劉英杰,齊六衛(wèi),董彥龍,羿 巖
(沈陽偉嘉生物技術(shù)有限公司,遼寧 沈陽 110027)
豬藍耳病,又被稱為豬繁殖與呼吸綜合征,因其具有極高的傳染性,我國將其列為一類傳染病。2021年中國豬病流行數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示:我國豬場有87.81%處于亞健康狀態(tài),商品豬場豬藍耳病陽性率高達90%以上,發(fā)病率高達30%~40%。豬場一旦感染豬藍耳病,母豬流產(chǎn)率可高達30%以上,仔豬死亡率高達50%以上。豬藍耳病以其高傳播性和高死亡率的特點致使其難以防控,從而給豬場帶來了不可估量的損失。日常防控措施包括完善的生物安全管理措施、疫苗接種預(yù)防、定期的實驗室抗體水平檢測和藥物防治等。藥物治療基于兩個核心點:提升免疫力和控制繼發(fā)感染,常用黃芪多糖和杜仲提取物等提升免疫力和抗生素聯(lián)合應(yīng)用防治豬藍耳病。經(jīng)臨床驗證,聯(lián)合應(yīng)用已在豬場取得了不錯的效果。本文以吉林某規(guī)?;i場藥物防治前后的豬藍耳病抗原抗體分析報告為例,闡述藥物防治豬藍耳病和定期實驗室檢測抗體的重要性,旨在幫助規(guī)?;i場能更好地防控豬藍耳病,在養(yǎng)殖過程中獲得更好的收益。
吉林省遼源市楊木林鎮(zhèn)某小規(guī)模豬場,母豬存欄30頭,保育豬存欄50頭,采取自繁自養(yǎng),場內(nèi)一直沒有進行過豬藍耳病疫苗免疫。母豬大群健康,個別食欲差;40日齡保育豬有呼吸道癥狀,發(fā)病率6%~10%。隨機挑選癥狀明顯的保育豬10頭,進行樣本的采集及藥物的治療。
治療方式采取杜仲提取物連續(xù)飼喂21 d,隨機選取整齊度差、精神狀態(tài)差的保育豬10頭進行抗原抗體檢測分析。具體方法如下:分別于給藥前、給藥后,進行豬前腔靜脈采血3~5 mL,按3 000 r/ min離心10 min,分離血清。
通過熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒核酸(豬藍耳病毒抗原),采用酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒方法檢測抗體(豬藍耳病毒抗體),操作方法和結(jié)果判定標準均參照試劑盒說明書。
豬藍耳病抗體的判定:通過豬藍耳病抗體檢測到樣本和對照的吸光度值換算出每個樣本的樣本 / 陽性對照比率(S/ P),根據(jù) S/ P值進行判定抗體。當 S/ P 值大于等于 0.4判定為陽性;當 S/ P 值小于 0.4 判定為陰性,體內(nèi)無抗體的存在。
豬藍耳病抗原Ct值的判定:通過試劑盒Ct值及曲線形狀對標本結(jié)果進行判定。當標本檢測結(jié)果Ct值在35及以下或有明顯指數(shù)增長期時判定為陽性;當標本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標本進行重復(fù)檢測,如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯的指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性;當樣本檢測結(jié)果Ct值大于38或無Ct值判定為陰性。
在給杜仲提取物治療豬藍耳病之前,抗原檢測結(jié)果顯示:10份血清經(jīng)合樣之后形成3份混合樣本,3份均為陰性;抗體分析結(jié)果顯示:所檢測的10份血清樣本,血清抗體陽性率為70%。通過檢測結(jié)果可知,因為豬群一直沒有進行過疫苗免疫,抗原陰性,抗體陽性,說明豬群以前感染過豬藍耳病毒后出現(xiàn)了自愈的情況。因保育豬出現(xiàn)了腹式呼吸的癥狀,推測目前處于排毒狀態(tài),但豬藍耳病毒數(shù)量比較少,且自身出現(xiàn)了一定量的抗體來抵御病毒。具體結(jié)果如表1—表3。
連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測結(jié)果見表4—表6。
表4 檢測結(jié)果
表6 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體酶聯(lián)免疫吸附檢測情況
連續(xù)飼喂21 d杜仲提取物后抗原抗體檢測統(tǒng)計分析結(jié)果見表7。
表7 給藥前后抗原抗體水平整體變化
對給藥前及給藥后豬繁殖與呼吸綜合征病毒(豬藍耳病病毒)抗體的S/P值采用SPSS軟件進行樣本配對t檢驗,分析結(jié)果如表
8—表10所示。
表1 檢測結(jié)果
表10 成對樣本檢驗
從使用杜仲提取物前后抗原抗體變化情況可以看出使用前后抗體差異明顯,抗體全部轉(zhuǎn)陰,豬藍耳病得到凈化,由以前的陽性穩(wěn)定場轉(zhuǎn)為雙陰場。具體分析如下:1)通過21 d杜仲提取物的使用將豬藍耳病抗體的陽性率從70%降低到0,離散度從36.84降低到0,豬場由豬藍耳病陽性場轉(zhuǎn)為豬藍耳病雙陰場。因此可以看出使用杜仲提取物能促進豬藍耳病毒的清除及大群凈化,有利于豬藍耳病毒的整體防控。2)SPSS軟件配對t檢驗分析結(jié)果證實飼喂杜仲提取物前后抗體差異極其顯著(P<0.01)。
目前在集約化養(yǎng)殖的大背景下,中小散戶在豬藍耳病的防控上普遍存在意識薄弱的現(xiàn)象,通常不會使用豬藍耳病疫苗進行定期預(yù)防和抗原抗體監(jiān)測。誠然豬藍耳病疫苗在豬藍耳病的防治上存在一定的劣勢,可能出現(xiàn)弱毒疫苗的排毒重組現(xiàn)象及滅活毒疫苗免疫效果不理想,但豬藍耳病疫苗一定程度上能減少豬藍耳病暴發(fā)的重癥。若不使用豬藍耳病疫苗進行防控,一旦出現(xiàn)豬藍耳病的暴發(fā),會造成豬群中重癥感染的增多進而造成更大的損失。因此,小規(guī)模養(yǎng)殖戶若不能做到疫苗的定期防控和抗原抗體監(jiān)測,則需要做到加強日常飼養(yǎng)管理工作和做好豬場整體環(huán)境衛(wèi)生工作。除了以上兩點,更要注重豬群的整體免疫力的提升。平時可使用維生素C和黃芪多糖及杜仲提取物進行定期的飼喂。一旦出現(xiàn)豬藍耳病感染,可使用頭孢菌素、替米考星等控制繼發(fā)感染,同時使用中藥提取物板藍根、魚腥草、雙黃連、杜仲揮發(fā)油等進行治療。
表2 給藥前豬繁殖與呼吸綜合征抗原熒光PCR定量檢測情況
表5 給藥后豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗原熒光PCR定量檢測情況
表8 成對樣本統(tǒng)計量
表9 成對樣本相關(guān)系數(shù)