程廣杰，苑 平，吳 芬

山東省聊城市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東聊城 252000

2型糖尿病是臨床上常見(jiàn)的代謝疾病，隨著人們生活水平的提高以及飲食結(jié)構(gòu)的改變，其發(fā)病率也逐年升高，預(yù)計(jì)到2030年中國(guó)糖尿病患者將達(dá)到1.405億[1]。糖尿病微血管病變是2型糖尿病特異性的并發(fā)癥，病變進(jìn)展難以逆轉(zhuǎn)，主要表現(xiàn)為毛細(xì)血管細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的合成以及基底膜的增厚[2]。早期識(shí)別微血管病變是2型糖尿病管理中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，但目前臨床上仍然缺乏有效的預(yù)測(cè)指標(biāo)。有研究顯示，微小核糖核酸152(miR-152)可通過(guò)調(diào)節(jié)葡萄糖而降低葡萄糖對(duì)胰島素分泌的刺激，其異常表達(dá)與糖尿病發(fā)生、進(jìn)展相關(guān)[3]；幾丁質(zhì)酶1(CHIT1)具有調(diào)控自身免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用，參與糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展[4]；血清淀粉樣蛋白A(SAA)在2型糖尿病患者中可異常表達(dá)，與血脂代謝紊亂及炎癥因子異常分泌相關(guān)，可用于病情監(jiān)測(cè)及評(píng)估[5]。本研究通過(guò)檢測(cè)2型糖尿病微血管并發(fā)癥患者中的miR-152、CHIT1、SAA水平，探討其臨床價(jià)值，以期為臨床醫(yī)師的診療工作提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1一般資料 選擇2020年1月至2021年6月本院收治的168例2型糖尿病患者為研究對(duì)象，均符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南(2020年版)》[6]的診斷標(biāo)準(zhǔn)。再按照是否存在微血管并發(fā)癥分為兩組：一組為單純糖尿病組共88例，年齡30～70歲；另一組為糖尿病微血管并發(fā)癥組共80例，年齡30～70歲，均符合《基層糖尿病微血管病變篩查與防治專家共識(shí)(2021年版)》[7]的診斷標(biāo)準(zhǔn)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)備案，所有入組的研究對(duì)象知情同意。

1.2觀察指標(biāo) 觀察指標(biāo)主要包括性別、年齡、病程、身高、體質(zhì)量、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙史、飲酒史、是否合并高血壓等。

1.3檢測(cè)方法 所有入組的研究對(duì)象均在次日早晨8:00左右空腹抽取靜脈血3 mL，注入紅色干燥試管，3 000 r/min離心10 min后取上清液保存于-80 ℃統(tǒng)一檢測(cè)。采用美國(guó)ABI公司7500型熒光定量PCR儀檢測(cè)miR-152水平，檢測(cè)方法為實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法。采用ELISA的方法檢測(cè)CHIT1水平，試劑盒由上海酶聯(lián)免疫生物科技有限公司提供，酶標(biāo)儀采用法國(guó)Biomerieux公司生產(chǎn)的mini-VIDAS型全自動(dòng)酶標(biāo)儀。采用日立7600全自動(dòng)生化分析儀及其配套試劑盒檢測(cè)SAA水平，檢測(cè)方法為散射比濁法。所有檢測(cè)項(xiàng)目均由同一檢驗(yàn)師在同一臺(tái)儀器上完成，室內(nèi)質(zhì)控、陰陽(yáng)對(duì)照均在控。

2 結(jié) 果

2.1兩組研究對(duì)象的一般資料比較 兩組研究對(duì)象的年齡、性別比例、吸煙史、飲酒史比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩組病程、BMI、合并高血壓情況比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組研究對(duì)象的一般資料比較

2.2兩組研究對(duì)象的miR-152、CHIT1、SAA水平比較 糖尿病微血管并發(fā)癥組患者的miR-152、CHIT1、SAA水平明顯高于單純糖尿病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組研究對(duì)象的miR-152、CHIT1、SAA水平比較

2.3糖尿病微血管病變發(fā)生的影響因素分析 以糖尿病患者是否并發(fā)微血管病變?yōu)橐蜃兞?，以病程、BMI、高血壓、miR-152、CHIT1、SAA為自變量進(jìn)行二分類Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，miR-152、CHIT1、SAA是糖尿病微血管病變發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 糖尿病微血管病變發(fā)生的影響因素分析

2.4miR-152、CHIT1、SAA對(duì)糖尿病微血管病變的預(yù)測(cè)價(jià)值 利用Logistic回歸計(jì)算得出miR-152、CHIT1、SAA聯(lián)合檢測(cè)時(shí)的方程為Y=1.26×miR-152+0.78×CHIT1+0.066×SAA-1.21，由此得到預(yù)測(cè)概率繪制miR-152、CHIT1、SAA 預(yù)測(cè)糖尿病微血管病變的ROC曲線，結(jié)果顯示，三者聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積(AUC)為0.856，靈敏度和特異度可達(dá)85.1%、70.2%，見(jiàn)表4。

表4 miR-152、CHIT1、SAA對(duì)糖尿病微血管病變的預(yù)測(cè)價(jià)值分析

3 討 論

糖尿病是一類由遺傳和(或)環(huán)境因素引起的以血糖持續(xù)性升高為特征的代謝類疾病，以2型糖尿病居多。微血管病變是其特異性的并發(fā)癥，主要表現(xiàn)為微血管基底膜增厚以及炎性血管的周圍纖維化反應(yīng)，可累及全身各個(gè)器官[8]。這主要是由于高血糖水平代謝產(chǎn)生的糖毒性產(chǎn)物可能通過(guò)激活多元醇和己糖通路最終導(dǎo)致血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)增強(qiáng)而誘發(fā)微血管病變[9]。一旦發(fā)生常常難以逆轉(zhuǎn)，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。監(jiān)控糖尿病患者是否并發(fā)微血管病變對(duì)于改善患者生活質(zhì)量，提高患者生存率顯得尤為重要。但目前仍缺乏高價(jià)值的血清學(xué)標(biāo)志物，因此臨床診斷及病情監(jiān)測(cè)比較困難。

隨著生物分子學(xué)的飛速發(fā)展，微小核糖核酸(microRNA)逐漸成為研究熱點(diǎn)。microRNA可通過(guò)結(jié)合靶基因而調(diào)控靶基因的表達(dá)，與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[10]。miR-152在胰島β細(xì)胞和微血管內(nèi)皮細(xì)胞生理病理功能中發(fā)揮重要作用，在糖尿病微血管并發(fā)癥患者中顯著升高，是糖尿病微血管病變的潛在生物學(xué)標(biāo)志物[11]。CHIT1是來(lái)源于人體巨噬細(xì)胞的一種酶，是巨噬細(xì)胞活化的標(biāo)志物，在糖尿病患者發(fā)生血管病變的過(guò)程中，血糖水平持續(xù)升高將誘發(fā)炎癥反應(yīng)，尤其是巨噬細(xì)胞活化[12]。SAA是一種由肝細(xì)胞合成的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在免疫應(yīng)答、炎癥防御、脂質(zhì)代謝等方面發(fā)揮作用，可作為診斷感染、糖尿病腎病、移植排斥反應(yīng)以及惡性腫瘤等多種疾病的生物學(xué)標(biāo)志物[13]。本研究采用miR-152、CHIT1、SAA對(duì)糖尿病微血管病變患者進(jìn)行診斷，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，3種指標(biāo)在糖尿病微血管病變患者中的水平明顯升高，這與李凌等[11]、胡雅楠等[12]、郝怡然等[13]的結(jié)論一致，說(shuō)明這些指標(biāo)與疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。推測(cè)其原因可能是由于糖尿病患者血糖水平持續(xù)性升高，引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，巨噬細(xì)胞活化、炎癥防御啟動(dòng)，造成微血管障礙甚至微血管病變。黃珂等[14]的研究顯示，糖尿病病程、糖化血紅蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白為老年2型糖尿病微血管病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，能預(yù)測(cè)疾病發(fā)生發(fā)展。本研究采用Logistic回歸分析結(jié)果顯示，糖尿病病程不是糖尿病微血管病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，這可能是由于入選研究對(duì)象存在差異造成的，有待日后擴(kuò)大樣本量進(jìn)行佐證。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)miR-152、CHIT1、SAA與疾病進(jìn)展密切相關(guān)，是發(fā)生糖尿病微血管病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。臨床上應(yīng)密切監(jiān)測(cè)這些指標(biāo)的變化，預(yù)防糖尿病患者發(fā)生嚴(yán)重的微血管病變，影響患者預(yù)后。本研究還利用ROC曲線分析miR-152、CHIT1、SAA的預(yù)測(cè)價(jià)值，結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度和特異度可達(dá)85.1%、70.2%，優(yōu)于各指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)的預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，miR-152、CHIT1、SAA水平在2型糖尿病微血管并發(fā)癥患者中明顯升高，是影響糖尿病微血管并發(fā)癥患者的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，聯(lián)合檢測(cè)有助于預(yù)后評(píng)估，值得臨床推廣應(yīng)用。但本研究樣本量較小且研究對(duì)象來(lái)自同一家醫(yī)院，可能存在選擇偏倚，待日后進(jìn)行多中心、大樣本量研究來(lái)驗(yàn)證結(jié)論的正確性。