朱閆陳，陳奕業(yè)，田漢晨，吳龍飛，黃依琳，孫寶麗

(華南農(nóng)業(yè)大學 動物科學學院，廣東 廣州 510642)

隨著集約化養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，優(yōu)質蛋白質飼料的缺乏已經(jīng)成為限制我國養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展的因素之一。構樹()屬于桑科構樹屬落葉喬木，具有蛋白質含量高，營養(yǎng)豐富，適應力強、生長快和年產(chǎn)量高等諸多優(yōu)點，近年來得到了學術界與媒體的廣泛關注。構樹中粗蛋白含量高達20%～30%，必需氨基酸含量優(yōu)于常見木本植物，各氨基酸組分與含量分配較合理。屠焰等測定了雜交構樹葉的常規(guī)營養(yǎng)成分、微量元素、氨基酸等，研究表明雜交構樹中鈣元素、鐵元素、錳元素以及鋅元素均高于苜蓿草粉和豆粕等常規(guī)日糧，而日糧中的礦物質元素具有影響動物的生產(chǎn)性能，調(diào)節(jié)機體代謝和參與體內(nèi)的酶促反應等重要生理功能。構樹中含有豐富的具有抗氧化功能的物質，如黃酮類物質、木脂素化合物和酚類物質等。此外構樹中所含有的黃酮類物質和生物堿對腫瘤細胞具有抑制作用。構樹中含有的多種抑菌成分可以有效抑制細菌與真菌的活性，且對人體毒性小，可用于抗菌藥的開發(fā)利用。研究發(fā)現(xiàn)，構樹葉中含有木質素、單寧等多種抗營養(yǎng)因子，會影響畜禽對營養(yǎng)物質的吸收。但是通過青貯處理后能大幅降低其中單寧含量，改善飼料的適口性，提高飼料的營養(yǎng)價值。

實際生產(chǎn)中，已經(jīng)有在日糧中添加經(jīng)過不同工藝處理的構樹飼料的行為。但是現(xiàn)階段關于構樹飼料的安全性和適宜的添加比例等方面的研究仍比較欠缺。本試驗以昆明(KM)小鼠為試驗動物，研究日糧中添加不同比例構樹葉粉對小鼠生長性能、臟器指數(shù)以及血清生化指標的影響，旨在為構樹作為新型飼料原料用于畜禽生產(chǎn)實踐中的安全性提供理論和實踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用構樹新鮮樹葉采摘自華南農(nóng)業(yè)大學構樹種植基地，去除主桿和發(fā)黃葉片，保留葉片前段20～30 cm處嫩枝和樹葉，于40 ℃烘箱內(nèi)烘干并粉碎。于華南農(nóng)業(yè)大學動物實驗中心購買24只體重(18～20 g)一致的健康4周齡KM公鼠作為試驗動物。

1.2 試驗動物分組與管理

將24只遺傳背景相同的健康KM公鼠隨機分為4個組，每組6只。在小鼠的基礎日糧中分別添加0%(對照組：T0)、15%(T15)、25%(T25)、35%(T35)的構樹葉粉日糧營養(yǎng)成分見表1。試驗預飼期7 d，正式試驗期28 d，提供自由采食與飲水。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平(干物質基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (DM basis) %

1.3 樣品采集與指標測定

1.3.1 生長性能指標 預飼期結束后，分別在正式試驗期的第1，7，14，21，28天的09: 00對小鼠進行稱重，記錄數(shù)據(jù)并計算平均日增重。

1.3.2 臟器指數(shù) 試驗結束后，采用頸椎脫臼法處死小鼠，取下心臟、肝臟、腎臟、脾臟，肺臟并用PBS緩沖液將各器官沖洗干凈并用吸水紙擦干，稱量各臟器重量，按照下列公式計算臟器指數(shù)：

1.3.3 血清生化指標 正式試驗結束后，將KM小鼠禁食12 h，采集小鼠一側眼球的血液。分離血清樣品于微量離心管(EP管)后，于-20 ℃冷凍保存。采用全自動生化分析儀測定KM小鼠血清中的谷草轉氨酶(AST)、谷丙轉氨酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素(Urea)、總膽固醇(TC)、球蛋白(GLB)、總三碘甲狀腺原氨酸(T3)、總甲狀腺激素(T4)、白球比(A/G)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)用Excel軟件進行初步整理，使用SAS 9.4軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，用Tukey方法進行多重比較，<0.05 表示差異顯著，<0.01 表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 不同比例構樹葉粉對KM小鼠生長性能的影響

由表2可知，T15組和T25組小鼠平均日增重與T0組差異不顯著(>0.05)，T35組的KM小鼠平均日增重顯著低于T0組(<0.05)。

表2 日糧中添加不同比例構樹葉粉對KM小鼠生長性能的影響Table 2 Effects of different proportion of BPL powder on growth performance of KM mice

2.2 不同比例構樹葉粉對KM小鼠臟器指數(shù)的影響

由表3可知，T15組小鼠的肝臟、脾臟指數(shù)顯著高于T0組(<0.05)；T25組小鼠的肺臟指數(shù)顯著低于對照組T0(<0.05)；T35組小鼠的肝臟指數(shù)極顯著低于其余三組(<0.01)，心臟指數(shù)顯著低于T0組與T25 組(<0.05)。

表3 日糧中添加不同比例構樹葉粉對KM小鼠臟器指數(shù)的影響Table 3 Effects of different proportion of BPL powder on organ index of KM mice

2.3 不同比例構樹葉粉對KM小鼠血清生化指標的影響

由表4可知，與對照組T0相比，試驗組小鼠LDH含量均有提高，T15組以及T35組KM小鼠的LDH含量達到極顯著水平(<0.01)，T25組達到顯著水平(<0.05)；試驗組TC含量均低于T0組，其中T25組和T35組達到顯著水平(<0.05)；T25組的KM小鼠ALT顯著低于T0組(<0.05)；相比與T0組，T35組小鼠TP、ALB和Urea含量均顯著提高(<0.05)。

表4 日糧中添加不同比例構樹葉粉對KM小鼠血清生化指標的影響Table 4 Effects of different proportion of BPL powder on serum biochemical indexes of KM mice

3 討 論

3.1 構樹葉粉對KM小鼠生長性能的影響

本試驗中T35組小鼠的平均日增重顯著低于T0組(<0.05)，T15組與T25組與T0組差異不顯著。可能是由于構樹的粗纖維含量較高，在日糧中添加較多構樹葉粉會影響日糧的適口性，同時導致日糧能量水平較低，無法滿足小鼠的能量需求，造成小鼠增重減慢，這與吳健平等和何國英研究結果一致。同時未經(jīng)過處理的構樹葉粉中含有較多的抗營養(yǎng)因子，會阻礙小鼠對日糧中其他營養(yǎng)物質的吸收，不利于小鼠生長。綜上所述，建議在小鼠日糧中構樹的添加量不超過25%。

3.2 構樹葉粉對KM小鼠臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)指的是器官的重量占體重的百分比，可以在一定程度上反映器官的發(fā)育和健康情況。臟器指數(shù)在正常范圍內(nèi)的提高表示體內(nèi)器官功能增強，對機體有益。本試驗結果顯示構樹葉粉對KM小鼠的臟器有不同程度的影響。脾臟是機體重要的免疫器官，對小鼠的免疫系統(tǒng)具有重要影響，肝臟功能眾多，是機體代謝的重要場所。T15組KM小鼠的脾臟、肝臟指數(shù)顯著高于T0組(<0.05)，說明日糧中添加15%的構樹葉粉可以促進小鼠的脾臟和肝臟的發(fā)育，增強小鼠的免疫功能，促進機體代謝活動。與T0組相比，T25組的肺臟指數(shù)與T35組小鼠心臟指數(shù)顯著降低(<0.05)，T35組小鼠肝臟指數(shù)極顯著降低(<0.01)，可能是由于添加過量的構樹葉粉導致日糧的適口性降低，小鼠采食量減少，同時營養(yǎng)水平下降，小鼠攝取營養(yǎng)不足影響各臟器的發(fā)育，也有可能是與構樹葉中的抗營養(yǎng)因子有關。綜上所述，在日糧中添加 15%左右的構樹葉粉可以促進小鼠肝臟、脾臟的發(fā)育，且對小鼠其他臟器無不良影響，有利于小鼠的機體健康。

3.3 構樹葉粉對KM小鼠血清生化指標的影響

血液生化檢查是臨床診斷中的重要手段，其指標可以反映機體組織器官的機能是否正常。LDH存在于機體所有組織細胞內(nèi)，其中肝臟含量最高，可作為評價肝功能受損的主要指標之一。本試驗中，T15組和T35組的LDH含量極顯著高于T0組(<0.01)， T25 組顯著高于T0組(<0.05)?？赡苁怯捎谔砑訕嫎淙~粉含量過高，影響小鼠對養(yǎng)分的吸收利用，影響肝臟的功能，也可能是構樹中某種物質導致小鼠肝功能受損。血清TP含量反應肝臟合成蛋白質的能力，血清TP和ALB含量的升高時，機體蛋白質代謝旺盛。Urea是體內(nèi)蛋白質代謝產(chǎn)物，血清中Urea含量可用來評價腎小球過濾功能。T35組TP、ALB和Urea含量均顯著高于T0組(<0.05)，說明日糧中添加構樹葉粉可以增強機體蛋白質代謝活動，但是過量會使腎臟功能受損。試驗組小鼠TC含量極顯著低于對照組T0組(<0.01)，說明日糧中添加構樹葉粉有利于降低膽固醇含量，降低患心血管疾病的風險。T3和T4都是動物體生長所必需的激素，能夠促進機體的生長與代謝活動，本試驗中，T15組T4含量顯著大于T25組和T35組(<0.05)，對機體健康更有利。機體特異性免疫應答水平提升會使A/G值下降。本試驗中，T15組A/G值顯著低于T35組(<0.05)，說明構樹葉粉含量過高會損害機體免疫功能。綜上所述，建議在小鼠日糧中添加的構樹葉粉含量不超過25%，可以降低血清膽固醇含量，且對機體臟器以及其它功能影響較小。

4 結 論

日糧中添加構樹葉粉含量不超過25%時能促進小鼠脾臟、肝臟的發(fā)育，降低小鼠總膽固醇含量，且對小鼠的生長性能及其他臟器和功能影響較小，大于35%時會導致小鼠生長受阻，部分臟器功能受損。在本試驗條件下建議KM小鼠日糧中構樹葉粉添加量不高于25%。