馮海珍

(睢縣中醫(yī)院 檢驗科，河南 商丘 476900)

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)屬于免疫系統(tǒng)疾病，主要表現(xiàn)為對稱性、進行性關(guān)節(jié)炎，且隨著病情的進展，可導(dǎo)致患者出現(xiàn)關(guān)節(jié)畸形、關(guān)節(jié)活動能力受限等，導(dǎo)致患者生活質(zhì)量低下[1]。RA的發(fā)病機制較為復(fù)雜，目前尚未完全明確，但多與免疫細胞失衡、成骨細胞與破骨細胞失衡等相關(guān)[2-3]。CC趨化因子配體21(CC chemokine ligand 21，CCL21)是一種新型穩(wěn)態(tài)趨化因子，是趨化因子CC家族的一員，由活化的T淋巴細胞、內(nèi)皮細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等產(chǎn)生，與其受體CC趨化因子受體7型(CC chemokine receptor type 7，CCR7)結(jié)合能調(diào)節(jié)T細胞和樹突狀細胞的遷移，趨化免疫細胞遷移至靶器官，也能調(diào)節(jié)它們的免疫功能，引起炎癥反應(yīng)[4]?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)在RA發(fā)生中發(fā)揮重要作用，可降解關(guān)節(jié)軟骨外基質(zhì)細胞，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)損害；同時可導(dǎo)致內(nèi)皮細胞功能異常，形成血管翳，進一步損傷軟骨，而MMP-3作為其中重要成分，對關(guān)節(jié)、軟骨的破壞性極強[5-6]。基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)是一種糖蛋白，作為MMPs的抑制劑，其對間質(zhì)溶解素、間質(zhì)膠原酶存在一定特異性?？紤]血清CCL21、TIMP-1水平可能與RA的發(fā)生、進展存在一定影響。鑒于此，本研究探討血清CCL21、TIMP-1水平在預(yù)測RA病情中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料本研究已經(jīng)睢縣中醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員審核并獲得批準，選取睢縣中醫(yī)院2018年12月至2020年12月收治的35例RA患者作為研究對象，且RA符合相關(guān)診斷標準[7]，且未合并其他自身免疫系統(tǒng)疾病，意識清晰，將其納入RA組。男9例，女26例；年齡48～65(56.59±4.28)歲；病程1～5(3.06±0.89)a；關(guān)節(jié)功能Ⅰ級4例，Ⅱ級6例，Ⅲ級14例，Ⅳ級11例。選取同時期睢縣中醫(yī)院收治的35例非RA的自身免疫疾病患者，將其納入非RA組。男11例，女24例；年齡46～65(55.93±4.51)歲；病程1～4(2.82±0.91)a；系統(tǒng)性紅斑狼瘡18例，硬皮病8例，干燥癥9例。兩組年齡、性別、病程差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。納入標準：近期未使用激素、免疫抑制劑治療；簽署知情同意書。排除標準：伴有關(guān)節(jié)發(fā)育畸形；有傳染性疾病、血液系統(tǒng)疾??；合并妊娠；伴有心血管疾病。

1.2 檢測方法于入院初診時，患者禁食12 h，清晨取兩組5 mL空腹靜脈血，以3 000 r·min-1進行離心處理，離心半徑為10 cm，10 min后分離血清，采用上海烜雅生物提供的試劑盒檢測血清CCL21、TIMP-1水平，檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附法，檢測操作均嚴格遵照試劑盒說明書要求進行。

2 結(jié)果

2.1 血清CCL21、TIMP-1水平RA組血清CCL21、TIMP-1水平高于非RA組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清CCL21、TIMP-1水平對比

2.2 logistic回歸分析將RA患者血清CCL21、TIMP-1水平作為自變量，將RA發(fā)生情況作為因變量，logistic回歸顯示，血清CCL21、TIMP-1高表達可能是誘發(fā)RA發(fā)生的影響因素(OR>1，P<0.05)。見表2。

表2 血清CCL21、TIMP-1水平對RA影響的logistic回歸分析

2.3 血清CCL21、TIMP-1水平及聯(lián)合檢測對RA的預(yù)測價值將RA患者血清CCL21、TIMP-1水平分別作為檢驗變量，RA發(fā)生情況作為狀態(tài)變量，繪制ROC曲線可知，血清CCL21、TIMP-1水平預(yù)測RA的AUC均>0.80，預(yù)測價值理想，且聯(lián)合預(yù)測價值更佳。血清CCL21、TIMP-1水平分別取242.419、181.049 ng·L-1時，可獲得較高的靈敏度、特異度。見表3。

表3 血清CCL21、TIMP-1水平及聯(lián)合檢測對RA的預(yù)測價值

3 討論

RA受自身免疫系統(tǒng)、環(huán)境等相關(guān)因素影響，病情極易反復(fù)，致殘率較高，且隨著疾病進展，極易累及關(guān)節(jié)外器官，可降低患者生活質(zhì)量，并帶來較大的心理負擔(dān)。因此，早期對RA患者進行診療及病情評估尤為重要。有研究指出，RA發(fā)病與多種細胞因子水平有關(guān)，其中CCL21、TIMP-1等在RA的發(fā)病及進展中發(fā)揮一定作用[8]。本研究中，RA組血清CCL21、TIMP-1水平高于非RA組，可見血清CCL21、TIMP-1水平在RA患者中呈高表達，推測其可能參與RA的發(fā)生。

研究顯示，CCL21是RA的易感基因，其可趨化免疫細胞向靶器官遷移，并參與炎癥反應(yīng)，對血管新生具有促進作用[9]。本研究結(jié)果顯示，血清CCL21高表達是導(dǎo)致RA發(fā)生的影響因素，提示血清CCL21與RA的發(fā)生存在一定關(guān)聯(lián)。分析原因在于，RA作為一種以血管生成為特征的慢性炎癥性疾病，內(nèi)皮細胞的活化、增殖在其中發(fā)揮重要作用，CCL21多于淋巴管內(nèi)皮小靜脈、T細胞聚集區(qū)基質(zhì)細胞中表達，能夠吸引巨噬細胞、T細胞，對T細胞、骨髓的致病活性具有促進作用，而類風(fēng)濕滑膜組織的內(nèi)皮細胞可產(chǎn)生CCL21，其可將T細胞吸引至炎癥部位，加快疾病進展[10]。因此，檢測血清CCL21水平對預(yù)測RA患者的發(fā)生及病情進展具有重要作用。TIMP-1廣泛分布于機體組織、體液中，對間質(zhì)膠原酶、間質(zhì)溶解素具有特異性，MMP-3是一種蛋白酶，是引起關(guān)節(jié)、軟骨降解的最主要的成分，降低其水平對延緩疾病進展具有積極意義，TIMP-1作為特異性抑制劑，能夠與活化的MMP-3結(jié)合，形成復(fù)合物，并對MMP-3活性、血管增殖產(chǎn)生抑制作用[11]。本研究結(jié)果顯示，血清TIMP-1高表達可能是導(dǎo)致RA發(fā)生的影響因素，提示血清TIMP-1在RA疾病進展中發(fā)揮重要作用。分析原因在于，MMP-3對關(guān)節(jié)具有破壞性，尤其是軟骨組織，在RA疾病發(fā)生早期，滑膜組織增生后，會蔓延至關(guān)節(jié)軟骨面，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨被侵蝕，形成血管翳，進而導(dǎo)致大量膠原酶、MMP-3釋放，當(dāng)TIMP-1水平低于MMP-3活性時，可引起骨組織破壞；而機體MMP-3分泌增加時，體內(nèi)反饋性保護作用會促使TIMP-1分泌增加，以抑制MMP-3對軟骨的侵蝕、破壞作用，可見MMP-3、TIMP-1水平的提高預(yù)示骨膜組織侵襲關(guān)節(jié)軟骨，且伴有滑膜炎癥，導(dǎo)致病情進展較迅速[12]。另外，RA發(fā)病始于滑膜內(nèi)膜和內(nèi)膜下層的增厚，隨著炎癥白細胞的侵襲，血管數(shù)量不斷增多，滑膜組織中可出現(xiàn)大量的新生血管，導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)內(nèi)的微環(huán)境發(fā)生改變，滑膜細胞需要更多的營養(yǎng)物質(zhì)與氧氣，進而出現(xiàn)低氧狀態(tài)，導(dǎo)致多種炎癥細胞不斷浸潤、擴散，進一步加重RA患者的病情。因而，血管翳是RA發(fā)病的重要機制之一，而炎癥細胞因子和趨化因子的高度浸潤可導(dǎo)致血管不受控制增殖，形成血管翳；其中CCL21可導(dǎo)致滑膜細胞呈低氧狀態(tài)，參與RA的發(fā)生、發(fā)展；MMP可導(dǎo)致血管內(nèi)皮細胞生長因子不斷增殖，血管生成，進而形成血管翳，不斷破壞軟骨細胞，并引起骨侵蝕，并為炎癥細胞分泌提供環(huán)境，導(dǎo)致膜炎癥，加重RA患者的病情。為進一步證實結(jié)論，繪制ROC曲線可知，血清CCL21、TIMP-1水平預(yù)測RA的AUC均>0.80，且聯(lián)合檢測較單個指標檢測的價值更高，可見將血清CCL21、TIMP-1水平聯(lián)合檢測，對初步診斷RA發(fā)生及病情評估具有積極意義，可為臨床治療提供有效指導(dǎo)。但是，血清CCL21、TIMP-1水平也受到其他因素的影響，如用藥、創(chuàng)傷等，臨床采用血清CCL21、TIMP-1水平評估、預(yù)測RA發(fā)生情況時，同時需結(jié)合其他檢查(如臨床癥狀表現(xiàn)、影像學(xué)檢查等)進行綜合性評估。

綜上所述，血清CCL21、TIMP-1水平在RA患者中呈高表達，可能是誘發(fā)RA發(fā)生及病情發(fā)展的影響因素，臨床可考慮檢測上述指標以預(yù)測RA發(fā)生及病情，為早期診療提供依據(jù)。血清CCL21、TIMP-1水平與RA的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，參與炎癥反應(yīng)、血管翳形成，進而誘發(fā)RA，臨床工作者可對兩個指標進行深入分析，將其作為臨床治療的靶點。