許 靜，沈云岳，高 鋒，何怡青

上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200233

原發(fā)性骨腫瘤是指原發(fā)在骨內(nèi)或者起源于骨的各種組織成分的腫瘤，包括良性、中間型和惡性骨腫瘤[1]。惡性骨腫瘤發(fā)病年齡輕，預(yù)后差；良性和中間型骨腫瘤預(yù)后較好，但也嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。隨著骨腫瘤進(jìn)展，患者骨組織發(fā)生成骨性或溶骨性改變，骨代謝異常。既往研究主要關(guān)注常規(guī)骨代謝指標(biāo)，如血清堿性磷酸酶(ALP)、鈣(Ca)、磷(P)等在骨腫瘤患者中的水平改變[2-3]。近年來(lái)，Ⅰ型膠原羧基端肽β特殊序列(β-CTx)、骨鈣素N端中分子(OCN-MID)、總Ⅰ型膠原氨基端延長(zhǎng)肽(TP1NP)等指標(biāo)已用于臨床骨質(zhì)疏松癥、代謝性骨病等的診斷及治療效果監(jiān)測(cè)[4-6]。目前，骨腫瘤的診斷主要依賴(lài)于影像學(xué)及病理學(xué)檢查，尚缺乏明確的血清學(xué)篩查和療效評(píng)估指標(biāo)[7]。本研究擬以骨腫瘤患者的骨代謝異常為切入點(diǎn)，系統(tǒng)性地研究血清骨代謝指標(biāo)Ca、P、ALP、β-CTx、OCN-MID、甲狀旁腺素(PTH)、25-羥基維生素D(25-OH-VD)和TP1NP在骨腫瘤患者中的水平改變，并篩選最佳的檢測(cè)指標(biāo)組合，以期為臨床骨腫瘤診斷及治療監(jiān)測(cè)提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年1-12月在本院就診并經(jīng)病理學(xué)檢查確診的原發(fā)性骨腫瘤患者76例作為骨腫瘤組，其中男33例，女43例，平均年齡(39.96±15.58)歲。同時(shí)，選取本院體檢健康者40例作為健康組，其中男21例，女19例，平均年齡(45.63±14.83)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡≥18歲；(2)骨腫瘤組患者均經(jīng)影像學(xué)和病理學(xué)檢查確診；(3)所有受試者基本資料(性別、年齡)完整，骨腫瘤組患者臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)接受過(guò)任何形式治療；(2)合并骨質(zhì)疏松癥、代謝性骨病或骨感染；(3)合并嚴(yán)重的心、肝、肺、腎等重要臟器原發(fā)病或其他組織的良、惡性腫瘤;(4)近期有外傷或手術(shù)史、使用過(guò)激素類(lèi)藥物等。兩組受試者性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。在骨腫瘤組中，根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)第5版(2020年)骨腫瘤分類(lèi)指南[1]，將骨腫瘤組患者進(jìn)一步分為良性組(29例)、中間型組(17例)和惡性組(30例)3種類(lèi)型。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2儀器與試劑 血清Ca、P和ALP使用生化分析儀(HITACHI LABOSPECT 008AS，日立)進(jìn)行檢測(cè)，其中Ca和P檢測(cè)采用美康生物科技股份有限公司試劑，ALP檢測(cè)采用邁克生物股份有限公司試劑；其他血清骨代謝指標(biāo)均使用羅氏電化學(xué)分析儀(ROCHE COBAS e602)及配套試劑進(jìn)行檢測(cè)。

1.3方法 采用分離膠促凝管采集所有受試者清晨空腹?fàn)顟B(tài)下的靜脈血，分離血清后用于骨代謝指標(biāo)的檢測(cè)。Ca、P和ALP的檢測(cè)方法分別為偶氮胂Ⅲ法、磷鉬酸鹽法和NPP底物-AMP緩沖液法，其他指標(biāo)的檢測(cè)方法均為電化學(xué)發(fā)光法。

2 結(jié) 果

2.1骨腫瘤組和健康組血清骨代謝指標(biāo)水平比較 兩組間血清Ca、OCN-MID、PTH及TP1NP的水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與健康組相比，骨腫瘤患者血清β-CTx、P、ALP水平顯著升高，而25-OH-VD水平顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1 健康組和骨腫瘤組血清骨代謝指標(biāo)水平比較或M(P25,P75)]

組別nOCN-MID(ng/mL)PTH(pg/mL)25-OH-VD(ng/mL)TP1NP(ng/mL)健康組4015.68(13.37,19.35)36.98(28.02,52.19)21.71(18.43,28.93)49.07(40.28,62.66)骨腫瘤組7618.10(13.07,24.07)38.66(30.25,44.64)14.10(11.11,20.34)a50.94(35.40,77.84)

2.2血清β-CTx、25-OH-VD、P及ALP對(duì)骨腫瘤的診斷價(jià)值 β-CTx、25-OH-VD、P聯(lián)合檢測(cè)診斷骨腫瘤的曲線下面積(AUC)最大(0.879)，且靈敏度和特異度(75.00%、90.00%)最高。各指標(biāo)單獨(dú)或聯(lián)合檢測(cè)診斷骨腫瘤的ROC曲線、AUC、截?cái)嘀?、靈敏度、特異度見(jiàn)圖1及表2。

表2 各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)骨腫瘤的診斷價(jià)值

2.3骨腫瘤患者血清β-CTx、25-OH-VD、P水平的相關(guān)性 血清β-CTx與P的水平呈正相關(guān)(r=0.55，P<0.01)，血清25-OH-VD與P的水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.26，P<0.05)，而血清β-CTx與25-OH-VD水平之間無(wú)相關(guān)性(r=0.04，P>0.05)。見(jiàn)圖2。

圖2 骨腫瘤患者血清β-CTx、25-OH-VD、P水平之間的相關(guān)性分析

2.4不同類(lèi)型骨腫瘤患者的血清β-CTx、25-OH-VD和P水平比較 良性組、中間型組和惡性組血清β-CTx、25-OH-VD和P水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

注：A為β-CTx、25-OH-VD、P、ALP單獨(dú)診斷；B為聯(lián)合診斷組合。

表3 良性組、中間型組和惡性組骨腫瘤患者血清β-CTx、25-OH-VD和P水平比較[M(P25,P75)或

3 討 論

血清骨代謝標(biāo)志物可分為4種類(lèi)型：(1)骨礦物質(zhì)相關(guān)指標(biāo)Ca、P；(2)鈣磷調(diào)節(jié)激素相關(guān)指標(biāo)PTH、25-OH-VD；(3)骨吸收相關(guān)指標(biāo)β-CTx；(4)骨形成相關(guān)指標(biāo)ALP、OCN-MID、TP1NP。本研究結(jié)果顯示，與健康組比較，骨腫瘤組患者血清P、β-CTx、ALP水平顯著升高，25-OH-VD水平顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而Ca、PTH、OCN-MID、TP1NP水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

Ca和P是骨組織中的主要礦物質(zhì)，當(dāng)發(fā)生溶骨性改變時(shí)，骨組織中沉積的Ca和P溶解后釋放入血，導(dǎo)致血Ca、P水平升高。血Ca、P水平可受PTH和活性維生素D的調(diào)節(jié)，PTH的作用是升高血Ca、降低血P，活性維生素D的作用則是通過(guò)增強(qiáng)小腸吸收升高血Ca和血P[8-9]。本研究結(jié)果顯示，骨腫瘤患者血清P水平顯著升高，提示骨吸收增強(qiáng)，血清25-OH-VD水平顯著降低，而Ca、PTH水平無(wú)明顯變化，這與武湘云等[3]的研究相符。25-OH-VD水平降低可能是由于消耗過(guò)多，失代償或骨腫瘤患者活動(dòng)減少所致，造成Ca、P的吸收減少，不利于骨組織礦物質(zhì)的沉積，可能會(huì)進(jìn)一步增加骨吸收。

Ⅰ型膠原是骨基質(zhì)的重要成分，骨吸收增強(qiáng)時(shí)，Ⅰ型膠原的降解增高并釋放入血。作為Ⅰ型膠原的降解產(chǎn)物，β-CTx是一種骨吸收標(biāo)志物[10]。與之相反，TP1NP在Ⅰ型膠原形成過(guò)程中釋放，然后整合至骨基質(zhì)中，是一種骨形成標(biāo)志物[11]。此外，ALP和骨鈣素(OCN-MID)也是骨形成相關(guān)指標(biāo)[12]。本研究結(jié)果顯示，骨腫瘤患者血清β-CTx、ALP水平顯著升高，TP1NP 和OCN-MID水平則無(wú)明顯變化，進(jìn)一步提示骨腫瘤患者的骨代謝異常表現(xiàn)以骨吸收增強(qiáng)為主。

本研究中ROC曲線分析結(jié)果顯示，在差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的4種骨代謝指標(biāo)中，ALP診斷骨腫瘤的AUC最小，診斷效能最低，反映骨吸收的3種指標(biāo)β-CTx、25-OH-VD、P的診斷效能較高，三者聯(lián)合應(yīng)用可顯著提升對(duì)骨腫瘤的診斷價(jià)值。此外，骨腫瘤患者血清β-CTx與P水平呈正相關(guān)(r=0.55,P<0.01)，25-OH-VD與P水平則呈負(fù)相關(guān)(r=-0.26,P<0.05)。然而，良性組、中間型組和惡性組骨腫瘤患者P、β-CTx、25-OH-VD水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，表明骨代謝指標(biāo)無(wú)法區(qū)分惡性程度，可能更適合用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)骨腫瘤進(jìn)展和治療效果。

本研究的血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果提示，原發(fā)性骨腫瘤患者的骨代謝異常表現(xiàn)可能以骨吸收增強(qiáng)為主。骨腫瘤患者血清β-CTx、P水平顯著升高，25-OH-VD水平顯著降低，β-CTx、P、25-OH-VD水平聯(lián)合檢測(cè)可為臨床骨腫瘤診斷和治療效果監(jiān)測(cè)提供參考。但本研究為單中心回顧性研究、納入的病例數(shù)較少，在結(jié)果解釋方面可能具有一定的局限性，后續(xù)還需要多中心、大樣本的臨床研究進(jìn)行驗(yàn)證。