張玉巧

(順昌縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建 順昌 353200)

0 引言

仔豬因自身尚不具備良好的消化能力以及抗逆能力，因此在斷奶時(shí)特別容易發(fā)生斷奶應(yīng)激，而斷奶應(yīng)激又會(huì)直接刺激到仔豬腸道，使其健康受到不良影響，出現(xiàn)腹瀉等問(wèn)題，給生產(chǎn)造成很大損失。目前，仔豬腹瀉是養(yǎng)豬生產(chǎn)中的一大難題，以往在生產(chǎn)實(shí)際中，多是通過(guò)把高劑量的氧化鋅添加到飼料中預(yù)防仔豬腹瀉，雖然能夠起到一定的預(yù)防作用，但其生物利用率卻很低，只有不到10%能夠被機(jī)體利用，其余都經(jīng)糞、尿的途徑排出，對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重污染，有違可持續(xù)、健康發(fā)展養(yǎng)殖業(yè)的初衷[1]。因此，益生菌復(fù)合制劑作為一種綠色、安全、無(wú)害的防治措施獲得關(guān)注。本試驗(yàn)就對(duì)益生菌復(fù)合制劑在斷奶仔豬腹瀉中的預(yù)防應(yīng)用效果展開(kāi)試驗(yàn)研究，以期為動(dòng)物健康養(yǎng)殖提供一定數(shù)據(jù)支撐。

1 試驗(yàn)材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

飼喂的基礎(chǔ)日糧是玉米-豆粕型，參考NRC(2012)營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(無(wú)抗生素含量)進(jìn)行配置，可以滿(mǎn)足斷奶仔豬(5～10 kg)的營(yíng)養(yǎng)需要量，基礎(chǔ)飼糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平具體見(jiàn)表1、表2。

表1 斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧組成

表2 斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平

益生菌復(fù)合制劑購(gòu)自福建某生物技術(shù)公司，主要由低聚糖、酸化劑和益生菌發(fā)酵液組成。其中低聚糖中包含低聚果糖、低聚木糖以及低聚殼聚糖；酸化劑中包含檸檬酸、延胡索酸、蘋(píng)果酸和乳酸；益生菌發(fā)酵液中包含戊糖片球菌發(fā)酵液、植物乳桿菌。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇50頭30～33日齡的、健康且胎次相近的杜×長(zhǎng)×大斷奶仔豬，將其隨機(jī)分成2組，每組25頭，展開(kāi)為期21 d的試驗(yàn)。分組情況：對(duì)照組，僅飼喂基礎(chǔ)日糧；處理組，基礎(chǔ)日糧+益生菌復(fù)合制劑(500 mg/kg)。試驗(yàn)前1周開(kāi)始徹底清掃飼養(yǎng)舍，沖刷飼養(yǎng)籠，消毒飼喂器等，保證舍內(nèi)清潔，每天固定打掃糞尿，每日8:00及16:00時(shí)飼喂(若開(kāi)始時(shí)仔豬進(jìn)食較少，應(yīng)予以人工誘食)，飲水自由。

1.3 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能

于斷奶當(dāng)日(即試驗(yàn)第0天)、試驗(yàn)第21天，分別在空腹情況下對(duì)所有仔豬進(jìn)行稱(chēng)重，記錄仔豬每日采食量，對(duì)其日平均增重、日平均采食量進(jìn)行計(jì)算。

1.3.2 腹瀉率

每日對(duì)仔豬腹瀉及健康狀況進(jìn)行觀察并記錄，計(jì)算得到腹瀉率。腹瀉率計(jì)算公式：腹瀉率(%)=試驗(yàn)期內(nèi)仔豬腹瀉頭數(shù)/(試驗(yàn)天數(shù)×同組豬頭數(shù))×100%。腹瀉評(píng)定依據(jù)：無(wú)腹瀉，糞便外觀正常、呈圓柱形；輕微腹瀉，糞便為軟邊、但尚成形；中度腹瀉，糞便較黏膩，不成形，有較多水分；重度腹瀉，糞便呈液態(tài)狀，不成形，有較高水分含量。自出現(xiàn)的中度腹瀉成為當(dāng)日糞便常態(tài)時(shí)，記作腹瀉頭次1次[2]。

1.3.3 腸道損傷情況

分別于試驗(yàn)第7天、第14天、第21天時(shí)，在空腹?fàn)顟B(tài)下采集仔豬的前腔靜脈血5 mL，放到采血管中，對(duì)其腸道損傷情況及腸道通透性進(jìn)行分析。血液在4℃條件下靜置整夜，并于4 000轉(zhuǎn)/min的條件下離心20 min，分離獲得血清，放到0.5 mL離心管中，于-80℃條件下存儲(chǔ)待用。使用D-乳酸試劑盒與顯色基質(zhì)鱟試劑盒，對(duì)血清中D-乳酸與內(nèi)毒素濃度進(jìn)行測(cè)定[3]。

1.3.4 糞便菌群計(jì)數(shù)

21 d試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別取對(duì)照組、處理組2組斷奶仔豬適量糞便作為樣本，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室測(cè)定，使用梯度稀釋法進(jìn)行糞便菌群計(jì)數(shù)測(cè)定[4]。

1.3.5 營(yíng)養(yǎng)水平測(cè)定

21 d試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別取對(duì)照組、處理組2組斷奶仔豬適量糞便作為樣本，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室測(cè)定，對(duì)其中營(yíng)養(yǎng)水平的測(cè)定指標(biāo)包括：能量、粗蛋白、粗脂肪。

1.4 數(shù)據(jù)處理

按照單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)方法，數(shù)據(jù)的初步處理使用Excel軟件完成，使用SPSS25.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)做進(jìn)一步的統(tǒng)計(jì)分析，表達(dá)為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差形式的計(jì)量數(shù)據(jù)形式，P<0.05代表差異性顯著。

2 結(jié)果

2.1 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表3中統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)可知，2組斷奶仔豬初始體重、試驗(yàn)?zāi)┲叵啾炔o(wú)很大差異性(P>0.05)，在日平均增重上2組間凸顯有顯著差異性(P<0.05)。處理組要比對(duì)照組日平均增重高14.31%。

表3 益生菌符合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬腹瀉的影響

由表4數(shù)據(jù)可知，處理組試驗(yàn)期內(nèi)腹瀉發(fā)生率較對(duì)照組降低6.77%，2組之間腹瀉發(fā)生率數(shù)據(jù)差異顯著(P<0.05)。

表4 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬腹瀉的影響

2.3 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬腸道通透性的影響

各組斷奶仔豬血清內(nèi)毒素、血清D-乳酸水平統(tǒng)計(jì)值具體見(jiàn)表5，從表中數(shù)據(jù)可見(jiàn)，對(duì)照組與處理組斷奶仔豬之間血清內(nèi)毒素和D-乳酸水平從試驗(yàn)第14天開(kāi)始出現(xiàn)差異(P<0.05)，飼喂益生菌復(fù)合制劑的處理組第14天、第21天時(shí)血清內(nèi)毒素、血清D-乳酸含量明顯更低(P<0.05)。

表5 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬血清內(nèi)毒素和D-乳酸水平的影響

2.4 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便菌群的影響

益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便菌群的影響見(jiàn)表6，2組之間糞便乳酸桿菌、大腸桿菌含量差異顯著(P<0.05)，處理組糞便乳酸桿菌數(shù)目明顯高于對(duì)照組，且大腸桿菌數(shù)目明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，提示腸道有明顯酸化效果。

表6 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便菌群的影響

2.5 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便營(yíng)養(yǎng)水平的影響

由表7所示，其中數(shù)據(jù)顯示出益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便營(yíng)養(yǎng)水平的影響，處理組斷奶仔豬糞便能量和粗脂肪相較于對(duì)照組明顯降低(P<0.05)，處理組糞便能量較對(duì)照組降低2.70%、粗脂肪較對(duì)照組降低4.01%。2組在粗蛋白上的差異并不顯著(P>0.05)。

表7 益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便營(yíng)養(yǎng)水平的影響

3 討論

在養(yǎng)豬生產(chǎn)活動(dòng)中，斷奶為仔豬出生之后的最大應(yīng)激因素，此時(shí)，仔豬的消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完全、先天性免疫力建立滯后、不具良好的體溫調(diào)節(jié)能力，上述生理特點(diǎn)都決定了其對(duì)外界會(huì)有諸多不適反饋。受到這些因素的影響，仔豬易發(fā)生早期斷奶綜合征，出現(xiàn)食欲降低、生長(zhǎng)速度慢、抵抗疾病能力差以及飼料利用率低和腹瀉等表現(xiàn)，其中腹瀉已成為早期斷奶綜合征最突出表現(xiàn)。

腹瀉的發(fā)生一般和腸道黏膜屏障發(fā)生變化密切相關(guān)，大都認(rèn)為，腸道黏膜屏障包括抗菌肽、黏膜黏液層和緊密連接蛋白等化學(xué)物質(zhì)[5]。有研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)，益生菌對(duì)于維護(hù)腸道的組織形態(tài)非常有效，能夠降低腸道通透性，對(duì)先天性免疫系統(tǒng)也有促進(jìn)作用，還能抵抗感染、抑制炎癥[6]。文章試驗(yàn)結(jié)果表明，益生菌復(fù)合制劑對(duì)于斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能有顯著影響，具體數(shù)據(jù)表現(xiàn)在2組間日平均增重差異顯著，處理組要比對(duì)照組日平均增重高14.31%。分析原因認(rèn)為，酸化劑是益生菌復(fù)合制劑中的主要組成，通過(guò)刺激仔豬的食欲，能夠在一定程度上促進(jìn)斷奶仔豬采食量的增加，從而提高斷奶仔豬的生產(chǎn)性能[7]。

益生菌復(fù)合制劑對(duì)于斷奶仔豬腸道通透性有著良好影響。完整的腸道屏障是確保腸道行使正常功能的基礎(chǔ)，一旦腸道屏障受損、其通透性也會(huì)加大，而既往研究報(bào)道，斷奶應(yīng)激是對(duì)腸道黏膜屏障造成損傷的重要刺激源，會(huì)加大腸道通透性[8]。本次試驗(yàn)中測(cè)定的血清D-乳酸與內(nèi)毒素是反映腸道通透性的重要指標(biāo)，能夠直接反映出腸道通透性大小。一般情況下，血清中只含有少量的D-乳酸和內(nèi)毒素，一旦腸道通透性增大，其在血清中的含量也會(huì)增高。本次試驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)第7天時(shí)，2組斷奶仔豬血清內(nèi)毒素與D-乳酸水平均較高，提示斷奶應(yīng)激給腸道通透性造成了很大影響，對(duì)腸道菌群造成了破壞菌群所分泌的內(nèi)毒素和D-乳酸滲透進(jìn)血；而從試驗(yàn)第14天開(kāi)始，2組血清內(nèi)毒素與D-乳酸含量開(kāi)始降低，同時(shí)處理組較對(duì)照組有更顯著降低，提示這時(shí)益生菌復(fù)合制劑開(kāi)始顯著緩解因斷奶應(yīng)激造成的腸道通透性增加，干預(yù)腹瀉的發(fā)生。

在試驗(yàn)中分析了益生菌復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便菌群和營(yíng)養(yǎng)水平的影響。從糞便菌群組成上來(lái)看，2組之間糞便乳酸桿菌、大腸桿菌含量差異顯著，處理組糞便乳酸桿菌數(shù)目明顯高于對(duì)照組，且大腸桿菌數(shù)目明顯低于對(duì)照組。酸化劑起到了很大作用，通過(guò)對(duì)腸道中微生物區(qū)系的改善，對(duì)有害菌的生長(zhǎng)加以抑制、對(duì)有益于的增殖加以促進(jìn)。在胃腸道中的很多有害菌生長(zhǎng)適宜環(huán)境都是中性偏堿，例如大腸桿菌適宜的生長(zhǎng)pH環(huán)境值是6.0～8.0，而如乳酸桿菌等有益菌的生長(zhǎng)則是酸性環(huán)境。因此益生菌復(fù)合制劑中基于酸化劑的效用，顯著提高了乳酸菌的數(shù)目，減少了大腸桿菌的數(shù)目，有利于對(duì)腸道內(nèi)微生物菌落的平衡加以改善。

從糞便營(yíng)養(yǎng)水平上來(lái)看，處理組斷奶仔豬糞便能量和粗脂肪相較于對(duì)照組明顯降低，從側(cè)面提示益生菌復(fù)合制劑的飼喂有利于提高斷奶仔豬的飼料利用率。

4 結(jié)論

益生菌復(fù)合制劑的飼喂可有效預(yù)防斷奶仔豬腹瀉問(wèn)題發(fā)生，同時(shí)有利于改善斷奶仔豬生長(zhǎng)性能，提高糞便中乳酸菌數(shù)量、降低糞便中大腸桿菌數(shù)量，降低腸道通透性以及斷奶仔豬糞便中的能量及粗脂肪含量。