高志強

（莘縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山東 莘縣 252400）

池塘養(yǎng)殖已成為我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要養(yǎng)殖方式之一[1]。但池塘養(yǎng)殖存在一些弊端，如水體環(huán)境、營養(yǎng)、微生物感染等，以上這些不利因素會導(dǎo)致魚類機體疾病頻發(fā)，甚至引起大規(guī)模死亡，限制了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。因此，如何提高池塘養(yǎng)殖水產(chǎn)生物機體的抗應(yīng)激能力、抗病能力至關(guān)重要。水產(chǎn)養(yǎng)殖中，經(jīng)常使用抗生素預(yù)防和治療水產(chǎn)生物疾病，但長期過量使用或濫用導(dǎo)致了一系列問題，如耐藥菌株的產(chǎn)生、抗生素殘留、環(huán)境污染等。研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌可以抑制動物腸道有害菌的繁殖，也能分泌代謝產(chǎn)物和抗生素，對水產(chǎn)養(yǎng)殖具有很好的效果。大量研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌可以提高魚類機體腸道黏膜免疫，增強機體抗應(yīng)激能力，提高機體免疫力和抗氧化能力，改善餌料轉(zhuǎn)化率，提高血清非特異性酶活力[2]；益生菌可以通過調(diào)節(jié)炎癥因子的分泌和表達調(diào)節(jié)機體的先天性免疫，增強機體腸道抗氧化應(yīng)激的能力。鯉魚是我國主要水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一，因適應(yīng)能力強、生長快速、肉質(zhì)鮮美備受研究者的關(guān)注和研究。目前，枯草芽孢桿菌在鯉魚養(yǎng)殖方面的研究甚少，因此，本試驗以鯉魚為受試對象，探究鯉魚基礎(chǔ)餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌對其機體抗氧化指標(biāo)的影響，為枯草芽孢桿菌在鯉魚養(yǎng)殖中的合理應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)參考。

1 試驗材料與試驗方法

1.1 試驗材料

本試驗所使用的的枯草芽孢桿菌由無錫中水漁業(yè)科技有限公司提供，有效活菌數(shù)≥1.0×1010CFU/g。

試驗鯉魚購自山東種工漁業(yè)發(fā)展有限公司。

1.2 試驗設(shè)計

試驗選取體重、體況相近的健康鯉魚600尾，按照單因素隨機試驗原則，將其均分為4組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)30尾鯉魚。對照組鯉魚飼喂基礎(chǔ)餌料，枯草芽孢桿菌組鯉魚依次飼喂含有0.5%（試驗1組）、1.0%（試驗2組）和1.5%（試驗3組）枯草芽孢桿菌的基礎(chǔ)餌料。試驗周期為4周，試驗結(jié)束后檢測鯉魚機體的抗氧化功能。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗前，需要對用于養(yǎng)殖鯉魚的水族箱清洗、消毒。試驗鯉魚馴化10天后進行正式試驗，馴化期間投喂基礎(chǔ)餌料。試驗鯉魚的養(yǎng)殖水環(huán)境為室內(nèi)循環(huán)淡水，水溫控制在21℃～24℃，pH值控制在7.2～7.5，溶氧含量大于5.5 mg/L，氨氮含量低于0.28 mg/L，每日換水量約為總水量的1/3。每日早、中、晚試驗鯉魚飼喂3次，飼喂量約為魚體質(zhì)量的3.4%～4.5%。

1.4 檢測項目

試驗4周結(jié)束后，試驗鯉魚禁食12小時，每重復(fù)中選擇3尾鯉魚，尾靜脈采集血液，在4℃條件下4000 r/min離心6 min，-20℃冰箱保存，用于血清抗氧化指標(biāo)的檢測。采用南京建成生物工程研究所的試劑盒進行抗氧化指標(biāo)的檢測（總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶及丙二醛），檢測步驟及方法嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.5 數(shù)據(jù)處理

抗氧化數(shù)據(jù)指標(biāo)采用SPSS 24.0進行統(tǒng)計分析，使用LSD法多重比較，P＜0.05表示此指標(biāo)各組數(shù)據(jù)差異顯著，結(jié)果以平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤呈現(xiàn)。

2 結(jié)果與分析

餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌對鯉魚血清抗氧化指標(biāo)的影響見表1。鯉魚餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌可以不同程度地增強鯉魚機體的抗氧化能力。其中，試驗2組和試驗3組鯉魚血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組有提高的趨勢（P＞0.05）；試驗2組和試驗3組鯉魚血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于對照組和試驗1組（P＜0.05），試驗1組與對照組差異不顯著（P＞0.05）；試驗2組鯉魚血清中過氧化氫酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），試驗1組和試驗3組有比對照組提高的趨勢（P＞0.05）；試驗組鯉魚血清中丙二醛含量均比對照組顯著降低（P＜0.05）。研究表明，鯉魚餌料中添加1.0%的枯草芽孢桿菌對機體抗氧化功能效果較好。

表1 餌料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌對鯉魚血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

動物機體產(chǎn)生氧化應(yīng)激易導(dǎo)致機體衰老，并發(fā)生疾病，主要受超氧陰離子和OH·的威脅[2]。動物機體內(nèi)存在清除自由基及脂質(zhì)氧化物的抗氧化酶類，主要包括CAT、SOD、GSH-Px等，保護機體免受氧化損傷[3]。本研究中，試驗2組和試驗3組鯉魚血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組；試驗2組和試驗3組鯉魚血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于對照組和試驗1組；試驗2組鯉魚血清中過氧化氫酶活性顯著高于對照組；試驗組鯉魚血清中丙二醛含量均比對照組顯著降低。研究表明，鯉魚餌料中添加1.0%的枯草芽孢桿菌對機體抗氧化功能效果較好。張冬梅等[4]研究發(fā)現(xiàn)，在大口黑鱸養(yǎng)殖中，使用適量的枯草芽孢桿菌可以提高腸道組織的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶及過氧化氫酶活性，提高了機體的抗氧化能力，且枯草芽孢桿菌的最適添加量為1.0%，于本研究結(jié)論類似。表明在水產(chǎn)生物養(yǎng)殖中使用適量的枯草芽孢桿菌可以增強機體的抗氧化功能，可與枯草芽孢桿菌改善了機體腸道健康，增強了機體對抗應(yīng)激能力。

4 結(jié)論

本試驗條件下，在鯉魚餌料中使用適宜水平的枯草芽孢桿菌可以顯著增強機體血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶活性，顯著降低丙二醛含量，增強了鯉魚機體的抗氧化功能，且枯草芽孢桿菌的最適添加量為1.0%。