蘇梅芬

欽州市第二人民醫(yī)院 廣西 欽州 535000

胸腔積液是臨床相關(guān)疾病常見癥狀，如炎癥性疾病、結(jié)締組織病、良、惡性腫瘤等，主要指以胸膜腔內(nèi)病理性液積聚為特征的一種常見臨床癥候，臨床癥狀主要表現(xiàn)為胸悶、呼吸困難等，臨床按照其發(fā)生機(jī)制可分為漏出性胸腔積液及滲出性胸腔積液[1]。正常人的胸膜內(nèi)會(huì)含有3～15ml液體，主要在呼吸時(shí)起到潤(rùn)滑作用，液體的濾出與吸收之間呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)平衡，患病后可使液體濾出與吸收失衡，病理性液體量增加，最終形成胸腔積液[2]。分析臨床研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)[3]，目前臨床的胸腔積液患者中約有20%由腫瘤發(fā)展造成。而隨著近幾年來多種惡性腫瘤及結(jié)核性疾病發(fā)病率的增加，胸腔積液在疾病診斷、鑒別及疾病治療、預(yù)后等多方面具有重要診斷價(jià)值，而臨床可應(yīng)用于胸腔積液檢查中的方式較為廣泛，主要包含了細(xì)胞學(xué)、生化學(xué)及分子生物學(xué)等，其中臨床認(rèn)為細(xì)胞學(xué)為胸腔積液的診斷金標(biāo)準(zhǔn)，包括蘇木精-伊紅染色法、沉渣涂片細(xì)胞化學(xué)染色、熒光染色、核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色等染色方法。本文現(xiàn)針對(duì)胸腔積液的細(xì)胞學(xué)檢查進(jìn)展進(jìn)行分析，主要綜述內(nèi)容如下。

1．胸腔積液的發(fā)生機(jī)制

胸膜腔是指由臟、壁兩層胸膜在左右兩肺周圍圍成的一個(gè)完全封閉的潛在性腔隙，腔內(nèi)含有少量漿液，正常含量為3～15ml，主要在呼吸運(yùn)動(dòng)時(shí)起到潤(rùn)滑作用，正常人每24h可形成及吸收約500～1000ml的液體，胸膜腔內(nèi)液體自毛細(xì)血管的靜脈端再吸收，其余液體自淋巴系統(tǒng)回收至血液，液體的濾過及吸收處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，此時(shí)若機(jī)產(chǎn)生全身或局部病變，病理變化可破壞液體濾過及吸收之間的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，從而使胸膜腔內(nèi)液體出現(xiàn)形成過快或吸收過緩，最終形成胸腔積液[4]。

2．細(xì)胞學(xué)檢查的概述及原理

細(xì)胞學(xué)檢查是臨床應(yīng)用較為廣泛的一種檢查方式，具有取材方便、創(chuàng)傷小、操作快捷的優(yōu)點(diǎn)，是目前臨床檢測(cè)胸腔積液腫瘤細(xì)胞分析方法的首要選擇，通過收集脫落的細(xì)胞，將細(xì)胞經(jīng)離心收集沉淀后制片等一系列操作后，在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，從而進(jìn)行疾病的診斷工作[5]。當(dāng)患者胸腔內(nèi)器官和胸膜發(fā)生炎癥、腫瘤等病理變化時(shí)，胸膜腔液的分泌增多形成胸腔積液，同時(shí)胸膜間皮細(xì)胞大量脫落，當(dāng)腫瘤穿破臟器表面間皮直接暴露在胸膜腔內(nèi)后，惡性腫瘤細(xì)胞可脫水落在胸腔積液中，因此通過采用細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)胸腔積液進(jìn)行分析可獲得特異性結(jié)果。臨床研究表明[6]，胸腔積液細(xì)胞學(xué)檢查的靈敏度在40%～87%之間。

3．細(xì)胞學(xué)檢查不同染色方式的應(yīng)用效果

3.1 蘇木精-伊紅染色法

蘇木精-伊紅染色法主要用于對(duì)細(xì)胞組織進(jìn)行染色，簡(jiǎn)稱HE染色，其檢驗(yàn)原理為細(xì)胞中的細(xì)胞核主要組成成分為酸性物質(zhì)，與堿性染料如蘇木精之間具有較強(qiáng)的親和力，而細(xì)胞漿則與細(xì)胞核相反，細(xì)胞漿中所含的堿性物質(zhì)與酸性染料如伊紅之間具有較強(qiáng)親和力，因此細(xì)胞或組織切片經(jīng)蘇木精-伊紅染色液染色后，可通過觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色變化和細(xì)微結(jié)構(gòu)來分析是否可能為瘤細(xì)胞[7]。臨床研究表明[8]，采用蘇木精-伊紅染色法瘤細(xì)胞檢出率為39%。目前臨床學(xué)者針對(duì)蘇木精-伊紅染色液在惡性細(xì)胞檢出中的應(yīng)用方式不斷進(jìn)行研究，使瘤細(xì)胞檢出率不斷增長(zhǎng)。臨床學(xué)者采用腦脊液細(xì)胞玻片離心沉淀器收集器對(duì)患者胸腔積液內(nèi)細(xì)胞進(jìn)行收集[9]，結(jié)果顯示細(xì)胞收集率高達(dá)80%，檢出率可高達(dá)93%。同時(shí)另一位學(xué)者將積液送檢量增加至250ml，取新鮮下層積液離心涂片染色，可使瘤細(xì)胞首次檢出率提高至83%，而三次以上檢出率可高達(dá)100%[10]。

3.2 沉渣涂片細(xì)胞化學(xué)染色

沉渣涂片細(xì)胞化學(xué)染色是基于細(xì)胞學(xué)及化學(xué)相結(jié)合的一種檢查方法，以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，運(yùn)用化學(xué)的原理對(duì)胸腔積液內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行定性、定位及半定量分析，常見方法包括過氧化物酶染色、蘇丹黑B染色、糖原染色、堿性磷酸酶染色、特異性脂酶染色、非特異性脂酶染色及酸性磷酸酶染色等[11]。采用沉渣涂片細(xì)胞化學(xué)染色法進(jìn)行胸腔積液檢查時(shí)，若積液存在惡性瘤細(xì)胞，檢查結(jié)果可顯示為過氧化物酶染色及蘇丹黑B染色結(jié)果為陰性，而糖原染色、堿性磷酸酶染色、特異性脂酶染色、非特異性脂酶染色及酸性磷酸酶染色等結(jié)果為陽(yáng)性[12]。

3.3 熒光染色

熒光染色是臨床較為常見的一種抗酸染色方法，以熒光染料為初染液，鹽酸乙醇為脫色劑，高錳酸鉀為復(fù)染液，染色后采用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察，若細(xì)胞漿及核仁內(nèi)含有大量的RNA，染色后細(xì)胞顏色為桔紅或火焰色熒光，若細(xì)胞核中含有大量的DNA則為黃綠色熒光[13]。臨床研究報(bào)道顯示[14]，采用熒光染色進(jìn)行檢查惡性胸腔積液，陽(yáng)性率為78%，假陽(yáng)性率為14%。

3.4 核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色

核仁組成區(qū)是染色體上的一個(gè)編碼核糖體RNA片段，存在于DNA特異性環(huán)上，圖像核仁，而核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色法可確定組織切片上的核仁組成區(qū)，顯示與核仁組成區(qū)有關(guān)的酸性蛋白，具有操作簡(jiǎn)便、批量染色的優(yōu)點(diǎn)[15]。臨床學(xué)者采用核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色法進(jìn)行良惡性胸腔積液鑒別[16]，結(jié)果顯示，良性胸腔積液中淋巴細(xì)胞、間皮細(xì)胞及非典型增生間皮細(xì)胞中的銀染色NOR相關(guān)蛋白核顆粒小于1.98個(gè)，其中87%為規(guī)則小圓形；惡性胸腔積液中瘤細(xì)胞銀染色NOR相關(guān)蛋白核顆粒大于4.98個(gè)，其中82%為不規(guī)則及彌散分布型顆粒。另一學(xué)者經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)[17]，在惡性胸腔積液檢查中，采用核仁組成區(qū)嗜銀染色診斷敏感性為75%，特異性為87%。

4．細(xì)胞學(xué)在胸腔積液檢查中的優(yōu)缺點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)：①細(xì)胞學(xué)能夠根據(jù)細(xì)胞大小、形態(tài)，細(xì)胞核大小、形態(tài)、核染色質(zhì)及細(xì)胞漿內(nèi)所含內(nèi)容物，細(xì)胞排列形式等特點(diǎn)進(jìn)行診斷，因此在胸腔積液檢查中應(yīng)用細(xì)胞學(xué)進(jìn)行診斷可有效提高臨床診斷準(zhǔn)確率，對(duì)良惡性腫瘤鑒別具有重要價(jià)值。②具有操作簡(jiǎn)單、患者接受度高、安全無創(chuàng)或微創(chuàng)、可重復(fù)進(jìn)行檢查的優(yōu)點(diǎn)。③由于操作簡(jiǎn)單，因此便于臨床進(jìn)行大規(guī)模人口健康篩查，同時(shí)具有較為廣泛的取材范圍，因此在早期腫瘤診斷中具有較高的準(zhǔn)確率。缺點(diǎn)：①取材較少可導(dǎo)致一定程度的假陰性；②對(duì)組織學(xué)結(jié)構(gòu)觀察不滿意，無法準(zhǔn)確對(duì)腫瘤進(jìn)行分類與分型；③無法準(zhǔn)確的判定腫瘤的原發(fā)病灶和浸潤(rùn)情況[18]。

5．小結(jié)

細(xì)胞學(xué)檢查是臨床公認(rèn)的胸腔積液診斷金標(biāo)準(zhǔn)，通過對(duì)胸腔積液內(nèi)惡性細(xì)胞進(jìn)行檢查，從而進(jìn)行相關(guān)疾病的診斷及鑒別，并在疾病的治療及預(yù)后方面具有重要價(jià)值。目前臨床常見的染色方法包括蘇木精-伊紅染色法、沉渣涂片細(xì)胞化學(xué)染色、熒光染色、核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色等，在胸腔積液的細(xì)胞學(xué)檢查中均具有較高價(jià)值。同時(shí)隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，臨床學(xué)者也針對(duì)上述染色方法不斷進(jìn)行完善及優(yōu)化，因此，細(xì)胞學(xué)檢查在胸腔積液中具有良好的應(yīng)用價(jià)值，且隨著醫(yī)療技術(shù)不斷發(fā)展，其染色方式逐漸多樣化，診斷準(zhǔn)確率也不斷提高。