熊 鷹，劉 麗，胡曉靜，孟懷書，羅 霞

近年來(lái)卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，相關(guān)研究顯示，POF發(fā)病率為1.92%，發(fā)病人群集中于生育期女性，月經(jīng)不規(guī)律、閉經(jīng)、絕經(jīng)是此類患者常有的臨床表現(xiàn)，給患者心理、精神造成重大不良影響[1-2]。目前，臨床上對(duì)POF并無(wú)有效便捷的診斷手段，多依靠患者的臨床表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)估，無(wú)法準(zhǔn)確診斷，從而影響治療，導(dǎo)致患者預(yù)后情況差[3]。尋找合適的指標(biāo)對(duì)POF的預(yù)后進(jìn)行有效評(píng)估，具有重要臨床意義?？姑缋展芗に?AMH)為評(píng)價(jià)卵巢儲(chǔ)備功能的敏感性指標(biāo)，可對(duì)卵泡生長(zhǎng)發(fā)育起到調(diào)節(jié)控制作用[4]。近年來(lái)有報(bào)道顯示，細(xì)胞免疫及免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子可參與POF發(fā)生發(fā)展[5]。已有報(bào)道表明，淋巴細(xì)胞亞群的改變可促進(jìn)POF進(jìn)展，但臨床中對(duì)于相關(guān)細(xì)胞因子的研究并不全面[6]。本文通過(guò)對(duì)比POF患者與健康人群的AMH、干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)水平差異，分析AMH、IFN-γ、IL-2檢測(cè)在POF診斷以及病情評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值，旨在為POF診療提供新思路，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年2月—2020年3月重慶市江津區(qū)婦幼保健院收治的POF 109例為POF組，病程0.5～5.0(2.26±1.22)年；年齡24～38(30.95±2.26)歲。①納入標(biāo)準(zhǔn)：符合POF診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：年齡≤40歲絕經(jīng)者，血清雌二醇(E2)水平低下、卵泡刺激素(FSH)>40 U/L、泌乳素水平正常，內(nèi)外生殖器第二性征明顯退化，合并圍絕經(jīng)期綜合征癥狀；臨床資料完整；均知曉同意本次研究，并簽署同意書。②排除標(biāo)準(zhǔn)：合并生殖器官腫瘤者；合并嚴(yán)重心血管疾病者；存在卵巢手術(shù)史者；合并子宮內(nèi)膜增生、多囊卵巢綜合征等疾病者。另選取同期在本院進(jìn)行健康體檢月經(jīng)周期正常女性100例為對(duì)照組，年齡23～38(30.21±2.14)歲。2組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 所有入選者在月經(jīng)周期前，抽取晨起外周靜脈血液標(biāo)本，使用離心機(jī)以3000 r/min離心10 min，獲取上清液，保存待測(cè)。IFN-γ、IL-2均使用放射免疫法檢測(cè)，試劑購(gòu)自比利時(shí)M EDGEN IX公司，AMH使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)；黃體生成素(LH)、FSH、E2使用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒均購(gòu)自貝克曼庫(kù)爾特商貿(mào)(中國(guó))有限公司。竇狀卵泡(AFC)數(shù)目檢測(cè)：在月經(jīng)周期第3天進(jìn)行陰道超聲檢查，檢測(cè)AFC直徑，統(tǒng)計(jì)直徑0.2～1.0 cm的AFC數(shù)目。

1.3觀察指標(biāo) ①比較POF組與對(duì)照組AMH、IFN-γ、IL-2水平。②比較POF組與對(duì)照組性激素水平及AFC數(shù)目。③分析AMH、IFN-γ、IL-2與性激素及AFC的相關(guān)性。④分析AMH、IFN-γ聯(lián)合IL-2檢測(cè)對(duì)POF的診斷價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1POF組與對(duì)照組AMH、IFN-γ、IL-2水平比較 POF組IFN-γ水平明顯高于對(duì)照組，AMH、IL-2水平明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 POF組與對(duì)照組AMH、IFN-γ、IL-2水平比較

2.2POF組與對(duì)照組性激素水平及AFC數(shù)目比較 POF組LH、FSH水平明顯高于對(duì)照組，E2水平明顯低于對(duì)照組，AFC數(shù)目明顯少于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表2。

表2 POF組與對(duì)照組性激素水平及AFC數(shù)目比較

2.3POF患者AMH、IFN-γ、IL-2與性激素、AFC的相關(guān)性 POF患者AMH、IL-2與LH、FSH呈負(fù)相關(guān)，與E2、AFC呈正相關(guān)(P<0.05，P<0.01)；IFN-γ與LH、FSH呈正相關(guān)，與E2、AFC呈負(fù)相關(guān)(P<0.05，P<0.01)。見(jiàn)表3。

表3 POF患者AMH、IFN-γ、IL-2與性激素、AFC的相關(guān)性分析

2.4AMH、IFN-γ、IL-2檢測(cè)對(duì)POF的診斷價(jià)值 依據(jù)ROC曲線分析可知，AMH、IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)診斷POF敏感度和特異度分別為96.32%、80.41%，曲線下面積為0.874(95%CI：0.785，0.963)，明顯高于三者單獨(dú)檢測(cè)。見(jiàn)表4及圖1。

表4 AMH、IFN-γ、IL-2檢測(cè)對(duì)POF的診斷價(jià)值分析

圖1 AMH、IFN-γ、IL-2檢測(cè)診斷POF的ROC曲線

3 討論

AMH是由胚胎中初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞分泌，隨著年齡增加，AMH水平逐漸下降，絕經(jīng)后AMH消失[8]。有實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，建立POF大鼠模型后，對(duì)其進(jìn)行激素治療，在此過(guò)程中發(fā)現(xiàn)AMH的分泌水平并未改變，但大鼠的FSH、LH水平下調(diào)，E2水平升高[9]。提示外源性激素并不會(huì)對(duì)AMH的分泌造成影響，相比其他性激素而言，即使處于月經(jīng)周期AMH的波動(dòng)也極小，因此使用AMH評(píng)估卵巢功能的敏感度較高[10]。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，在POF患者中AMH、E2表達(dá)水平明顯降低，而FSH、LH表達(dá)水平則呈明顯上調(diào)的趨勢(shì)，提示在常規(guī)性激素指標(biāo)未能診斷POF時(shí)，AMH已提示卵巢功能衰退[11]。本研究結(jié)果也表明，在POF患者中AMH水平明顯降低，與上述研究結(jié)果相符。

本研究中POF患者的IFN-γ水平明顯高于對(duì)照組，而IL-2水平則明顯低于對(duì)照組，與以往研究結(jié)果相符[12]。還有研究結(jié)果證明，自身免疫功能異常也可導(dǎo)致POF發(fā)生，Zp3致敏的特異性T淋巴細(xì)胞可導(dǎo)致卵巢損傷，而在受損卵巢中IFN-γ、腫瘤壞死因子-α、IL-1β等mRNA表達(dá)水平可明顯升高[13]。有研究發(fā)現(xiàn)，IFN-γ、IL-2與抗卵巢抗體效價(jià)有高度相關(guān)性，IFN-γ與IL-2之間也存在高度相關(guān)性[14]。在正常情況下卵泡從基礎(chǔ)卵泡發(fā)展成為成熟卵泡，再到排卵、閉鎖，在此過(guò)程中細(xì)胞因子均完全參與，可利用內(nèi)分泌、旁分泌或是自分泌來(lái)實(shí)現(xiàn)調(diào)控[15]。

LIU等[16]研究發(fā)現(xiàn)，IFN-γ導(dǎo)致某些細(xì)胞因子被激活，引發(fā)了卵泡閉鎖的現(xiàn)象。如果機(jī)體免疫功能異常，CD4+ T淋巴細(xì)胞會(huì)被卵巢的抗原激活，隨著其細(xì)胞數(shù)量不斷地增加，可直接作用于B淋巴細(xì)胞導(dǎo)致免疫球蛋白分泌，以及細(xì)胞的生殖、分化從而誘導(dǎo)多種殺傷細(xì)胞激活，最終導(dǎo)致卵巢抗原靶細(xì)胞(顆粒細(xì)胞、黃體細(xì)胞、生產(chǎn)甾體激素細(xì)胞以及卵細(xì)胞)的凋亡、損傷[17-18]。卵巢過(guò)度損傷后，會(huì)引起卵泡過(guò)度閉鎖進(jìn)而出現(xiàn)排卵障礙，最終導(dǎo)致POF發(fā)生或引起不孕。AFC數(shù)目對(duì)POF卵巢功能的診斷也具有較高敏感度和特異度，在POF患者中AFC數(shù)目明顯減少。通過(guò)相關(guān)性分析可知，POF患者AMH、IL-2與LH、FSH呈負(fù)相關(guān)，與E2、AFC呈正相關(guān)；IFN-γ與LH、FSH呈正相關(guān)，與E2、AFC呈負(fù)相關(guān)。提示AMH、IFN-γ、IL-2對(duì)卵巢功能評(píng)估具有一定參考價(jià)值。進(jìn)一步行ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，AMH、IFN-γ、IL-2均可為POF臨床診斷提供參考，三者聯(lián)合檢測(cè)診斷POF的敏感度和特異度分別為96.32%、80.41%，曲線下面積為0.874(95%CI：0.785，0.963)，提示三者聯(lián)合能有效提高診斷效能。

綜上所述，AMH、IFN-γ、IL-2可反映POF患者的卵巢儲(chǔ)備功能，三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)POF的早期診斷及嚴(yán)重程度評(píng)估具有重要參考價(jià)值。