趙 瑩，歐陽雅帆，楊曉燕，林澤耿

（1.廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院檢驗科，廣州 511480；2.深圳市中山大學(xué)附屬第七醫(yī)院神經(jīng)醫(yī)學(xué)中心，廣東深圳 518107）

隨著改革開放，尤其是近幾十年以來，人們的生活質(zhì)量顯著提高，隨著生活方式發(fā)生的巨大改變，某些疾病的發(fā)生率呈增高趨勢，如：中國人群的血脂水平逐步升高，血脂異常的患病率明顯增加[1-3]。調(diào)查顯示，中國成人血脂異?？傮w患病率持續(xù)增高，血脂異常患病及相關(guān)疾病負(fù)擔(dān)將繼續(xù)加重[4]。另據(jù)報道，全球約有10 %的夫婦患有不孕不育，其中因男性因素導(dǎo)致的約占50%，男性精液質(zhì)量呈明顯下降趨勢。動物實驗證實，通過給予小鼠高脂飲食建立小鼠高血脂癥模型，小鼠的精液質(zhì)量下降，表現(xiàn)為精子計數(shù)及活力的降低、精子畸形率的升高。同樣，對高脂飲食的男性人群進(jìn)行精液質(zhì)量檢測，亦得到相近結(jié)論[5-6]。目前，對于血清高血脂水平與精液參數(shù)之間的相關(guān)性的研究較少，本文擬探討高脂血癥男性患者血清總膽固醇(total cholesterol ,TC)，三酰甘油( triglyceride , TG )及高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)水平與其精液質(zhì)量參數(shù)之間的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2019年9月～2020年10月廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院男性科就診的126 例成年男性，年齡19 ～56（3.37±1.37）歲。根據(jù)血清血脂水平，將其分為高脂血癥組86 例（高脂血癥組），年齡23 ～ 56（33.84±6.80）歲；和血脂正常者40例（對照組），年齡19 ～ 49（31.48 ± 5.88）歲。高脂血癥組患者禁欲時間2～7天，平均4.60 ± 1.65天；對照組人群禁欲時間2 ～7 天，平均4.33 ± 1.67天。兩組年齡、禁欲時間比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(t= -1.656, -0.937, 均P＞ 0.05 )。所有受試者對本次研究的方法、目的知情同意。

納入標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)《中國成人血脂異常防治指南》[3]的血脂紊亂診斷標(biāo)準(zhǔn)，符合以下任何一項即可診斷為高脂血癥：①高膽固醇血癥：TC ≥5.2 mmol/L；②高三酰甘油血癥：TG ≥1.7 mmol/L；③混合型高脂血癥：TC ≥5.2mmol/L 且TG ≥1.7mmol/L；④低高密度脂蛋白膽固醇血癥：HDL-C＜1.0 mmol/L。健康對照組人群血脂正常，其他實驗室指標(biāo)均正常。

排除標(biāo)準(zhǔn): ①因勃起功能、射精障礙等無法獲取精液標(biāo)本者；②具有不良嗜好者(如吸煙、酗酒)；③從事特定執(zhí)業(yè)者(如高溫作業(yè)、長期久坐等)；④罹患某些疾病患者(如索靜脈曲張、泌尿生殖道感染、生殖道畸形或患有其他全身性疾病等)。對于健康對照組，篩選血脂及其他實驗室指標(biāo)均正常者。排除心、腦血管疾病、糖尿病等慢性病患者；器官功能障礙者；腫瘤等免疫力低下者等。

1.2 儀器與試劑 精液常規(guī)分析采用西班牙SCA-H-01 計算機輔助精液分析系統(tǒng)，精子形態(tài)分析采用Diff-Quick 快染法，以上均購自廣州友寧有限公司。血清TC, TG 及HDL-C 水平檢測采用全自動生化分析儀 (美國貝克曼庫爾特公司)，試劑盒購自貝克曼庫爾特實驗系統(tǒng) (蘇州) 有限公司。

1.3 方法

1.3.1 精液質(zhì)量分析：參照世界衛(wèi)生組織 ( WHO ) 制定的《人類精液檢查與處理實驗室手冊》2010年第5 版[8]要求，囑所有受試者按要求禁欲2 ～7 天，標(biāo)本采集當(dāng)天，于取精房內(nèi)通過手淫法將全部精液采集于一次性專用無菌廣口塑料杯中并立刻送檢，標(biāo)本接收后置于37℃ 恒溫水浴箱中。待精液液化后，檢測精子濃度、總數(shù)、前向運動百分率、精子總活力。取一定量精液(5 ～10 μl)拉薄技術(shù)推片、干燥、染色后，油鏡下計數(shù)至少200 條精子，計數(shù)正常形態(tài)精子百分率 (參考值范圍 ≥ 4% )。

1.3.2 血清血脂檢測：夜間禁食后，次日清晨采集受試者外周靜脈血，3 000 r/min 離心10 min，檢測血清TG , TC 及HDL-C 水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，非正態(tài)分布以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M(P25, P75)]表示；兩組間比較采用Students’t檢驗(正態(tài)分布)及Mann-WhitneyU檢驗(非正態(tài)分布)；采用Pearson (正態(tài)分布)、Spearman (非正態(tài)分布)進(jìn)行相關(guān)性分析。P＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組精液質(zhì)量比較 見表1。所有精液標(biāo)本液化時間正常，顏色為灰白或淡黃色，黏稠度正常。兩組間精液pH 值、精液體積、正常形態(tài)精子百分率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞ 0.05)。與正常對照組相比，高脂血癥組精子濃度、精子總數(shù)、前向運動精子百分率及精子總活力均降低 ，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P＜ 0.05 )。

表1 各組精液質(zhì)量比較[（±s），M(P25, P75)]

表1 各組精液質(zhì)量比較[（±s），M(P25, P75)]

項 目高脂血癥組( n = 86 )正常對照組( n = 40 )t/Z 值P 值pH 值7.30 ± 0.23 7.28 ± 0.16-0.2750.783精液量 (ml)3.37 ± 1.373.65 ± 1.301.0650.290精子濃度(×106/ml)54.2(25.10, 88.85)63.9(49.25, 114.20)-3.4040.001精子總數(shù)(×106/ml)167.31(81.51, 256.99)258.24(209.19, 349.99)-4.2710.000 PR ( % )31.29 ± 16.3736.39 ± 9.432.2060.029 PR+NP ( % )39.22 ± 16.6944.31±10.072.1150.037正常形態(tài)精子百分率( % )6.66 ± 4.127.34 ± 4.440.8150.418

2.2 各組血脂水平比較 與對照組相比，高脂血癥組患者血清TC 水平 (5.83±1.04 mmol/L vs 4.41 ±0.60mmol/L), TG 水平 (2.59 ± 0.58 mmol/L vs 1.05± 0.18 mmol/L) 和 HDL-C 水平(0.96±0.11mmol/L vs 1.37 ± 0.22 mmol/L), 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.015，7.123， 19.845, 均P＜0.01 )。

2.3 精液質(zhì)量與血清TG, TC 及HDL-C 水平相關(guān)性分析 見表2。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，精子濃度、精子總數(shù)與血清TG, TC 水平呈負(fù)相關(guān)，與血清HDL-C 水平呈正相關(guān)(均P＜0.05 )；前向運動精子百分率及精子總活力與血清HDL-C 水平呈正相關(guān)(均P＜0.05 )。

表2 精液質(zhì)量與血清TG, TC 及HDL-C 水平的相關(guān)性分析

3 討論

高脂血癥是指由多種原因引起的脂質(zhì)代謝紊亂，臨床上分為高膽固醇血癥、高三酰甘油血癥、混合型高脂血癥和低高密度脂蛋白膽固醇血癥四型。近年來，隨著經(jīng)濟的發(fā)展、居民生活水平的提高、飲食習(xí)慣的改變及食物中脂肪含量的增加，中國人群的血脂水平逐步升高、血脂異?？傮w患病率大幅上升。生活方式的改變、飲食結(jié)構(gòu)的調(diào)整同樣影響著男性生育力[9-10]。男性因素導(dǎo)致的不孕不育呈高發(fā)趨勢，精液質(zhì)量作為男性生育力評價指標(biāo)，其下降是導(dǎo)致男性不育的重要原因。不良的飲食習(xí)慣會導(dǎo)致血脂異常的發(fā)生，血脂異常可引起男性精液質(zhì)量下降，進(jìn)而影響男性生育力。

本研究針對血脂異常和男性精液質(zhì)量之間相關(guān)性進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)高脂血癥患者其精子濃度、精子總數(shù)、前向運動精子百分率（PR）及精子總活力均低于血脂正常人群。相關(guān)性分析顯示，精子濃度、精子總數(shù)、PR，精子總活力與血清TG , TC 水平呈負(fù)相關(guān)，與血清HDL-C 水平呈正相關(guān)，進(jìn)一步證實血脂異常導(dǎo)致男性精液質(zhì)量下降，影響男性生育力。

血脂異常導(dǎo)致精液質(zhì)量下降的機制是多方面的。動物實驗表明，高脂血癥可明顯降低大鼠睪丸重量、精子密度、精子存活率等。血清高膽固醇模型兔子的生精功能亦受到明顯影響，表現(xiàn)為精子活力、數(shù)量及正常形態(tài)率的降低[11-12]。血脂異常對精液質(zhì)量的影響，其中一個機制與下丘腦-垂體-性腺軸的激素異常有關(guān)。正常情況下丘腦分泌促性腺激素釋放激素（gonadotropin-releasing hormone,GnRH），刺激垂體產(chǎn)生黃體生成素( LH )和卵泡刺激素(FSH ), 兩者在保持睪丸功能、刺激睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌睪酮上發(fā)揮重要作用，而高脂血癥通過改變下丘腦-垂體-性腺軸的組織結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致雄激素產(chǎn)生減少、睪丸和附睪萎縮、引起睪丸生精功能、內(nèi)分泌功能、性功能下降[13]。男性基礎(chǔ)性激素分泌水平的改變對精液質(zhì)量的影響不僅表現(xiàn)在精子濃度、總數(shù)的減少，亦會導(dǎo)致精子活率、總活力的降低，這是由于在一定范圍內(nèi)，隨著激素濃度的增加，能夠促進(jìn)精子的發(fā)育和成熟，減少精子細(xì)胞的凋亡[14]。故高脂血癥導(dǎo)致睪丸支持細(xì)胞和睪丸間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)分泌功能缺陷，引起性激素分泌紊亂，最終影響生精功能和附睪精子成熟功能，附睪功能缺陷又進(jìn)一步導(dǎo)致精子運動性下降。

另外，作為精子膜的重要成分之一的膽固醇，其在精子成熟和獲能過程中發(fā)揮重要作用。精子膽固醇含量增高導(dǎo)致的精子膽固醇構(gòu)成變化可能會導(dǎo)致精子異常形態(tài)率增高、精子活力降低以及過早發(fā)生頂體反應(yīng)等，血脂代謝的紊亂亦可能影響附睪的精子成熟，以上均最終影響男性生育[15-17]。

另一個可能的機制與機體的氧化應(yīng)激狀態(tài)以及活性氧的產(chǎn)生相關(guān)。機體在正常情況下，氧化因子和抗氧化因子處于動態(tài)平衡，高脂血癥可破壞內(nèi)皮功能導(dǎo)致動態(tài)失衡，抗氧化防御機制受損，大量的活性氧( reactive oxygen substance, ROS)產(chǎn)生，而精子對氧化應(yīng)激具有易感性，過度的氧化反應(yīng)一方面通過影響電子傳輸和ATP 合成的解偶聯(lián)作用，影響線粒體的呼吸作用，損傷精子線粒體正常功能，導(dǎo)致精子活力下降。另一方面高水平ROS 導(dǎo)致精子膜脂質(zhì)過氧化，影響精子運動性和膜功能障礙。且過多產(chǎn)生的ROS 可攻擊、破壞生物分子，改變DNA 的遺傳特性，破壞精子DNA 的完整性，不僅造成精子畸形率上升，還可加速細(xì)胞凋亡的進(jìn)程。同時，ROS 作用于生精細(xì)胞，影響睪丸的生精能力，進(jìn)一步減少精子數(shù)目[5,16]。所以血脂異常通過氧化應(yīng)激產(chǎn)生過量的ROS，ROS 促進(jìn)生精細(xì)胞凋亡、增加精子DNA 損傷、損傷細(xì)胞的抗氧化機制等，最終導(dǎo)致精子數(shù)目減少、精子活力降低、精子畸形率升高。

其他一些可能的因素包括：高脂食物攝入過多，致機體內(nèi)脂肪代謝紊亂，精液中脂肪含量增加使得精液黏稠度增高，引起精子活動力下降[6]。另外，高脂血癥與炎癥通路的激活有關(guān)。體內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂、低睪酮水平均可導(dǎo)致精漿免疫微環(huán)境改變，引起的慢性低度炎癥反應(yīng)，如精漿TNF-α，IL-6 分泌增多，炎癥因子一方面可直接損害生精上皮細(xì)胞，引起生精微環(huán)境紊亂，另一方面可通過改變附睪內(nèi)環(huán)境，影響附睪上皮功能，最終導(dǎo)致精子成熟和受精能力障礙[18-19]。

綜上所述，機體的高血脂狀態(tài)可通過引起生殖激素分泌的改變、增強機體的氧化應(yīng)激狀態(tài)而過度分泌ROS，誘導(dǎo)慢性炎癥等引起睪丸、附睪功能障礙及免疫微環(huán)境改變，最終導(dǎo)致精液質(zhì)量下降。男性長期高脂肪攝入不僅引發(fā)血脂異常，亦會增加男性不育的發(fā)生風(fēng)險，因此，控制血脂水平對男性，尤其是育齡期男性生殖健康尤為重要。