尚津鋒，李倩楠，崔一然，劉 欣#

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100029； 2.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院藥學(xué)部，北京 100010)

巴豆為大戟科植物巴豆CrotontigliumL.的干燥成熟果實(shí)，具有瀉下冷積、逐水退腫和祛痰利咽等功效，在臨床被應(yīng)用于寒積便秘、腹水膨脹等[1]。巴豆的主要成分包括有機(jī)酸類、二萜類、生物堿類和植物蛋白類，其中巴豆脂肪油和巴豆毒素是巴豆大毒的物質(zhì)基礎(chǔ)[2-3]。因此，目前常使用取仁蒸煮后去油制霜的炮制方法，以達(dá)緩和峻瀉、降低毒性的目的[4]?；谥嗅t(yī)藥百科全書數(shù)據(jù)庫(ETCM)、中醫(yī)藥整合藥理學(xué)研究平臺(TCMIP)，通過大數(shù)據(jù)的智能化數(shù)據(jù)挖掘，分析藥物、成分和靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)關(guān)聯(lián)，闡釋中藥多成分-多靶點(diǎn)-多途徑作用機(jī)制[5-6]。本研究以效毒關(guān)系為切入點(diǎn)，運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法篩選巴豆和巴豆霜成分和靶標(biāo)并進(jìn)行通路分析，預(yù)測并探討巴豆制霜的機(jī)制，為臨床巴豆霜的應(yīng)用提供參考。

1 資料與方法

1.1 化學(xué)成分靶點(diǎn)篩選

通過TCMIP V2.0[7]的中藥材數(shù)據(jù)庫，檢索巴豆、巴豆霜的化學(xué)成分和靶點(diǎn)。獲得的中藥基因靶標(biāo)由MedChem Studio預(yù)測，只保留可靠性分值>0.8的靶標(biāo)。

1.2 化學(xué)成分ADMET預(yù)測

admetSAR-2.0(http://lmmd.ecust.edu.cn/admetsar2/)從多種數(shù)據(jù)庫收集化合物藥理學(xué)相關(guān)信息，能夠預(yù)測化合物ADMET參數(shù)，包括血腦屏障、人體小腸吸收性、Caco-2細(xì)胞透過性和急性口服毒性等定性定量參數(shù)[8]。利用該數(shù)據(jù)庫檢索巴豆、巴豆霜成分的ADMET參數(shù)，分析化學(xué)成分的藥動學(xué)和毒理學(xué)性質(zhì)。

1.3 靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

為明確靶標(biāo)間的相互關(guān)系，利用Venny 2.1.0(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)將巴豆和巴豆霜靶點(diǎn)取交集，并將共有靶點(diǎn)和特有靶點(diǎn)提交至STRING 11.0數(shù)據(jù)庫[9](https://string-db.org)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)，設(shè)定生物種類為“Homo sapiens”，最小互作閾值為“highest confidence”(>0.900)，其余均為默認(rèn)設(shè)置，得到PPI網(wǎng)絡(luò)，并通過Cytoscape 3.8.0對PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)一步可視化。

1.4 成分的通路富集分析

利用DAVID軟件[10](http://david.abcc.ncifcrf.gov/)將篩選得到的靶點(diǎn)進(jìn)行京都基因與基因組百科全書(KEGG)通路富集分析，保留P<0.01的通路，并根據(jù)P值篩選出前20條通路進(jìn)行分析。

1.5 成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建和分析

將成分、靶點(diǎn)和通路數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0[11]，構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖。成分、靶點(diǎn)和通路以節(jié)點(diǎn)(node)表示，利用Cytoscape內(nèi)置工具Analyze Network分析各節(jié)點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)，其中，節(jié)點(diǎn)的度值(degree)是與節(jié)點(diǎn)相連邊的數(shù)量，度值越大，說明網(wǎng)絡(luò)中與該節(jié)點(diǎn)直接相關(guān)的節(jié)點(diǎn)數(shù)越多，表明該節(jié)點(diǎn)越重要[12]。根據(jù)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)可判斷中藥發(fā)揮藥效、表現(xiàn)毒性的主要成分以及核心靶點(diǎn)。

2 結(jié)果

2.1 巴豆、巴豆霜化學(xué)成分靶點(diǎn)獲取和篩選

根據(jù)TCMIP V2.0中藥材數(shù)據(jù)庫檢索巴豆、巴豆霜分別有47、9個化學(xué)成分，篩選去除無作用靶標(biāo)的成分，得到巴豆苷(crotonoside)、月桂酸(lauric acid)等巴豆成分37個以及巴豆醇(phorbol)等巴豆霜成分6個。去重基因靶標(biāo)，得到巴豆有309個靶點(diǎn)，巴豆霜有202個靶點(diǎn)。篩選結(jié)果表明，巴豆的成分包括巴豆霜的6個化學(xué)成分。

2.2 化學(xué)成分ADMET預(yù)測結(jié)果

將上述篩選的6種巴豆-巴豆霜共有成分導(dǎo)入admetSAR-2.0中檢索，結(jié)果見表1—3。巴豆苷、β-谷甾醇等成分均能透過血腦屏障并被人體小腸吸收，分布在細(xì)胞核、線粒體和溶酶體，對CYP酶的抑制性較低，其中β-谷甾醇的Caco-2細(xì)胞通透性和口服生物利用度較高。除β-谷甾醇、巴豆醇-12-十四烷酸酯-13-乙酸酯、4-脫氧-4-巴豆醇和巴豆醇是CYP3A4底物，巴豆醇-12-十四烷酸酯-13-乙酸酯是CYP2C9抑制劑外，其余成分均不是CYP酶亞型的底物或抑制劑。根據(jù)化合物毒性指標(biāo)，6種成分均無鉀電壓門控通道亞家族H成員2(HERG)相關(guān)基因抑制性、交鏈孢酚單甲醚(AME)致畸性、致癌性，且生物降解度較低。值得注意的是，巴豆醇和異鳥嘌呤具有肝毒性，β-谷甾醇的急性口服毒性處于危險(xiǎn)等級。

表1中以巴豆苷為例，人體小腸吸收性為“+”，說明巴豆苷在小腸吸收性較好；Caco-2細(xì)胞通透性為“-”，說明巴豆苷使Caco-2細(xì)胞通透性變差；血腦屏障為“+”，說明巴豆苷可以透過血腦屏障；P糖蛋白底物為“-”，說明巴豆苷不是P糖蛋白底物。表3中以巴豆苷為例，肝毒性為“+”，說明巴豆苷具有肝毒性；生物降解度為“-”，說明巴豆苷的生物降解度降低。

表1 巴豆化學(xué)成分的吸收、分布和排泄相關(guān)指標(biāo)Tab 1 Absorption, distribution and excretion of chemical components of croton

表2 巴豆化學(xué)成分的代謝相關(guān)指標(biāo)Tab 2 Metabolism-related indicators of chemical components of croton

表3 巴豆化學(xué)成分的毒性相關(guān)指標(biāo)Tab 3 Toxicity related indicators of chemical components of croton

2.3 靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將篩選的巴豆化學(xué)成分靶點(diǎn)與巴豆霜化學(xué)成分靶點(diǎn)取交集，并通過Venny 2.1.0繪制韋恩圖，得到巴豆-巴豆霜共同靶點(diǎn)202個，均為巴豆靶標(biāo)，以及巴豆的特有靶點(diǎn)107個，見圖1。將巴豆-巴豆霜共有靶點(diǎn)和巴豆特有靶點(diǎn)分別提交至STRING 11.0平臺得到PPI網(wǎng)絡(luò)，并導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0對PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)一步可視化，見圖2—3(節(jié)點(diǎn)面積越大代表度值越高)。

圖1 巴豆-巴豆霜靶點(diǎn)的韋恩圖Fig 1 Venn diagram of targets of croton and semen crotonis pulveratum

圖2 巴豆-巴豆霜共有成分靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)Fig 2 PPI network of common component targets of croton and semen crotonis pulveratum

圖3 巴豆特有成分靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)Fig 3 PPI network of specific component targets of croton

2.4 KEGG通路富集分析

為闡明巴豆、巴豆霜成分的效毒關(guān)系機(jī)制，將巴豆-巴豆霜的共有成分靶點(diǎn)和巴豆的特有成分靶點(diǎn)輸入DAVID數(shù)據(jù)庫進(jìn)行KEGG通路富集分析。202個共有靶點(diǎn)富集得到77條通路，篩選P<0.01的通路共38條，涉及尼古丁成癮(nicotine addiction)、GABA能突觸(GABAergic synapse)、神經(jīng)活性配體受體相互作用(neuroactive ligand-receptor interaction)、嘌呤代謝(purine metabolism)、cAMP信號通路(cAMP signaling pathway)、Rap1信號通路(Rap1 signaling pathway)和Ras信號通路(Ras signaling pathway)等。選擇前20條通路使用Omicshare平臺(https://www.omicshare.com/tools/)可視化，見圖4(RichFactor值越大，表示通路富集程度越高；點(diǎn)的大小表示富集的靶點(diǎn)數(shù)量；點(diǎn)的顏色由淺到深表明P值由大到小)。

圖4 巴豆-巴豆霜共有靶點(diǎn)KEGG通路富集分析氣泡圖Fig 4 Bubbles of KEGG pathway enrichment analysis of common targets of croton and semen crotonis pulveratum

107個巴豆特有成分靶點(diǎn)富集得到44條通路，篩選P<0.01的通路共21條，涉及PPAR信號通路(PPAR signaling pathway)、非酒精性脂肪肝[non-alcoholic fatty liver disease(NAFLD)]、阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease)、帕金森病(Parkinson’s disease)、脂肪酸降解(fatty acid degradation)、α-亞麻酸代謝(alpha-Linolenic acid metabolism)、血管平滑肌收縮(vascular smooth muscle contraction)和甲狀腺癌(thyroid cancer)等。其中，長時程增強(qiáng)作用(Long-term potentiation)、苯丙胺成癮(amphetamine addiction)是共有靶點(diǎn)和特有靶點(diǎn)富集得到的2條共有通路。選擇前20條通路使用Omicshare平臺可視化，見圖5(RichFactor值越大，表示通路富集程度越高；點(diǎn)的大小表示富集的靶點(diǎn)數(shù)量；點(diǎn)的顏色由淺到深表明P值由大到小)。

圖5 巴豆特有靶點(diǎn)KEGG通路富集分析氣泡圖Fig 5 Bubbles of KEGG pathway enrichment analysis of specific targets of croton

2.5 成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建及拓?fù)浞治?/h3>

將巴豆、巴豆霜的化學(xué)成分及相關(guān)靶點(diǎn)和富集分析得到的通路導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0，繪制“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖。度值是節(jié)點(diǎn)的直接相連節(jié)點(diǎn)數(shù)目，度值越大，該節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中更重要。共有化學(xué)成分、相關(guān)靶點(diǎn)及富集通路導(dǎo)入該軟件，繪制出130個節(jié)點(diǎn)、417條邊的“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖，見圖6(形狀代表類型，八邊形為成分，矩形為靶點(diǎn)，三角形為通路；節(jié)點(diǎn)的面積代表其度值，面積越大說明該節(jié)點(diǎn)越重要)。網(wǎng)絡(luò)分析表示，巴豆苷連接度為75，介度為0.642 2，緊密度為0.581 1，說明巴豆苷是巴豆霜發(fā)揮藥效的主要成分。腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)、G蛋白亞基α I1(GNAI1)、絲裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、CAMP響應(yīng)性元素結(jié)合蛋白1(CREB1)、磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸3-激酶催化亞基α(PIK3CA)、蘇氨酸激酶1(AKT1)、ATP結(jié)合盒C亞家族1(ABCC1)和ATP結(jié)合盒亞家族A成員1(ABCA1)等靶點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中有較高連接度值，說明上述靶點(diǎn)在巴豆發(fā)揮藥效過程中具有重要作用。

圖6 巴豆-巴豆霜共有成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖Fig 6 Common component-target-pathway network diagram of croton and semen crotonis pulveratum

將特有成分、相關(guān)靶點(diǎn)及富集通路導(dǎo)入該軟件，繪制出86個節(jié)點(diǎn)、427條邊的“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖，見圖7(形狀代表類型，八邊形為成分，矩形為靶點(diǎn)，三角形為通路；節(jié)點(diǎn)的面積代表其度值，面積越大說明該節(jié)點(diǎn)越重要)。Cytoscape網(wǎng)絡(luò)分析表示，棕櫚酸、花生酸、硬脂酸、肉豆蔻酸和亞麻酸的連接度等網(wǎng)絡(luò)拓?fù)渲稻^大，說明這些脂肪油類成分與巴豆產(chǎn)生毒性作用有密切關(guān)系。鈣調(diào)蛋白1(CALM1)、磷脂酶A2組IB(PLA2G1B)、?；o酶A合成酶長鏈家族成員3(ACSL3)、磷脂酶A2組IIA(PLA2G2A)、蛋白激酶 CAMP 活化催化亞基α(PRKACA)、?；o酶A氧化酶1(ACOX1)和過氧化物酶體增殖劑激活受體γ(PPARG)等靶點(diǎn)連接度較高，是巴豆產(chǎn)生毒性的基礎(chǔ)。

圖7 巴豆特有成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖Fig 7 Specific component-target-pathway network diagram of croton

3 討論

3.1 巴豆(霜)藥效機(jī)制分析

巴豆霜在臨床上可用于治療寒積便秘、水腫腹脹、乳食停滯和喉風(fēng)喉痹等，也用于惡性腫瘤的治療[13-14]。本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法初步篩選出巴豆霜發(fā)揮藥效的主要成分為巴豆苷、異鳥嘌呤等生物堿和二萜類成分。相關(guān)研究結(jié)果表明，巴豆提取物具有明顯的抗腫瘤活性，能抑制多種腫瘤細(xì)胞，其作用機(jī)制與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、影響膜系統(tǒng)分子動力學(xué)、抑制腫瘤轉(zhuǎn)移和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化等有關(guān)[15]。此外，巴豆生物堿促使細(xì)胞G2/M期阻滯和抑制細(xì)胞的有絲分裂，誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞凋亡[16]。藥理研究結(jié)果表明，巴豆屬植物中的二萜類成分有抗炎的藥理活性[17]。巴豆苷也具有抗炎作用，表現(xiàn)為抑制毛細(xì)血管通透性和耳腫脹[18]。同時，巴豆霜給小鼠灌服，可抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬活性，還可降低小鼠碳廓清率及胸腺重量[19]。

網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治龊透患Y(jié)果顯示，巴豆霜成分作用的核心靶點(diǎn)包括ABCA1、PIK3CA、CREB1和AKT1等，主要作用于2類通路：一是神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)通路，包括尼古丁成癮、GABA能突觸、ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、Rap1信號通路和Ras信號通路等；二是癌癥通路，包括非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、腎細(xì)胞癌和前列腺癌等。此外，巴豆霜還通過嘌呤代謝、嘧啶代謝等通路參與機(jī)體的物質(zhì)代謝，通過Fcγ受體(FcγR)介導(dǎo)的吞噬作用通路在免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)和免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮作用[20]。藥理學(xué)研究結(jié)果表明，尼古丁加劇胃潰瘍和惡性腫瘤侵襲性因素的有害作用，并減弱胃腸防御因素的保護(hù)作用，在胃十二指腸潰瘍中發(fā)揮重要作用，同時通過調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖凋亡和血管生成促進(jìn)惡性腫瘤進(jìn)展，導(dǎo)致胃腸道癌變[21]。γ-氨基丁酸(GABA)是重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)生理學(xué)和免疫細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)中的作用至關(guān)重要，與胃腸動力密切相關(guān)[22-23]。腸道中廣泛的GABA表明，GABA可能被應(yīng)用于運(yùn)動性胃腸道疾病，如胃輕癱和腸梗阻，從而恢復(fù)生理性胃腸動力[24]。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族，如ABCA1、ABCB1、ABCC1和ABCC9等，能夠利用ATP水解產(chǎn)生的能量，協(xié)助各種物質(zhì)進(jìn)行跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)[25]。研究結(jié)果表示，ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可將疏水親脂的化療藥主動排出腫瘤細(xì)胞外，降低細(xì)胞內(nèi)藥物蓄積，從而使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥[26]。Ras和Rap1對細(xì)胞的增殖、分化等基本生命活動起重要的調(diào)控作用，與腫瘤密切相關(guān)[27-28]。研究結(jié)果顯示，Rap1b通過參與多條信號調(diào)節(jié)過程，在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著重要作用[29]。同時，隨著Ras蛋白表達(dá)升高，腫瘤組織更易進(jìn)展、浸潤和轉(zhuǎn)移[30]。巴豆霜可能通過Rap1和Ras相關(guān)通路抑制惡性腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。PIK3CA是磷脂酰肌醇3激酶催化亞單位的基因，能夠調(diào)控磷酸化的蘇氨酸激酶(p-Akt)蛋白的表達(dá)，從而降低非小細(xì)胞肺癌的侵襲及遷移能力[31]；臨床上，非小細(xì)胞肺癌患者的PIK3CA突變則預(yù)后不良[32]。CREB基因和食管癌、膀胱癌等多種惡性腫瘤關(guān)系密切，抑制該基因表達(dá)能夠抑制惡性腫瘤細(xì)胞增殖[33-34]；此外，CREB表達(dá)上調(diào)的食管鱗癌患者預(yù)后不良[35]。由此可知，CREB為腫瘤的關(guān)鍵靶點(diǎn)。研究結(jié)果表明，Akt是靶向抗腫瘤藥研發(fā)的重要靶標(biāo)，抑制Akt可有效抑制腫瘤生長[36]?？傮w而言，巴豆(霜)的多個成分通過多種靶點(diǎn)、多條途徑在抗腫瘤中取得了顯著效果，同時調(diào)節(jié)胃腸動力，抑菌抗炎，預(yù)測其藥效機(jī)制涉及GABA能突觸受體、ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和Rap1信號通路等通路。

3.2 巴豆毒性機(jī)制分析

本研究通過網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)篩選出棕櫚酸、花生酸等脂肪酸為巴豆產(chǎn)生毒性的主要化學(xué)成分。ADMET結(jié)果顯示，巴豆、巴豆霜對肝藥酶抑制較低，進(jìn)入體內(nèi)后會保持較高的血藥濃度。巴豆苷和異鳥嘌呤不是CYP3A4底物，可能與巴豆損傷肝臟，導(dǎo)致肝毒性有關(guān)。網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)和基因富集結(jié)果顯示，巴豆毒性的核心靶點(diǎn)ACOX1等主要作用于脂肪酸代謝相關(guān)通路，如脂肪酸代謝通路、脂肪酸降解、脂肪細(xì)胞因子信號通路、非酒精性脂肪肝、PPAR信號通路、α-亞麻酸代謝和亞油酸代謝通路。過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)是肝臟中高表達(dá)的代謝性核受體，主要功能是參與脂肪酸氧化，包括激活脂肪酸攝取、加速脂肪酸氧化、抑制糖異生、抑制炎癥和纖維化，這些過程都與非酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)[37]。有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，共軛亞油酸與PPARα聯(lián)系緊密。共軛亞油酸可能通過PPARα激活，介導(dǎo)抗神經(jīng)炎癥[38]；PPARα在共軛亞油酸誘導(dǎo)的肝脂肪變性中調(diào)節(jié)脂肪生成和脂肪酸氧化，對維持脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)發(fā)揮雙重作用[39]。由此可見，巴豆毒性作用的產(chǎn)生與體內(nèi)產(chǎn)生亞油酸及其代謝過程緊密相關(guān)。同時，巴豆特有靶點(diǎn)的富集通路涉及神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，包括阿爾茨海默病、帕金森病和亨廷頓病。說明巴豆毒性可能造成神經(jīng)系統(tǒng)損傷。此外，巴豆油有弱致癌作用，可誘導(dǎo)大鼠癌基因的增加[40]。巴豆油對小鼠耳有致炎作用，導(dǎo)致其水腫和中性粒細(xì)胞浸潤[41]。因此，巴豆的毒性機(jī)制可能與脂肪酸代謝通路、PPAR信號通路等脂肪酸代謝類通路相關(guān)。

3.3 巴豆制霜機(jī)制分析

巴豆大毒，在傳統(tǒng)炮制工藝中，通常采用去油制霜的方法降低毒性，緩和峻下，即取巴豆仁碾碎蒸煮，壓榨去油至松散成粉狀[42]。在這一過程中，巴豆毒蛋白因加熱變性而除去，巴豆油大部分去除，以此達(dá)到降低毒性的目的。根據(jù)本研究富集分析，巴豆發(fā)揮“效”“毒”作用有2個共同通路，即苯丙胺成癮和長時程增強(qiáng)。有研究結(jié)果顯示，GABA對長時程增強(qiáng)的影響是通過受體介導(dǎo)的突觸前、后抑制效應(yīng)而實(shí)現(xiàn)的[43]。GABA受體拮抗劑不影響神經(jīng)病理性痛大鼠海馬突觸長時程增強(qiáng)誘出及維持[44]；而GABA激動劑降低依賴藥物引起的加強(qiáng)作用，可緩解苯丙胺類藥物依賴[45]。說明巴豆與巴豆霜因成分變化或成分含量不同，對神經(jīng)系統(tǒng)的作用不同。綜合以上分析，巴豆制霜去除或減少巴豆油等致炎、弱致癌成分，增強(qiáng)了巴豆的抗腫瘤、抗菌和抗病毒的功效，同時降低了巴豆毒性，減少了臨床不良反應(yīng)，并可能對神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響，通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測巴豆制霜機(jī)制可能與苯丙胺成癮和長時程增強(qiáng)等神經(jīng)系統(tǒng)通路有關(guān)。

綜上所述，本研究通過TCMIP V2.0等數(shù)據(jù)庫，采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，以巴豆的效毒關(guān)系為切入點(diǎn)，對巴豆和巴豆霜的成分進(jìn)行篩選、靶點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測、通路進(jìn)行分析。結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)、毒理學(xué)研究以及傳統(tǒng)炮制方法，分析巴豆發(fā)揮“效”“毒”作用機(jī)制，探討巴豆制霜的分子機(jī)制。巴豆(霜)調(diào)控Rap1信號通路、非小細(xì)胞肺癌等通路，對腫瘤具有明顯的治療作用。巴豆苷等導(dǎo)致肝毒性，影響脂肪酸代謝通路，是巴豆的主要毒性機(jī)制。巴豆制霜不僅能降低巴豆的不良反應(yīng)和毒性效應(yīng)，而且能更好地發(fā)揮巴豆霜的抗腫瘤抑菌治療作用。然而，本研究缺乏實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，今后可基于體內(nèi)外模型分別給予巴豆和巴豆霜，檢測各組神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)通路的蛋白表達(dá)變化，進(jìn)而驗(yàn)證預(yù)測結(jié)果?？傊?，本研究探討了巴豆制霜的分子機(jī)制，發(fā)現(xiàn)這種巴豆炮制方法與苯丙胺成癮、長時程增強(qiáng)等神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)通路有關(guān)。