閆建全,劉 豪,陳力嘉,盧慧林,陳逢浩,侯軍曉,楊 蓉,歐陽(yáng)雄發(fā),歐陽(yáng)革成,孟 翔*
(1.廣東省科學(xué)院動(dòng)物研究所/廣東省動(dòng)物保護(hù)與資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣東省野生動(dòng)物保護(hù)與利用公共實(shí)驗(yàn)室,廣州 510260;2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,廣州 510642;3.廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,廣州 510006;4.廣州驕陽(yáng)農(nóng)業(yè)公司,廣州 510653;5.廣州歐聯(lián)生物科技有限公司,廣州 510520)
黃曲條跳甲Phyllotreta striolata(Fabricus)隸屬鞘翅目Coleoptera葉甲科Chrysomelidae,是嚴(yán)重為害白菜、蘿卜、甘藍(lán)等十字花科蔬菜的重要害蟲(chóng)之一[1]。黃曲條跳甲成蟲(chóng)主要取食植株地上部分,造成葉片孔洞;卵產(chǎn)于莖基部附近土壤,孵化幼蟲(chóng)于土壤中取食細(xì)根或根毛,導(dǎo)致根系吸水能力下降,引起植株地上部葉片萎焉枯死,嚴(yán)重影響蔬菜產(chǎn)量和質(zhì)量[2]。由于田間十字花科蔬菜大面積種植及其常年連作,導(dǎo)致黃曲條跳甲的發(fā)生及為害程度逐年加重,造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[3,4]。目前,化學(xué)農(nóng)藥仍舊是防治黃曲條跳甲的主要手段,但化學(xué)農(nóng)藥長(zhǎng)期、大量使用,不僅會(huì)增加黃曲條跳甲的抗藥性,還對(duì)生態(tài)環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品安全等產(chǎn)生負(fù)面影響[5]。因此,尋找黃曲條跳甲的新型綠色安全防治方法至關(guān)重要。
植物源甘油酯乳劑(以下簡(jiǎn)稱:植物油)是以醬油渣為原料提取植物甘油酯并乳化研制而成的生物源農(nóng)藥。其作用機(jī)理與礦物油相似,主要是通過(guò)物理封閉作用在害蟲(chóng)體表和卵外殼形成致密的油膜,阻塞害蟲(chóng)氣門和抑制卵外殼的正常氣體交換,導(dǎo)致生命力降低或缺氧窒息;還能夠溶解和破壞細(xì)胞膜造成細(xì)胞損傷,使害蟲(chóng)脫水死亡[6];此外,植物油還可以影響害蟲(chóng)的行為特性,干擾害蟲(chóng)的寄主定位,產(chǎn)卵等行為[7]。劉慧等[8]研究發(fā)現(xiàn)90%植物油蒸餾油乳劑150倍液能有效防治柑橘木虱Diaphorina citri(Kuwayama)卵、若蟲(chóng)和成蟲(chóng),且對(duì)雌蟲(chóng)的產(chǎn)卵有拒避作用。油乳劑除了具有殺蟲(chóng)活性外,其形成的乳化效果可以附著在真菌孢子表面并起到保護(hù)作用,使真菌孢子免受干燥和紫外線等不良環(huán)境的侵襲[9,10],還有利于孢子分散和施藥后在植物表面及昆蟲(chóng)體表的附著,增強(qiáng)真菌孢子對(duì)害蟲(chóng)的殺傷效果[11]。
利用昆蟲(chóng)病原微生物控制害蟲(chóng)是生物防治的重要方法之一,昆蟲(chóng)病原真菌類殺蟲(chóng)劑具有寄主范圍廣、持效期長(zhǎng)、不污染環(huán)境、不易產(chǎn)生抗藥性以及對(duì)人類和非靶標(biāo)生物相對(duì)安全等優(yōu)點(diǎn),具有廣闊的應(yīng)用前景[12]。金龜子綠僵菌Metarhizium anisopliae(以下簡(jiǎn)稱:綠僵菌)是一類重要的生防真菌,對(duì)害蟲(chóng)特別是寄居于土壤中的害蟲(chóng)具有較強(qiáng)的觸殺和拒食作用[13,14],但由于其作用效果緩慢、易受環(huán)境影響等原因,在生產(chǎn)實(shí)踐中對(duì)害蟲(chóng)的防控效果有限,嚴(yán)重制約其大面積的推廣和使用[15]。如何切實(shí)有效地發(fā)揮其在殺蟲(chóng)過(guò)程中的優(yōu)勢(shì),在害蟲(chóng)的可持續(xù)防控中發(fā)揮作用是目前綠僵菌使用的重點(diǎn)和難點(diǎn)。植物油乳劑在殺蟲(chóng)的同時(shí),其乳化作用還可能會(huì)改善綠僵菌所處的微環(huán)境,保護(hù)并增強(qiáng)綠僵菌孢子對(duì)害蟲(chóng)的殺傷作用。目前為止,有關(guān)植物源甘油酯乳劑與綠僵菌聯(lián)合使用能否顯著地增強(qiáng)對(duì)害蟲(chóng)的殺傷能力仍未見(jiàn)報(bào)道。
黃曲條跳甲是十字花科蔬菜重要的害蟲(chóng),目前主要通過(guò)噴施化學(xué)殺蟲(chóng)劑,調(diào)整農(nóng)業(yè)種植模式,利用信息素誘殺以及生物源農(nóng)藥等進(jìn)行防治[16-23]。但是這些防控措施結(jié)構(gòu)單一、生產(chǎn)成本較高,且害蟲(chóng)易產(chǎn)生耐藥性,從而導(dǎo)致黃曲條跳甲防治效果欠佳。因此,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,需要明確各種防控措施的作用機(jī)制,整合多種手段使其達(dá)到增效減量的效果,才能更好地滿足現(xiàn)代綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展的要求,達(dá)到控制害蟲(chóng)的目的[24]。本研究以農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境友好為防治目標(biāo),探究并對(duì)比了植物油乳劑和綠僵菌以及二者混配液對(duì)黃曲條跳甲的殺傷作用,發(fā)現(xiàn)植物油乳劑和綠僵菌混配液對(duì)黃曲條跳甲具有顯著的殺傷作用,且二者之間存在顯著的協(xié)同增效作用。本研究不僅為黃曲條跳甲的綠色防控提供技術(shù)參考,同時(shí)也為利用綠色殺蟲(chóng)劑之間的協(xié)同增效作用,尋找更有益的綠色殺蟲(chóng)方法提供了有益參考。
供試?yán)ハx(chóng):黃曲條跳甲采集于清遠(yuǎn)未噴任何藥劑的十字花科蔬菜地,并轉(zhuǎn)移至廣東省科學(xué)院動(dòng)物研究所實(shí)驗(yàn)室,利用盆栽美綠菜心飼養(yǎng)多代。
供試菌種:金龜子綠僵菌GDIZMMa-3由自然感病的黃曲條跳甲尸首中分離,并經(jīng)菌種鑒定和優(yōu)化獲得,菌種保存于廣東省科學(xué)院動(dòng)物研究所環(huán)境昆蟲(chóng)研究中心。菌種在PDA平板(26±1)℃,光周期14L∶10D下培養(yǎng)7 d,收集分生孢子粉備用。
供試蔬菜:“美綠菜心”分別在室內(nèi)盆栽和田間栽種,汕頭市實(shí)誠(chéng)種子有限公司。
培養(yǎng)基:馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar,PDA)培養(yǎng)基成分為馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g、水1000 mL。
藥劑及儀器:93%植物源甘油酯乳劑(廣州歐聯(lián)生物科技有限公司,廣東省科學(xué)院動(dòng)物研究所監(jiān)制);GXZ-380智能光照培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠);NM930-ZZM光學(xué)顯微鏡(深圳市晨晟光學(xué)儀器有限公司);XB-K-25血球計(jì)數(shù)板(上海求精生化試劑儀器有限公司);16 L背負(fù)式手動(dòng)噴霧器(臺(tái)州市大地機(jī)械有限公司);50 mL手持噴霧瓶(浙江三米容器有限公司)。
先將植物油與去離子水按照1∶1比例振蕩攪拌均勻,再稀釋至50倍、100倍、200倍、400倍和800倍的供試藥液,質(zhì)量濃度分別為18.20、9.10、4.55、2.28、1.14 g/L。選取大小相當(dāng)?shù)牟诵模款w菜心接入20 頭生育期(羽化5~10 d)和活性一致的黃曲條跳甲成蟲(chóng),并用25 cm×30 cm的網(wǎng)袋籠罩。使用手持噴霧器進(jìn)行不同植物油稀釋液噴霧,噴霧量為10 mL。噴霧后,放入(26±1)℃,光周期14 L∶10 D的光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。以0.02%吐溫-80無(wú)菌水為對(duì)照分別于處理后3、6、12、24、48 h統(tǒng)計(jì)死亡數(shù),并計(jì)算校正死亡率及毒力。每個(gè)處理重復(fù)3次。
取少量綠僵菌孢子粉,放入含0.02%吐溫-80的無(wú)菌水燒杯中,用磁力攪拌器攪拌,將孢子打散后用雙層擦鏡紙過(guò)濾,用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù),測(cè)量母液的濃度,配制成2×108孢子/mL的孢子懸浮液,再依次稀釋成2×108、1×108、5×107、2.5×107、1.25×107孢子/mL的孢子懸浮液備用。試蟲(chóng)的選取和噴霧方法同1.2。噴霧后,放入光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng),培養(yǎng)條件同1.2。以0.02%吐溫-80無(wú)菌水為對(duì)照,逐日檢查(連續(xù)觀察5 d)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的死亡情況并計(jì)算校正死亡率及毒力。每個(gè)處理重復(fù)3次。
根據(jù)1.2和1.3試驗(yàn)結(jié)果,分別選取濃度為0、2×108、1×108孢子/mL的綠僵菌孢子懸浮液和0、100、300倍液植物油稀釋液進(jìn)行混配,以0.02%吐溫-80無(wú)菌水作空白對(duì)照,對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)進(jìn)行毒力測(cè)定。每個(gè)處理設(shè)3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20頭成蟲(chóng)。試蟲(chóng)的選取和噴霧方法同1.2。噴霧后,放入光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng),培養(yǎng)條件同1.2。分別于處理后2、4、6、8、12、16、20、24 h統(tǒng)計(jì)死亡數(shù),并計(jì)算校正死亡率及毒力。每個(gè)處理重復(fù)3次。
田間藥效試驗(yàn)在廣州國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新中心的菜心樣地進(jìn)行。田間試驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理:清水、1×108孢子/mL綠僵菌孢子懸浮液、100倍液植物油、100倍液植物油+1×108孢子/mL綠僵菌孢子懸浮液。每個(gè)處理重復(fù)3次,每小區(qū)面積為28 m2(4 m×7 m),每小區(qū)噴施藥液2 L,各小區(qū)之間留1壟不做任何處理,作為緩沖保護(hù)區(qū)。所有小區(qū)均使用工農(nóng)16 L型手動(dòng)背負(fù)式農(nóng)用噴霧器均勻噴灑。試驗(yàn)期間不使用其他殺蟲(chóng)劑,各小區(qū)田間管理與其他菜地一致。
采用5點(diǎn)取樣法調(diào)查各小區(qū)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的數(shù)量,每點(diǎn)調(diào)查5株。施藥前一天調(diào)查1次,施藥后第2、4、6、8 d各調(diào)查1次。分別記錄每株菜心黃曲條跳甲成蟲(chóng)的數(shù)量。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果計(jì)算蟲(chóng)口密度(蟲(chóng)數(shù)/百株)、蟲(chóng)口減退率和相對(duì)防效。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010、SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)算死亡率和校正死亡率;毒力回歸方程、LT50及其95%置信限等參數(shù);利用單因素方差分析對(duì)蟲(chóng)口減退率、相對(duì)防效、死亡率和校正死亡率試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,并采用Duncan氏新復(fù)極差法比較兩組處理之間的差異顯著性;利用多因素方差分析測(cè)定植物油、綠僵菌、作用時(shí)間對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)死亡率影響。死亡率=死亡蟲(chóng)數(shù)/供試蟲(chóng)數(shù)×100%;校正死亡率=(處理組的死亡率―對(duì)照組的死亡率)/(1―對(duì)照組的死亡率)×100%;蟲(chóng)口減退率=(處理前處理蟲(chóng)量―處理后處理蟲(chóng)量)/處理前處理蟲(chóng)量×100%;相對(duì)防治效果=1―(處理前對(duì)照蟲(chóng)量×處理后處理蟲(chóng)量)/(處理后對(duì)照蟲(chóng)量×處理前處理蟲(chóng)量)×100%。
不同稀釋倍數(shù)的植物油對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的毒力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表 1。在噴施不同稀釋倍數(shù)的植物油 2 d時(shí),黃曲條跳甲成蟲(chóng)的校正死亡率隨著供試植物油濃度升高而顯著增加(F=64.90,P<0.001)。毒力測(cè)定表明:隨著植物油稀釋倍數(shù)的增加,黃曲條跳甲成蟲(chóng)的致死中時(shí)(LT50)逐漸延長(zhǎng)(F=69.21,P<0.001)。以上結(jié)果表明,不同濃度的植物油對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)毒力具有顯著差異,且LT50隨著植物油濃度的增加而明顯縮短。
表1 不同濃度植物油對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的毒力Table 1 Toxicity of different concentrations of plant spray oil to P.striolata adult
不同濃度綠僵菌孢子懸浮液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的毒力測(cè)定結(jié)果表明,黃曲條跳甲成蟲(chóng)的累計(jì)死亡率隨著綠僵菌孢子濃度和孢子的作用時(shí)間的增加而上升(圖 1),致死中時(shí)隨著綠僵菌孢子濃度增加而顯著降低(F=12.34,P=0.007,表2)。當(dāng)綠僵菌孢子懸浮液濃度較高時(shí)(2×108孢子/mL),殺蟲(chóng)效果最好,在施藥第2 d時(shí)其死亡率顯著高于對(duì)照組(F=71.10,P<0.001),在第5 d時(shí),黃曲條跳甲成蟲(chóng)的死亡率和校正死亡率均高于 90%(表 2);當(dāng)綠僵菌孢子濃度較低時(shí)(1.25× 107孢子/mL),其對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防治效果降低,且殺蟲(chóng)效果與綠僵菌的作用時(shí)間相關(guān),其死亡率在4 d以后會(huì)顯著高于對(duì)照組(4 d,F(xiàn)=72.24,P<0.001;5 d,F(xiàn)=49.38,P<0.001)。
表2 不同濃度綠僵菌對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的毒力Table 2 Toxicity of different concentrations of M.anisopliae to P.striolata adult
圖1 不同孢子濃度下綠僵菌對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的作用時(shí)間-死亡率比較Fig.1 Comparison of time-mortality relationship M.anisopliae on P.striolata adult inoculated with spores at varied concentrations
根據(jù)2.1和2.2的試驗(yàn)結(jié)果,選取植物油100倍液、300倍液與綠僵菌濃度2×108、1×108孢子/mL分別進(jìn)行混配,測(cè)定混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的毒力。結(jié)果表明,植物油和綠僵菌混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)控制作用顯著,黃曲條跳甲成蟲(chóng)在同一時(shí)間的累計(jì)死亡率均高于植物油和綠僵菌單劑處理(圖 2),24 h的校正死亡率大于95%(表3)。多因素方差分析結(jié)果表明,植物油和綠僵菌的作用時(shí)間會(huì)顯著地影響黃曲條跳甲成蟲(chóng)的死亡率,但短時(shí)間內(nèi)綠僵菌對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的死亡影響較小。多因素方差分析的交互結(jié)果顯示,綠僵菌和植物油具有顯著的交互作用,能夠增強(qiáng)對(duì)黃曲條跳甲的防控效果(表4)。
表3 植物油和綠僵菌混用對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的毒力Table 3 Toxicity of plant spray oil mixed with M.anisopliae to P.striolata adult
表4 植物油、綠僵菌及時(shí)間的相互作用對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)死亡率影響的多因素方差分析Table 4 Multi-factor variance analysis of mortality P.striolata adults in the treatments of plant spray oil with M.anisopliae
圖2 植物油和綠僵菌混用對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)作用時(shí)間-死亡率比較Fig.2 Comparison of P.striolata adult time-mortality relationship in the treatments of plant spray oil with M.anisopliae
根據(jù)室內(nèi)試驗(yàn)的結(jié)果,通過(guò)田間試驗(yàn)進(jìn)一步測(cè)試了植物油和綠僵菌以及二者混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防控效果(圖 3)。為降低試驗(yàn)誤差,試驗(yàn)開(kāi)始前統(tǒng)計(jì)了各小區(qū)的黃曲條跳甲成蟲(chóng)的種群密度,結(jié)果顯示各小區(qū)黃曲條跳甲成蟲(chóng)數(shù)量基本一致,保證了后續(xù)結(jié)果的一致性。對(duì)比植物油和綠僵菌以及二者混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的控制作用結(jié)果表明,植物油和綠僵菌混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)具有較強(qiáng)的殺傷作用顯著高于兩種單劑,并且混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)種群的增長(zhǎng)具有持續(xù)控制的效果(2 d,F(xiàn)=65.70,P<0.001;4 d,F(xiàn)=332.08,P<0.001;6 d,F(xiàn)=343.83,P<0.001;8 d,F(xiàn)=641.55,P<0.001)。通過(guò)分析不同藥劑處理后黃曲條跳甲成蟲(chóng)的種群密度變化情況可以看出,噴施植物油后會(huì)較快地降低黃曲條跳甲成蟲(chóng)的種群密度;綠僵菌對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防控起效慢,但持續(xù)時(shí)間長(zhǎng);植物油和綠僵菌的混配液可以快速控制黃曲條跳甲成蟲(chóng)種群密度同時(shí)在后期能夠持續(xù)地降低黃曲條跳甲成蟲(chóng)種群(圖3A)。進(jìn)一步的分析表明,植物油和綠僵菌的混配液前期主要是植物油起作用,而后期長(zhǎng)時(shí)間的持續(xù)控制作用主要是綠僵菌起作用。
為進(jìn)一步評(píng)價(jià)上述三種藥劑對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防控效果,試驗(yàn)計(jì)算并比較了三種藥劑處理的相對(duì)防效和蟲(chóng)口減退率(圖3B和圖3C),與黃曲條跳甲成蟲(chóng)種群密度變化一致,植物油和綠僵菌混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的相對(duì)防效和蟲(chóng)口減退率顯著高于植物油和綠僵菌單劑處理(8 d:相對(duì)防效,F(xiàn)=93.30,P<0.001;蟲(chóng)口減退率,F(xiàn)=322.20,P<0.001)。植物油對(duì)黃曲條跳甲的防治速度快,后期相對(duì)防效變化不大;綠僵菌孢子懸浮液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防治效果較低且作用緩慢,但持效期長(zhǎng),而植物油和綠僵菌混和施用可以顯著提高對(duì)黃曲條跳甲的防治效果,彌補(bǔ)植物油和綠僵菌防治過(guò)程中的缺點(diǎn)。
圖3 田間施用綠僵菌、植物油和混合施用對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的田間防效Fig.3 Field control efficacy of P.striolata adult after spraying of M.anisopliae, plant spray oil and their mixture in the field
利用綠色安全的殺蟲(chóng)劑防治蔬菜害蟲(chóng)不僅能保證食品的安全生產(chǎn),同時(shí)也會(huì)降低農(nóng)藥殘留和對(duì)環(huán)境的污染,綜合利用和探究各綠色殺蟲(chóng)劑之間的協(xié)同作用,可為新型農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)以及防控田間害蟲(chóng)提供新的方法和手段。植物源甘油酯(植物油)和綠僵菌均為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中常用的綠色無(wú)公害殺蟲(chóng)劑,但其二者混配后使用是否可以增加對(duì)害蟲(chóng)的防控效果仍缺乏相關(guān)研究。本試驗(yàn)測(cè)試了植物油和綠僵菌以及二者聯(lián)合使用對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防控作用,結(jié)果表明植物油和綠僵菌混配液可以增強(qiáng)各自的殺蟲(chóng)和防控效果,同時(shí)混配液還可以顯著地延長(zhǎng)對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的控制時(shí)長(zhǎng)。
植物油是從發(fā)酵食品中提取的新型植物油脂,具有在環(huán)境中易降解、生產(chǎn)成本低、對(duì)天敵安全、害蟲(chóng)不會(huì)產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn),對(duì)小型害蟲(chóng)和一些葉面微生物病害的防控起重要作用[8]。例如,臭氧化植物油具有殺菌和愈合傷口的功效,可用于蘋(píng)果腐爛病的防治[25];蓖麻油可用于田間小菜蛾P(guān)lutella xylostella(Linnaeus)幼蟲(chóng)防治,且會(huì)拒避小菜蛾成蟲(chóng)產(chǎn)卵[26]。該試驗(yàn)的室內(nèi)結(jié)果表明,植物油可以用于防控黃曲條跳甲成蟲(chóng)且對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)殺傷作用會(huì)隨著植物油濃度的增加而增大,并且100倍液植物油稀釋液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的殺傷作用高于90%,且致死中時(shí)顯著降低,但田間試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)植物油的殺傷作用低于室內(nèi)效果,這可能與田間環(huán)境變化相關(guān)。
綠僵菌是廣泛分布于自然界中的一類重要的昆蟲(chóng)病原真菌。目前已用于防治甜菜夜蛾Spodopteraexigua(Hübner)、褐飛虱Nilaparvata lugens(St?l)、蝗蟲(chóng)等害蟲(chóng)[14],但其殺蟲(chóng)效果相對(duì)較慢,在施藥初死亡率較低,受環(huán)境影響較大[27-29]。本文測(cè)試了綠僵菌在室內(nèi)對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防治效果,發(fā)現(xiàn)低濃度綠僵菌對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的殺傷作用較低,高濃度下對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的殺傷效果明顯,但其殺蟲(chóng)速度緩慢,遠(yuǎn)低于植物油的防控效果和速度。田間試驗(yàn)表明,高濃度的綠僵菌對(duì)黃曲條跳甲的防控起效時(shí)間慢,但持效期長(zhǎng),這可能由于綠僵菌可以一定程度上在施藥后增殖,能夠長(zhǎng)期存活在環(huán)境中并侵染害蟲(chóng)有關(guān)。
室內(nèi)和田間的試驗(yàn)結(jié)果表明,植物油和綠僵菌的混配液對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防控效果均顯著高于兩種單劑,并且多因素方差分析結(jié)果顯示植物油和綠僵菌具有顯著的相互作用。二者的混配液可能改變了制劑的性狀,進(jìn)而增強(qiáng)了殺蟲(chóng)效果。已有的研究顯示,植物油不僅可以通過(guò)覆膜直接殺死害蟲(chóng),其還具有乳化作用,可作為助劑協(xié)助其他農(nóng)藥在生物體表面上的展布、潤(rùn)濕和沉積,增加農(nóng)藥在植物表面的滲透和覆蓋面,達(dá)到增效的作用[6]。植物油和綠僵菌混配可能會(huì)增強(qiáng)綠僵菌的粘著力和滲透性,使其更易侵入寄主。此外,植物油乳化后會(huì)在接觸面形成油膜,形成的微環(huán)境可以抵御紫外線、高溫、干燥等不良環(huán)境,延長(zhǎng)了孢子的存活時(shí)間,使其能順利萌發(fā)和侵染;同時(shí)植物油在昆蟲(chóng)體表形成致密的油膜,還可能會(huì)改變害蟲(chóng)生理代謝以及免疫活性等,由此增加了真菌孢子的侵染活力,這些仍需進(jìn)一步的探究。
對(duì)比植物油和綠僵菌混配液與兩種單劑在田間的防控效果發(fā)現(xiàn)植物油和綠僵菌混配液在殺蟲(chóng)前期主要是植物油起到殺蟲(chóng)作用,而綠僵菌可以持續(xù)的降低害蟲(chóng)的種群密度,增強(qiáng)藥效的持續(xù)時(shí)間,彌補(bǔ)植物油施用后期殺蟲(chóng)效果的不足。二者的混配液不僅可以降低各自在害蟲(chóng)防控中的缺點(diǎn),達(dá)到協(xié)同增效作用,同時(shí)還可以降低田間的施藥頻次。對(duì)比其他常見(jiàn)的黃曲條跳甲防治藥劑,植物油和綠僵菌混配液第8 d的相對(duì)防效高達(dá)89.80%,顯著高于普通藥劑,同時(shí)植物油和綠僵菌的混配液不會(huì)引起害蟲(chóng)的抗藥性,并且對(duì)人類健康和對(duì)環(huán)境友好是理想的綠色防控藥劑。
病蟲(chóng)害的綠色防控是近些年來(lái)對(duì)害蟲(chóng)防治過(guò)程中的理念,通過(guò)綜合利用各種手段以及綠色農(nóng)藥控制病蟲(chóng)害的發(fā)生。在使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)大多數(shù)的綠色農(nóng)藥普遍殺蟲(chóng)效果不好,導(dǎo)致綠色農(nóng)藥的推廣和使用受到限制,探究綠色農(nóng)藥之間的相互作用,增強(qiáng)綠色農(nóng)藥的殺蟲(chóng)效果,有利于其使用和推廣,但目前這些研究仍然較少。本試驗(yàn)證實(shí)了植物油與綠僵菌組合對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)的防控具有協(xié)同增效作用,不僅增加了黃曲條跳甲的綠色防控手段同時(shí)也為其他害蟲(chóng)的防控提供了依據(jù),該研究還為利用綠色農(nóng)藥間的協(xié)同作用控制病蟲(chóng)害提供了案例,同時(shí)在綠色食品生產(chǎn),農(nóng)藥減量增效和生態(tài)環(huán)境保護(hù)等方面具有重要的指導(dǎo)意義。