析 將參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)(http://david.ncifcrf.gov/)中進(jìn)行基因本體論(Gene Ontology,GO)功能富集分析和京都基因組與基因百科全書(shū)(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析，設(shè)定靶基因名稱為“Homo sapiens”，閾值P<0.01，根據(jù)涉及靶點(diǎn)數(shù)目的多少篩選排名靠前的生物過(guò)程及通路，并采用ImageGP在線平臺(tái)(www.ehbio.com/ImageGP/)對(duì)相關(guān)GO功能注釋結(jié)果進(jìn)行可視化分析。

1.6 靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)的獲取 將參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)導(dǎo)入KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.kegg.jp)，限定物種為人，通過(guò)KEGG Mapper工具的“Search Pathway”功能獲取作用靶點(diǎn)涉及的相關(guān)通路并進(jìn)行通路注釋，最終得到作用靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)。

2 結(jié) 果

2.1 參麥注射液的活性成分及相關(guān)靶點(diǎn) 共檢索到參麥注射液活性成分112個(gè)，其中紅參90個(gè)、麥冬22個(gè)，無(wú)共有成分；刪除重復(fù)項(xiàng)并經(jīng)UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)校正后共獲取活性成分相關(guān)靶點(diǎn)807個(gè)，其中紅參575個(gè)、麥冬427個(gè)，共有靶點(diǎn)195個(gè)。見(jiàn)圖1。

2.2 參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn) 以“coronavirus”“pneumonia”和“COVID-19”為關(guān)鍵詞，在CTD數(shù)據(jù)庫(kù)中分別檢索到6 918個(gè)、34 364個(gè)和472個(gè)相關(guān)靶點(diǎn)，共有靶點(diǎn)472個(gè)，作為COVID-19的靶基因；將上述472個(gè)疾病靶點(diǎn)與807個(gè)參麥注射液活性成分相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行取交集，得到148個(gè)共同靶點(diǎn)，即為參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)。見(jiàn)圖1。

圖1 參麥注射液活性成分相關(guān)靶點(diǎn)(左圖)及其治療COVID-19的靶點(diǎn)(右圖)的韋恩圖

2.3 參麥注射液治療COVID-19的活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 參麥注射液治療COVID-19的148個(gè)作用靶點(diǎn)可對(duì)應(yīng)到94個(gè)活性成分，其中有101個(gè)作用靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)紅參的77個(gè)活性成分，有97個(gè)作用靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)麥冬的17個(gè)活性成分，二者共有作用靶點(diǎn)50個(gè)。運(yùn)用Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建參麥注射液治療COVID-19的活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)(見(jiàn)圖2)，發(fā)現(xiàn)參麥注射液治療COVID-19的活性成分主要包括皂苷、植物甾醇、高異黃酮、脂肪酸、多糖和揮發(fā)性成分，表明上述成分為參麥注射液在治療COVID-19時(shí)發(fā)揮藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。圖中紅參的活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)包括179個(gè)節(jié)點(diǎn)(1味藥材、77個(gè)活性成分、101個(gè)作用靶點(diǎn))和649條邊；麥冬的活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)包括115個(gè)節(jié)點(diǎn)(1味藥材、17個(gè)活性成分、97個(gè)作用靶點(diǎn))和150條邊。網(wǎng)絡(luò)中同一活性成分可作用于不同靶點(diǎn)，同一靶點(diǎn)可對(duì)應(yīng)多個(gè)成分，提示參麥注射液治療COVID-19具有多成分、多靶點(diǎn)協(xié)同作用的特點(diǎn)。

圖2 參麥注射液治療COVID-19的活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)

將紅參、麥冬的活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)整合后，利用“Network Analyzer”功能對(duì)整合網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析，獲取度值排名前25的活性成分及作用靶點(diǎn)，見(jiàn)表1。其中，薯蕷皂苷元、人參皂苷、三七皂苷、原人參三醇、人參炔三醇、β-欖香烯、豆甾醇等單一活性成分的度值較大，提示其可能為參麥注射液在治療COVID-19時(shí)發(fā)揮藥效的主要成分。前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)、信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、Na+/K+-ATP酶α1亞基(Na+/K+-ATPase alpha 1 subunit,ATP1A1)、纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(fibroblast growth factor 1,FGF1)、熱休克蛋白90α家族 A類成員1(heat shock protein 90 alpha family class A member 1,HSP90AA1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、白細(xì)胞介素2(interleukin 2,IL-2)、B細(xì)胞淋巴瘤2(B cell lymphoma-2,BCL2)L1、雌激素受體1(estrogen receptor 1,ESR1)、溶質(zhì)載體家族6成員4(solute carrier family 6 member 4,SLC6A4)、核受體共激活蛋白2(nuclear receptor coactivator 2,NCOA2)、細(xì)胞色素P450家族2亞家族C(cytochrome P450 family 2 subfamily C,CYP2C)19和CYP2C9等靶點(diǎn)分別與多個(gè)化學(xué)成分關(guān)聯(lián)，表明它們可能是參麥注射液治療COVID-19的重要作用靶點(diǎn)。

表1 參麥注射液治療COVID-19度值排名前25的活性成分與靶點(diǎn)

2.4 參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò) 將篩選所得的參麥注射液治療COVID-19的148個(gè)作用靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，設(shè)置置信度>0.9，得到PPI網(wǎng)絡(luò)；并將結(jié)果文件導(dǎo)入Cytoscape3.7.2軟件中重新構(gòu)建PPI，見(jiàn)圖3。如圖3所示，STAT3、MAPK1、MAPK3、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,AKT)1、原癌基因Jun轉(zhuǎn)錄因子AP-1亞單位(Jun proto-oncogene,AP-1 transcription factor subunit,JUN)、腫瘤蛋白p53(tumor protein p53，TP53)、RELA、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)、IL-6、原癌基因酪氨酸蛋白激酶Src(proto-oncogene tyrosine-protein kinase Src,SRC)、Janus激酶(Janus kinase,JAK)、HSP90AA1、Caspase 8(CASP8)、VEGFA、EGFR等靶標(biāo)蛋白在網(wǎng)絡(luò)中十分突出(即節(jié)點(diǎn)大、顏色深)，提示以上靶點(diǎn)可能是參麥注射液治療COVID-19的核心作用靶點(diǎn)。

圖3 參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)

2.5 GO功能富集和KEGG通路富集分析 將參麥注射液治療COVID-19的148個(gè)作用靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。GO功能富集分析共映射到顯著富集的GO 條目155個(gè)，包括生物過(guò)程120個(gè)、細(xì)胞組分15個(gè)和分子功能20個(gè)，采用ImageGP在線平臺(tái)對(duì)上述3個(gè)模塊中排名前10的條目進(jìn)行可視化處理(見(jiàn)圖4)。結(jié)果顯示，生物過(guò)程主要涉及缺乏配體的外源性凋亡信號(hào)途徑、RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄正調(diào)控、DNA損傷的內(nèi)源性凋亡信號(hào)途徑、神經(jīng)元凋亡過(guò)程、脂多糖介導(dǎo)的信號(hào)途徑、凋亡過(guò)程負(fù)調(diào)控、宿主共生體生長(zhǎng)負(fù)調(diào)控、DNA模板轉(zhuǎn)錄、膠原分解代謝過(guò)程等；細(xì)胞組分主要涉及細(xì)胞外間隙、胞液、細(xì)胞核、質(zhì)膜外側(cè)、核常染色質(zhì)、黑素小體、膜筏、胞外基質(zhì)、線粒體外膜、核仁等；分子功能主要涉及蛋白質(zhì)異二聚活性、血紅素結(jié)合、蛋白質(zhì)均聚活性、ATP結(jié)合、生長(zhǎng)因子活性、同一蛋白結(jié)合、藥物結(jié)合、細(xì)胞因子活性、半胱氨酸型內(nèi)肽酶活性、通道活性等。

圖4 GO基因功能注釋

KEGG通路富集分析共得到102個(gè)P<0.01的條目，取P值排名前30的通路繪制氣泡圖(見(jiàn)圖5)。結(jié)果顯示，參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)主要涉及乙型肝炎、癌癥信號(hào)通路、前列腺癌、弓形蟲(chóng)病、恰加斯病/南美錐蟲(chóng)病、癌癥相關(guān)蛋白多糖信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路、低氧誘導(dǎo)因子1(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)信號(hào)通路、胰腺癌、磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/AKT信號(hào)通路、利什曼病、麻疹、小細(xì)胞肺癌、結(jié)核病、甲型流感等多條信號(hào)通路。

圖5 KEGG通路富集分析

在GO基因功能注釋和KEGG通路富集分析中，涉及到的靶基因主要包括TNF、PTGS2、STAT3、FGF1、HSP90AA1、VEGFA、IL-2、BCL2L1、基質(zhì)金屬蛋酶9、ESR1、SLC6A4、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator activated receptor,PPAR)γ、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4、NCOA2、CYP2C19、CYP2C9、MAPK1、MAPK3、AKT1、JUN、TP53、RELA、IL-6、PPARA、SRC、JAK、CASP8、EGFR等。

2.6 作用靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)分析 將參麥注射液治療COVID-19的148個(gè)作用靶點(diǎn)導(dǎo)入KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)，利用KEGG Mapper工具獲取作用靶點(diǎn)涉及的相關(guān)通路并進(jìn)行通路注釋，最終得到作用靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)，此網(wǎng)絡(luò)可更加準(zhǔn)確、直觀地反映參麥注射液治療COVID-19的分子作用機(jī)制。經(jīng)數(shù)據(jù)庫(kù)分析，得到多個(gè)靶點(diǎn)-通路相互作用關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，與病毒感染有關(guān)的通路包括人巨細(xì)胞病毒、甲型流感、麻疹、人乳頭瘤病毒感染、丙型肝炎、皰疹、小細(xì)胞肺癌、人T細(xì)胞白血病病毒1型感染、乙型肝炎、結(jié)核等。其中僅丙型肝炎涉及的靶點(diǎn)和通路中就包括了18個(gè)參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)(以紅色標(biāo)記)和相關(guān)信號(hào)通路(包括JAK-STAT、TNF、PI3K-AKT、MAPK、PPAR等信號(hào)通路)，見(jiàn)圖6。

圖6 丙肝病毒感染涉及的作用靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)

3 討 論

COVID-19屬于中醫(yī)“疫”病范疇，病因?yàn)楦惺堋耙哽濉敝畾猓∥辉诜?。重癥者多在發(fā)病1周后出現(xiàn)呼吸困難和/或低氧血癥，嚴(yán)重者可進(jìn)展為急性呼吸窘迫綜合征、膿毒癥休克、難以糾正的代謝性酸中毒、凝血功能障礙、多器官功能衰竭等[6]。參麥注射液具有益氣固脫、養(yǎng)陰生津的功效，臨床上常用于治療心力衰竭、休克、病毒性心肌炎、糖尿病等[12-14]，因此成為國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)推薦的抗疫藥物，用于危重型患者的治療。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法共篩選出參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)148個(gè)，可對(duì)應(yīng)94個(gè)活性成分?；钚猿煞种写蟛糠謱儆谌藚⒃碥铡Ⅺ湺碥蘸椭参镧薮?。其中，人參皂苷能夠解除機(jī)體免疫抑制，還具有心肌保護(hù)作用，可有效地改善心力衰竭患者的心功能[15-17]。麥冬皂苷可以提高心肌對(duì)缺氧的耐受性，并且降低心肌耗氧量，減輕缺氧對(duì)心肌的損傷[18]。豆甾醇和β-谷甾醇具有抗炎、抗氧化、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和護(hù)肝等藥理活性[19-20]。以上提示參麥注射液可能通過(guò)免疫調(diào)節(jié)和抗炎作用治療COVID-19引起的炎癥和肺損傷。

通過(guò)對(duì)參麥注射液治療COVID-19的活性成分、作用靶點(diǎn)進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)PTGS2、STAT3、FGF1、HSP90AA1、IL-2、BCL2L1等作用靶點(diǎn)的度值較高。研究顯示，PTGS2/環(huán)氧合酶-2是一種誘導(dǎo)酶，其表達(dá)與肺炎和肺損傷有關(guān)，抑制PTGS2表達(dá)可減輕炎性損傷[21-22]；FGF1具有促進(jìn)組織器官的形態(tài)發(fā)生、損傷修復(fù)、血管生成和神經(jīng)細(xì)胞再生等作用[23]；STAT3、HSP90AA1和IL-2在調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖與凋亡中發(fā)揮重要作用[24-26]；BCL2可通過(guò)控制線粒體膜通透性來(lái)調(diào)節(jié)造血細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，其過(guò)度表達(dá)會(huì)減少脂質(zhì)氧化物的生成[27]。此外，本研究PPI網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果顯示，MAPK1、MAPK3、AKT1、JUN、TP53、RELA、TNF、IL-6、JAK、CASP8、EGFR等是PPI網(wǎng)絡(luò)中的核心靶點(diǎn)。MAPK家族在氧化應(yīng)激、DNA損傷、癌癥發(fā)展和病毒感染等刺激下被激活[28]。AKT1能夠抗細(xì)胞凋亡，參與細(xì)胞凋亡和葡萄糖代謝等細(xì)胞過(guò)程[29]。JUN是核內(nèi)原癌基因c-Jun的編碼產(chǎn)物，c-Jun被各種細(xì)胞、炎癥因子激活后，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力[30]。 抑制腫瘤壞死蛋白TP53的表達(dá)可減輕肺部炎癥和上皮細(xì)胞凋亡[31]。RELA可促進(jìn)中性粒細(xì)胞由循環(huán)系統(tǒng)進(jìn)入肺組織，加重炎癥反應(yīng)?；罨闹行粤＜?xì)胞能夠分泌γ-干擾素、IL-6等炎性因子，促進(jìn)TNF-α等趨化因子的表達(dá)[32]。CASP8可抑制肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲[33]。EGFR常表達(dá)于多種細(xì)胞的細(xì)胞膜上，病毒可利用EGFR介導(dǎo)的內(nèi)吞作用或信號(hào)傳導(dǎo)進(jìn)入宿主細(xì)胞，并在細(xì)胞中復(fù)制，對(duì)抗宿主抗病毒反應(yīng)[34]。由此可見(jiàn)，參麥注射液可能通過(guò)上述靶點(diǎn)在減輕機(jī)體炎癥、促進(jìn)心肺功能和提高免疫功能等方面發(fā)揮治療作用。

GO功能富集分析顯示，參麥注射液治療COVID-19的作用靶點(diǎn)主要涉及與調(diào)控細(xì)胞凋亡和分解代謝等相關(guān)的生物過(guò)程。經(jīng)KEGG富集到的通路涉及病毒和細(xì)菌感染、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤和炎癥等方面，其中以PI3K/AKT、TNF、HIF-1等信號(hào)通路最為重要。研究表明，PI3K/AKT信號(hào)通路參與細(xì)胞炎癥反應(yīng)的調(diào)控，PI3K抑制劑對(duì)病毒性肺炎小鼠肺組織炎癥反應(yīng)具有抑制作用；許多病毒能通過(guò)該通路來(lái)促使病毒蛋白表達(dá)、復(fù)制，并抑制宿主抗病毒反應(yīng)[35-36]。TNF能直接殺傷腫瘤細(xì)胞且對(duì)正常細(xì)胞無(wú)明顯毒性，并可促進(jìn)促炎因子的表達(dá)，參與全身炎癥反應(yīng)[37]。HIF-1是一種轉(zhuǎn)錄因子，可作為氧穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)劑，HIF-1通路與病毒性肺炎的炎癥因子釋放有關(guān)[38-39]。這表明參麥注射液可能通過(guò)上述通路抑制病毒和機(jī)體的炎性反應(yīng)，從而發(fā)揮治療COVID-19的作用。由作用靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果可知，參麥注射液治療COVID-19的分子作用機(jī)制涉及多條信號(hào)通路和相關(guān)靶點(diǎn)，作用機(jī)制復(fù)雜，這恰好與中醫(yī)的整體觀念和辨證論治相符合，從側(cè)面顯示出中醫(yī)藥在COVID-19的治療中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。

綜上所述，參麥注射液的活性成分可能主要是可能通過(guò)作用于PTGS2、AKT1、JUN、TP53、RELA、EGFR等靶點(diǎn)，調(diào)控PI3K/AKT、TNF、HIF-1等信號(hào)通路來(lái)抑制新型冠狀病毒和機(jī)體的炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和機(jī)體免疫功能，從而達(dá)到治療COVID-19的目的。但網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)存在一定局限性，還需進(jìn)一步開(kāi)展實(shí)驗(yàn)研究驗(yàn)證所得結(jié)論，從而為藥物的臨床應(yīng)用提供更科學(xué)、有效的依據(jù)。