趙月橋 ,胡耀方 ,于學(xué)祥 ,陸時娟 ,王久紅 ,李文濤 ,何啟蓋
(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院動物醫(yī)學(xué)院,湖北 武漢 430070;2.廣西揚(yáng)翔股份有限公司,廣西 貴港 537000;3.湖北金林原種畜牧有限公司,湖北 武漢 430200)
豬傳染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia,PCP)是由胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染引起的一種傳播迅速、傳染性強(qiáng)的豬呼吸道傳染病。最急性型和急性型時,病豬無先兆癥狀,突然死亡。耐過豬只可能轉(zhuǎn)歸為亞臨床感染,不表現(xiàn)臨床癥狀,但持續(xù)排出病菌,導(dǎo)致感染豬群中很難控制和根除該病(Bosse等,2002)。
胸膜肺炎放線桿菌(APP)是一種典型球桿狀菌體、有莢膜的革蘭氏陰性菌。根據(jù)體外生長時是否依賴煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD),APP可分成生物Ⅰ型(NAD依賴型)和生物Ⅱ型(NAD不依賴型)兩種。根據(jù)細(xì)菌細(xì)胞壁外莢膜中莢膜多糖(CPS)的成分不同,APP分為19個血清型,但仍有一些菌株無法分型(Stringer等,2021)。
在大多數(shù)案例中,豬傳染性胸膜肺炎是由亞臨床感染的豬只排菌引起(Klinkenberg 等,2014)。本病一年四季皆可發(fā)生,但在冬春(寒冷)季節(jié)發(fā)病率高;各階段豬只均對APP易感,但90日齡左右豬只最為易感。APP在豬群內(nèi)主要是通過口腔或是鼻腔分泌物接觸傳播,或通過0.5~3 μm大小的氣溶膠液滴在2 m內(nèi)短距離傳播。根據(jù)Zhang(2019)和李倩倩(2022)等人對國內(nèi)規(guī)模化豬場細(xì)菌性疾病的流行病學(xué)調(diào)查顯示,近十年內(nèi)APP的流行率約為0.3%~2.7%,且呈逐年上升趨勢。
根據(jù)臨床癥狀,豬傳染性胸膜肺炎病程包括最急性型、急性型和慢性型三類。
最急性型:豬只突然發(fā)病,體溫迅速升高至41.5℃,精神沉郁、厭食等。病豬虛弱,鼻部、耳朵、四肢皮膚發(fā)紺。在疾病后期,出現(xiàn)嚴(yán)重呼吸障礙并張口呼吸,呈犬坐姿勢且肛溫下降。死亡前,通??谇缓捅乔慌懦鲇写罅颗菽瓲顜а姆置谖?。最急性型從感染到死亡,病程最短只有6 h。
急性型:同一或不同豬圈的多頭豬只出現(xiàn)感染,體溫迅速達(dá)到40.5~41℃左右,出現(xiàn)皮膚發(fā)紅、精神沉郁、食欲廢絕等癥狀。病豬出現(xiàn)明顯的呼吸困難、咳嗽等呼吸系統(tǒng)癥狀,有時張口呼吸。從感染到死亡,病程在48 h左右。
慢性型:發(fā)生在急性癥狀消失后、治療或預(yù)防措施沒有完全控制感染時,或中等毒力血清型菌株引起的感染。表現(xiàn)為輕微發(fā)熱或不發(fā)熱,并出現(xiàn)不同程度的持續(xù)性或間歇性咳嗽。同時,因食欲減退導(dǎo)致增重率降低(張立昌,2001)。
該病病變程度取決于豬只感染菌株的毒力和機(jī)體的載菌量。豬傳染性胸膜肺炎的病理變化局限于胸腔。病豬患有纖維素性出血性或纖維素性壞死性肺炎,且以肺葉和小葉雙側(cè)性的纖維性胸膜肺炎為特征性病變。彌漫性纖維性滲出物分布在胸膜和肺漿膜表面。病程較長的豬,可見胸腔積液、渾濁,有時混有血液,肺與胸腔高度粘連(張立昌,2001)。
在該病的早期,肺臟組織學(xué)變化包括出血、壞死,并有纖維素性滲出物。局部嗜中性粒細(xì)胞浸潤。病程后期可見巨噬細(xì)胞浸潤、壞死灶周圍有大量的白細(xì)胞,肺泡中有變性的肺泡上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及嗜中性粒細(xì)胞,血管嚴(yán)重變性導(dǎo)致出血,擴(kuò)張毛細(xì)血管中可見紅細(xì)胞、血小板栓塞及纖維素性滲出(Bosse等,2002)。
主要包括急性暴發(fā)時引起的豬只突然死亡,慢性、隱形感染時導(dǎo)致的生產(chǎn)、治療成本增加,增重率及出欄重下降。此外,該病主要導(dǎo)致豬只肺臟損傷,呼吸機(jī)能受損,可能易繼發(fā)其他疾病。
6.1.1 樣品采集
(1)肺臟、氣管和扁桃體的采集 優(yōu)先選擇發(fā)病后死亡豬只或者具有咳喘等明顯癥狀的豬只進(jìn)行解剖。保定豬只,充分放血后,打開豬只咽喉部、胸腔,鈍性分離肺臟,保證肺臟及氣管的完整性。扁桃體位于豬只口腔上顎的后部,取氣管時可以一同取下。
(2)鼻拭子的采集 可選取有咳喘等癥狀的豬只進(jìn)行采集。鼻腔拭子為活體監(jiān)測常用樣品,但存在其他細(xì)菌污染的情況,導(dǎo)致APP分離難度較高。保定豬只,先將鼻部明顯的污物清理后,再用棉簽拭子或者植絨拭子伸入豬只鼻腔內(nèi)4~5 cm位置,將拭子停留直到豬只打噴嚏后取出拭子,放在EP管中保存,盡可能兩邊鼻腔都采集。
血液樣品不宜作為病原檢測樣品,可作為抗體檢測樣品。
6.1.2 病原分離
(1)肺臟、氣管 選擇肺臟的病變交界處,用酒精消毒表面,使用無菌剪刀在消毒區(qū)域剪出2 cm×2 cm的組織塊,用內(nèi)表面在巧克力瓊脂平板上劃線接種并培養(yǎng)。
用無菌組織剪在氣管近肺臟端剪開缺口,將無菌接種環(huán)伸入氣管內(nèi),粘到黏液后取出在巧克力瓊脂平板上劃線。
(2)扁桃體 將扁桃體表面用酒精棉擦拭消毒,用無菌剪刀從側(cè)面剪開扁桃體,用暴露出的截面在巧克力瓊脂平板上涂抹。
(3)鼻拭子 用滅菌鑷子將鼻拭子在巧克力瓊脂平板上按壓涂抹。
為了觀察菌株的溶血性和“衛(wèi)星現(xiàn)象”,按照無菌操作標(biāo)準(zhǔn),將樣品接種到血瓊脂表面,同時將金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)作交叉劃線接種,于37℃含5%二氧化碳的恒溫箱中分離,隨后用巧克力瓊脂平板和PPLO瓊脂平板進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
6.1.3 病原鑒定
APP于血瓊脂培養(yǎng)基劃線接種培養(yǎng)24~48 h后,菌落形態(tài)呈現(xiàn)露珠樣,直徑約1~2 mm??僧a(chǎn)生β溶血環(huán)和“衛(wèi)星現(xiàn)象”(即APP的菌落大小與靠近金黃色葡萄球菌菌落的距離呈反比關(guān)系)。
革蘭氏染色可見APP呈現(xiàn)革蘭氏陰性小球桿菌,繼代培養(yǎng)APP菌落可呈現(xiàn)多種形態(tài),早期偶見絲狀形態(tài)。
6.1.4 判定
具有以下四個特點(diǎn),即可初步判定為APP:
(1)革蘭氏染色鏡檢呈現(xiàn)革蘭氏陰性小球桿菌或多形態(tài);
(2)于血瓊脂平板上生長具有溶血現(xiàn)象;
(3)生長依賴Ⅴ因子,即存在“衛(wèi)星現(xiàn)象”;
(4)生化特性:尿素酶試驗(yàn)為陽性,能分解D-木糖,不分解棉子糖、阿拉伯糖。
6.2.1 豬胸膜肺炎放線桿菌 Apx抗體檢測
可參考劉建杰(2004)、梁望旺(2004)及Jung(2019)等 建立的ELISA方法分別檢測ApxI、ApxII和ApxIII毒素抗體。
6.2.2 豬胸膜肺炎放線桿菌ApxⅣ抗體檢測
用商業(yè)化試劑盒ApxⅣ-ELISA檢測豬血清樣品中APP ApxⅣ抗體。APP分泌的外毒素ApxIV毒素具有種屬特異性,且ApxIV只能在APP感染豬只體內(nèi)產(chǎn)生,體外培養(yǎng)的APP不分泌此毒素(Jacobsen等,1996)。滅活疫苗免疫豬的ApxⅣ抗體為陰性,而感染豬的ApxⅣ抗體為陽性,因此,檢出ApxIV抗體,可區(qū)分滅活苗免疫豬與自然感染豬。如果基因缺失活疫苗是缺失了ApxIV基因,商業(yè)化ApxⅣ-ELISA也可實(shí)現(xiàn)鑒別診斷。
LPS-ELISA試劑盒可檢出APP抗體,但無法實(shí)現(xiàn)鑒別診斷。
6.3.1 模板制備
菌落:挑取可疑菌落于pH 7.2、0.01 M PBS中,制成約108CFU/mL菌懸液(液體稍渾濁)。離心后取沉淀加入50 μL PBS,-20℃冷凍15 min,取出立即置100℃水浴中煮沸5 min。重復(fù)凍融、煮沸兩次。10 000 g離心5 min,取上清,可作為模板直接擴(kuò)增。
組織樣品及鼻拭子:將0.5~1 g組織(取病變交界處、深處的肺臟組織,扁桃體組織)剪碎,加入1 mLPBS緩沖液,勻漿。鼻拭子在1 mLPBS緩沖液中反復(fù)震蕩,以充分釋放細(xì)菌。按照商品化試劑盒推薦方法提取總核酸。
6.3.2 多重PCR檢測
對分離的菌株和核酸樣品,可采用陳凡等(2004)建立的可對胸膜肺炎放線桿菌生物Ⅰ 型13個標(biāo)準(zhǔn)菌株中的8個血清型進(jìn)行區(qū)分的多重PCR方法,直接用于臨床病料的檢測,縮短檢測時間。Oliver等(2021)基于ApxIV基因和血清特異性莢膜基因建立多重PCR方法,能快速鑒定已知的19個血清型。
6.3.3 熒光定量PCR檢測
楊利等(2010)建立了實(shí)時熒光定量PCR方法檢測APP,能特異性地檢測出APP感染,還能定量反映APP在不同組織中的分布差異。2021年,馮逸雪建立了檢測胸膜肺炎放線桿菌、副豬格拉瑟菌和肺炎支原體的多重?zé)晒舛縋CR方法,可檢測鼻拭子、環(huán)境樣品(水槽、料槽和生產(chǎn)區(qū)土壤)和肺臟樣品中的APP核酸。
良好的環(huán)境管理可將疫病暴發(fā)的可能性降至最低,包括保持適宜的環(huán)境溫度、減少刺激、根據(jù)不同季節(jié)適當(dāng)?shù)耐L(fēng)、全進(jìn)全出和適當(dāng)?shù)娘曫B(yǎng)密度以及更早的斷奶日齡
(<21 d)。
對于APP陰性的豬群,應(yīng)嚴(yán)格采取生物安全措施,防止外源APP的引入。應(yīng)從沒有臨床癥狀和病變且APP抗體陰性的豬場引種,避免引入帶有APP菌株的豬只。
針對感染豬的治療,選擇抗菌藥物要根據(jù)其最低抑菌濃度(MIC)及其藥代動力學(xué)和藥效學(xué)(PK/PD)特性為基礎(chǔ)。最好使用對分離菌敏感性的藥物。通常使用氟苯尼考、替米考星、恩諾沙星等藥物。群體給藥方式可使用泰樂菌素1 kg/t和強(qiáng)力霉素1.5 kg/t拌料飼喂,連用7 d;個別重癥發(fā)病個體可肌注頭孢噻呋與解熱鎮(zhèn)痛藥物。受威脅豬群可進(jìn)行藥物預(yù)防,具體是替米考星400 g/t并強(qiáng)力霉素1 kg/t,拌料飼喂,連用5~7 d(陳瓊等, 2015)。
個體治療以肌注為主。由于病豬食欲下降,拌料給藥效果較差。病程早期使用抗生素治療才能見效,可使死亡率下降。對于感染嚴(yán)重或病程過長的豬只,即使治療也可能無法恢復(fù)健康(肺臟已與胸腔粘連),應(yīng)實(shí)施淘汰。
需要采取綜合措施,核心技術(shù)是免疫預(yù)防、藥物治療、淘汰感染豬、引種檢疫和全進(jìn)全出等5個措施。具體凈化方案依據(jù)豬群感染狀態(tài)來確定。
8.2.1 采樣技術(shù)
病原學(xué)樣品:用一次性植絨拭子伸入豬只鼻腔一定深度,在鼻腔中稍作停留,豬只有噴嚏反射時取出拭子,放入無菌EP管中保存,每側(cè)鼻腔分別用不同拭子采集。
血清學(xué)樣品:使用無菌注射器采集豬只血液,每份血液樣品不少于3 mL。樣品可放于4℃靜置析出血清,無菌分離血清后分裝于無菌EP管中保存在4℃,長期保存可放置于-20℃保存。
樣品運(yùn)輸:當(dāng)天采集的樣品應(yīng)24 h內(nèi)檢測,若無條件當(dāng)天檢測可置于4℃短期保存。
8.2.2 抽樣數(shù)量
按照估算比例的樣本量公式設(shè)計(jì)抽樣量,根據(jù)感染抗體陽性率高低,確定具體凈化方案。
種豬場根據(jù)感染情況,分為重度感染場、中度感染場和輕度感染場和陰性場,如表1。
表1 不同程度感染場ApxIV抗體陽性率、APP核酸陽性率、發(fā)病率和死亡率
重度感染場:不具備凈化條件。執(zhí)行藥物治療措施,待豬群不出現(xiàn)死亡后、生產(chǎn)指標(biāo)正常,開始凈化。
中度感染場:執(zhí)行藥物干預(yù)后,使用疫苗免疫。實(shí)行強(qiáng)化免疫—檢測淘汰—補(bǔ)充陰性后備豬—監(jiān)測與認(rèn)證維持的分步凈化方案。
輕度感染場:可直接實(shí)行檢測—淘汰—監(jiān)測與認(rèn)證維持的凈化方案。
陰性場:依賴生物安全措施和全進(jìn)全出,加強(qiáng)生豬轉(zhuǎn)群、銷售環(huán)節(jié)的車輛消毒;只引入抗體陰性豬。
8.5.1 疫苗選擇
目前市場上主要有亞單位疫苗和滅活苗兩種。
亞單位苗主要以APP外毒素為主要成分,輔以外膜蛋白等因子為抗原。國外已有默沙東豬胸膜肺炎放線桿菌亞單位滅活疫苗,該疫苗成分包含APP菌株幾種毒力因子:外膜蛋白(OMP)和3種毒素(ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ),可提供較好的交叉免疫保護(hù)。
通常采用滅活疫苗預(yù)防PCP,我國先后用免疫性良好的APP研制成功多種滅活疫苗,經(jīng)現(xiàn)場試驗(yàn)證明疫苗是安全有效。目前有中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所研制的APP(1、3、7型)三價滅活苗和華中農(nóng)業(yè)大學(xué)等研制的APP(1、2、7型)三價滅活苗等獲得國家新獸藥注冊證書,已經(jīng)商業(yè)化生產(chǎn)和推廣使用。但由于滅活后APP的交叉保護(hù)力比較弱,使用某幾個血清型的多價疫苗不能抵抗所有血清型的APP的攻擊,因此用從當(dāng)?shù)胤蛛x的APP菌株制備而成的滅活苗,對當(dāng)?shù)亓餍兄甑姆揽乇容^好。
8.5.2 免疫程序
采用ELISA方法監(jiān)測群體的感染時間,根據(jù)疫苗免疫后抗體的產(chǎn)生時間,制定合理的免疫程序。通常情況下,仔豬35—40日齡進(jìn)行第1次免疫接種,4周加強(qiáng)免疫1次。母豬產(chǎn)前6周和2周各注射1次,以后每6個月免疫1次。
8.5.3 抗體水平評估
免疫后3周檢測ApxⅡ毒素抗體,抗體效價≥1∶1 280可具有完全保護(hù)效力。90%以上的豬群產(chǎn)生合格抗體,認(rèn)為群體免疫合格。
8.5.4 臨床評估
通過強(qiáng)化免疫后,豬群應(yīng)無豬傳染性胸膜肺炎臨床癥狀。
8.6.1 商品豬隔離淘汰
每6個月檢測抗體,每次抽樣檢測10%~20%的豬只。將APP抗體陽性的豬只與陰性豬只隔離到不同欄舍飼養(yǎng),防止交叉感染。逐步淘汰陽性豬只,降低陽性豬只比例。同時也要加強(qiáng)陰性群的隔離與監(jiān)測,最后建立APP陰性豬群。
8.6.2 種豬群檢測與淘汰
種豬群APP抗體陽性率小于10%時,檢測到抗體陽性豬可直接淘汰,采取藥物治療,直至出欄;若有可疑樣品時,可對樣品復(fù)檢,或者在兩周后抽樣檢測,若依舊為可疑,可直接淘汰。
8.6.3 后備種豬檢測與淘汰
可分別在5月齡(或進(jìn)入后備舍前)和配種前1個月對選擇留種的后備種豬采集血清樣品,檢測ApxⅣ抗體,如為陰性,即可作為種豬使用;如檢出APP ApxⅣ抗體陽性或出現(xiàn)兩次可疑陽性結(jié)果,應(yīng)作淘汰處理。
(1)對全群豬群進(jìn)行APP ApxⅣ ELISA普檢,淘汰全部抗體陽性豬只。
(2)在淘汰全部APP ApxⅣ抗體陽性豬1個月后,按10%的比例對母豬群采血。種公豬全體采血,進(jìn)行抗體檢測。
(3)如抽檢種豬群胸膜肺炎放線桿菌ApxⅣ抗體全部陰性可視為豬傳染性胸膜肺炎假定陰性群。
在陽性豬淘汰1年后,種豬群持續(xù)保持胸膜肺炎放線桿菌ApxⅣ抗體陰性,且豬群生產(chǎn)持續(xù)平穩(wěn),便認(rèn)定豬群達(dá)到假定凈化階段。
8.9.1 評估時間
達(dá)到“假定凈化階段”后,按照免疫凈化標(biāo)準(zhǔn)、非免疫凈化標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行凈化場評估。
8.9.2 免疫凈化標(biāo)準(zhǔn)
(1)在生產(chǎn)母豬群和后備種豬群中按比例采集血清樣品,抽檢Apx毒素抗體,合格率不低于
90%;
(2)在種公豬群、生產(chǎn)母豬群和后備種豬群中按比例采集血清樣品,抽檢APP ApxⅣ抗體,檢測結(jié)果均為陰性;
(3)連續(xù)兩年以上無臨床病例。
8.9.3 非免疫凈化標(biāo)準(zhǔn)
種公豬、生產(chǎn)母豬和后備種豬抽檢,APP ApxⅣ 抗體檢測均為陰性,疑似病例或者屠宰育肥豬的扁桃體不能分離到APP。停止免疫兩年以上,無PCP臨床病例。8.9.4 評估抽樣
評估抽樣方法見表2。
表2 評估抽樣
8.10.1 免疫
種豬場要選用合格的豬胸膜肺炎放線桿菌疫苗制訂合理有效的免疫程序,并嚴(yán)格執(zhí)行。
8.10.2 監(jiān)測
(1)種豬群監(jiān)測:每年監(jiān)測陰性種豬群的APP ApxⅣ 抗體水平。置信度95%,預(yù)期流行率3%。保證基礎(chǔ)群、后備群維持陰性狀態(tài)。
(2)后備豬群監(jiān)測:在后備豬選留時進(jìn)行APP ApxⅣ抗體和APP核酸檢測,確保轉(zhuǎn)入種豬群的豬只ApxⅣ抗體為陰性并且APP核酸為陰性,即無APP感染豬只。后備豬入群必須逐頭檢測。
8.10.3 引種檢疫
(1)引種時嚴(yán)格檢疫監(jiān)測。逐頭檢測種豬,確保豬只ApxⅣ 抗體為陰性和APP抗原陰性后才能引進(jìn)。
(2)建造獨(dú)立隔離舍,引進(jìn)后隔離飼養(yǎng)45 d以上,經(jīng)檢測APP核酸和抗體雙陰性后才可混群飼養(yǎng)。
8.10.4 疑似病例診斷
要及時剖檢疑似病死豬,檢測APP病原,如果病原檢測為陽性,則檢測同群接觸豬只。若同欄豬均帶菌,建議全部淘汰。
8.11.1 合理的豬場選址
按《標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)模養(yǎng)豬場建設(shè)規(guī)范》(NY/T 1568-2007)規(guī)定執(zhí)行,避免豬舍的進(jìn)風(fēng)口與出風(fēng)口的空氣交叉混合,避免細(xì)菌在棟舍之間經(jīng)空氣傳播,交叉污染。
8.11.2 生產(chǎn)模式
參照《集約化豬場防疫基本要求》(GB/T 17823-2009)執(zhí)行。實(shí)行自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出、提前斷奶及“兩點(diǎn)式”或“三點(diǎn)式”的生產(chǎn)模式,阻斷豬場間、豬群間、批間、引種、轉(zhuǎn)場等環(huán)節(jié)的疫病傳播。
8.11.3 飼養(yǎng)管理
嚴(yán)格依照《規(guī)模豬場生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》(GB/T 17824.2)執(zhí)行,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,減少應(yīng)激。做好通風(fēng)、保溫、適宜的飼養(yǎng)密度。種豬場的凈道與污道要分開。母豬分胎次飼養(yǎng)、分階段飼養(yǎng),隔離、阻斷疫病傳播??茖W(xué)規(guī)范用藥,種豬禁用皮質(zhì)類固醇類藥物。
8.11.4 消毒措施
嚴(yán)格對人員、物品、用具、車輛、豬舍內(nèi)外環(huán)境以及糞污等進(jìn)行消毒。按《豬場消毒技術(shù)規(guī)范》(DB13/T 991-2008)執(zhí)行。
8.11.5 無害化處理措施
(1)病死豬及母豬所生產(chǎn)的弱仔豬、死胎、流產(chǎn)胎兒按農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕25號《病死及病害動物無害化處理技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定處理;
(2)糞污無害化處理嚴(yán)格按《畜禽糞便無害化處理技術(shù)規(guī)范》(NY/T 1168-2006)的規(guī)定執(zhí)行。
8.11.6 有害生物防治措施
禁止在豬場內(nèi)飼養(yǎng)犬、貓等其他動物。每6個月至少開展1次全方位徹底滅鼠。定期殺蟲、防蠅。
8.11.7 其他生物安全措施
(1)保障獨(dú)立、隔離的公豬站的生物安全,加強(qiáng)人工授精檢測與管理,防止精液被污染而傳播;
(2)加強(qiáng)生產(chǎn)流程管理。重點(diǎn)在容易轉(zhuǎn)陽的階段,全部清空1~2批,徹底消毒,空欄;
(3)保持凈化工作的連續(xù)性。
8.11.8 檔案管理
(1)嚴(yán)格做好免疫程序記錄、獸藥使用記錄、圈舍消毒記錄、生產(chǎn)記錄、病死豬無害化處理記錄、獸醫(yī)診療記錄、飼料記錄、飼料添加劑使用記錄、防疫監(jiān)測記錄、運(yùn)輸車輛記錄、銷售記錄和糞污無害化處理記錄等;
(2)記錄保存不少于2年。
由于APP可在機(jī)體具有低水平抗體或亞臨床感染的情況下定植于扁桃體隱窩中,常規(guī)檢測可能為“假陰性”,導(dǎo)致豬群中APP持續(xù)流行。因此,如何提高檢測敏感性,研發(fā)靶向扁桃體中APP的藥物,是實(shí)施凈化面臨的挑戰(zhàn)。