尹翠云， 俞 靜， 李宜航， 張麗霞， 王云強(qiáng)， 唐德英， 張忠廉

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所/云南省南藥可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 云南 景洪 666100)

傣百解是我國(guó)重要的傣藥，其基原植物為蘿藦科牛奶菜屬植物通光散(Marsdeniatenacissima(Roxh.) Moon)[1-2]，以干燥根入藥，藥材含有脂肪酸、生物堿和單糖等多種成分，具有清火解毒、消腫止痛等功效，用于治療咽喉腫痛、口舌生瘡、肺熱咳嗽及解藥食毒等。傣百解是國(guó)藥準(zhǔn)字品種“雅解片”和百解膠囊、版納涼劑、雅解嘎罕等的組方中藥，近年來，隨著人們對(duì)傳統(tǒng)醫(yī)藥重視程度的不斷增強(qiáng)，以上中成藥的應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大，需求量不斷增加，然而，傣百解基原植物通光散在我國(guó)僅分布于云南省，野生資源十分有限，僅依賴野生資源根本無法滿足日益增加的市場(chǎng)需求，人工栽培已成為解決傣百解藥材資源稀缺的必要途徑。

種苗是中藥材種植的物質(zhì)基礎(chǔ)，其質(zhì)量在一定程度上影響著藥材的最終品質(zhì)[3]。種苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化是確保種苗質(zhì)量、保證種苗安全性、提高藥材質(zhì)量和產(chǎn)量、保護(hù)國(guó)家中藥材資源的重要途徑。一直以來，傣百解種苗主要是藥農(nóng)自產(chǎn)自用，沒有相應(yīng)的種苗檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，移栽前未進(jìn)行科學(xué)的分級(jí)篩選，在實(shí)際生產(chǎn)中很難對(duì)傣百解種苗的質(zhì)量進(jìn)行有效控制，嚴(yán)重影響了傣百解藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量。鑒于此，對(duì)傣百解種苗質(zhì)量分級(jí)進(jìn)行系統(tǒng)研究，以期為傣百解的規(guī)范化栽培及種苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

以繁育2個(gè)月并即將移栽至大田定植的傣百解為研究材料，于2019年6—7月對(duì)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所育苗試驗(yàn)基地(300株)、云南省勐臘縣勐伴鄉(xiāng)曼蚌村(200株)和云南省景洪市勐養(yǎng)鎮(zhèn)曼勒水庫(215株)3個(gè)苗圃地的播種苗進(jìn)行隨機(jī)抽樣調(diào)查，共抽取715株傣百解健康種苗進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。傣百解種苗均由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所唐德英研究員鑒定為蘿藦科植物傣百解種苗。

1.2 方 法

1.2.1指標(biāo)測(cè)量方法

選擇根系生長(zhǎng)正常，無機(jī)械損傷的種苗進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量指標(biāo)包括：根長(zhǎng)、根粗、苗高、地徑、葉數(shù)、葉長(zhǎng)、葉寬共7項(xiàng)指標(biāo)。各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)為：根長(zhǎng)指主根長(zhǎng)，自地面土痕處至根端的距離；根粗指主根粗，是主根最粗處的直徑；苗高即莖長(zhǎng)，指從地面土痕處到頂芽的枝條長(zhǎng)度；地徑指苗干基部土痕處的直徑；葉數(shù)指真葉數(shù)量；葉長(zhǎng)指葉片基部至葉尖的長(zhǎng)度，葉寬指葉片中間最寬處的長(zhǎng)度。用游標(biāo)卡尺測(cè)定其根粗和地徑，精確到0.01 cm；用鋼卷尺測(cè)量其根長(zhǎng)、苗高、葉長(zhǎng)、葉寬，精確到0.1 cm。

1.2.2數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析方法

采用SPSS Statistics 22.0軟件進(jìn)行主成分分析和相關(guān)性分析，確定傣百解種苗分級(jí)指標(biāo)；將所有分級(jí)指標(biāo)的原始數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化后，采用K-均值聚類分析，按類間距離大小劃分種苗質(zhì)量等級(jí)類別，制定傣百解種苗分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 傣百解種苗質(zhì)量指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

對(duì)傣百解種苗的各質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果見表1。2月齡傣百解種苗的苗高為6.10～50.00 cm、地徑1.00～8.00 mm、根粗0.63～6.04 mm、根長(zhǎng)0.50～28.00 cm、葉數(shù)3～12片、葉長(zhǎng)1.90～13.70 cm、葉寬0.40～11.20 cm。

表1 傣百解種苗質(zhì)量指標(biāo)描述統(tǒng)計(jì)Table 1 Descriptive stastics about quality index of Marsdenia tenacissima

2.2 傣百解種苗分級(jí)指標(biāo)的確定

2.2.1主成分分析

由主成分分析結(jié)果(表2)可知，前3個(gè)特征值累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到84.42%，說明前3個(gè)主成分基本包含了全部指標(biāo)信息。其中第一主成分貢獻(xiàn)率達(dá)到65.579%，第二主成分貢獻(xiàn)率為10.916%，第三主成分貢獻(xiàn)率為7.925%，故第一主成分具備綜合評(píng)價(jià)功能。第一主成分對(duì)應(yīng)的特征向量中葉寬、葉長(zhǎng)、根粗、苗高、根長(zhǎng)、葉數(shù)、地徑的值均較大，所以通過主成分分析可以初步選取葉寬、葉長(zhǎng)、苗高、根長(zhǎng)、葉數(shù)、地徑、根粗作為傣百解種苗質(zhì)量分級(jí)的指標(biāo)。

表2 傣百解種苗主成分分析結(jié)果Table 2 Analysis results about main components of Marsdenia tenacissima

2.2.2相關(guān)性分析

傣百解種苗質(zhì)量各指標(biāo)間相關(guān)分析結(jié)果見表3，苗高、地徑、根長(zhǎng)、根粗、葉數(shù)、葉長(zhǎng)、葉寬間均存在極顯著正相關(guān)關(guān)系(p<0.01)。其中葉長(zhǎng)與葉寬呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.938，說明葉長(zhǎng)與葉寬能反映相互的數(shù)值信息，并且葉長(zhǎng)、葉寬和苗高之間也呈極顯著正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.733和0.734，因此以苗高代替葉長(zhǎng)和葉寬兩個(gè)指標(biāo)。此外，在生產(chǎn)或運(yùn)輸過程中葉片易掉落，不宜將其作為種苗質(zhì)量分級(jí)指標(biāo)。

表3 傣百解種苗質(zhì)量各指標(biāo)間的相關(guān)分析Table 3 Correlation analysis among seedling quality indexes of Marsdenia tenacissima

根據(jù)主成分分析、相關(guān)性分析，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際情況，將苗高、地徑、根粗、根長(zhǎng)4個(gè)指標(biāo)作為質(zhì)量分級(jí)的主要指標(biāo)，劃分傣百解種苗質(zhì)量等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 傣百解種苗質(zhì)量分級(jí)

2.3.1K-均值聚類分析

通過K-均值聚類分析對(duì)苗高、地徑、根粗和根長(zhǎng)4個(gè)質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行分析，各質(zhì)量指標(biāo)最終聚類各類間中心距離見表4，其中第2類和第3類中心距離最大，第1類和第3類中心距離次之，而第1類和第2類間中心距離最小，說明可將傣百解種苗劃分為3個(gè)質(zhì)量等級(jí)。將第3類定為Ⅰ級(jí)苗，第1類定為Ⅱ級(jí)苗，第2類定為Ⅲ級(jí)苗。最終聚類中心值見表5，Ⅰ級(jí)苗149株，占20.84%；Ⅱ級(jí)苗408株，占57.06%；Ⅲ級(jí)苗158株，占22.10%。Ⅰ、Ⅱ級(jí)種苗占77.90%。

表4 傣百解種苗質(zhì)量指標(biāo)最終聚類中心間的距離Table 4 Distance between the final cluster centers of seedling quality indexes of Marsdenia tenacissima

表5 傣百解種苗質(zhì)量分級(jí)指標(biāo)最終聚類中心值Table 5 Final cluster center value about seedling quality grading index of Marsdenia tenacissima

2.3.2傣百解種苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)劃分

根據(jù)傣百解種苗質(zhì)量分級(jí)指標(biāo)的最終聚類中心值，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際和可操作性，將苗高、地徑、根粗和根長(zhǎng)4個(gè)質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行修訂得到各等級(jí)分類值，傣百解種苗質(zhì)量等級(jí)初步劃分標(biāo)準(zhǔn)見表6。

表6 傣百解種苗質(zhì)量等級(jí)初步劃分標(biāo)準(zhǔn)Table 6 Preliminary classific grades about seedling quality index of Marsdenia tenacissima

2.4 傣百解種苗分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)

由于用于質(zhì)量分級(jí)研究的傣百解藥材尚未到達(dá)采收年限，無法進(jìn)行藥材產(chǎn)量、質(zhì)量分析，因此暫以成活率來評(píng)價(jià)該分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。不同等級(jí)的種苗栽植于試驗(yàn)地1年后，其成活率與質(zhì)量級(jí)別呈現(xiàn)相關(guān)性趨勢(shì)，即質(zhì)量級(jí)別越高成活率越高；Ⅰ級(jí)苗、Ⅱ級(jí)苗、Ⅲ級(jí)苗的成活率分別為92.0%、84.0%和70.0%。表明傣百解種苗分級(jí)指標(biāo)是可行的。

表7 傣百解種苗移栽試驗(yàn)結(jié)果Table 7 Transplanting test results of Marsdenia tenacissima seedlings

3 討 論

種苗是中藥材種植的物質(zhì)基礎(chǔ)，制定種苗質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)是保障種苗質(zhì)量、提高藥材產(chǎn)量的有效途徑。種苗質(zhì)量分級(jí)的前提是選擇能全面準(zhǔn)確反映苗木質(zhì)量的指標(biāo)。目前報(bào)道的根及根莖類藥材種苗質(zhì)量指標(biāo)有苗高、地徑、根粗、根長(zhǎng)、單根重、側(cè)根數(shù)等[4]。苗高是最直觀、最容易測(cè)定的形態(tài)指標(biāo)，能夠很好地反映苗木的生長(zhǎng)量。地徑與根系的相關(guān)關(guān)系在90%以上，地莖粗壯則苗木根系發(fā)達(dá)，而根系發(fā)達(dá)其地莖粗壯，地徑與造林成活率及林木生長(zhǎng)量成正比。根系是植物全部根的總稱，包括根系長(zhǎng)度、根幅和側(cè)根數(shù)等[5]。本研究通過相關(guān)性分析和主成分分析，將苗高、地徑、根粗和根長(zhǎng)4項(xiàng)指標(biāo)作為2月齡傣百解種苗的主要分級(jí)指標(biāo)，能全面地反映傣百解種苗的生長(zhǎng)發(fā)育狀況，具有一致性好、易于測(cè)量、便于應(yīng)用的特點(diǎn)，對(duì)指導(dǎo)傣百解規(guī)范化育苗栽培技術(shù)具有重要參考價(jià)值。

種苗質(zhì)量分級(jí)方法是制定種苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)[6]。目前，種苗分級(jí)方法有K-聚類分析法[7-10]、聚類中心±標(biāo)準(zhǔn)差法[6,11]、平均值±標(biāo)準(zhǔn)差法[3,11]、正態(tài)分步法[12]等，其中K-聚類分析法具有簡(jiǎn)單、方便、易實(shí)現(xiàn)大數(shù)據(jù)分析的特點(diǎn)，是使用較多的分級(jí)方法，已用在黨參[7]、滇重樓[8]、蒙古黃芪[9]、廣藿香[10]等中藥材種苗質(zhì)量分級(jí)研究中。本研究以K-聚類分析法對(duì)傣百解種苗進(jìn)行分級(jí)研究，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為Ⅰ級(jí)標(biāo)準(zhǔn)苗高≥37.00 cm，地徑≥4.00 mm，根長(zhǎng)≥15.00 cm，根粗≥3.80 mm；Ⅱ級(jí)標(biāo)準(zhǔn)24.00 cm≤苗高<37.00 cm，3.30 mm≤地徑<4.00 mm，12.00 cm≤根長(zhǎng)<15.00 cm，3.00 mm≤根粗<3.80 mm；Ⅲ級(jí)標(biāo)準(zhǔn)13.00 cm≤苗高<24.00 cm，3.00 mm≤地徑<3.30 mm，6.00 cm≤根長(zhǎng)<12.00 cm，2.50 mm≤根粗<3.00 mm。移栽試驗(yàn)表明，種苗等級(jí)越高，成活率也越高，說明該分級(jí)方法具有一定的合理性，而更符合藥材特性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，有待藥材收獲后根據(jù)產(chǎn)量、質(zhì)量進(jìn)一步修訂。