張叢叢 ，李亞 ，李素云 ，毛靜 *

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種常見的呼吸系統(tǒng)疾病，具有較高的發(fā)病率與死亡率，據(jù)統(tǒng)計(jì)，在我國40歲以上人群中COPD的患病率高達(dá)13.7%，每年大約有100萬人死于COPD［1-3］。COPD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜尚不完全清楚，主要與氣道慢性炎癥、氧化與抗氧化失衡、蛋白酶與抗蛋白酶失衡、腸道功能障礙等機(jī)制有關(guān)［4］，其中腸道功能障礙引起的黏膜屏障受損、腸胃運(yùn)動(dòng)功能受阻是導(dǎo)致COPD病情加重的重要因素［5］。分泌型免疫球蛋白A（secretory immunoglobulin A，SIgA）是一類存在于黏膜表面通過阻止病原體黏附和定植、中和病菌等發(fā)揮免疫功能的抗體［6-7］。COPD發(fā)生時(shí)，患者體內(nèi)SIgA的缺失或下降，導(dǎo)致局部黏膜屏障功能降低，細(xì)菌、毒素入侵進(jìn)一步加重屏障損傷［8-9］。P物質(zhì)（SP）、血管活性腸肽（VIP）是由肺臟和腸道分泌的活性物質(zhì)，SP表達(dá)水平升高與COPD患者氣道炎性反應(yīng)和氣道高反應(yīng)性的形成密切相關(guān)，VIP可減輕肺內(nèi)炎性反應(yīng)、擴(kuò)張支氣管改善COPD患者通氣阻力，同時(shí)兩者均可調(diào)節(jié)腸液分泌和腸道運(yùn)動(dòng)并維護(hù)黏膜屏障功能［10-11］。

李素云教授認(rèn)為“正虛積損”是COPD的主要病機(jī)，“肺脾氣虛”是COPD穩(wěn)定期的主要證型［12］，以“補(bǔ)肺健脾，培土生金”為法，擬定了補(bǔ)肺健脾方［13］。前期臨床研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)肺健脾方在改善COPD穩(wěn)定期患者肺功能、減少患者急性加重次數(shù)、改善運(yùn)動(dòng)耐力等方面具有較好的療效［14］。同時(shí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究也表明，補(bǔ)肺健脾方不僅能提高肺功能、降低炎性因子表達(dá)水平，顯著改善COPD穩(wěn)定期模型大鼠便溏、倦怠喜臥等一般情況，而且還能提高COPD大鼠骨骼肌的張力和耐力等［15-16］。補(bǔ)肺健脾方對(duì)COPD大鼠黏膜屏障的保護(hù)機(jī)制尚不清楚，有待深入研究探討?；诖耍緦?shí)驗(yàn)采用香煙煙霧暴露聯(lián)合鼻腔滴注脂多糖（LPS）的方法制作COPD穩(wěn)定期大鼠模型，觀察補(bǔ)肺健脾方對(duì)COPD大鼠肺腸組織SP、VIP和SIgA的調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 2019年9月至2020年12月選取50只SPF級(jí)8周齡SD大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量180～220 g，購于濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司，許可證號(hào)：SCXK［魯］20190003。本研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)河南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（DWLL2019020002）。

1.2 藥物 補(bǔ)肺健脾方（黃芪15 g、黃精15 g、黨參15 g、白術(shù)12 g、茯苓12 g、浙貝母9 g、地龍12 g、厚樸9 g、陳皮9 g、紫菀9 g、赤芍15 g、淫羊藿6 g）由河南中醫(yī)藥大學(xué)藥物分析實(shí)驗(yàn)室提供［17］；LPS（100 mg，美 國Sigma公 司， 批 號(hào)：028M4094V ）； 氨 茶 堿（0.1 g/片，海南制藥廠有限公司制藥一廠，國藥準(zhǔn)字H41020704）；益生菌（Probiotic IMM，60 片/瓶，Pure Encapsulations有限公司，批號(hào)：6030112A）；0.9%氯化鈉溶液（500 ml/瓶，河南竹林眾生制藥股份有限公司）；紅旗渠牌過濾嘴香煙（烤煙型，焦油量10 mg，煙氣一氧化碳含量12 mg，煙堿量1.0 mg，河南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司）。

1.3 試劑與儀器 大鼠酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑 盒：SIgA（GAWVN1VKA6）、SP（XL28IN2GJ5）、VIP（V26VVA4LFA）購于武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司；蘇木素-伊紅（HE）染色試劑盒（G1120）、BCA蛋白定量檢測(cè)試劑盒（PC0020）、羊抗兔酶標(biāo)抗體（IgG-HRP）抗體（SE134）購于北京索萊寶科技有限公司；腫瘤壞死因子（TNF）抗體（PA1079）、白介素10（IL-10）抗體（RP1014）購于武漢博士德生物工程有限公司；全波長酶標(biāo)儀（美國Thermo公司，型號(hào)：MK3）；顯微鏡及顯微照相系統(tǒng)（日本Olympus公司，型號(hào)：OLYMPUS-DP70）；獨(dú)立送風(fēng)隔離籠具（蘇州馮氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)備有限公司，型號(hào)：IVC-Ⅱ型）；離心機(jī)（中國Dlab公司，型號(hào)：D3024）；研磨儀（武漢Servicebio公司，型號(hào)：KZ-III-F）。

1.4 造模與給藥方法 采用亂數(shù)表法將50只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、補(bǔ)肺健脾組、氨茶堿組和益生菌組，每組10只。第1～8周，對(duì)照組大鼠給予鼻腔滴入0.9%氯化鈉溶液（0.2 ml/次，2 次/周），剩余4組大鼠給予香煙煙霧暴露〔30 min/次，2 次/d，6 次/周，煙霧濃度（3 000±500）ppm〕聯(lián)合鼻腔滴LPS（1 mg/kg，2 次/周）［18］。第8周造模結(jié)束時(shí)隨機(jī)選取2只大鼠觀察肺組織病理，大鼠氣管腔變窄，肺泡結(jié)構(gòu)斷裂，部分融合成肺大泡，支氣管壁出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤，表明造模成功。

從第9周起，補(bǔ)肺健脾組大鼠給予補(bǔ)肺健脾方（12.42 g·kg-1·d-1）灌胃，氨茶堿組大鼠給予氨茶堿（0.027 g·kg-1·d-1）灌胃，益生菌組大鼠給予益生菌（0.9×1010CFU·kg-1·d-1）灌胃，對(duì)照組和模型組大鼠給予0.9%氯化鈉溶液（2 ml/d）灌胃，2 次/d，間隔3 h，持續(xù)4周。藥量計(jì)算采用等效劑量系數(shù)折算法換算，公式為D大鼠=D人（HI大鼠/HI人）×（W人/W大鼠）2/3。注：D為劑量，HI為體型系數(shù)，W為體質(zhì)量。

1.5 取材與指標(biāo)檢測(cè) 因個(gè)別大鼠在造模期間死亡，加上造模結(jié)束前需取材驗(yàn)證模型，最后每組剩余6～10只大鼠不等，所以各組大鼠統(tǒng)一取6只進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。

1.5.1 肺、結(jié)腸組織病理變化 取灌注10%中性甲醛溶液（約10 ml）的左肺和結(jié)腸組織分別置于裝有10%中性甲醛溶液的50 ml固定管中，固定72 h后更換甲醛溶液，再次固定，石蠟包埋，HE染色，光鏡下觀察病理變化。

1.5.2 肺組織TNF-α、IL-10表達(dá)水平 免疫組化法檢測(cè)炎性因子TNF-α和IL-10表達(dá)水平，每組選6張切片，置于200倍視野下，在不同區(qū)域采集6張圖像，使用Image-Pro Plus 6.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，陽性結(jié)果以積分光密度（IOD）的平均值表示。

1.5.3 支氣管肺泡灌洗液（BALF）SIgA表達(dá)水平 用4 ℃預(yù)冷的無菌PBS灌注左肺，3 ml/次，共3次，沖洗肺腔，獲得BALF。每組取6支BALF樣本分別測(cè)定蛋白、SIgA表達(dá)水平。

1.5.4 肺、結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平 用4 ℃預(yù)冷的無菌PBS沖洗右肺和結(jié)腸，濾紙吸水，每組分別稱取6個(gè)組織樣本（右肺和結(jié)腸組織）約100 mg，以1∶9的體積比加入PBS進(jìn)行研磨，8 000 r/min離心6 min，取上清液。BCA試劑盒檢測(cè)蛋白含量，ELISA試劑盒檢測(cè)SP、VIP表達(dá)水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用GraphPad Prism 7.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺、結(jié)腸組織病理變化 對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)基本完整；模型組大鼠氣管周圍存在大量炎性細(xì)胞，支氣管管壁增厚，管腔向內(nèi)皺縮，氣管變窄；藥物干預(yù)后各治療組肺部病理有不同程度的改善，包括炎性細(xì)胞浸潤、肺泡斷裂融合減少及氣道皺縮減輕，其中補(bǔ)肺健脾組改善效果最為顯著，見圖1。對(duì)照組大鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)基本完整；模型組大鼠結(jié)腸組織出現(xiàn)損傷表現(xiàn)為大量上皮細(xì)胞脫落，隱窩形態(tài)大小不一，甚至消失；各組治療后，腸上皮細(xì)胞排列和隱窩結(jié)構(gòu)恢復(fù)正常，黏膜得到修復(fù)，其中補(bǔ)肺健脾組和益生菌組改善效果良好，見圖2。

圖1 各組大鼠肺組織病理變化（HE染色，×200）Figure 1 Pathological status in lung tissue of rats in five groups

圖2 各組大鼠結(jié)腸組織病理變化（HE染色，×200）Figure 2 Pathological status in colon tissue of rats in five groups

2.2 肺組織TNF-α、IL-10表達(dá)水平 免疫組化結(jié)果顯示，TNF-α、IL-10陽性表達(dá)呈棕色或棕黃色，主要表達(dá)位置為支氣管細(xì)胞壁的細(xì)胞質(zhì)中，另外IL-10在肺泡細(xì)胞胞質(zhì)、小血管內(nèi)皮和周圍炎性細(xì)胞中也有大量表達(dá)，見圖3。

圖3 各組大鼠肺組織TNF-α、IL-10表達(dá)（免疫組化，×200）Figure 3 Expression of TNF-α and IL-10 in lung tissue of rats in five groups

五組大鼠肺組織TNF-α、IL-10表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果顯示，模型組肺組織TNF-α表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=20.390，P＜0.05）；各治療組肺組織TNF-α表達(dá)水平低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q補(bǔ)肺健脾組=20.130，q氨茶堿組=16.930，q益生菌組=14.340，P＜0.05）；補(bǔ)肺健脾組大鼠肺組織TNF-α表達(dá)水平低于益生菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=5.793，P＜0.05）。模型組大鼠肺組織IL-10表達(dá)水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=6.636，P＜0.05）；各治療組肺組織IL-10表達(dá)水平較模型組均有所增加，其中補(bǔ)肺健脾組肺組織IL-10表達(dá)水平高于模型組和益生菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q模型組=6.477，q益生菌組=4.634，P＜0.05），見表 1。

表1 各組大鼠肺組織TNF-α、IL-10表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Expression levels of TNF-α and IL-10 in lung tissue of rats in five groups

表1 各組大鼠肺組織TNF-α、IL-10表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Expression levels of TNF-α and IL-10 in lung tissue of rats in five groups

注：TNF-α=腫瘤壞死因子α，IL-10=白介素10；a表示與對(duì)照組比較P＜0.05，b表示與模型組比較P＜0.05，c表示與補(bǔ)肺健脾組比較P＜0.05

組別 只數(shù) TNF-α IL-10對(duì)照組 6 7.39±2.43 71.60±18.61模型組 6 47.09±8.22a 34.78±11.90a補(bǔ)肺健脾組 6 7.90±2.38b 70.72±6.07b氨茶堿組 6 14.14±3.09b 58.98±18.12b益生菌組 6 19.17±4.98abc 45.01±8.38ac F值 70.640 8.444 P 值 ＜0.001 ＜0.001

2.3 BALF中SIgA表達(dá)水平 五組大鼠BALF中SIgA表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型組及各治療組大鼠BALF中SIgA表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；補(bǔ)肺健脾組大鼠BALF中SIgA表達(dá)水平高于模型組和氨茶堿組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q模型組=4.471，q氨茶堿組=4.352，P＜0.05），見表2。

表2 各組大鼠BALF中SIgA表達(dá)水平比較（±s，ng/mg）Table 2 Expression levels of SIgA in BALF of rats in five groups

表2 各組大鼠BALF中SIgA表達(dá)水平比較（±s，ng/mg）Table 2 Expression levels of SIgA in BALF of rats in five groups

注：SIgA=分泌型免疫球蛋白A，BALF=支氣管肺泡灌洗液；a表示與對(duì)照組比較P＜0.05，b表示與模型組比較P＜0.05，c表示與補(bǔ)肺健脾組比較P＜0.05

組別 只數(shù) SIgA對(duì)照組 6 29.00±11.68模型組 6 1.32±0.88a補(bǔ)肺健脾組 6 11.34±3.16ab氨茶堿組 6 1.59±0.99ac益生菌組 6 5.36±1.60a F值 26.370 P值 ＜0.001

2.4 肺、結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平

2.4.1 肺組織SP、VIP表達(dá)水平 五組大鼠肺組織SP、VIP表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型組大鼠肺組織SP表達(dá)水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=24.030，P＜0.05）；補(bǔ)肺健脾組和益生菌組大鼠肺組織SP表達(dá)水平均低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q補(bǔ)肺健脾組=19.100，q益生菌組=11.340，P＜0.05）；補(bǔ)肺健脾組大鼠肺組織SP表達(dá)水平低于氨茶堿組和益生菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q氨茶堿組=16.970，q益生菌組=7.763，P＜0.05）。模型組大鼠肺組織VIP表達(dá)水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=5.522，P＜0.05）；補(bǔ)肺健脾組大鼠肺組織VIP表達(dá)水平高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=4.583，P＜0.05），見表3。

表3 各組大鼠肺組織SP、VIP表達(dá)水平比較（±s，pg/mg）Table 3 Expression levels of SP and VIP in lung tissue of rats in five groups

表3 各組大鼠肺組織SP、VIP表達(dá)水平比較（±s，pg/mg）Table 3 Expression levels of SP and VIP in lung tissue of rats in five groups

注：SP=P物質(zhì)，VIP=血管活性腸肽；a表示與對(duì)照組比較P＜0.05，b表示與模型組比較P＜0.05，c表示與補(bǔ)肺健脾組比較P＜0.05，d表示與氨茶堿組比較P＜0.05

組別 只數(shù) SP VIP對(duì)照組 6 1 361.69±45.07 209.81±47.06模型組 6 1 889.38±58.76a 101.81±63.92a補(bǔ)肺健脾組 6 1 469.96±46.74ab 191.44±40.75b氨茶堿組 6 1 842.52±52.37ac 172.20±39.61益生菌組 6 1 640.42±63.66abcd 145.26±44.11 F值 108.700 4.665 P值 ＜0.001 0.006

2.4.2 結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平 五組大鼠結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；模型組大鼠結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（qSP=26.260，qVIP=9.420，P＜0.05）。各治療組大鼠結(jié)腸組織SP表達(dá)水平均低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q補(bǔ)肺健脾組=12.340，q氨茶堿組=4.582，q益生菌組=24.470，P＜0.05）；補(bǔ)肺健脾組大鼠結(jié)腸組織SP表達(dá)水平低于氨茶堿組而高于益生菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q氨茶堿組=7.758，q益生菌組=12.130，P＜0.05）。各治療組大鼠結(jié)腸組織VIP表達(dá)水平均低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q補(bǔ)肺健脾組=6.456，q氨茶堿組=8.279，q益生菌組=4.154，P＜0.05），見表 4。

表4 各組大鼠結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平比較（±s，pg/mg）Table 4 Expression levels of SP and VIP in colon tissue of rats in five groups

表4 各組大鼠結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平比較（±s，pg/mg）Table 4 Expression levels of SP and VIP in colon tissue of rats in five groups

注：a表示與對(duì)照組比較P＜0.05，b表示與模型組比較P＜0.05，c表示與補(bǔ)肺健脾組比較P＜0.05，d表示與氨茶堿組比較P＜0.05

組別 只數(shù) SP VIP對(duì)照組 6 4 786.02±303.29 1.42±0.27模型組 6 8 180.00±360.98a 3.16±0.46a補(bǔ)肺健脾組 6 6 585.30±168.88ab 1.96±0.46b氨茶堿組 6 7 587.84±422.13abc 1.63±0.20b益生菌組 6 5 018.25±268.37bcd 2.38±0.66ab F值 136.600 13.980 P值 ＜0.001 ＜0.001

3 討論

目前認(rèn)為，慢性氣道炎癥引起的肺結(jié)構(gòu)性改變、小氣道狹窄和肺實(shí)質(zhì)破壞等是COPD的主要病理特征［19］。本次病理切片結(jié)果顯示，模型組大鼠支氣管管壁異常增厚并向氣管腔內(nèi)皺縮，導(dǎo)致管腔變狹窄，偶見支氣管黏膜上皮細(xì)胞脫落及肺泡腔內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤。《素問·咳論》中提到“肺咳不已，則大腸受之；大腸咳狀，咳而遺矢”，肺部久病必然會(huì)導(dǎo)致大腸的傳導(dǎo)功能失常。本實(shí)驗(yàn)顯示，模型組大鼠結(jié)腸出現(xiàn)病變，表現(xiàn)為大量上皮細(xì)胞脫落，杯狀細(xì)胞數(shù)量減少，隱窩形態(tài)大小不一，以及黏膜下層出現(xiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤，導(dǎo)致腸黏膜屏障損傷，以上結(jié)果符合中醫(yī)理論。

人體呼吸道和胃腸消化道具有相似的黏膜結(jié)構(gòu)，兩者共同組成黏膜免疫系統(tǒng)（MIS）作為人體抵御外界病原微生物入侵的第一道屏障。呼吸道感染時(shí)，病原微生物入侵并黏附于上皮，刺激黏膜局部產(chǎn)生免疫應(yīng)答，并通過黏膜免疫歸巢遷移的途徑影響傳變到腸道，使肺和腸道SIgA的合成與分泌減少，黏膜局部抗感染能力減弱進(jìn)一步增加肺部病變［8］。研究顯示，COPD患者體內(nèi)炎性因子水平升高，SIgA表達(dá)水平降低，肺功能下降［20］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組大鼠BALF中SIgA水平顯著低于對(duì)照組，補(bǔ)肺健脾方組SIgA表達(dá)水平較模型組升高，提示補(bǔ)肺健脾方能通過增加SIgA表達(dá)水平，增強(qiáng)局部黏膜免疫治療COPD。

SP、VIP是常見的內(nèi)源性活性肽，SP的作用體現(xiàn)在與速激肽1型受體（NK1R）結(jié)合，激活核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）通路，促進(jìn)促炎因子如IL-1、IL-6、TNF-α、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β（MIP-1β）1β和干擾素γ（IFN-γ）等的產(chǎn)生，以及舒張血管引起血管通透性增加，導(dǎo)致包括肺臟在內(nèi)的各組織中淋巴細(xì)胞浸潤［21］。VIP可以通過減少NF-κB轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子的結(jié)合從而抑制TNF-α、IL-12和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）的表達(dá)，減輕炎性反應(yīng)，還可以通過與環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）因子的結(jié)合來增加IL-10的表達(dá)，并能誘導(dǎo)產(chǎn)生調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞，抑制巨噬細(xì)胞的促炎作用［10，22］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，COPD模型組肺組織SP、TNF-α表達(dá)水平均高于對(duì)照組，COPD模型組肺組織VIP、IL-10表達(dá)水平均低于對(duì)照組。藥物治療可以降低肺組織SP、TNF-α表達(dá)水平，增加肺組織VIP、IL-10表達(dá)水平，其中補(bǔ)肺健脾方在降低SP表達(dá)水平方面的作用優(yōu)于其他治療組。

由于COPD證型表現(xiàn)為肺氣虛，根據(jù)“脾為肺之母”和“子盜母氣”的理論，肺虛日久傷脾，脾氣虛弱，表現(xiàn)為大便溏稀、腹脹腹痛等胃腸道癥狀，進(jìn)而導(dǎo)致腸絨毛萎縮、上皮細(xì)胞脫落，腸黏膜屏障損傷［23-24］。模型組大鼠結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平較對(duì)照組顯著升高，藥物組干預(yù)后，結(jié)腸組織SP、VIP表達(dá)水平下降。SP作為一種腸道興奮性活性肽，可以直接作用大腸縱行肌與環(huán)行肌并引起收縮，刺激腸胃運(yùn)動(dòng)［25］，而VIP在結(jié)腸組織與肺組織中表達(dá)趨勢(shì)不同，可能由于VIP不僅參與調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)，還參與激活cAMP/PKA信號(hào)通路，進(jìn)而降低平滑肌內(nèi)Ca2+濃度，抑制小腸運(yùn)動(dòng)，增加水分和電解質(zhì)的分泌，最終出現(xiàn)腹瀉、便溏等癥狀［26］；SP與VIP共同作用引起腹脹、腹瀉，導(dǎo)致腸黏膜損傷，使內(nèi)毒素、致病菌等經(jīng)腸淋巴系統(tǒng)進(jìn)入全身血液循環(huán)而加重COPD。

綜上所述，補(bǔ)肺健脾方能夠顯著降低COPD大鼠肺組織內(nèi)炎性因子表達(dá)水平，改善肺腸組織病理損傷，修復(fù)黏膜屏障，與增加SIgA表達(dá)水平、增強(qiáng)局部黏膜免疫功能和調(diào)節(jié)肺腸活性肽表達(dá)水平有關(guān)。本研究僅檢測(cè)了COPD大鼠BALF中SIgA與肺腸活性肽表達(dá)水平的變化，發(fā)現(xiàn)VIP在大鼠肺和結(jié)腸組織的表達(dá)水平呈現(xiàn)相反的變化，分析可能與多種活性肽存在相互拮抗有關(guān)，且VIP的分泌受多重機(jī)制調(diào)控，下一步將對(duì)具體調(diào)控機(jī)制進(jìn)行深入探究。

作者貢獻(xiàn)：張叢叢進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作、數(shù)據(jù)整理和論文撰寫；李亞、李素云提出研究思路；毛靜制定總體研究目標(biāo)，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案并對(duì)文章質(zhì)量進(jìn)行控制，對(duì)文章整體負(fù)責(zé)。

本文無利益沖突。