陳軍，王敬亞，卜東明，楊增

(1.蕪湖市第二人民醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科, 安徽 蕪湖 241000；2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)院, 湖南 長(zhǎng)沙 410008)

干燥綜合征(sjogren's syndrome，SS)屬慢性炎癥性自身免疫疾病，其臨床表現(xiàn)以眼口干燥為主。目前SS發(fā)病機(jī)制尚不清楚，認(rèn)為可能與遺傳、病毒感染、環(huán)境及自身免疫等有關(guān)[1]；并認(rèn)為該病若不及時(shí)進(jìn)行有效治療，可誘發(fā)肺間質(zhì)病變、橋本甲狀腺炎等一系列并發(fā)癥。針對(duì)SS，臨床普遍認(rèn)為免疫功能紊亂是導(dǎo)致該病發(fā)生發(fā)展的主要基礎(chǔ)，加之受炎癥因子的影響，進(jìn)一步刺激了機(jī)體的免疫功能，即表現(xiàn)出抗SSA、SSB抗體水平顯著升高；也有相關(guān)研究表示，抗SSA、SSB抗體水平升高受唇腺腺體破壞和組織形態(tài)學(xué)改變影響[2]；另外，在抗SSA、SSB抗體水平升高的影響下，IgG蛋白含量也會(huì)隨之增加。目前關(guān)于抗SSA、SSB抗體及IgG表達(dá)與唇腺病理關(guān)系的文獻(xiàn)報(bào)道頗少，尚不清楚唇腺病理是否會(huì)直接影響抗SSA、SSB抗體、IgG表達(dá)。據(jù)此，本研究選取85例疑似SS患者作為研究對(duì)象，探討SS患者抗SSA/SSB抗體及IgG與唇腺活檢的關(guān)系，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2018年1月—2021年12月診治的85例疑似SS患者，按照唇腺病理活檢(labial salivary gland biopsy，LSGB)結(jié)果分為陽性組(LSGB≥3級(jí)，n=53)與陰性組(LSGB<3級(jí)，n=32)，并根據(jù)陽性組的SS唇腺病理損傷程度分為輕度組(n=23)和重度組(n=30)。SS診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合干燥綜合征診斷及治療指南中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，經(jīng)臨床病理確診。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)認(rèn)知功能正常;(2)>18 歲;(3)愿意接受病理活檢。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并系統(tǒng)性紅斑狼瘡;(2)患有惡性腫瘤;(3)伴有腦卒中、顱內(nèi)感染等疾病。

1.2 研究方法

1.2.1基礎(chǔ)資料調(diào)查 設(shè)計(jì)統(tǒng)一的病例調(diào)查表，由專業(yè)醫(yī)師收集受試者臨床資料，包括抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG及唇腺活檢病理結(jié)果。

1.2.2血清指標(biāo)測(cè)定 于入院次日采集患者空腹靜脈血3 mL，經(jīng)3 000 r/min離心10 min，取上清液。選擇免疫散射比濁法,采用貝克曼庫爾特特定蛋白分析系統(tǒng)及配套IgG試劑盒測(cè)定IgG，歐蒙免疫印跡法自動(dòng)操作儀測(cè)定抗SSA抗體、抗SSB抗體，試劑盒購于德國歐蒙公司。

1.2.3病理活檢 對(duì)受試者唇部進(jìn)行常規(guī)消毒，行局部麻醉后于下唇黏膜距離一側(cè)口角和下頜前庭溝分別為1 cm和0.5 cm交界處做一切口，取唇腺3～5 枚，縫合切口后將腺體標(biāo)本置于10%甲醛溶液中固定，包埋、切片、行蘇木素伊紅(hematoxylin and eosin，HE)染色，病理切片總面積≥4 mm2，制片后下顯微鏡下觀察。根據(jù)Chisholm標(biāo)準(zhǔn)和按照淋巴細(xì)胞(lymphocytes，LC)浸潤(rùn)程度將唇腺病理變化分為0～4 級(jí)：0 級(jí)表示無LC浸潤(rùn)，1 級(jí)表示輕度LC浸潤(rùn)，2 級(jí)表示中度LC浸潤(rùn)、但未形成灶性，3 級(jí)表示4 mm2有一個(gè)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)灶；4 級(jí)表示4 mm2有一個(gè)以上淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)灶，其中每個(gè)浸潤(rùn)灶含有50 個(gè)淋巴細(xì)胞和組織細(xì)胞,計(jì)數(shù)唇腺標(biāo)本淋巴細(xì)胞灶數(shù)目；LSGB≥3級(jí)為陽性、LSGB<3級(jí)為陰性[4]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 SS陽性率

85例疑似SS患者經(jīng)唇腺活檢確診為SS陽性(LSGB≥3級(jí))53例，陽性率為62.35%;陰性32例，陰性率37.65%；其中陽性病例中，根據(jù)Chisholm標(biāo)準(zhǔn)和按照LC程度劃分為輕度組23例(43.40%)、重度組30例(56.60%)。

2.2 臨床資料

陽性組與陰性組的性別、年齡、BMI等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；輕度組與重度組SS患者的性別、年齡、BMI等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 SS陽性組與陰性組、SS輕度組與重度組的一般資料比較

2.3 抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG

SS陽性組和陰性組抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG比較，陽性組>陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 SS陽性組和陰性組抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG水平比較

2.4 logistic回歸分析

以LSGB結(jié)果為因變量(賦值：陽性=1、陰性=2)，以抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG為協(xié)變量，經(jīng)二元logistic回歸分析顯示，抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG升高會(huì)對(duì)唇腺病理損傷產(chǎn)生影響(P<0.05)。見表3。

表3 LSGB與抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG的關(guān)系

2.5 唇腺病理表現(xiàn)

85例疑似SS患者中，LSGB陰性32例，LSGB 0～2級(jí)，表現(xiàn)為腺泡大小基本正常、無萎縮、導(dǎo)管無擴(kuò)張，且導(dǎo)管上皮細(xì)胞無增生、間質(zhì)無或有少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。LSGB陽性53例，其中輕度唇腺損害病理，LSGB 3級(jí)，表現(xiàn)為腺體輕度萎縮、腺泡呈不規(guī)則、大小不等，間質(zhì)及導(dǎo)管周圍可見少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)灶，導(dǎo)管擴(kuò)張，導(dǎo)管上皮細(xì)胞無增生；重度唇腺損害病理，LSGB 4級(jí)，表現(xiàn)為腺體萎縮明顯、腺泡大小不等，導(dǎo)管擴(kuò)張、導(dǎo)管上皮細(xì)胞增生，間質(zhì)內(nèi)伴有彌散性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，多個(gè)灶性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。見圖1。

注：A為L(zhǎng)SGB 0～2級(jí)，B為L(zhǎng)SGB 3級(jí)，C為L(zhǎng)SGB 4級(jí)。

2.6 唇腺損傷程度與抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平

輕度組和重度組SS患者抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平比較，輕度組<重度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 兩組SS患者抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平比較

2.7 抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平與唇腺損傷病理程度的相關(guān)性

Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平與唇腺損傷病理嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

表5 抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG與唇腺損傷病理程度的相關(guān)性

3 討論

經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，SS患病率約為0.29%～0.77%，且以女性多見[5]。據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，男女性別之比約為1∶9或1∶10[6]。目前臨床上對(duì)于該病發(fā)病原因尚未完全闡明，僅認(rèn)為該病是一種以浸潤(rùn)炎性細(xì)胞和破壞腺體組織為主而引起生理功能減退、器官損傷的彌漫性結(jié)締組織病，即隨著病情發(fā)展可侵犯淚腺、唾液腺等外分泌腺體，同時(shí)也會(huì)引起B(yǎng)淋巴細(xì)胞異常增殖、組織淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，進(jìn)而引發(fā)口唇干燥、口渴飲水不止、無法進(jìn)食干硬食物、腮腺腫大、舌質(zhì)干裂等一系列臨床表現(xiàn)。其中，唇腺組織為反映分泌功能減弱的內(nèi)分泌腺，在正常情況下具有清潔口腔、潤(rùn)濕及抗炎的作用，但在SS患者中，受組織淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)影響，常導(dǎo)致外分泌腺的腺體及導(dǎo)管上皮萎縮、破壞，進(jìn)一步引起口干、眼干等癥狀[7]。目前臨床主要是依賴唇腺腺體破壞表現(xiàn)診斷SS，譬如在病理組織形態(tài)見外分泌腺腺體萎縮，且LSGB≥1個(gè)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)灶，周圍見高度淋巴細(xì)胞聚集及淋巴濾泡樣生長(zhǎng)中心形成。但由于其屬有創(chuàng)檢查，部分患者依從性相對(duì)較差，臨床無法常規(guī)開展，加之標(biāo)本采集時(shí)間及方法各異，可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[8]?？筍SA、SSB抗體為臨床用于輔助診斷SS的常用生物標(biāo)志物，除出現(xiàn)SS患者血清中，也常出現(xiàn)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫性肌炎等其他免疫性疾病中[9]。在本研究結(jié)果中可見，確診為陽性SS患者，其血清抗SSA抗體、抗SSB抗體水平顯著高于陰性，說明上述抗體在SS患者中呈高表達(dá)樣。針對(duì)其作用機(jī)制分析，可能與唇腺炎性浸潤(rùn)上皮細(xì)胞，通過促進(jìn)B細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞和激活B細(xì)胞，引起B(yǎng)淋巴細(xì)胞亢進(jìn)有關(guān)，通過產(chǎn)生大量的抗體，如抗SSA、SSB抗體等，誘發(fā)SS疾病[110]。另外，在本研究結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，抗SSA、SSB抗體水平會(huì)隨著唇腺損傷程度而發(fā)生顯著改變，即重度唇腺損傷患者的抗SSA抗體、抗SSB抗體水平顯著高于輕度組，提示監(jiān)測(cè)抗SSA、SSB抗體在診斷唇腺病理損害進(jìn)展中具有重要價(jià)值[11-12]。據(jù)相關(guān)研究表示，SS患者因機(jī)體存在多種自身抗體，其免疫球蛋白可出現(xiàn)異常增高現(xiàn)象，其中以lgG含量升高最為常見[13]。在本研究結(jié)果中可見，陽性組的IgG含量顯著高于陰性組，針對(duì)其升高機(jī)制分析，可能與其是免疫應(yīng)答中產(chǎn)生抗體的主要成分有關(guān)，因此在臨床上監(jiān)測(cè)SS患者的IgG表達(dá)十分必要[14]。

基于對(duì)抗SSA、SSB抗體及IgG蛋白的研究，發(fā)現(xiàn)這些指標(biāo)水平會(huì)隨著唇腺受累程度而發(fā)生改變，即上述已說的抗SSA、SSB抗體會(huì)隨著唇腺損傷程度發(fā)生改變，而IgG蛋白含量也會(huì)受多種自身抗體和細(xì)胞因子調(diào)控異常而發(fā)生改變[15]。故在研究結(jié)果中可見，重度組IgG水平明顯高于輕度組。但對(duì)于上述結(jié)果仍不能確切說明抗SSA、SSB抗體及IgG蛋白表達(dá)水平是受唇腺損傷嚴(yán)重程度而發(fā)生顯著的異常升高[16]。因此本研究將SS患者唇腺損傷病理程度和抗SSA、SSB抗體、IgG納入Spearman相關(guān)性模型中檢驗(yàn)，結(jié)果顯示抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG與唇腺損傷病理嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，證實(shí)了抗SSA、SSB抗體及IgG水平會(huì)隨唇腺損傷程度而變化說法的可靠性。同時(shí)也提示臨床可通過觀察上述指標(biāo)水平為臨床判斷唇腺損傷程度提供重要參考[17-18]。

綜上所述，SS患者的唇腺損傷病理程度與抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平相關(guān)，臨床可通過動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG水平，為臨床診治提供指導(dǎo)。