何思遠 余政禮 梁 樂 覃 敏 黃燕梅 王志強 吳永明

(廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院人類精子庫，廣西南寧市 530021)

人類精子庫是利用超低溫冷凍保存等技術，采集、檢測、保存和提供精液或精子供輔助生殖臨床治療使用的機構[1]。廣西精子庫按照原國家衛(wèi)生和計劃生育委員會頒布的《人類精子庫基本標準和技術規(guī)范》的要求[2]，對捐精志愿者進行嚴格的精液質量評估，以及血液傳染病、性傳播疾病、優(yōu)生遺傳疾病的篩查，排除不符合要求的志愿者，以保證精液質量和供精安全。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G-6-PD)缺乏癥是由于基因突變導致紅細胞G-6-PD合成減少或缺乏，從而引起溶血性貧血的一種遺傳性血液病。廣西是我國南方G-6-PD缺乏癥高發(fā)區(qū)之一[3]。有學者指出，在中國南方地區(qū)應考慮對捐精者進行地中海貧血、G-6-PD缺乏癥等遺傳性疾病的排查[4]。廣西人類精子庫接待的志愿者的籍貫主要為廣西籍，因此需要加強G-6-PD的篩查，最大限度降低精子庫出生后代患遺傳病的風險。本研究對廣西精子庫1 332例志愿者的G-6-PD篩查結果進行回顧性分析，觀察不同籍貫、不同民族的捐精志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率的差異，為廣西精子庫進行相應的區(qū)域或民族高發(fā)遺傳病檢測提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2013年3月至2021年5月期間在廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院人類精子庫捐精的1 332例志愿者作為研究對象。所有志愿者均符合《人類精子庫基本標準和技術規(guī)范》規(guī)定的基本條件，精液常規(guī)篩查合格且精液病原學檢測無異常；精液篩查前志愿者已明白供精者權利、義務及所捐贈的精液用途，并簽署知情同意書。

1.2 G-6-PD活性的篩檢方法 囑志愿者采血前一日不要熬夜，清淡飲食；次日抽取志愿者的靜脈血2～3 mL 送至我院產前診斷與地中海貧血篩查實驗室進行檢測，采用WHO推薦的酶速率法進行檢測。G-6-PD活性參考范圍(由我院產前診斷與地中海貧血篩查實驗室提供)為1 300～3 600 IU，G-6-PD活性<1 300 IU時判定為G-6-PD缺乏癥。

1.3 志愿者一般資料的收集 將志愿者身份證信息(姓名、民族、出生日期、身份證號等)通過自動識別設備導入精子庫捐精系統(tǒng)，根據(jù)志愿者填寫的個人信息記錄籍貫。由精子庫接待醫(yī)生與所有志愿者確認籍貫、民族。

1.4 統(tǒng)計學分析 使用SPSS 26.0軟件進行統(tǒng)計學分析。計數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 志愿者的一般資料 1 332例志愿者的年齡為20～40周歲，其中廣西籍志愿者1 006例(占75.53%)、非廣西籍志愿者326例(占24.47%)；非廣西籍志愿者中，176例來自我國南方地區(qū)(湖南籍42例、廣東籍29例、四川籍19例、湖北籍16例、安徽籍14例、福建籍13例、江西籍11例、重慶籍10例、貴州籍8例、海南籍8例、云南籍6例)，14例來自我國東部地區(qū)(浙江籍7例、江蘇籍7例)，134例來自我國北方地區(qū)(河南籍30例、山東籍29例、山西籍22例、河北籍13例、黑龍江籍12例、陜西籍9例、遼寧籍7例、內蒙古籍5例、吉林籍3例、甘肅籍3例、寧夏籍1例)，2例來自我國西部地區(qū)(青海籍和新疆籍各1例)。1 006例廣西籍志愿者中，壯族364例，漢族593例，其他少數(shù)民族(包括瑤族、苗族、侗族、彝族、毛南族、仫佬族)49例。

2.2 廣西籍與非廣西籍志愿者的G-6-PD缺乏癥檢出率比較 1 332例志愿者中檢出G-6-PD缺乏癥134例，總檢出率為10.06%。廣西籍、非廣西籍志愿者的G-6-PD缺乏癥檢出率分別為12.62%(127/1 006)、2.15%(7/326)，廣西籍志愿者的G-6-PD 缺乏癥檢出率高于非廣西籍志愿者(χ2=29.870，P<0.001)。

2.3 非廣西籍G-6-PD缺乏癥志愿者的籍貫分布情況 7例非廣西籍G-6-PD缺乏志愿者中，6例來自我國南方地區(qū)(廣東籍2例、海南籍1例、貴州籍1例、湖南籍1例、湖北籍1例)、1例來自我國北方地區(qū)(山西籍)。

2.4 廣西籍G-6-PD缺乏癥志愿者的民族構成情況 127例廣西籍G-6-PD缺乏癥志愿者中，壯族58例，檢出率為15.93%(58/364)，漢族64例，檢出率為10.79%(64/593)，其他少數(shù)民族5例(分別為瑤族3例、侗族2例)，檢出率為10.20%(5/49)。廣西籍壯族、漢族和其他少數(shù)民族(瑤、苗、侗、彝、毛南族和仫佬族)志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率比較，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=5.679，P=0.058)。

3 討 論

遺傳咨詢、家系調查和體格檢查能發(fā)現(xiàn)有潛在遺傳病風險的捐精志愿者，而實驗室檢查能篩選出無癥狀遺傳基因攜帶者。在《人類精子庫基本標準和技術規(guī)范》[2]提出需要篩查的遺傳病中，部分遺傳病患者可表現(xiàn)為無癥狀基因攜帶，我國大多數(shù)的精子庫因所在單位由于實驗條件受限而未能對志愿者進行這部分遺傳病的檢測，只能通過遺傳咨詢、家系調查和體格檢查進行篩選。雖然目前有相關基因檢測機構可以進行全外顯子基因檢測，但從運營成本方面考慮，大多數(shù)精子庫暫未將全外顯子基因檢測作為捐精者常規(guī)的遺傳篩查項目。因此，遺傳咨詢、家系調查和體格檢查在捐精遺傳篩選中至關重要。G-6-PD缺乏癥為伴X性染色體不完全顯性遺傳病，若父方為攜帶者，女兒會攜帶有致病基因，而兒子正常；父母均為患者時，母方若為純合子，子女均攜帶致病基因。然而，多數(shù)G-6-PD缺乏癥患者無誘因時可無臨床癥狀，易因服藥或進食蠶豆時出現(xiàn)較嚴重的溶血性貧血[5]，在對捐精者進行遺傳咨詢、家系調查和體格檢查時容易被遺漏。因此，在我國G-6-PD缺乏癥高發(fā)地區(qū)對捐精者開展G-6-PD活性檢測尤為重要。

G-6-PD缺乏癥在黑色人種、地中海地區(qū)人群和東方民族人群中的發(fā)生率較高，患病人群地理分布與歷史上瘧疾流行的地理分布存在著一定的相關性，與地中海貧血在民族分布上有重疊現(xiàn)象[6-7]。杜傳書[8]對中國12個民族近4萬人進行抽樣調查，發(fā)現(xiàn)G-6-PD基因頻率在0～4.483%之間，呈“南高北低”分布。一項流行病學調查結果顯示，我國大陸兒童G-6-PD缺乏癥患病率為4.03%，其中廣西、廣東、海南的G-6-PD缺乏癥位居前三，南部地區(qū)患病率高于中部地區(qū)及北部地區(qū)[9]。還有學者報告廣西地區(qū)新生兒G-6-PD缺乏癥檢出率為7.4%，男嬰的檢出率高于女嬰[10]。鐘志娟[11]報告，廣西西南邊境五縣(寧明縣、大新縣、天等縣、靖西市和那坡縣)居民的G-6-PD缺乏率為9.96%。以上調查研究表明，廣西地區(qū)人群G-6-PD缺乏癥發(fā)病率較高，因此有必要對廣西人類精子庫捐精者開展G-6-PD活性檢測。

廣西人類精子庫是廣西目前唯一一家人類精子庫，參與捐精的志愿者以來自廣西各縣市的人群為主，這些人群罹患G-6-PD缺乏癥的風險較大。本研究中，廣西籍志愿者占75.53%，非廣西籍志愿者占24.47%，非廣西籍志愿者來自26個省或自治區(qū)。廣西精子庫捐精志愿者的G-6-PD缺乏癥總檢出率為10.06%(134/1 332)，稍高于王奇玲等[12]報告的廣東省精子庫捐精志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率[4.29%(266/6 207)]，以及胡靜等[13]報告的湖南省精子庫捐精志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率[0.15%(5/3 336)]，說明G-6-PD缺乏癥在廣西地區(qū)捐精志愿者中檢出率較高。此外，廣西籍捐精志愿者 G-6-PD缺乏率高于非廣西籍捐精志愿者(P<0.05)，這可能與廣西是我國G-6-PD缺乏癥高發(fā)區(qū)有關。在非廣西籍志愿者人群中，檢出的G-6-PD缺乏者的籍貫以廣東、海南、貴州、湖南為主，除山西有1例外均分布于我國南方地區(qū)，這與我國G-6-PD缺乏癥呈“南高北低”的發(fā)病特點相符合。另外，我們的調查尚未發(fā)現(xiàn)廣西籍壯族、漢族和其他少數(shù)民族(瑤族、苗族、侗族、彝族、毛南族和仫佬族)捐精者G-6-PD缺乏癥檢出率存在差異性(P>0.05)，這可能與該研究樣本量較少以及研究對象的特殊性有關。

鑒于廣西為G-6-PD缺乏癥高發(fā)區(qū)的特點，廣西人類精子庫在捐精者首次精液篩查前即開展此病的遺傳咨詢。根據(jù)該病的遺傳方式且攜帶者不一定發(fā)病的特點，對遺傳咨詢中否認患此病的捐精者，重點對其兄弟、母親和外祖父進行病史調查，同時開展實驗室G-6-PD活性檢測，以剔除患有G-6-PD缺乏癥的捐精者。實驗室G-6-PD活性檢測是G-6-PD篩查的重要手段，有利于篩選出遺傳咨詢未發(fā)現(xiàn)的無癥狀G-6-PD缺陷者，大大降低了G-6-PD缺陷遺傳篩選的漏診率。

總之，G-6-PD缺乏癥在廣西人類精子庫捐精志愿者中的檢出率較高，尤其是在廣西籍的志愿者中。雖有研究顯示女性不孕患者患有G-6-PD缺乏癥不影響行體外受精-胚胎移植的結局[14]，但精子庫必須遵循有利于供受者的倫理原則，降低子代遺傳病發(fā)生的風險和預防出生缺陷。G-6-PD缺乏癥發(fā)病率較高的地區(qū)的精子庫，必須嚴格把好遺傳咨詢、家系調查和實驗室檢測3大關口，最大限度降低精子庫后代患G-6-PD缺陷的風險。因此，我們建議國內人類精子庫，針對籍貫為南方地區(qū)省份，特別是廣西籍和廣東籍的捐精者，要加強G-6-PD缺乏癥的遺傳咨詢和家系調查，必要時應進行G-6-PD活性檢測，以確定捐精者是否有G-6-PD缺陷。