趙俊峰，冼土秀，溫慧敏

（廣東省綠色產(chǎn)品認(rèn)證檢測中心有限公司，廣東 廣州 510440）

引言

近年來，隨著民眾食品安全意識的提升和市場監(jiān)督管理局執(zhí)法力度的加強(qiáng)，食品質(zhì)量安全深入人心，蜜餞作為常見的零食，其質(zhì)量優(yōu)劣關(guān)系著消費(fèi)者的健康。在國家市場監(jiān)督管理局官方網(wǎng)站，以蜜餞為關(guān)鍵詞進(jìn)行索引，在質(zhì)量報告專欄查看通報情況，情況卻不容樂觀。各地市局通告不合格項目主要有四類：一是菌落總數(shù)不合格；二是添加劑含量超標(biāo)，其中尤以糖精鈉超標(biāo)最為常見；三是合成著色劑超標(biāo)；四是水分含量超標(biāo)。本文通過比較不同提取方法對蜜餞類食品中合成著色劑的提取效果，為各檢測員提供思路，共同達(dá)到準(zhǔn)確檢測的目的。

食品合成著色劑，也稱食品合成染料。食品合成色素，是指人工合成的有機(jī)著色劑，其具有著色力強(qiáng)，顏色艷麗，不易褪色，穩(wěn)定性強(qiáng)，成本低廉等優(yōu)點。但其也存在致毒性，致泄性和致癌性等缺點，因此國標(biāo)對合成所色劑的添加有嚴(yán)格規(guī)定[1-3]。果品在熱燙處理和硫化處理中會發(fā)生褐變，添加合成著色劑能顯著改變蜜餞的色澤。

1 實驗部分

1.1 實驗儀器、試劑

Agilent LC1100 高效液相色譜儀（配有紫外檢測器）；超聲波清洗儀；漩渦振蕩儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)品（檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍(lán)、赤蘚紅）；甲醇，分析純；乙腈，分析純；氨水，化學(xué)純；甲酸，分析純；乙酸銨；聚酰胺小柱，500 mg/6 mL。

1.2 前處理方法

1）國家標(biāo)準(zhǔn)法5009.35[4-5]水提取法：稱取1 g～2 g粉碎樣品（精確至0.001 g），放入50 mL 離心管中，加水30 mL，溫?zé)崛芙?，? 次提取，用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH 到6 左右。經(jīng)過甲醇、水活化的聚酰胺小柱，分2 次用3 mL 10%氨水甲醇洗脫，用空氣吹干，以1∶1流動相定容，使用0.22 μm 聚四氟乙烯水相膜過濾，上機(jī)。

2）氨水甲醇提取法：準(zhǔn)確稱量1 g～2 g 樣品（精確值0.001 g），放入50 mL 離心管中，用15 mL 10%氨水甲醇分2 次超聲提取，以70 ℃振蕩提取1 h，重復(fù)提取2 次，合并上清液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸至剩約5 mL，用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH 至6 左右。過柱，淋洗，洗脫，用空氣吹干，用1∶1 流動相定容，上機(jī)。

3）甲酸甲醇提取法：準(zhǔn)確稱取1 g～2 g 樣品（精確值0.001 g），用15 mL 10%甲酸甲醇分2 次超聲提取，其余步驟同上。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線配置

將檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍(lán)、赤蘚紅用一級水配成100 μg/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，并逐級稀釋為1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.4 色譜條件

Agilent Eclipse plus C18（4.6×250 mm，5 μm），柱溫35 ℃，波長254 μm，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量為10 μL，流動相：A 為甲醇，B 為0.02 mol/L 乙酸銨溶液。梯度洗脫表如表1。

表1 梯度洗脫程序

2 實驗數(shù)據(jù)

2.1 標(biāo)準(zhǔn)校正曲線的建立

本實驗選用3 種不同的提取方法對蜜餞中合成著色劑進(jìn)行提取，通過建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，比較不同方法回收率確定提取效率，除提取條件不同外，其余實驗條件均相同?？偨Y(jié)歸納不同條件對色素提取的影響，得出提取效率最高的方法。

將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液同樣以10 μL 進(jìn)樣，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)軸，以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，通過回歸計算求得回歸方程與回歸系數(shù)。若回歸系數(shù)為0.999 以上，則說明該標(biāo)準(zhǔn)系列曲線配置良好，適宜作為標(biāo)準(zhǔn)曲線驗證待測物質(zhì)含量。由表2 可知，本次各組分回歸系數(shù)均大于0.999，故標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立是準(zhǔn)確的。

表2 色素標(biāo)準(zhǔn)曲線校正表

2.2 試樣色譜圖

試樣色譜圖見圖1～圖3。

圖1 國家標(biāo)準(zhǔn)法水提取色譜圖

圖2 氨水甲醇提取法色譜圖

圖3 甲酸甲醇提取法色譜圖

2.3 實驗回收率與準(zhǔn)確度

按照既定條件連續(xù)測定不同方法提取相同質(zhì)量待測樣品的合成著色劑含量，并計算其回收率，其結(jié)果如表3 所示。本實驗的準(zhǔn)確度以相同提取方法在相同待測參數(shù)間回收率差值的絕對值來表示，兩次回收率的絕對差值低于5%，則說明該方法穩(wěn)定性強(qiáng)，重復(fù)性好。經(jīng)過計算，本次相同方法各參數(shù)的回收率差值均在5%以內(nèi)，說明在實驗過程中沒有明顯差錯，增加了實驗結(jié)論的可信度。通過比較，發(fā)現(xiàn)使用氨水甲醇提取法在各種合成著色劑的提取效率均優(yōu)于水提取法和甲酸甲醇提取法。甲酸甲醇提取法的提取效率顯著低于水提取法和氨水甲醇提取法，合成著色劑偶氮類結(jié)構(gòu)決定了其在酸性溶液中的溶解度較差，在水及堿性溶液中的溶解度較好。各食品檢測人員可使用堿性氨水甲醇溶液提高合成著色劑檢測的準(zhǔn)確性。

表3 各實驗方法的回收率 %

3 實驗結(jié)論及建議

本實驗通過對不同提取方法對蜜餞的實驗，得出使用10%氨水甲醇方法提取在各種人工色素的提取中效果均為最優(yōu)的結(jié)論。對于含糖量高、提取困難的蜜餞樣品，可以通過堿性甲醇溶液提取的方法進(jìn)行提取，需要進(jìn)行說明的是，準(zhǔn)確測定蜜餞中的人工著色劑，不僅可以優(yōu)化改善提取方法，也可以從樣品的制備角度進(jìn)行改善，建議在樣品冷凍狀態(tài)下進(jìn)行制樣，在常溫制樣常常不能充分均質(zhì)，樣品仍為粘連的塊狀，而非細(xì)小的粉末狀，這對于準(zhǔn)確測定也是有較大影響。